四氯化碳诱导大鼠肝性脑病模型的制备

目的 建立肝性脑病(HE)动物模型.方法 应用四氯化碳联合酒精自饮法制作慢性肝功能衰竭引起HE发生的模型,进行迷宫试验、脑电图、血液生化、形态学、行为活动观察等检测.结果 1.肉眼下可见模型组肝脏普遍肿大,表面较粗糙,有较粗的颗粒,暗红色;正常组肝脏未见异常.模型组肝内有大量纤维增生,肝细胞溶解,弥漫性大片坏死,残留肝细胞成片气球样变.2.与对照组大鼠比较,造模组第九周水迷宫测试逃避潜伏期明显延长,以潜伏期延长超过正常x+2.5 s为标准,本实验有14/20(55％)只大鼠水迷宫潜伏期明显延长;3.HE模型组血氨浓度明显高于正常对照组,组间比较差异有显著性(P＜0.01);4.正常组脑电图以α波为主,无明显异常;模型组出现肝性脑病变化.结论 1.建立了肝硬化合并肝性脑病较为理想的动物模型;2.水迷宫测试联合检测更易检出HE.     

四氯化碳诱导大鼠急性肝功能衰竭动物模型的建立

目的不同剂量的四氯化碳可以引起不同的肝脏损害,本试验用四氯化碳灌服制造急性肝功能衰竭的动物模型。方法SD大鼠35只,分5组,1个对照组,4个实验组,实验组四氯化碳灌胃剂量依次为每公斤体重1、3、4和5mL。观察动物的精神状况、食欲、运动情况、毛发、尿的颜色,检测血清谷丙转氨酶、总胆红素,数据x±s表示,实验组和对照组的动物存活率用χ2检验;各组肝功能指标用单因素方差分析。肝脏组织HE染色后观察病理学改变。结果各组间肝功能损害的差异及动物存活率的差异在统计学上均有极显著性。每公斤体重4mL四氯化碳组出现急性肝功能衰竭的临床表现以及肝脏病理改变。结论每公斤体重4mL四氯化碳灌胃可用于SD大鼠急性肝功能衰竭模型的建立。     

硫代乙酰胺致大鼠肝性脑病模型的量-效关系

目的 :探讨不同剂量硫代乙酰胺 (TAA)致大鼠肝性脑病 /轻微型肝性脑病 (HE/MHE)的量 -效关系。方法 :设立 3个TAA剂量组 ,分别以 2 0 0、2 5 0、35 0mg/(kg·d)剂量的TAA隔日行腹腔内注射 ,共 2次 ,建立不同剂量TAA致大鼠肝性脑病的动物模型 ,1d后进行检测脑干听觉诱发电位 (BAEP)和门静脉血浆内毒素 ,血氨 ,肝功能 ,肝脏病理等指标。结果 :不同剂量TAA组的大鼠在HE/MHE发生率 ,肝性脑病分级评分 ,内毒素 ,血氨 ,肝功能和肝脏病理变化等方面均差异显著 (P <0 .0 5 ) ,TAA剂量越大 ,内毒素和血氨水平越高 ,肝功能损害和肝脏病理变化越明显 ,HE/MHE发生率和肝性脑病分级评分越高 ,存在明显的量 -效关系。结论 :TAA致大鼠肝性脑病模型具有显著的量效关系 ,其中 2 0 0mg/(kg·d)剂量TAA为制备MHE模型的适宜剂量。     

慢性疲劳对大鼠肝脏功能的影响

目的 观察慢性疲劳对大鼠肝脏功能的影响.方法 100只大鼠随机分为正常对照组和慢性疲劳模型组,两组又按周数(1,2,3,4,5周)各分为5个亚组,慢性疲劳模型组大鼠每日强制游泳2 h,模型各亚组造模前及造模最后1 d观测大鼠的力竭游泳时间,正常对照组大鼠除在疲劳模型组大鼠游泳期间给予禁食禁水外其他不作干预,实验结束后大鼠腹主动脉采血,检测肝功能相关指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(G).结果 慢性疲劳模型组大鼠造模2周以后其力竭游泳时间显著减少(P＜0.01),并随着造模时间延长至5周,大鼠力竭游泳时间有减少的趋势,但差异无显著性(P＞0.05).与正常对照组比较,慢性疲劳模型组大鼠造模2周时血清AST出现升高(P＜0.05),并持续到5周(P＜0.01);大鼠造模3周时血清ALT出现显著性升高(P＜0.05),并持续到5周(P＜0.01);其他肝功能相关指标未见异常.结论慢性疲劳可造成大鼠肝功能损伤.     

硝石矾石散对肝内胆汁瘀积型大鼠血清学及Na-K-ATP酶活性的影响

目的:探讨硝石矾石散对α-荼基异硫氰酸盐(α-naphthylisothiocyanate,ANIT)诱导的肝内胆汁瘀积大鼠模型的影响。方法:采用ANIT诱导制备肝内胆汁瘀积大鼠模型40只,雌雄各半,随机分为模型组、西药阳性对照组及中药治疗组,其中模型组20只,其余组各10只,另选未造模大鼠10只作为正常对照组。各组均日一次灌胃给药,西药组给予思美泰,中药组给予硝石矾石散,模型组和正常对照组给予等容积0.9%氯化钠注射液。给药时间从造模当天开始,于造模48h后处死模型组10只大鼠,留取血清及肝组织备用。用药7天后处死全部大鼠,观察各组大鼠肝功能指标及Na-K-ATP酶活性。结果:与模型组相比,中药组血清中总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、谷丙转氨酶(ALT)、血清总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酶(ALP)水平均明显下降(P<0.05),Na-K-ATP酶活性有明显差异(P<0.05)。结论:硝石矾石散对肝内胆汁瘀积模型有很好的治疗作用。     

乳果糖治疗亚临床肝性脑病的临床及实验研究

目的 :为探讨乳果糖 (苏威制药 ,杜必克 )治疗亚临床肝性脑病 (Subclinicalhepaticen cephalopathy ,SHE)的疗效及其机理。 方法 :观察了 30例肝炎后肝硬化 (代偿期 )SHE患者治疗前后临床症状、体征、肝功能、血氨、数字连接试验、画线试验等指标变化。结果 :乳果糖不仅可改善临床症状、体征、而且明显降低血氨和数字连接试验的时间以及画线试验的时间及错误次数 (P <0 .0 5)。以四氯化碳 (CCL4 )和苯巴比妥染毒造成大鼠肝硬化模型 ,通过观察血清血氨 ,肝脏病理及Y型电迷宫试验。乳果糖可降低血氨 ,改善肝脏病理 ,而且使大鼠Y型电迷宫试验错误次数明显低于模型对照组。结论 :乳果糖治疗亚临床肝性脑病疗效确切 ,其机制可以是通过降低血氨和通过排便而清除内毒素等减轻肝脏炎症而起作用。     

克纤胶囊对慢性肝损伤大鼠模型肝功能及肝纤维化指标的影响

目的：观察克纤胶囊对酒精及四氯化碳所致大鼠慢性肝损伤肝功能及肝纤维化指标的影响。方法：用酒精及四氯化碳造成大鼠慢性肝损伤模型，然后用克纤胶囊等给药治疗。观察大鼠肝功能及肝纤维化指标的变化。结果：与模型组比较，克纤胶囊能显降低ALT、AST值（P＜0．05），能降低HA，PC－Ⅲ，Ⅳ－C，LN等肝纤维化指标，与模型组比较有显性差异（P＜0．05），结论：克纤胶囊具有保肝降酶，抑制肝纤维化作用。     

四氯化碳不同注射方式诱导大鼠不同分期肝纤维化模型的研究

目的研究四氯化碳不同注射方式对构建大鼠不同分期肝纤维化模型的作用,为四氯化碳诱导大鼠不同分期肝纤维化模型提供可靠的方法。方法 42只雄性SD大鼠随机分成皮下及腹腔注射组,每周2次分别于后腿内侧皮下、腹腔注射四氯化碳-食用调和油悬浊液。第6周开始各组分别处死2~3只大鼠进行肝纤维化分期。结果皮下注射组造模期间死亡3只,死亡率14.3%;腹腔注射组造模期间死亡11只,死亡率52.4%,两种注射方式死亡率明显差异(P<0.05)。皮下注射组第7周获得有意义肝纤维化,第12周造模完成,造模完成时获得有意义肝纤维大鼠11只;腹腔注射组第6周获得有意义肝纤维化,第10周造模完成,造模完成时获得有意义肝纤维大鼠10只,两种注射方式获得有意义肝纤维化无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔及皮下注射方式均可建立大鼠不同分期肝纤维化模型;皮下注射造模死亡率较腹腔注射低,造模完成时间较长,两种注射方式获得有意义肝纤维无明显差异。     

S-腺苷蛋氨酸对奈乙硫氰酸酯致大鼠药物型胆汁淤积性肝病肝纤维化的保护作用

目的：研究 S-腺苷蛋氨酸(SAMe)对奈乙硫氰酸酯(ANIT)诱发大鼠药物型胆汁淤积性肝病肝纤维化的保护作用。方法将18只 SD 大鼠分为3组：A 组(空白对照组)、B 组(造模+NS)、C 组(造模+SAMe),每组各6只,各组大鼠腹腔注射后72 h 处理。采用全自动生化分析仪检测各组肝脏血清学指标,并取肝脏组织行 HE 染色及 MASSON 染色观察肝脏病理组织学变化及胶原含量改变。结果C 组大鼠的血清学指标谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)、直接胆红素(DBiL)、间接胆红素(IBiL)、谷胺酰转肽酶(γ-GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)明显低于 B 组,3组之间比较差异均有统计学意义(P <0.05);但3组之间总胆固醇(Chol)水平差异无统计学意义(P >0.05)。C 组大鼠的胶原纤维含量及胶原纤维面积比均明显低于 B 组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论SAMe 能通过改善药物型胆汁淤积性肝病的肝功能,降低胶原纤维含量及面积,进一步保护肝脏组织。     

四氯化碳致大鼠肝纤维化模型的建立

目的探讨适当改进经典四氯化碳模型复制方法。方法采用适当改进的40%(体积比)四氯化碳腹腔注射造模,造模结束后检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性、HPC3、C4、LN、HA含量;通过Mallory染色观察大鼠肝组织病理学变化。结果模型组肝湿重、肝指数、HPC3、C4、LN、HA含量以及肝纤维化程度均较正常组明显升高(P<0.01)。结论本法能够成功建立大鼠肝纤维化模型,死亡率极低,从而提高了模型质量以及实验效率。     

甲状腺激素对大鼠急性肝衰竭肠粘膜屏障功能的保护作用

目的探讨补充外源性甲状腺激素(thyroid hormone,TH)对急性肝衰竭(acute hepatic failure,AHF)肠粘膜屏障的保护作用.方法 SD大鼠36只,随机分为3组:对照组(SO组)、急性肝衰竭组(AHF组)和治疗组(AHF+TH组).腹腔注射硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)制作AHF模型.15μg/kg的标准腹腔注射三碘甲状腺原氨酸(T3),取下腔静脉血检测TH水平,取小肠组织测二胺氧化酶(DAO)活性,取末段回肠行普通HE染色观察,并使用图像分析系统测量小肠绒毛长度.结果 AHF+TH组较AHF组小肠组织DAO活性升高(P<0.05),小肠绒毛长度升高(P<0.05),肠粘膜损伤程度降低(P<0.05).结论补充外源性TH对AHF时肠粘膜屏障有明显的保护作用.     

急性肝性脑病大鼠脑水肿与脑水通道蛋白-4的相关性

目的 探讨水通道蛋白-4(AQP4)在急性肝衰竭肝性脑病与脑水肿的相关性。方法 采用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射制备急性肝衰竭肝性脑病大鼠模型。将健康雄性SD大鼠随机分为对照组8只和模型组24只,其中模型组根据造模后处死大鼠时间不同,分为24、48、60h组。观察大鼠一般情况,评估HE等级,测定血浆丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素和血氨,观察肝组织病理学,检测脑含水量和脑组织AQP4（包括蛋白和mRNA）表达水平。结果 模型组大鼠表现出典型肝性脑病症状,随着造模后观察时间延长,HE等级进行性升高,肝脏生化和血氨水平较对照组显著升高(P＜0.05),肝组织病理变化与对照组差异有统计学意义。脑含水量和AQP4表达水平（包括蛋白和mRNA）明显高于对照组(P＜0.05),并且AQP4蛋白和mRNA表达水平分别与脑含水量呈正相关(r =0.536,P＜0.01;r=0.566,P=0.01)。结论 急性肝衰竭肝性脑病大鼠脑水通道蛋白-4(AQP4)表达与脑水肿密切相关,因此AQP4是急性肝衰竭肝性脑病脑水肿发生发展的重要分子机制之一。     

红景天甙对肝纤维化大鼠Samds基因表达的影响

目的: 观察红景天甙对肝纤维化大鼠TGFβ-Smad通路的影响.方法: CCl4诱导大鼠肝纤维化,以红景天甙水溶液干预性治疗,Masson染色观察肝组织胶原沉积;ELISA法检测大鼠血清TGFβ1水平;原位杂交(in situ hybridization,ISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IH)检测大鼠肝组织Smads表达情况.结果: 红景天甙干预性治疗使肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平明显下降[(53.4±19.5) vs (88.7±22.8) mg/L, P<0.05],肝脏胶原占肝组织面积比例减少为(0.041±0.011)[模型组(0.167±0.052),P<0.05];治疗组肝脏Smad 4蛋白表达阳性率降低为(0.023±0.008)[模型组(0.137±0.090),P<0.01],Smad 4 mRNA阳性率降低为(0.233±0.018)[模型组(0.741±0.091),P<0.01];Smad 7蛋白阳性率增加为(0.067±0.010)[模型组(0.019±0.002),P<0.05],Smad 7 mRNA阳性率增加为(0.198±0.011)[模型组(0.074±0.012),P<0.01];肝组织Smads蛋白表达与Smads mRNA水平变化一致.结论: 红景天甙防治可显著降低肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平,减少肝脏胶原沉积,抑制肝脏Smad 4表达及促进Smad 7 mRNA表达,从而减弱了由TGFβ1介导的肝纤维化信号,可能是其发挥抗肝纤维化作用的分子机制之一.     

清开颗粒对亚临床肝性脑病大鼠学习记忆能力的影响

目的：建立亚临床肝性脑病大鼠模型,并探讨清开颗粒改善其学习记忆能力的机制。方法：采用四氯化碳（CCl4）高脂低蛋白复合因素造成的实验性肝硬化大鼠,对其进行动态的学习记忆测试及神经电生理测试直至出现亚临床肝性脑病。造模成功后分为中药治疗组、西药对照组及模型组,分别给予清开颗粒、乳果糖、生理盐水灌胃;2周后检测各组大鼠的Morris水迷津潜伏期成绩、肝功能、血清氨浓度和脑内氨浓度,及氨基酸神经递质的含量。结果：与正常组大鼠比较,至第10周时,造模后大鼠学习记忆的潜伏期明显延长;治疗组和对照组潜伏期均明显缩短（P〈0．01）。治疗组和对照组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、血氨、脑内氨浓度高于正常组（P〈0．01）,但明显低于模型组（P〈0．01）;治疗组的下降较对照组明显（P〈0．01）。治疗组γ-氨基丁酸的含量低于模型组,谷氨酸与天冬氨酸的含量高于模型组,皆有统计学差异（P〈0．01）。结论：清开颗粒可改善SHE大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与改善肝功能、降低氨浓度以及改善氨基酸神经递质有关。     

肠道菌群的共生素调节对肝硬化患者亚临床肝性脑病影响

目的探讨肠道菌群的共生素(海斯药业,贝飞达)调节对肝硬化患者亚临床肝性脑病(SHE)的治疗作用和机制。方法50例慢性乙型肝炎后肝硬化(代偿期)SHE患者随机分为治疗组(25例)和对照组(25例)。治疗组在对照组治疗的基础上给予贝飞达胶囊2粒,3次/日,对照组给予一般类保肝药,疗程8周。观察治疗前、后第4、8周患者临床症状、体征、肝功能、血氨、内毒素(LPS)、数字连接实验(NCT)、Child-Turcotte-Pugh功能分级、肝性脑病(HE)的发生等指标变化,并与对照组比较。结果贝飞达不仅可改善临床症状、体征、肝功能、Child-Turcotte-Pugh功能分级,而且明显降低血氨、内毒素和数字连接试验的时间(P<0.05)。结论共生素调节能有效地改善肝硬化患者亚临床肝性脑病(SHE)和避免肝性脑病(HE)发生,其机制可以是通过降低血氨、通过调整肠道菌群失调降低内毒素等减轻肝脏炎症,改善肝功能,从而降低HE的发病率。     

氧化苦参碱磷脂复合物对CCl4致大鼠慢性肝损伤的影响

目的:观察氧化苦参碱磷脂复合物对四氯化碳(CCl4)致慢性肝损伤大鼠肝功能的影响,并探讨其作用及机制。方法:将66只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、氧化苦参碱组(54 mg/kg)及氧化苦参碱磷脂复合物低、中、高剂量组(27,54,108 mg/kg),每组11只。除正常对照组外,其余各组大鼠采用10%CCl4橄榄油灌胃,每周2次,共8周,制备大鼠慢性肝损伤模型。期间记录摄食量和体质量。8周后,采血测定血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)的含量,计算肝脏指数,HE染色观察肝组织的病理变化。结果:与模型组比较,氧化苦参碱磷脂复合物低、中剂量组大鼠血清ALT、AST水平减低(P<0.05),TP升高(P<0.05),ALB含量显著升高(P<0.01);肝脏指数降低(P<0.05)。HE染色分析肝组织病理学变化结果表明,氧化苦参碱磷脂复合物低、中剂量能够有效改善肝组织损伤程度。结论:氧化苦参碱磷脂复合物对CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤具有显著保护作用,其作用机制可能与增强抗氧化活性有关。     

混合型人工肝治疗肝衰竭疗效观察

目的　评价混合型人工肝支持方法———血浆置换 +血液灌流吸附治疗肝衰竭的临床疗效、安全性及其对血浆内毒素的清除作用。方法　 3 4例肝衰竭患者进行血浆置换 +血液灌流吸附治疗 ,比较治疗前后肝肾功、血常规、PT、血浆内毒素水平的变化 ,观察治疗后患者临床症状体征情况等变化。结果　血浆置换 +血液灌流吸附治疗后 ,患者的临床症状均有不同程度改善 ,总有效率为 67.6% ,最终存活率仅为 2 9.1%。检测指标中转氨酶、总胆红素、凝血酶原时间、凝血酶原活动度、内毒素水平较治疗前后差异有显著性意义 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,不良反应较轻。结论　混合型人工肝对肝衰竭有肯定的疗效 ,对血浆内毒素有确定的清除作用