As2O3/ Mn0.5Zn0.5Fe2O4复合纳米粒的制备及其对乳腺癌细胞增殖、凋亡的实验研究

目的：通过制备As2O3/Mn0.5Zn0.5Fe2O4复合纳米粒来研究热化疗对乳腺癌的治疗效果。方法：采用改良的化学沉淀-浸渍法制备As2O3/Mn0.5Zn0.5Fe2O4复合纳米粒,通过透射电镜、扫描电镜、能谱仪、原子荧光光谱仪来表征;检测As2O3/Mn0.5Zn0.5Fe2O4复合纳米粒的释药水平及在交变磁场中的升温能力;通过MTT比色法和流式细胞仪检测化疗组、热疗组及热化疗组乳腺癌的治疗效果。结果：制备的复合纳米粒粒径为20～40 nm;复合纳米粒体外升温能达到肿瘤的有效治疗温度（41～46℃）;释药缓慢,48 h释药为14.67%。结论：采用改良的化学沉淀-浸渍法可以成功制备As2O3/Mn0.5Zn0.5Fe2O4复合纳米粒,体外实验证明该复合纳米粒联合交变磁场热疗对乳腺癌细胞具有很强的生长抑制和凋亡诱导作用。     

As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球的制备与表征

目的 :制备用于肿瘤热化疗和逆转多药耐药的As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球并表征。方法:化学共沉淀法制备Fe3O4磁性纳米粒,运用透射电镜、X射线衍射分析进行表征,溶血实验及MTT试验进行毒理学评定。去溶剂化交联法制备As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球,运用透射电镜和能谱仪进行表征,在交变磁场作用下进行体外升温试验,体外释药方法研究其释药速率。结果:Fe3O4磁性纳米粒近似球形,粒径约20 nm,无溶血作用,细胞毒性为1级。As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球近似球形,大小均匀,粒径约193.4 nm,其不同浓度的磁流体在交变磁场下可升温至39.5~58.0℃并保持恒定。体外释药实验证实As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球具有明显的缓释功能。结论:Fe3O4磁性纳米粒作为药物载体具有良好的生物相容性。用去溶剂化交联法可以成功制备出As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球,As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球释药速率缓慢,为研究肿瘤热化疗和逆转多药耐药提供理论和实验基础。     

DMSA@γ-Fe2O3纳米磁流体联合卡氮芥在交变磁场下对人胶质瘤细胞U251的影响

目的 研究在一定强度交变磁场下DMSA@γ-Fe2O3纳米磁流体热疗联合化疗药物卡氮芥对人胶质瘤细胞U251的影响.方法 对Fe2O3纳米材料进行体外升温实验,以期找到热疗(43℃)所需的最佳浓度.MTT法评价Fe2O3纳米材料对人胶质瘤细胞U251的毒性作用,并确定卡氮芥对该细胞的工作浓度.将人胶质瘤细胞U251分为对照组、磁纳米热疗组、化疗组、磁纳米热疗联合化疗组(简称热化疗组),对照组更换培养液后继续培养,磁纳米热疗组加入适当浓度的Fe2O3浸提液置于磁场下43℃热疗2h,化疗组加入工作浓度的卡氮芥后继续培养24h,热化疗组加入上述浓度的卡氮芥后置于于磁场下43℃热疗2h,采用流式细胞仪观察各组细胞的凋亡情况.结果 Fe2O3纳米材料升温效应良好,当Fe2O3浓度≥8g·L-1时,温度可达43℃以上.Fe2O3纳米材料对U251细胞毒性为0～1级,均属对细胞无毒性范畴.以24h 时IC10～IC25的药物浓度作为实验的工作浓度,确定卡氮芥的工作浓度为0.02g·L-1;43℃单独热疗和单独化疗均对胶质瘤细胞有抑制和杀伤作用(P<0.05),而在此温度下磁纳米热疗与药物联合抑制作用均明显强于单独热疗和单独化疗(P<0.05);流式细胞仪结果显示,对照组、磁纳米热疗组、化疗组、热化疗组细胞凋亡率分别为2.58%、13.75%、17.60%和35.27%.结论 交变磁场作用下,磁纳米热疗(43℃)可以明显增强化疗药物卡氮芥对人胶质瘤细胞U251的抑制作用.     

As2O3磁性纳米微球的制备及其联合磁流体热疗对宫颈癌治疗的体外实验研究

目的：研究As2O3磁性纳米微球的制备及其联合磁流体热疗（MFH）对宫颈癌Siha细胞株的治疗作用。方法：采用改良的乳化冷冻凝聚法制备As2O3磁性纳米微球，能谱仪、原子荧光光谱仪对其进行表征；高频交变磁场中进行体外升温实验。四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测As2O3磁性纳米微球联合MFH对宫颈癌Siha细胞株生长的影响，流式细胞仪（FCM）检测凋亡。结果：所制备As2O3磁性纳米微球近似球形，粒径约为120nm，含砷量为0．61％，在输出电流I=300A的高频交变磁场中具有升温能力，且能达到肿瘤治疗的有效温度（41℃～46℃）；As2O3磁性纳米微球联合MFH能抑制宫颈癌Siha细胞株的生长，促进其凋亡，且均较单纯As2O3液及单纯MFH明显。结论：As2O3磁性纳米微球可同时发挥As2O3的细胞毒性作用和磁感应加热的联合定向治疗作用，效果优于单一治疗，为临床治疗宫颈癌提供新的方法。     

Fe2O3 纳米磁流体热疗治疗小鼠结肠癌实验研究

目的研究Fe2O3纳米磁流体热疗对小鼠结肠癌的治疗效果。方法磁流体直接局部注射到小鼠皮下肿瘤组织,交变磁场下加热至43℃,计算瘤体积抑制率,肿瘤组织及各个脏器做病理检测。结果 Fe2O3纳米磁流体在交变磁场(alternatingmagnetic field,AMF)中升温迅速。热疗组相比磁流体对照组、磁场对照组、空白对照组,热疗6天后瘤体体积抑制率分别为50.87%、50.50%、76.57%,P<0.05,差异有统计学意义。病理检测证实肿瘤组织部分凋亡,而正常脏器无变化。结论 Fe2O3纳米磁流体热疗可抑制小鼠结肠癌的增长,对结肠癌的治疗有一定作用,但并不能完全抑制肿瘤的生长。实验证明热疗安全可靠。     

As2O3磁性纳米微球磁感应加热治疗宫颈癌的研究

目的探讨As2O3磁性纳米微球磁感应加热治疗宫颈癌的作用和机理。方法用培养的SiHa细胞建立裸鼠人宫颈癌移植瘤模型,将研制的As2O3纳米微球、磁性纳米微球、As2O3磁性纳米微球等注入肿瘤细胞接种处,加高频交变磁场磁感应加热治疗3次后,d 45实验结束,分析比较3个实验组较对照组的延迟出瘤时间、质量抑制率、肝功能和肾功能情况及肿瘤、瘤周和内脏组织学的改变。同时观察磁流体热疗的升温和恒温效果。结果在高频交变磁场下,As2O3磁性纳米微球组肉眼未见肿瘤生长,该组的肿瘤质量抑制率为99.93%,明显高于As2O3纳米微球组(85.20%,P<0.01)及磁性纳米微球组(87.72%,P<0.01)。各实验组裸鼠血清AST、ALT、Bun及Cr水平与对照组相比无显著性差异(P>0.05),瘤旁和内脏组织未见明显损伤。结论在高频交变磁场作用下,As2O3纳米微球、磁性纳米微球、As2O3磁性纳米微球治疗裸鼠宫颈癌均有效,以As2O3磁性纳米微球效果最佳。本研究所采用的As2O3磁性纳米微球联合磁流体热疗技术具有双重抗癌功能,为宫颈癌和其他实体瘤的治疗提供了一条新途径。      

纳米As2O3磁性脂质体的制备及表征

目的:制备将药物治疗与热疗相结合的靶向抗癌药物新剂型-As2O3磁性脂质体。方法:用改良的湿化学法制备MnxZn(1鄄x)Fe2O4(锰锌铁氧体)纳米磁性粒子,运用透射电镜和PE热分析系统进行表征,在高频交变磁场下进行体外加热试验,MTT实验检测其细胞毒性;采用薄膜-超声法加高速搅拌制备纳米As2O3磁性脂质体,用透射电镜、图像分析系统和能谱仪对其进行表征,原子荧光光度计检验脂质体中As2O3的包封率。结果:MnxZn(1鄄x)Fe2O4纳米磁性粒子近似球形,粒径20～40nm,无细胞毒性,居里温度随锰锌比例的不同分布在97℃~140℃之间,其磁流体在高频交变磁场下可升温至35℃~47℃并保持恒定。以此磁性材料为载体制成的As2O3磁性脂质体的平均粒径为(182±125)nm,其中含有As2O3和MnxZn(1鄄x)Fe2O4的成份,药物包封率达到71.16%。结论:MnxZn(1鄄x)Fe2O4纳米粒子是制备医用磁性脂质体的良好载体,采用薄膜-超声法加高速搅拌可制备纳米级As2O3磁性脂质体。     

磁性阿霉素白蛋白纳米粒的研制

目的：制作具有稳定磁性、能够携带化疗药物的白蛋白纳米粒,并对白蛋白纳米粒的磁性,药物含量进行检测。方法：将市售用Fe3O4粉末,经化学方法处理,制成纳米大小的Fe3O4泥糊,将Fe3O4泥糊、纯盐酸阿霉素、人体血清白蛋白按一定比例混合,通过在棉仔油中超声乳化,加热变性、乙醚洗涤等工艺制作出磁性阿霉素白蛋白纳米粒,用乙醇提取法提取磁性纳米粒中的阿霉素,并用荧光光度计测定含量。将纳米粒溶于生理盐水中,在光学显微镜下观察在磁场作用下磁性纳米粒的运动情况,通过检测溶液中的游离药物,观察在不同的加热温度下,磁性纳米粒的稳定性,并用电子显微镜观察纳米粒的内部结构。结果：磁性白蛋白纳米粒阿霉素含量为57．5μg/g,阿霉素包含率为98．3％,磁性白蛋白纳米溶液在光学显微镜下观察,在磁场的作用下,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集,当磁铁与纳米粒的距离加大时,纳米粒运动速度减慢,并沿磁力线的方向形成串珠状聚集。电子显微镜下观察,Fe3O4颗粒均匀分布在白蛋白纳米粒中,结论：磁性白蛋白纳米粒具有磁性稳定、靶向性强、药物包含率高、释药速率可控制的特点,为靶向药物治疗提供了可靠的载药工具。     

C225偶联磁性白蛋白纳米球的制备、表征及联合磁流体热疗体外靶向抗肺癌的研究

目的：制备抗表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor,EGFR）单抗西妥昔（C225）偶联的磁性白蛋白纳米球,对其表征并联合磁流体热疗观察其体外抑制肺癌细胞的效果。方法：化学共沉淀法制备Fe3O4磁性纳米粒,去溶剂化?交联法制备磁性白蛋白纳米球（magnetic albumin nanospheres,MANs）,然后用双功能交联剂N?琥珀酰亚胺?3?（2?吡啶二硫代）丙酸酯［N?succinimidyl?3?（2?pyridyldithio）propionate,SPDP］将C225偶联其上制备C225?MANs。纳米球的形态、平均粒径、zeta电位、抗体结合率、含铁量、细胞靶向性及磁热动力学均被表征。最后采用CCK?8及流式细胞（flow cytometry,FCM）分析检测C225?MANs介导的体外双靶向磁流体热治疗肺腺癌细胞GLC?82的效果。结果：透射电镜显示制备的C225?MANs为球形,Fe3O4纳米粒被封装其内,Fe含量约2.0 mg/mL;平均水合粒径约为140 nm,带负电;在输出电流20 A、输出频率200 kHz的交变磁场作用下,不同Fe含量的C225?MANs能在 60 min内升温到39.3 ℃~52.0 ℃,且加热30 min后温度能保持恒定。FCM荧光检测显示抗体结合率为79.74%。免疫荧光实验和细胞MRI成像证实C225?MANs能够靶向GLC?82细胞。CCK?8与FCM分析显示双靶向联合治疗组的细胞增殖率明显低于其他治疗组,而凋亡率明显高于其他治疗组（P < 0.05）。结论：C225?MANs对肺腺癌细胞GLC?82具有良好的靶向效应,且双靶向磁流体热疗联合分子靶向治疗在体外能有效抑制肺癌细胞。     

蛋白酶体抑制剂联合亚砷酸对NB4细胞survivin基因表达的影响

目的 研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib)单药应用及其联合亚砷酸(As2O3)对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4中survivin mRNA表达的影响.方法 将受试对象分为9组:未加药空白对照组(D组);As2O3组,0.5 μmol/L(A1组)和1μmol/L(A2组);bortemmib组,5 nmol/L(B1组)和10 nmol/L(B2组);联合组,0.5/μmol/L As2O3 5 nmol/Lbortezomib(C1组),0.5μmol/L As2O3 10 nmol/L bortezomib(C2组),1μmol/L As2O3 5 nmol/L bortezomib(C3组),1μmol/LAs2O3 10 nmol/L bortezomib(CA组).作用时间分为三个水平:24 h,48 h和72 h.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测药物作用前后抑凋亡基因survivin mRNA的表达水平.结果 bortezomib和As2O3单药组中survivin mRNA的表达水平下降,且存在剂量与时间依赖性,联合组survivin mRNA的表达水平亦下降,且比单药组下降更明显.结论 bortezomib与As2O3可通过抑制NB4细胞株survlvin mRNA的表达诱导细胞发生凋亡,两药联合具有协同效应.     

0．5％碘伏治疗足癣的疗效观察

目的探讨0．5％碘伏治疗足癣的临床疗效。方法2005年9月-2012年11月我院采用o．5％碘伏治疗足癣46例,观察其临床疗效。结果本组46例足癣患者,经15d~20d的治疗,41例痊愈,占89．13％;4例显效,占8．70％;1例效果较差,占2．17％,总有效率为97．83％。本组46例均获得10个月~21个月的随访,平均13个月,未见复发病例。结论0．5％碘伏治疗足癣疗效较佳,值得推广。     

羟乙基淀粉200/0.5急性高容量血液稀释对脊柱椎间融合手术患者血流动力学的影响

目的探讨全身麻醉下羟乙基淀粉200/0.5急性高容量血液稀释对骨科脊柱椎间融合手术患者血流动力学的影响。方法将120例全身麻醉下行骨科脊柱椎间融合手术患者按随机数字表法分为研究组和对照组，各60例。研究组采用羟乙基淀粉200/0.5，输注速率50ml/min进行急性高容量血液稀释，对照组进行常规输液。术中连续监测平均动脉压（MAP）、心率（HR）和中心静脉压（CVP）。分别于稀释前即刻（T0）、稀释后5min（T1）、稀释后120min（T2）抽取桡动脉血进行乳酸（Lac）、尿素氮（BUN）、红细胞压积（Hct）及血红蛋白（Hb）测定。结果研究组血液稀释后的MAP和CVP均比稀释前升高，并且研究组的CVP明显高于对照组（P＜0.05），HR明显低于对照组（P＜0.05）；血液稀释后的T1和T2的Hct及Hb与对照组差异均无统计学意义（均P＞0.05）；研究组Lac、BUN与对照组差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论全身麻醉下羟乙基淀粉200/0.5急性高容量血液稀释可以有效改善脊柱椎间融合手术患者的血流动力学的影响。     

羟乙基淀粉200/0.5氯化钠注射液在创伤失血性休克患者中的应用

目的观察羟乙基淀粉200/0.5氯化钠注射液在创伤失血性休克患者中的临床应用效果。方法按照临床诊断标准,选取中重度失血性休克患者78例,随机分为2组:对照组和研究组各39例。2组患者分别输注聚明胶肽和羟乙基淀粉200/0.5氯化钠注射液1000 ml,测定液体输注前后患者血压、脉搏、休克指数、Na~+、CI~-、SpO_2等指标变化。结果与人室时比较,2组输注液体20～30 min后血压均明显升高(P<0.05),而休克指数均显著降低(对照组20 min除外),差异有统计学意义(P<0.05),且研究组优于对照组(P<0.05)。治疗后2组血钠、血氯均升高(P<0.05),但仍在正常范围,SpO_2均显著升高(P<0.05),且研究组优于对照组(P<0.05)。结论输注羟乙基淀粉200/0.5氯化钠注射液可有效改善失血性休克患者血压,纠正休克。     

羟乙基淀粉130/0.4和200/0.5对凝血和血小板功能的影响

目的 观察输注羟乙基淀粉(HES)溶液130/0.4和200/0.5(33mL/kg)后对凝血和血小板功能的影响.方法 随机选择连续硬膜外阻滞下腹部手术患者45例,分别以10～15 mL·kg-1·h-1速度从颈内静脉输注HES 130/0.4、HES 200/0.5和0.9%生理盐水(NS)33mL/kg,分为 HES 130/0.4组、HES 200/0.5组和NS组,每组各15例.输注前、输注后30min和4h从肘静脉抽血,测定红细胞压积(Hct)、血小板计数(Plt)、凝血酶原时间(PT)、激活的部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、血浆Ⅷ因子和假性血友病因子(VWF),Sonoclot血小板功能分析仪测定玻璃珠激活全血凝固时间(gbACT)、凝血速率和血小板功能.结果 三组患者输注后Hct与Plt均明显下降(P<0.01);HES 130/0.4组输注前后APTT无明显变化(P>0.05),输注后30min和4h明显短于HES 200/0.5组(P<0.05);HES 200/0.5组输注后30min和4 h较输注前和NS组均明显延长(P<0.05);三组间输注前后PT与FIB比较,差异无统计学意义(P>0.05);HES 130/0.4组和HES 200/0.5组输注后30min较输注前和NS组血浆Ⅷ因子、VWF均明显下降(P<0.05或P<0.01),HES 130/0.4组下降明显少于HES 200/0.5组(P<0.05).HES 130/0.4组输注前后凝血功能指标无明显变化(P>0.05),输注后30 min与HES 200/0.5组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HES 200/0.5组输注后30 min与输注前和NS组比较,凝血功能指标的差异均有统计学意义(P<0.05).结论 输注HES130/0.4和HES200/0.5(33mL/kg)均可引起血浆Ⅷ因子和VWF显著下降,但后者更明显.HES130/0.4对内外源性凝血和血小板功能无影响,HES200/0.5则有明显损害.     

羟乙基淀粉200/0.5溶液容量替代治疗的有效性和安全性

目的：观察羟乙基淀粉200／0．5溶液血浆容量替代治疗的有效性和安全性。方法：选择23例ASAI－Ⅱ级择期手术患者，给予羟乙基淀粉200／0．5溶液进行容量替代治疗，观察术中血流动力学变化及对酸碱平衡，凝血功能和肝肾功能的影响。结果：所有患者术中血流动力学保持稳定，随着手术时间的延长，出现轻度代谢性酸中毒，术后凝血功能和肝肾功能正常，结论：羟乙基淀粉200／0．5溶液为一有效和安全的血浆代用品。     

4-氨基-4-甲基哌啶二对甲苯磺酸盐的合成

目的 合成二肽基肽酶4抑制剂ABT-279和K-579的重要中间体4-氨基4-甲基哌啶二对甲苯磺酸盐.方法 以4-哌啶甲酸乙酯为原料,经N-Boc保护、烷基化、酰胺化、Hofmann降解和N-Boc脱保护5步反应,制备得4-氨基4-甲基哌啶二对甲苯磺酸盐.结果 4-哌啶甲酸乙酯为原料合成目标化合物的总收率为49.5%....     

高渗羟乙基淀粉(200/0.5)氯化钠注射液用于择期颅脑手术麻醉效果探讨

目的 探讨高渗羟乙基淀粉(200/0.5)氯化钠注射液用于择期颅脑手术麻醉对患者血流动力学、电解质酸碱平衡及降低颅内压效果的影响.方法 选取行择期胶质瘤切除手术患者120例,以随机抽样方法分为对照组(60例)和高渗组(60例);分别给予常规羟乙基淀粉和高渗羟乙基淀粉(200/0.5)静脉输注,比较两组患者不同时间点心率(HR),平均动脉压(MAP),中心静脉压(CVP),Na+、K+、Ca2+、pH及颅内压(ICP)等指标水平.结果 两组患者T2、T3及T4时间点HR和CVP指标均较T0时间点明显提高,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者T3和T4时间点MAP指标均较T0时间点显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);而高渗组患者T4时间点HR和MAP指标水平均明显优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者T1、T2、T3及T4时间点Na+和K+指标水平与T0时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者T2、T3及T4时间点ICP水平较T0时间点均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);高渗组患者T4时间点ICP水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高渗羟乙基淀粉(200/0.5)氯化钠注射液用于行颅脑外科手术治疗患者可有效稳定血流动力学,纠正电解质酸碱平衡平衡紊乱,并抑制颅内压升高.     

4-取代氨基甲酰胺基-4-脱氧-4′-去甲基表鬼臼毒素衍生物的合成及其抗肿瘤活性

根据鬼臼毒素类化合物C_4位氮取代衍生物构效原理,设计并合成了11个4-取代氨基或烃氧甲酰胺基表鬼臼毒素类似物。从鬼臼毒素出发,经溴代、水解、叠氮化、还原以及酰化等六步反应合成标题化合物。体外抗肿瘤活性试验表明这类化合物具有较为显著的生物活性,多数化合物对L1210白血病肿瘤细胞与KB细胞生长抑制活性超过临床用药依托泊甙。     

4-取代氨基甲酰胺基-4-脱氧-4′-去甲基表鬼臼毒素衍生物的合成及其抗肿瘤活性

根据鬼臼毒素类化合物C_4位氮取代衍生物构效原理,设计并合成了11个4-取代氨基或烃氧甲酰胺基表鬼臼毒素类似物。从鬼臼毒素出发,经溴代、水解、叠氮化、还原以及酰化等六步反应合成标题化合物。体外抗肿瘤活性试验表明这类化合物具有较为显著的生物活性,多数化合物对L1210白血病肿瘤细胞与KB细胞生长抑制活性超过临床用药依托泊甙。