中国汉族家族性肥厚型心肌病肌球蛋白重链基因G823E突变分析

目的 研究中国人家族性肥厚型心肌病(HCM)的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系.方法 在1个中国汉族HCM家系中进行心脏肌钙蛋白T基因(TNNT2)、心脏肌球蛋白结合蛋白C基因(MYBPC3)和心脏β-肌球蛋白重链基因(MYH7)的突变筛查,聚合酶链反应(PCR)扩增基因功能区外显子片段,并对PCR产物进行测序分析.以120名正常志愿者为对照组.结果 在该家系接受调查的12名成员中有4名成员携带MYH7基因G823E杂合突变,该突变位点位于MYH7基因的22号外显子并使823位的甘氨酸(G)转换为谷氨酸(E),该突变在西方人中未见报道,其导致的临床表型在家系内部呈现较明显的异质性,携带该突变的家族成员发病年龄和临床症状差异较大.该家系成员TNNT2及MYBPC3基因未发现突变且对照组相同位置未发现异常.结论 MYH7基因为我国家族性HCM的致病基因之一,G823E突变所致肥厚型心肌病呈现明显的个体异质性表型.     

心脏型肌钙蛋白T基因14035c＞t突变导致家族性肥厚型心肌病的临床表型分析

目的研究中国人肥厚型心肌病（HCM）致病基因,分析基因型与临床表型的关系。方法在一个HCM家系中进行心脏型肌钙蛋白T基因（TNNT2）、心脏型肌球蛋白结合蛋白C基因（MYBPC3）和β-肌球蛋白重链基因（MYH7）突变筛查,利用聚合酶链反应（PCa）扩增其功能区的外显子片段,双脱氧末段终止法测序。家系调查资料包括临床表现、体格检查、心脏超声和心电图。结果在该家系接受家系调查的10例对象中4例携带TNNT2 14035c〉t（R130C）突变,全部于40岁之前发病,外显率100％。正常对照组同一位置未见异常,该突变位点使TNNT2基因第10号外显子130位的精氨酸变为半胱氨酸,先证者及其两兄长皆以心功能不全表现为主,先证者的两位兄长在我们随访过程中发生猝死。MYH7及MYBPC3基因未发现突变。结论TNNT2基因14035c〉t突变是该HCM家系的致病突变。其携带者的临床表型较恶。对于临床表型较恶,猝死发生率较高HCM家系有必要进行TNNT2的突变筛查。     

LMNA 基因 C.1583C>G 突变致 Emery-Dreifuss 型#br# 肌营养不良 2 个家系心脏受累特点研究

目的 分析 LMNA 基因 C.1583C>G 突变致 2 个 Emery-Dreifuss 型肌营养不良( Emery-Dreifuss musculardystrophy , EDMD )家系心脏受累特点。方法 收集、分析 2 例先证者及其家系临床资料及血液标本(提取 DNA ),以及 2 例先证者活组织检查骨骼肌病理分析; PCR 、直接测序; 3 例患者进行心电图、超声心动图、 99 Tc M - MIBI 门控心肌灌注显像检查。结果 家系 1 呈常染色体显性遗传,家系 2 为散发病例; 3 例患者均具有典型的 EDMD 临床表现:关节挛缩,进行性加重肌无力、肌萎缩,心律失常伴或不伴心肌病;活组织检查骨骼肌病理分析呈 肌病改变;基因检测家系 1 ( 2 例患者)、家系 2 ( 1 例患者) LMNA 基因 9 号外显子 C. 1583C>G ( T528R )杂合错义突 变;心电图及心脏影像学检查显示 3 例患者表现不同程度及类型的心律失常:窦性心动过速、心房扑动、 Ⅲ 度房室 传导阻滞;家系 2 先证者合并心肌病,家系 1 先证者合并扩张型心肌病、心力衰竭;家系 1 先证者女儿无明显心脏 结构功能异常。结论 2 个家系 3 例患者经临床、活组织检查骨骼肌病理分析、基因检测确诊为 EDMD ,致病基因均 为 LMNA 基因 9 号外显子 C. 1583C>G ( T528R )杂合错义突变; LMNA 基因突变所致 EDMD 心脏受累程度更严 重,心脏传导系统受累常合并扩张型心肌病和(或)心力衰竭。     

神经纤维瘤病Ⅰ型基因32、33号外显子突变的检测

检测中国人神经纤维瘤病Ⅰ型（ Ｎ ＦⅠ）基因３２ 、３３ 外显子突变。方法　应用聚合酶链反应单链构象多态性（ Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ） 法分析１４ 个 Ｎ ＦⅠ家系６２ 名成员及３０ 名正常对照外周血白细胞 Ｄ Ｎ Ａ的 Ｎ ＦⅠ基因３２ 、３３ 号外显子。结果　３ 个家系（２１４ ％ ） 、４ 例 Ｎ ＦⅠ患者（１１１ ％ ） Ｎ ＦⅠ基因３２ 号外显子的 Ｄ Ｎ Ａ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ 发生泳动变位,可能为 Ｎ ＦⅠ基因３２ 号外显子发生突变。家系中其他成员及正 常对照组无此现象。通过３ 种不同的 Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ 实验条件,未发现３３ 号外显子异常泳动变位。结论　３２号外显子可能为中国人 Ｎ ＦⅠ基因突变热点之一。本研究方法对 Ｎ ＦⅠ症状前诊断和产前诊断有重要应用价值。     

一个汉族肥厚型心肌病家系中首次发现肌球连接蛋白-C基因Arg346fs突变

目的研究中国人家族性肥厚型心肌病(HCM)的致病基因突变位点,分析基因型与临床表型的相互关系。方法对5个经过MYH7基因扫描未发现异常的家族性HCM的先证者进行肌球连接蛋白-C基因(MYBPC3)扫描,聚合酶链反应(PCR)扩增其功能区外显子片断,双脱氧末端终止法测序。对阳性结果者进行家系中其他成员筛查,并分析患者临床表型特点。结果在1个家系中发现MYBPC3基因的13号外显子的Arg346fs突变,而正常对照组同一位置未见异常,Arg346fs突变为我国患者中首次发现。结论MYBPC3基因为我国家族性HCM的的致病基因之一。其临床表型的异质性提示多因素参与了HCM的发生及外显。     

伴高血压肥厚型心肌病家系基因多态性及临床特点

目的结合伴高血压肥厚型心肌病(HCM)家系的基因多态性检测及散发病例的临床特点分析,初步探讨其发病机制。方法对家系成员进行候选基因(ACE、NPPA、MTPN、MYBPC3、MYH7)测序筛查及病例对照分析;通过病史采集、家系调查、心脏彩超、心电图检查对散发病例的临床特点进行分组比较。结果在家系先证者及其他罹患成员中发现与心肌肥厚表型相关的NPPArs5063位点多态性,导致其编码产物中血管扩张素相关肽(cardiodilatinrelatedpeptide)段的第7位氨基酸由缬氨酸(V)转换为甲硫氨酸(M)。散发病例的分组比较提示伴高血压的HCM的心脏彩超特点呈对称型或非对称性心肌肥厚伴左室腔缩小、左房扩大、LVEF增强及顺应性下降的舒张功能障碍;对比其中7例患者1年前后心超参数提示IVS、LVPW及LVMI均明显升高(P0.05)。结论伴高血压的HCM可能与遗传缺陷诱发心肌肥厚及影响心脏舒张功能有关,高血压可能作为促发因素引起心肌肥厚进行性加重。     

EPB41基因突变导致遗传性椭圆形红细胞增多症一家系的分子诊断研究

  目的  对临床诊断为遗传性椭圆形红细胞增多症（HE）的一个家系进行遗传学病因分析。  方法  应用靶向捕获及高通量测序技术对先证者和家系中4名成员的外周血基因组DNA进行高通量测序,经过数据分析筛选可能的致病变异,同时使用生物信息学软件对变异进行功能预测,在家系中对检出的可疑致病性变异进行Sanger测序验证。同时对50例健康对照抽取外周血,进行正常人群突变位点检测。  结果  高通量测序结果显示临床表现为中度贫血的先证者和其母在EPB41基因第13外显子均存在杂合c.1215G>A（p.Trp405Ter）无义突变,为功能缺失型突变,有极强的致病性（very strong pathogenicity,PVS1）。该位点G碱基突变为A碱基,导致其编码的蛋白质链第405位的色氨酸的密码子变为终止密码子,使蛋白合成提前终止,形成截短蛋白,部分功能区域丧失。该变异在人群中极为罕见,为尚未报道的致病性突变。Sanger测序结果显示先证者外祖母亦携带这一杂合突变,且在此家系中观察到基因型和表型共分离。50例无亲缘关系的健康对照均未检测到突变。  结论  EPB41基因的c.1215G>A突变是本例HE家系的可疑致病原因。首次在中国HE家系中发现了EPB41基因致病性突变。     

首次发现肥厚型心肌病肌球蛋白结合蛋白C基因Arg856fs突变

目的： 研究中国人群肥厚型心肌病(HCM)患者的致病基因突变位点，并对基因型与临床表型之间的关系进行分析。方法: 对76例HCM先证者进行聚合酶链反应(PCR)扩增心肌肌球蛋白结合蛋白C基因（MYBPC3）第15 16,18,26,28,34号外显子，产物做单链构象多态性(SSCP)分析，出现异常条带者将其目的片段和正常对照组该片段送检测序。结果: 在1例52岁男性患者的MYBPC3基因第26号外显子上发现了一个新的移码突变位点Arg856fs。由于在100名正常对照组中未见异常，故我们认为此突变位点为该患者的致病基因位点。结论: MYBPC3基因是我国HCM的致病基因之一。     

浙江省余姚地区22个非综合征型耳聋家系遗传分析

目的：对宁波市余姚地区22个非综合征型耳聋（NSHI）家系GJB2、GJB3、GJB6编码区以及线粒体基因突变分析,进行临床、遗传和分子特征分析评估。方法：调查对象来自于余姚市人民医院22个NSHI家系22名先证者及患病家属33名,听力正常者254例,且均未携带GJB2、GJB3、GJB6编码区以及线粒体基因致病突变。所有受检者均采集外周血并提取DNA,并对受检者GJB2、GJB3、GJB6基因编码区以及线粒体基因进行测序,结合患者听力学检查、耳聋相关突变热点基因检测以及患者家系资料进行综合遗传分析。结果：在来源于宁波市余姚地区的22个NSHI家系的33名患者中,发现携带有GJB2基因235delC单突变家系4例,GJB2双杂合突变家系2例,线粒体基因1555位点突变3例。在GJB3、GJB6编码区并未发现有致病突变。在这22个NSHI患者家系中,有27.3%的家系检测出携带有GJB2基因病理性突变;有13.6%的家系携带有线粒体12S rRNA基因1555A＞G突变。据临床资料显示,6个携带GJB2基因病理性突变家系以及3个携带1555A＞G 突变家系的听力损失程度、发病年龄、耳聋外显率等都有差异。结论：GJB2基因以及线粒体12S rRNA基因1555A＞G突变是浙江省余姚地区NSHI患者的主要相关基因,可能也存在其他未知基因与这2个基因相互协同作用,对患者表型产生影响。     

一个中国先天性有汗性外胚层发育不良家系的GJB6基因筛查

目的: 先天性有汗性外胚层发育不良是一种常染色体显性遗传病,GJB6基因突变与之相关。调查一个来自中国的先天性有汗性外胚层发育不良家系与GJB6基因的关系。方法: 收集一个共有17个家系成员(患者8人,5男3女)的先天性有汗性外胚层发育不良家系,采集家系成员的外周血,抽提DNA。然后针对GJB6基因的每个外显子设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法扩增GJB6基因的整个编码区,测序、筛查突变。结果: 通过对家系患者的GJB6基因筛查,发现了一个杂合错义突变c.31G>A(p.G11R)。结论: GJB6基因错义突变c.31G>A(p.G11R)导致该家系先天性有汗性外胚层发育不良。     

家族性与散发性肥厚型心肌病基因突变的对比研究

目的 研究中国家族性及散发性肥厚型心肌病（HCM）患者的致病基因突变位点的异同。方法 对10个家系中36例HCM患者及50例散发的HCM患者进行B肌球蛋白重链（MYH7）、肌钙蛋白T（TNNT2）及肌球结合蛋白C（MYBPC3）扫描,聚合酶链式反应扩增,双脱氧末端终止法测序。结果家族性HCM患者中,3个家系的13例HCM患者发现MYH7错义突变,分别为18号外显子发生G12601A突变（Arg663His）、23号外显子发生G15373A突变（Glu924Lys）、20号外显子发生T13659C突变（Ile736Thr）,散发的50例HCM患者中,有1例发现MYH7的20号外显子上T13659C突变。所有HCM患者均未发现TNNT2基因突变。家族性HCM患者中有2个家系共4例发现MYBPC3基因突变：2例为18号外显子上的Arg502Trp、2例为13号外显子碱基插入突变,即在7425～7426间插入CGGCA,导致Arg346fs移码突变;50例散发性HCM患者中未发现此基因突变。结论 MYH7和MYBPC3可能为我国家族性HCM的主要致病基因之一,而我国散发性HCM患者MYH7和MYBPC3基因突变率低;TNNT2可能不是我国HCM患者的主要致病基因。     

星状神经节阻滞对自发性高血压大鼠左心室重构的影响

目的:对自发性高血压大鼠(SHR) 行星状神经节阻滞(SGB), 观察星状神经节阻滞对其左心室重构的影响。方法:将32 只10 周龄雄性SHR 随机分为4 组( 每组8 只):左侧星状神经节阻滞组(LS 组)、右侧星状神经节阻滞组(RS组)、药物卡托普利组(D 组)、手术对照组(C 组)。用ALC-NIBP 无创血压测量系统测定大鼠血压, 第10 周实验结束后用3% 戊巴比妥钠腹腔注射(45 mg/kg) 麻醉SHR, 迅速取出心脏测左心室质量指数。HE 染色后光镜下观察左心室心肌组织结构, 放射免疫法测定其eNOS 和ET-1 的浓度, 免疫组织化学法检测其I 型、III 型胶原蛋白表达的含量。结果:与C 组和LS 组比较, RS 组可降低左心室质量指数(P<0.05), 改善心肌组织结构, 降低心肌组织中 ET-1 和增加eNOS 的含量(P<0.05), 降低I 型胶原和增加III 型胶原表达(P<0.05)。结论:右侧星状神经节阻滞在治疗自发性高血压大鼠的同时可改善和逆转左心室重构。     

埃及东北地区夏季暴露尸体上常见嗜尸性昆虫种类的鉴定

目的:首次鉴定埃及东北地区( 东经32° 15' 和北纬30° 36' ) 常见嗜尸性昆虫种类及记录其演替规律。方法:观察被置于一空地上的动物尸体在夏季60 d 内的腐败过程, 同时捕捉出现的昆虫及记录每日的环境温度( 最高及最低温度) 和相对湿度(RH)。利用已知嗜尸性昆虫鉴别要点对所收集的昆虫进行分类及鉴定。结果:在研究期间的最高和最低的环境温度的均值分别为34.85℃和29.2℃, 相对湿度的均值为53.5%。尸体的腐败过程主要分为4 个阶段:新鲜期、肿胀期、腐败期和干化期。收集到的昆虫大部分为双翅目、鞘翅目和膜翅目昆虫。经形态学鉴定双翅目包括四科昆虫( 家蝇科、厕蝇科、丽蝇科和麻蝇科), 鞘翅目包括两科昆虫( 皮蠹科和阎魔虫科), 膜翅目仅包括厨蚁属小黑蚁。结论:为进一步研究埃及地区不同季节的嗜尸性昆虫演替奠定了基础。     

A Mitochondrial DNA A8701G Mutation Associated with Maternally Inherited Hypertension and Dilated Cardiomyopathy in a Chinese Pedigree of a Consanguineous Marriage

Background:

Cardiovascular diseases, including dilated cardiomyopathy (DCM) and hypertension, are the leading cause of death worldwide. The role of mitochondrial DNA (mtDNA) in the pathogenesis of these diseases has not been completely clarified. In this study, we evaluate whether A8701G mutation is associated with maternally inherited hypertension and DCM in a Chinese pedigree of a consanguineous marriage.

Methods:

Fourteen subjects in a three-generation Han Chinese family with hypertension and DCM, in which consanguineous marriage was present in the parental generation, were interviewed. We divided all the family members into case (7 maternal members) and control group (7 nonmaternal members) for comparison. Clinical evaluations and sequence analysis of mtDNA were obtained from all participants. Frequency differences between maternal and nonmaternal members were tested to locate the disease-associated mutations.

Results:

The majority of the family members presented with a maternal inheritance of hypertension and DCM. Sequence analysis of mtDNA in this pedigree identified eight mtDNA mutations. Among the mutations identified, there was only one significant mutation: A8701G (P = 0.005), which is a homoplasmic mitochondrial missense mutation in all the matrilineal relatives. There was no clear evidence for any synergistic effects between A8701G and other mutations.

Conclusions:

A8701G mutation may act as an inherited risk factor for the matrilineal transmission of hypertension and DCM in conjunction with genetic disorders caused by consanguineous marriage.     

保护性通气模式对脊柱融合术老年患者肺功能的影响

目的:观察全身麻醉时采用肺保护性通气模式对老年脊柱融合术患者肺功能的影响。方法:选择美国麻醉医师协会(ASA) II~III 级、择期行脊柱融合术患者60 例, 年龄70~85 岁, 采用随机数字表随机分成肺保护性通气(PMV)组及常规机械通气(CMV) 组, 每组30 例。PMV组:机械通气模式为间歇正压通气(IPPV) 加10 cmH₂O 呼气末正压(PEEP), 潮气量(VT)=6 mL/kg, 呼吸频率(RR)=12~18 次/min, 吸: 呼比(I:E)=1:2, 每间隔15 min 作一次规律肺泡复张(AR);CMV 组:机械通气模式为IPPV, VT =10~12 mL/kg, RR=12 次/min, I:E=1:2。观察全麻插管前(T₀)、插管后1 h (T₁)、拔管后即刻(T₂)、拔管后1 h (T₃)、术后1 d (T₄)、2 d (T₅)、3 d (T₆) 各个时间点患者pH, PaO₂, PaCO₂, 氧和指数(PaO₂/FiO₂)、肺泡氧分压- 动脉血氧分压差(PA-aDO₂)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、脉博(HR)、中心静脉压(CVP) 及术后1 天肺部并发症的发生情况。结果:在T₁, T₂, T₃, T₄, T₅ 各观察时间点中:与CMV 组相比, PMV 组中的PaO₂和PaO₂/FiO₂ 升高, PA-aDO₂ 下降(P<0.05);术后第1 天, CMV 组有5 例发生了气管- 支气管炎, 5 例低氧血症, 3 例肺不张, 术后肺并发症(PPCs) 发生率为43.3%, PMV 组仅2 例发生了气管- 支气管炎, 未出现其他并发症, PPCs 发生率为6.6% (P<0.05)。两组血流动力学各时点组内组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肺保护性通气模式能够有效改善老年脊柱融合术患者术后低氧血症, 减少肺部并发症, 对老年患者血流动力学无明显影响。     

静息态功能性磁共振成像下对精神分裂症的多体素模式分析

目的:通过多体素模式分析研究精神分裂症患者和健康对照者在静息态下的脑功能连通, 找出患者异常的脑区和网络。方法:对22 例精神分裂症患者和22 例健康对照组受试者进行静息态下全脑的磁共振扫描, 提取其功能性连通作为特征, 再选用3 种方法对选取的特征进行降维, 最后进行分类。结果:采用主成分分析方法降维后的分类效果最好, 分类率达到86.4%;而且大多数的连通特征是视觉皮层网络内部及其与中央前后回和颞叶的连通。结论:基于功能性磁共振的多体素模式分析可以将精神分裂症患者识别出来, 而视觉皮层网络从生理学方面解释精神分裂症有重大的意义。     

安徽地区汉族人家族性与散发性肥厚型心肌病MYH7基因18及20号外显子突变分析

目的分析安徽地区汉族家族性及散发性肥厚型心肌病(HCM)患者的致病基因β肌球蛋白重链(MYH7)突变位点的异同。方法对3个家系中8例HCM患者及20例散发的HCM患者进行MYH7基因18及20号外显子扫描,双脱氧末端终止法测序。结果3个家族性HCM(FHCM)家系8例患者中,有2例患者发现MYH7基因20号及18号外显子发生突变,分别为20号外显子发生Arg723Gly突变;18号外显子发生Arg663His突变;散发的20例HCM患者中,有1例发现MYH7的20号外显子上发生Ile736Thr突变,未发现18号外显子发生突变。结论MYH7基因中18号、20号外显子突变可能是安徽地区FHCM的常见突变位点之一;散发性HCM(SHCM)可能与FHCM具有相似的发病机制,但与FHCM相比,在MYH7基因中突变率较低。     

Clinical and Genetic Investigation of a Multi-generational Chinese Family Afflicted with Von Hippel-Lindau Disease

Background:Von Hippel-Lindau (VHL) disease is a hereditary tumor disorder caused by mutations or deletions of the VHL gene.Few studies have documented the clinical phenotype and genetic basis of the oc...     

胰岛素样生长因子-1对高胆固醇血症患者内皮的保护作用及机制

目的:探讨血清胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor-1, IGF-1) 对高胆固醇血症血管内皮的保护作用及机制。方法:观察高胆固醇血症患者和正常对照( 各25 例) 肱动脉血流介导的血管舒张功能(flow-mediatedarterial diastolic function, FMD), 并检测血清中IGF-1、非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS) 以及一氧化氮(NO) 水平;将培养的人脐静脉内皮细胞分为3 组:正常对照组、氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL) 损伤组和IGF-1 干预组, 培养24 h 后, 检测各组细胞培养液中ADMA, NOS, NO 水平, 细胞裂解液中二甲基精氨酸二甲胺水解酶(dimethylarginine dimethylamine hydrolase, DDAH) 活性, 并进行β- 半乳糖苷酶染色, 计算细胞衰老率。结果:临床实验中, 高胆固醇血症患者FMD 显著下降;伴随血清IGF-1, NOS 以及NO 水平的下降, ADMA 水平升高。多元线性回归分析显示IGF-1 与FMD 呈正相关, ADMA 与FMD 呈负相关。细胞实验中, ox-LDL 处理24 h 后, 细胞裂解液DDAH 活性下降;伴随上清液中ADMA 水平升高, NOS 和NO 水平下降和细胞衰老率增加, 给予IGF-1 干预能部分逆转上述作用。结论:血液中IGF-1 水平下降可能是高胆固醇血症患者血管内皮舒张功能受损的重要原因之一;IGF-1 具有抗内皮细胞衰老作用, 其机制可能涉及对DDAH/ADMA 途径的调节。