白藜芦醇抑制TXNIP/NLRP3信号通路改善脂多糖诱导的肾小管上皮细胞炎性损伤

[目的]观察白藜芦醇对脂多糖诱导的肾小管上皮细胞（HK-2）炎性损伤的保护作用,及其对TXNIP/NLRP3炎性通路的影响。[方法]采用脂多糖（LPS,1 mg/L）体外诱导HK-2细胞炎性损伤模型,将细胞分为正常对照组、LPS诱导组、LPS+低剂量（50 μmol/L）白藜芦醇组、LPS+中剂量（100 μmol/L）白藜芦醇组、LPS+高剂量（200 μmol/L）白藜芦醇组;CCK8法检测HK-2细胞相对存活率,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测炎性因子白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,Western Blot方法分析诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧酶-2（COX-2）、人硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）及人隐热蛋白（NLRP3）表达。[结果]与LPS诱导组比较,不同浓度白藜芦醇干预的HK-2细胞相对存活率明显升高（P<0.05）,细胞上清炎性因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平明显降低（P<0.05）,细胞中炎性蛋白iNOS及COX-2表达水平显著降低（P<0.05）;细胞中TXNIP及NLRP3蛋白表达也显著降低（P<0.05）,并表现出剂量依赖性。[结论]白藜芦醇可以明显抑制LPS诱导的HK-2细胞炎症损伤,抑制炎症相关蛋白的表达,其作用机制可能与抑制TXNIP/NLRP3炎性通路活化相关。     

芍药苷减弱真菌葡聚糖诱导的支气管上皮细胞内NLRP3炎性小体活化

目的：探讨脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）联合真菌葡聚糖能否活化支气管上皮细胞16HBE内NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（Nod-like receptor pyrin domain-containing protein 3,NLRP3）炎性小体,芍药苷（paeoniflorin,PF）对该NLRP3炎性小体的活化是否有抑制作用及相关机制。方法：LPS联合真菌葡聚糖建立感染模型,RT-PCR检测细胞内NLRP3、caspase-1、白细胞介素（interleukin,IL）-1β mRNA的表达;ELISA检测细胞上清中IL-1β含量;caspase-1活性检测试剂盒检测胞内caspase-1活化程度;流式检测胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）变化;Western blot检测胞内NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白表达变化。结果：LPS联合真菌葡聚糖联合作用于支气管上皮细胞,胞内NLRP3、caspase-1、IL-1β表达转录加强,细胞上清中IL-1β含量增加,caspase-1活性上调,细胞内ROS升高;PF预作用细胞后,胞内ROS随着药物浓度增加而逐渐降低,NLRP3、caspase-1、IL-1β的转录表达也随之受抑制而下调。结论：LPS联合真菌葡聚糖可有效活化支气管上皮细胞内NLRP3炎性小体,而PF能有效抑制胞内ROS产生从而抑制炎性小体活化、抑制真菌葡聚糖所致的炎性反应。     

miR-1915-3p在胃癌细胞中的表达水平及其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 检测miR-1915-3p在胃癌细胞中的表达水平,探讨其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测胃癌细胞MGC-803、SGC-7901、MKN-45和永生化胃上皮细胞GES-1中miR-1915-3p的相对表达水平;转染实验将miR-1915-3p质粒和对照质粒（miR-NC）转染至MGC-803和SGC-7901中,分别设置MGC-803细胞miR-1915-3p组和miR-NC组及SGC-7901细胞miR-1915-3p组和miR-NC组;细胞增殖实验和凋亡实验分别检测miR-1915-3p组和miR-NC组细胞的光密度（OD）值和凋亡率;蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测miR-1915-3p组和miR-NC组细胞的Bcl-2蛋白表达情况。结果 MGC-803、SGC-7901、MKN-45细胞中miR-1915-3p的相对表达水平分别为（0.46±0.06）、（0.42±0.05）、（0.33±0.04）,均低于GES-1细胞中miR-1915-3p的相对表达水平（P<0.05）。MGC-803细胞中,miR-1915-3p组与miR-NC组相比,OD值降低、细胞凋亡率增加、Bcl-2蛋白表达减弱（P均<0.05）;SGC-7901细胞中,miR-1915-3p组与miR-NC组相比,OD值降低、细胞凋亡率增加、Bcl-2蛋白表达减弱（P均<0.05）。结论 miR-1915-3p在胃癌细胞系中表达降低,上调miR-1915-3p的表达可抑制胃癌细胞增殖,减弱Bcl-2蛋白表达以促进细胞凋亡。     

抑制线粒体活性氧自由基可减轻高糖诱导的心肌细胞焦亡和铁死亡

目的 探讨抑制线粒体氧化应激和炎症小体减轻高糖诱导的H9C2心肌细胞焦亡和铁死亡的作用,分析线粒体活性氧自由基（ROS）和炎症小体之间可能的上下游关系。方法 将H9C2心肌细胞按照随机数字表法随机分为5组。正常对照组（CON）：含25 mmol/L浓度葡萄糖的DMEM完全培养基;高糖损伤组（HG）：含35 mmol/L浓度的高糖完全培养基;高糖+线粒体抗氧化剂Mitoquinone（MitoQ）组（HG+MitoQ）：35 mmol/L高糖完全培养基中加入终浓度为0.5 μmol/mL的MitoQ;高糖+ NLRP3抑制剂MCC950组（HG+MCC950）：35 mmol/L高糖完全培养基中加入终浓度为1 μmol/mL的MCC950;高糖组+MCC950+线粒体电子传递抑制剂Rotenone（ROT）组（HG+MCC950+ROT）：35 mmol/L高糖完全培养基中加入终浓度为1 μmol/mL的MCC950和0.5 μmol/mL的ROT。各组心肌细胞干预24 h后,CCK-8法测定细胞活性;CellRox和MitoSox荧光探针分别测定心肌细胞内和线粒体氧化应激水平变化;免疫荧光法检测细胞内NLRP3炎症小体水平;Western blot检测心肌细胞中NLRP3、GSDMD和Cleaved-GSDMD（GSDMD-NT）等焦亡相关重要因子的蛋白表达和铁死亡相关因子GPX4蛋白表达。结果 与CON组相比,HG组细胞活性明显下降（P<0.01）,心肌细胞和线粒体内ROS荧光强度（P<0.01）、NLRP3免疫荧光强度（P<0.01）以及焦亡相关因子NLRP3,GSDMD和GSDMD-NT的蛋白表达（P<0.01）均明显升高,铁死亡相关因子GPX4蛋白表达下降（P<0.01）。与HG组相比,HG+MitoQ和HG+MCC950组细胞活性明显升高（P<0.01）,细胞和线粒体内ROS荧光强度（P<0.01）、NLRP3免疫荧光强度（P<0.01）以及 NLRP3、GSDMD 和 GSDMD-NT 的蛋白表达明显降低（P<0.05）,GPX4 蛋白表达增高（P<0.01）。与HG组相比,HG+MCC950+ROT组细胞活性和NLRP3、GSDMD-NT的蛋白表达无明显差异（P>0.05）;但与HG+MCC950组相比,HG+MCC950+ROT组细胞活性明显降低（P<0.01）,ROS荧光强度、NLRP3炎症小体免疫荧光以及NLRP3、GSDMD-NT的蛋白表达均明显升高,GPX4蛋白表达降低（P<0.05）。结论 MitoQ直接抑制线粒体ROS的产生减轻了高糖诱导的心肌细胞NLRP3炎症小体的生成,减少焦亡和铁死亡的发生;抑制NLRP3炎症小体减少线粒体ROS的产生;线粒体ROS和NLRP3之间可能存在着相互影响。     

胆绿素对脂多糖诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞NLRP3炎性体激活的作用

目的 探讨胆绿素（biliverdin,BV）对脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞NLRP3炎性体激活的影响及其作用机制。方法 用不同浓度胆绿素（10、20、30μmol/L）处理小鼠RAW264.7巨噬细胞30min后再用LPS （1μg/ml）处理细胞6h,ELISA法检测培养上清液IL-β和IL-18中的分泌量。30μmol/L胆绿素处理细胞30min后再用LPS处理细胞6h,Western blot法检测胞内NLPR3、caspase-1、ASC和磷酸化IκB （p-IκB）的蛋白表达水平;NF-κB抑制剂BAY11-7082处理细胞1h后,然后给予细胞30μmol/L胆绿素孵育30min,经1μg/ml LPS孵育6h,ELISA法检测细胞培养上清液中IL-β、IL-18的表达水平。结果 （1）在受到LPS作用后,RAW264.7巨噬细胞分泌IL-β、IL-18水平显著升高;而在预先给予胆绿素后,抑制了LPS诱导的IL-β、IL-18表达,并且呈剂量依赖性（P < 0.05）。（2）与空白对照组相比,LPS处理巨噬细胞6h后,NLRP3炎性体各组分蛋白和p-IκB蛋白表达明显上调（P均<0.05）,在同时间点,巨噬细胞在LPS处理前经过胆绿素预处理后,NLRP3炎性体各组分蛋白和p-IκB蛋白表达都显著降低（均P<0.05）。（3）与LPS组相比,BAY+胆绿素明显抑制了LPS诱导的IL-β、IL-18的表达（P<0.05）,并且BAY和胆绿素的对于LPS诱导炎性反应对的联合抑制作用显著的高于BAY或者胆绿素的单独作用（P<0.05）。结论 在RAW264.7巨噬细胞中,胆绿素可以通过抑制NF-κB的活性进而抑制NLRP3炎性体的形成,从而发挥抗炎作用。     

脂多糖通过诱导NLRP3表达促进膀胱癌细胞侵袭迁移的机制研究

目的采用脂多糖（LPS）处理膀胱癌（BC）5637细胞以模拟炎症微环境，研究炎症对BC细胞侵袭迁移的影响及由NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）介导的调控机制。方法将5637细胞分为LPS组、MCC950组、LPS/MCC950组和空白对照组4组，采用CCK-8实验检测细胞增殖活力，Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，qRT-PCR检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、钙黏蛋白E（E-cadhjerin）、波形蛋白（Vimentin）、NLRP3mRNA表达水平，Westernblot检测MMP-2、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、E-cadherin、Vimentin、NLRP3蛋白表达水平。结果LPS可显著增强5637细胞的增殖活力，促进其侵袭迁移及上皮间充质转化，并上调NLRP3mRNA和蛋白的表达；MCC950可显著下调NLRP3蛋白的表达，并抑制LPS促进5637细胞侵袭迁移的效应。结论LPS可通过诱导NLRP3表达来促进BC细胞侵袭迁移，NLRP3炎症小体可能是炎症状态下促进BC进展的重要因子。     

钙离子信号介导Nod样受体蛋白炎性小体激活的研究进展

Nod样受体蛋白（Nod-like receptor protein 3, NLRP3）炎性小体可识别多种病原体及细胞损伤,诱导分泌白细胞介素1β（interleukin-1β, IL-1β）、IL-18,调节炎症反应,是固有免疫系统的重要组成部分。近年研究表明,钙离子（Ca²⁺）信号参与多种NLRP3激动剂诱导的NLRP3炎性小体激活过程,并与相关疾病的发生密切相关。本文综述了有关钙离子与NLRP3炎性小体的相关研究,重点关注钙离子信号在NLRP3炎性小体激活和调节中的潜在作用,为治疗NLRP3炎性小体驱动的炎症性疾病提供新思路。     

鸡屎藤苷酸对肝癌HepG2细胞炎症因子水平、生长、凋亡、侵袭和血管生成的影响

[目的] 探讨鸡屎藤苷酸对肝癌细胞系炎症因子水平、生长、凋亡、侵袭和血管生成的影响。[方法] CCK8法检测肝癌细胞系的活力;流式检测细胞凋亡;ELISA检测相关炎症因子的含量;Western blot检测B细胞淋巴2（Bcl2）、Bcl2相关X（Bax）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase3）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、E-钙黏蛋白（E-cad）、波形蛋白（Vimentin）、纤维粘连蛋白（FN）、血管内皮生长因子（VEGF）;Transwell检测细胞侵袭;内皮细胞成管实验检测肿瘤小管的形成。[结果] 当鸡屎藤苷酸溶液的浓度小于20 μg/mL时,对肝癌细胞系活力的抑制作用不具有明显差异;48 h当浓度大于40 μg/mL时,对HepG2抑制作用明显（P<0.05）,且呈剂量依赖性抑制;选择HepG2细胞处理48h,鸡屎藤苷酸分成3个剂量组（0、20、40 μg/mL）,厄洛替尼（0.86 ng/mL）为阳性对照。与空白对照组相比,40 μg/mL组的细胞凋亡率、抗炎因子水平（IL-10）、Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3/Caspase-3和E-cad蛋白表达显著升高（P<0.05）;促炎因子水平（IFN-γ、IL-6）、侵袭细胞数量及相关蛋白表达（FN）、小管形成数量及血管内皮生长因子表达显著降低（P<0.05）。[结论] 鸡屎藤苷酸通过抗炎、抑制肝癌细胞HepG2生长、侵袭、肿瘤血管形成并促进其凋亡,缓解肝癌的发生发展。     

NLR家族Pyrin域蛋白3炎症小体对糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合的作用及其机制研究

目的 探究含NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）炎症小体对糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合的作用及其机制。方法 将30只大鼠随机分为对照组、模型组、炎症小体抑制组，每组10只。除对照组外，采用高糖饲养+腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型，模型复制成功后用球钻毁损大鼠部分牙槽骨骨质，复制牙槽骨缺损模型。模型复制成功后，炎症小体抑制组大鼠立即尾静脉注射20 mg/kg NLRP3抑制剂，1次/d，连续给药28 d。给药结束后，检测各组大鼠空腹血糖。采用酶联免疫吸附试验测定各组大鼠血清护骨因子（OPG）和碱性磷酸酶（ALP）含量。分别采用苏木精-伊红（HE）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TARP）染色观察牙槽骨缺损愈合情况及破骨细胞数，进行骨再生Lane-Sandhu评分。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western blotting检测NLRP3、Caspase-1和白细胞介素1β（IL-1β）mRNA和蛋白的表达。结果 模型组OPG、ALP低于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。HE染色结果显示，模型组大鼠牙槽骨缺损严重，可见大量炎症浸润细胞，炎症小体抑制组牙槽骨缺损程度低，炎症浸润细胞较少。模型组Lane-Sandhu评分低于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。TARP染色结果显示，模型组破骨细胞数高于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。模型组大鼠上颌骨组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。结论 抑制NLRP3炎症小体可改善骨代谢，促进糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合，其作用可能与抑制NLRP3/IL-1β通路有关。     

可溶性尿酸通过下调UCP2蛋白激活心肌细胞中NLRP3炎性小体的实验研究

目的 观察尿酸处理下大鼠心肌细胞系H9C2的损伤和NLRP3炎性小体的活化情况,探讨可溶性尿酸活化NLRP3炎性小体的机制。 方法 采用不同质量浓度的尿酸处理H9C2 12 h、24 h和48 h,通过MTS和乳酸脱氢酶（LDH）检测细胞活力,以反映细胞损伤情况,同时采用流式细胞术（FCM）分析H9C2凋亡情况。通过Western blot检测NLRP3炎性小体相关分子[NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和Caspase-1]的蛋白水平。分离线粒体和胞质,Western blot检测细胞色素C的释放情况,评价线粒体损伤情况。MTS和LDH检测活性氧（ROS）抑制剂N-乙酰基-L-半胱氨酸（NAC）对细胞活力的影响,real time-PCR及Western blot检测NAC对NLRP3炎性小体活化的改善情况。最后采用Western blot和免疫荧光检测解偶联蛋白2（UCP2）蛋白的表达。 结果 随着尿酸浓度的增加,细胞损伤和凋亡加剧,且具有时间依赖性;尿酸可上调NLRP3炎性小体相关分子的表达,并导致线粒体受损;NAC可改善细胞损伤并抑制NLRP3炎性小体相关mRNA和蛋白的活化;尿酸还可下调UCP2的表达。 结论 尿酸下调UCP2蛋白的表达,诱导线粒体损伤,激活NLRP3炎性小体,导致心肌细胞损伤。     

完善病案复印 改善医患关系

《医疗机构病历管理规定》存在一些未详细说明的问题，如什么是有效身份证明，什么年份的病案可以复印等？这不仅影响医院为患者提供病历复印工作，更影响和谐医患关系，造成医患关系紧张；因此，一方面要完善《医疗机构病历管理规定》，另一方面，医院应利用出院记录等医疗文件进行详尽的告知义务，同时，应将住院检验、影像报告单一式两份，一份贴于病案中，一份直接给病人，这样能极大的方便患者，改善医患关系。     

病案信息管理发展趋势

目的探索病案信息管理未来发展方向。方法将病案信息管理过程中所涉及的问题进行分析。结果病案信息管理在医疗、教学、科研、医院管理、医疗保险、法律等起着举足轻重的作用。结论病案信息管理发生显著的变化,向数字化、高智能化的电子病案方向发展。     

学习环境中的气味与记忆成绩相关性研究

目的探索学习环境中的气味,单独或同时出现于编码与提取过程中,其对短时记忆储存的影响。方法设计两个试验:试验一,将被试随机分为气味组、想象组、控制组,在有桂花香气味、想象气味、没有也不想象气味的学习环境中分别测验被试的整体回忆成绩和相关词汇的回忆量,并进行统计学处理。试验二,气味为愉快气味和不愉快气味2种,试验是3个被试间设计(学习时伴随气味:愉快的,不愉快的,无气味×3;回忆时伴随气味:愉快的,不愉快的、无气味×3)。试验分两次进行,间隔24h,然后进行统计学处理。结果试验一,气味组的整体回忆成绩(12.500±3.117)个高于想象组(9.571±2.387)个和控制组(7.625±5.225)个,变差分析显示3组间差异有显著性(P<0.05),想象组成绩低于气味组,但高于控制组。试验二,在学习中呈现气味和回忆中呈现气味之间有着显著的相互作用(P<0.05);但对气味呈现于测验(回忆)中则无显著影响(P>0.05)。均数逐对检验亦发现A1B1、A2B1、A2B3三个组的均数与其余各组(除A2B2组外)都差异有显著或非常显著;A2B2组只与A3B1组差异有显著性。结论1.学习和回忆时,如果呈现同一种愉快气味,那么会产生记忆的增益(提高)现象,愉快气味可以认为是一种有效的记忆提取线索;2.学习时,如果呈现一种不愉快气味,那么回忆时不管有否气味,都会产生记忆的增益(提高)现象。     

肠内营养支持对胎儿宫内发育迟缓的疗效

目的探讨肠内营养支持对胎儿宫内发育迟缓（IUGR）治疗效果,以及妊娠期长时间应用肠内营养支持的可行性和安全性。方法胎儿宫内发育迟缓孕妇48例,随机分为观察组和对照组,每组24例,对照组给予相应胎龄所需热量的饮食,观察组除给予对照组的饮食外再加适量的肠内营养制剂,应用30天。结果观察组孕妇的宫高和双顶径的增加显着大于对照组孕者;观察组胎儿无应激试验（NST）阳性的比率显着大于对照组（P〈0.01）;观察组低体重出生儿（小儿出生体重小于2500g）及和Apgar小于7分的患儿比率显着小于对照组（P〈0.01）。结论肠内营养支持在胎儿宫内发育迟缓的治疗中不仅有效,而且对孕妇和胎儿也是安全的。     

加强病历书写的质量监控确保病案质量

目的针对住院病案缺陷的常见原因，提出解决方法。方法对2007年上半年出院病案进行质量检查。结果抽查病历924份，病历缺陷924份，共2540项次。结论加强医师的法制观念，加强责任感，强化基本功讪练，实行病案质量四级监控，杜绝缺陷病案归档上架，确保病案质量。     

从“神、形、纳、眠、便”判断糖尿病治疗效果

朱章志教授通过长期临床实践,在糖尿病治疗方面形成了一套独特的理论,创新性的提出以"神、形、纳、眠、便"判断疗效,即以患者的精神状态、形体、饮食、睡眠及二便等症状作为糖尿病治疗效果的判断标准。人体的"神、形、纳、眠、便"是在人体正气的推动下才能够正常,"神、形、纳、眠、便"出现异常,实际上是反应了人体正气的虚弱,因而可以用来评价人体的正气是否正常,这一方法在临床上具有很强的实用性,以此作为指导,取得了广大患者的认可。     

方药离合今论

通过对方剂配伍规律的研究,阐述了配伍在遣药组方及方中药性发挥中的重要作用,指出如配伍得当,可选择发挥方中之药的某一药性,可使方剂直达病位,亦可解毒增效,体现了方药离合之妙。     

病案首页信息质量与统计报表的准确性

目的提高病案首页信息质量,保证医院统计报表的准确性.方法通过了解病案首页信息质量的要求(完整性、准确性、时效性);分析病案首页信息质量常见问题对医院统计指标的影响;提出对病案首页信息质量存在问题的对策.结果病案首页信息质量,直接影响医院统计报表的准确性.结论只有提高病案首页信息质量才能保证医院统计报表的准确.     

用权利制约权力--论病人权利与医师权力的关系

医师在医疗服务中拥有的医学治疗权不是一项个人权利,而是一项社会权力.医师权力来源病人权利的部分让渡.其目的是为了维护和增进病人的健康利益,但在现实生活中,市场经济的负面因素诱发医师权力部分地背离了它的本始目的,这一现象就是医师权力异化.异化了的医师权力侵犯病人权利,引起医患双方利益冲突,形成医疗纠纷.在立法上全面确定病人的权利与医师的义务,用病人权利制约医师权力,这是和谐医患关系的一条有效途径.     

现代司法技术与经验法则的运用

经验法则是利用事物发展常态而形成的规律,而适用于证据司法场域的特殊法官心证过程.借助现代司法的自由心证技术,以及盖然强度的适用效能评估,可以促进经验法则更加符合民众实质正义观感,促进基于证据事实裁量的纠纷解决结果的可接受性.