二氧化碳气腹环境对人卵巢癌细胞系SKOV3侵袭能力的影响

目的 研究腹腔镜手术中二氧化碳(CO2)气腹环境对恶性卵巢肿瘤细胞黏附、侵袭能力的影响,探讨恶性肿瘤行腹腔镜手术的安全性.方法 体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,模拟腹腔镜CO2气腹环境处理肿瘤细胞,噻唑蓝比色(MTT)法和Boyden小室侵袭运动实验检测SKOV3细胞的黏附、运动和侵袭能力;免疫组化和半定量RT-PCR方法检测SKOV3细胞黏附分子CD44及促血管生成因子bFGF的蛋白和mRNA表达.结果 与对照组比较,CO2处理组细胞对人工基底膜的黏附力明显增加(P＜0.01);处理组细胞运动和侵袭能力明显增强(P＜0.01);其CD44和bFGF蛋白分泌和mRNA表达量显著增加(P＜0.05).结论 CO2气腹环境能促进体外培养的恶性卵巢肿瘤细胞的侵袭转移,其作用机制可能与其促进卵巢癌细胞异质黏附和运动能力;增加细胞黏附分子和促血管生成因子的表达有关.     

HT-29人结肠癌细胞缺氧对鞘氨醇激酶-1表达的影响

目的：研究体外缺氧对HT-29人结肠癌细胞鞘氨醇激酶-1（SK-1）表达及细胞迁移的影响。方法：模拟体外缺氧环境,应用RT-PCR及Western blot检测缺氧对HT-29细胞SK-1表达的影响,以及观察细胞迁移能力的情况。结果：缺氧状态下HT-29细胞SK-1 mRNA及蛋白表达增强,细胞迁移能力增强;且U0126具有抑制SK-1表达增强的作用。结论：缺氧状态下HT-29细胞迁移能力和SK-1基因表达存在一定关系。     

靶向乙酰肝素酶的RNA干扰对人大肠癌细胞株HT-29生物学行为的影响

目的 探讨RNA干扰乙酰肝素酶(UPSE)对人大肠癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响.方法 以人大肠癌细胞株HT-29为研究对象,联合应用生物信息学技术与高效siRNA设计原则进行siRNA分子设计,并通过体外转录与化学合成siRNA,瞬时转染HT-29大肠癌细胞,24、48、72 h后MTT法检测实验组与对照组细胞的增殖活性,RT-PCR检测各组细胞HPSE mRNA表达水平,免疫组化细胞染色检测各组HPSE蛋白表达水平,Transwell体外侵袭实验进行癌细胞体外侵袭力分析.结果 实验组与对照组相比,细胞增殖活性明显受到抑制;HPSE mRNA及蛋白表达明显下降;细胞侵袭能力明显下降(均P＜0.05).阴性对照组与空白对照组之间无明显差异(P＞0.05).结论 沉默大肠癌细胞HPSE基因,对体外培养的大肠癌细胞的增殖和侵袭有明显的抑制作用,其作用机制与HPSE基因和蛋白表达下调有关.

Abstract：

Objective To approach the effect of RNAi targeting heparanase on the proliferation,invasion and metastasis of colorectal carcinoma cell.Methods The heparanase mRNA-targeted doublestanded siRNA was designed with the bioinformatics technology.Seventy-two houm after transfecting HT29 cells with specific anti-HPSE siRNA or N.C.FAM siRNA.MTY method was used to detect the proliferation of the cells every day in three days after transfection.The level of HPSE mRNA in the cells was measured by real time PCR.the expression of HPSE protein was detected by immunnohistochemistry and the invasiveness of HT-29 cell in vitro was measured quantitatively by the invasion test of Transwell chamher.Results Compared with control groups,cell proliferation of siRNA group was obviously suppressed,the expression of HPSE siRNA and protein were obviously reduced,the invasion and metastasis were obviously declined(P<0.05) ,but there Was no obvious difference(P>0.05) in the control groups.Conclusions Silencing HPSE can effectively inhibit the proliferation and invasion of human colorectal carcinoma and the mechanism of action correlate with the downregulation of level of HPSE mRNA and protein.     

曲古抑菌素A体外对结肠癌细胞凋亡及低氧状态下其缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的:观察曲古抑菌素A(TSA)体外对结肠癌HT-29细胞凋亡及低氧状态下其缺氧诱导因子(HIF)-1α表达的影响.方法:体外培养结肠癌HT-29细胞,给予TSA 100、200、400、600、800 nmol/L分别处理12、24、48、72h,对照组加入同等体积的DMSO.MTT法检测各组HT-29细胞的存活率;Annexin V、TUNEL法检测HT-29细胞凋亡率;RT-PCR、免疫印迹法分别检测低氧状态下(37℃、1%O2)HT-29细胞HIF-1α mRNA及蛋白的表达.结果:MTT法检测结果发现,与对照组相比,TSA处理组HT-29细胞活力明显降低(P＜0.05),随着浓度的增大、时间的延长,其抑制作用逐渐增强.Annexin V、TUNEL法检测结果发现,TSA能诱导HT-29细胞的早期凋亡,TSA(200、400、600、800 nmol/L)处理组凋亡率明显高于对照组(P＜0.05).低氧条件下,TSA抑制HT-29细胞HIF-1α蛋白的表达,随着浓度的增大,其抑制作用逐渐增强;而对HIF-1α mRNA的表达无影响.结论:TSA体外可能通过抑制低氧条件下HT-29细胞HIF-1α蛋白的表达,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖.     

苦参碱调控Wnt/β⁃catenin途径抑制宫颈癌细胞系Caski细胞侵袭迁移

目的：基于Wnt/β?catenin途径探索苦参碱抑制人宫颈癌细胞系Caski细胞侵袭迁移的分子机制。方法：Caski细胞用不同浓度苦参碱处理后,MTT法检测细胞增殖抑制情况;Transwell小室侵袭迁移实验检测细胞侵袭迁移情况;ELISA法检测细胞基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP?9）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的分泌变化;实时荧光定量PCR检测细胞糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β,GSK?3β）、Wnt2B蛋白的表达情况;免疫蛋白印迹检测细胞β连环蛋白（β?catenin）、磷酸化β连环蛋白（p?β?catenin）含量。结果：苦参碱对Caski细胞的增殖具有抑制作用（P＜0.05）,且呈现时间、浓度依赖性;苦参碱抑制Caski细胞的侵袭迁移率（P＜0.05）,对Caski细胞分泌MMP?9、VEGF的能力具有显著抑制作用（P＜0.05）;苦参碱可显著降低Caski细胞Wnt2B mRNA的表达及β?catenin的蛋白含量,增加Caski细胞中GSK?3β mRNA的表达和p?β?catenin的蛋白含量。结论：苦参碱通过促进Caski细胞Wnt/β?catenin通路中GSK?3β mRNA表达,提高p?β?catenin蛋白含量,降低Wnt2B mRNA表达、β?catenin蛋白含量以及Caski细胞内MMP?9、VEGF的分泌,进而抑制Caski细胞的侵袭迁移。     

五味子多糖对人结肠癌HT-29细胞体外增殖及侵袭能力的抑制作用

目的:探讨五味子多糖(ASPS)对人结肠癌HT-29细胞增殖和侵袭活性的影响,阐明ASPS的抗肿瘤作用。方法:40只 Wistar大鼠随机分为对照组(给予生理盐水)和100、200、400 mg·kg^-1 ASPS组,每组10只,取各组大鼠血清,HT-29细胞体外培养,以各组大鼠血清进行预处理,采用MTT法和Transwell小室检测各组HT-29细胞的增殖抑制率和侵袭活性抑制率;Western blotting法检测各组细胞上清液中bcl-2、bax和Caspase-3蛋白表达水平。结果:与对照组和100 mg·kg^-1 ASPS组比较,200和400 mg·kg^-1 ASPS组HT-29细胞增殖抑制率和侵袭活性抑制率均升高(P<0.05,P<0.01)。400 mg·kg^-1 ASPS组HT-29细胞上清液中bcl-2蛋白表达水平低于其他组(P<0.05,P<0.01),bax和Caspase-3蛋白的表达水平高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:ASPS能显著抑制细胞的体外增殖和侵袭能力,其机制可能与下调HT-29细胞的bcl-2基因表达,上调bax和Caspase-3基因表达,激活细胞凋亡通道有关联。     

曲古抑菌素A体外对结肠癌细胞凋亡及低氧状态下其缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的：观察曲古抑菌素A（TSA）体外对结肠癌HT-29细胞凋亡及低氧状态下其缺氧诱导因子（HIF）-lα表达的影响。方法：体外培养结肠癌HT-29细胞，给予TSA100、200、400、600、800nmol／L。分别处理12、24、48、72h，对照组加入同等体积的DMSO。MTT法检测各组HT-29细胞的存活率；AnnexinV、TUNEL。法检测HT-29细胞凋亡率；RT-PCR、免疫印迹法分别检测低氧状态下（37℃、1％O2）HT-29细胞HIF-1α mRNA及蛋白的表达。结果：MTT法检测结果发现，与对照组相比，TSA处理组HT-29细胞活力明显降低（P〈0.05），随着浓度的增大、时间的延长，其抑制作用逐渐增强。AnnexinV、TUNEL法检测结果发现，TSA能诱导HT-29细胞的早期凋亡，TSA（200、400、600、800nmol／L。）处理组凋亡率明显高于对照组（P％0．05）。低氧条件下，TSA抑制HT-29细胞HIF-1α蛋白的表达，随着浓度的增大，其抑制作用逐渐增强；而对HIF-1α mRNA的表达无影响。结论：TSA体外可能通过抑制低氧条件下HT-29细胞HIF-1α蛋白的表达，诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖。     

氧化苦参碱对肝癌细胞QGY-7703迁移侵袭能力和MMP-9表达的影响

目的通过观察氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对人肝癌细胞QGY-7703体外迁移侵袭能力和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)表达的影响,初步探讨氧化苦参碱对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响及可能的分子机制。方法体外培养人肝癌细胞QGY-7703并用OM干预后,Transwell迁移和侵袭实验检测OM对细胞迁移侵袭能力的影响;定量PCR检测细胞中MMP-9 mRNA的表达水平,Western Blot检测细胞中MMP-9蛋白的表达水平。结果与细胞对照组相比,低浓度(1mg.mL-1)OM干预组QGY-7703细胞的迁移侵袭能力未发生显著变化;中浓度(2.5mg.mL-1)和高浓度(5mg.mL-1)OM干预组细胞的迁移侵袭能力受到明显抑制(P<0.01),同时伴有MMP-9 mRNA和蛋白表达水平的下降(P<0.01)。结论 OM在体外可抑制人肝癌细胞QGY-7703的迁移侵袭能力,并能抑制MMP-9的表达,提示OM可能通过抑制MMP-9的表达参与抗肿瘤细胞迁移侵袭的作用。     

抑制组织蛋白酶B表达对胃癌BGC-823细胞黏附、增殖和侵袭的影响

目的 探讨抑制组织蛋白酶B表达对胃癌BGC-823细胞黏附、增殖和侵袭的影响.方法 构建针对CB的siRNA表达载体,脂质体LipofectAmineTM2000转染胃癌细胞株BGC-823.荧光定量RT-PCR和免疫印迹检测CB在各组胃癌细胞中的表达水平;细胞黏附实验检测各组胃癌细胞的黏附能力;细胞侵袭性实验检测各组胃癌细胞的侵袭能力;细胞增殖实验检测各组胃癌细胞的增殖能力.结果 与空白对照组和无关siRNA对照组相比,沉默1组和沉默2组细胞中,CB mRNA的相对表达量显著降低(P ＜0.01);CB蛋白表达被显著抑制;纤维粘连蛋白和基质胶黏附的胃癌细胞数目以及穿透基质胶的胃癌细胞数显著降低(P＜0.05);并且在2d、3d、4d及5d细胞孔内的吸光度值亦显著减少,差异有显著性(P＜0.05).而在无关siRNA对照组和空白对照组之间,CB mRNA的相对表达量、两组的黏附细胞数目以及两组穿透基质胶的细胞数都无显著性差异(P＞0.05).结论 设计针对CB基因的siRNA片段构建的siRNA载体能够有效干扰胃癌BGC-823细胞中CB mRNA和蛋白的表达.抑制胃癌BGC-823细胞CB基因表达,可以降低胃癌细胞的生长速度、降低胃癌细胞与基质黏附能力、降低胃癌细胞侵袭和转移的能力.     

双歧杆菌脂磷壁酸对不同大肠癌细胞株转移能力及VEGF表达的影响

目的 研究双歧杆菌脂磷壁酸(ipoteichoic acid,LTA)对血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)表达及其对大肠癌细胞株侵袭、转移能力的影响.方法 采用噻唑蓝比色(MTT)法检测经双歧杆菌LTA处理前后大肠癌细胞株LoVo和HT-29对人工基底膜(Matrigel)的黏附能力变化;Transwell小室体外侵袭迁移实验检测经LTA处理前后两株细胞侵袭、迁移能力的改变.RT-PCR和Western blot检测经LTA作用前后,VEGF在两株细胞中的表达差异.结果 经20、50、80μg/ml双歧杆菌LTA处理后,LoVo细胞和HT-29细胞在30、60、90、120 min时的黏附率明显低于对照组(P<0.01);经50μg/ml双歧杆菌LTA处理24 h后,LoVo细胞和HT-29细胞的侵袭能力及VEGF的mRNA和蛋白质的表达,与对照组比较有显著性差异(P<0.01).结论 双歧杆菌LTA能抑制大肠癌细胞黏附、侵袭、迁移的能力,下调其VEGF的mRNA和蛋白质的表达.     

hERG1钾通道在结直肠癌中异常表达及红霉素诱导HT-29细胞凋亡的机制

目的:旨在检测hERG1钾通道蛋白在结直肠癌患者术后组织中的表达,分析其表达与临床病理特点的关系,并以其阻断药红霉素干预,以了解hERG1蛋白对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法:免疫组化检测76例结直肠癌的癌组织与配对癌旁正常组织中hERG1蛋白表达。不同浓度红霉素干预HT-29细胞,MTT检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、Boyden小室法检测细胞侵袭力的变化、Western印迹检测hERG1、P53和Bax蛋白表达。结果:免疫组化发现hERG1蛋白在正常大肠组织中无表达,在大肠癌组织异常表达(阳性率83%),其表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移和Dukes分期有关(P<0.05)。红霉素以浓度和时间依赖的方式抑制HT-29细胞增殖,可诱导细胞凋亡。递增剂量的红霉素刺激HT-29细胞,可逐渐减弱其侵袭力(P<0.05),下调hERG1蛋白表达、上调P53和Bax蛋白表达(P<0.05)。结论:hERG1蛋白在正常结肠组织中无表达,在结直肠癌中异常表达,可能参与了结直肠癌的恶性生物学行为。红霉素作为hERG1钾通道阻断药,能抑制结肠癌HT-29细胞增殖,促进细胞凋亡;其作用机制可能与阻断hERG1钾通道、上调P53和Bax的表达有关。     

IPI-926对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响及其机制

目的 观察IPI-926对人结肠癌HT-29细胞增殖的影响,并探讨在人结肠癌HT-29细胞增殖过程中IPI-926对Hedgehog (刺猬,Hh)信号通路因子表达的影响。 方法 常规体外培养人结肠癌HT-29细胞,随机分为对照组(空白培养基)和不同浓度IPI-926(10 nM、20 nM、30 nM)的实验组,培养HT-29细胞72 h后倒置显微镜观察各组细胞形态变化;MTT法测定各组培养72 h后HT-29细胞抑制率;RT-PCR和Western blot分别检测各组培养72 h后HT-29细胞Shh、Ptch、Smo和Gli-1 mRNA及其相关蛋白的表达;采用独立样本t检验进行组间比较,P<0.05为差异有统计学意义。 结果 对照组细胞生长状态良好;而用不同浓度IPI-926(10 nM、20 nM、30 nM)处理的HT-29细胞细胞凋亡增加,并随着IPI-926浓度的增加,凋亡率明显升高;10 nM、20 nM、30 nM浓度的IPI-926对人结肠癌细胞HT-29抑制率分别为(17.23±1.32)%、(38.34±1.82)%和(75.81±3.43)%,随着浓度的增加而升高,抑制率呈量效关系。空白对照组和IPI-926浓度为10 nM时Shh、Ptch、Smo和Gli-1的mRNA及其蛋白表达差异均无统计学意义,但在IPI-926浓度为20 nM和30 nM时,Shh、Ptch、Smo和Gli-1的mRNA及其蛋白表达均比空白对照组明显下调,并且IPI-926浓度为30 nM时的Shh、Ptch、Smo和Gli-1的表达明显高于20 nM时的mRNA表达。 结论 小剂量IPI-926不能有效抑制HT-29细胞的增殖,但当超过20 nM时则可以有效抑制HT-29细胞的增殖;其抑制的机制可能与Hh通路相关成员Shh、Ptch、Smo和Gli-1的表达有关。      

RhoC-shRNA对结肠癌细胞HT-29细胞生物学行为的影响

目的探讨RhoC-shRNA对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法构建RhoC-shRNA表达载体,以脂质体转染法将之稳定转染入HT-29结肠癌细胞株,Western blot检测转染细胞中RhoC蛋白表达的抑制情况,观察转染前后结肠癌细胞周期、凋亡和侵袭能力的变化。结果成功构建RhoC-shRNA真核表达载体,并且转染入结肠癌细胞后,细胞中RhoC蛋白表达水平明显受到抑制,并且抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,降低肿瘤细胞侵袭能力。结论下调RhoC蛋白的表达可抑制结肠癌细胞HT-29的体外增殖和侵袭能力。     

选择性及非选择性COX-2抑制剂对结肠癌细胞生长的影响

目的探讨选择性及非选择性环氧合酶-2（cylooxygenase-2，COX-2）抑制剂对体外培养的结肠癌细胞生长的影响及凋亡的诱导作用。方法体外培养HT-29、SW480及LS174-T三种结肠癌细胞，分别加入不同浓度的非选择性COX-2抑制剂阿司匹林（aspirin）、选择性COX-2抑制剂塞来昔布（celecoxib）及美洛昔康（meloxicam）作用于HT-29及SW480细胞。采用MTT法检测结肠癌细胞增殖；用免疫细胞化学法及免疫印迹技术分别检测结肠癌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）及细胞COX-2的表达；流式细胞技术分析对结肠癌细胞周期的影响；用Annexin V／PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡。结果aspirin、celecoxib及meloxicam均能有效抑制体外培养的HT-29、SW480结肠癌细胞生长，并具有良好的量-效关系。Western blot表明，HT-29细胞表达COX-2，而SW480细胞不表达COX-2。Aspirin及celecoxib处理组细胞PCNA表达较对照组明显下调。10mmol／L的aspirin及50μmol／L的celecoxib能诱导HT-29及SW480细胞凋亡，凋亡率分别为4．8％，17．7％；5．1％，20．4％。结论选择性及非选择性COX-2抑制剂均能有效抑制结肠癌细胞生长，这种作用亦存在于COX-2阴性表达的结肠癌细胞。     

红霉素对钾离子通道HERG高表达癌细胞的增殖抑制及其与化疗药物的协同作用

目的研究红霉素对钾离子通道HERG高表达癌细胞的增殖抑制及其与化疗药物的协同作用。方法采用Western印迹、四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、流式细胞术、细胞黏附实验以及明胶酶谱法观察红霉素对肿瘤细胞的作用。结果HERG钾通道在人结肠癌HT-29细胞和小鼠结肠癌C26细胞中均有表达,和HERG钾通道高表达对照神经母细胞瘤SH-SY5Y相比,在HT-29细胞中表达量较高。红霉素对HT-29细胞和C26细胞的增殖具有不同程度的抑制作用,呈浓度依赖性。红霉素能将HT-29细胞阻滞于G2／M期,并引起明显的Sub G1峰。红霉素对HT-29细胞黏附于Ⅰ型胶原具有明显的抑制作用,存在明显的剂量-效应关系。红霉素能抑制肿瘤细胞释放明胶酶MMP-2。红霉素与长春新碱协同抑制小鼠C26细胞的增殖。长春新碱单用以及长春新碱与红霉素（50μmol／L）联用的IC50分别为62．65nmol／L和4．68nmol／L。红霉素与紫杉醇、羟基喜树碱联用亦显示协同作用。结论红霉素在能抑制钾离子通道HERG高表达癌细胞HT-29的增殖,并能诱导肿瘤细胞凋亡。红霉素与长春新碱等化疗药物显示协同作用。     

四君子汤与5-FU联用对结肠癌HT-29细胞生长的抑制效应

目的探索传统中药复方四君子汤与临床常用化疗药物氟尿嘧啶(5-FU)联用对体外培养的结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,为临床上应用四君子汤作为5-FU的增效剂联合治疗结肠癌提供实验依据。方法将体外培养的结肠癌HT-29细胞分成不含药血清对照组、5-FU组、高剂量四君子汤血清加5-FU组、中剂量四君子汤血清加5-FU组和低剂量四君子汤血清加5-FU组5组。将制备好的四君子汤含药血清和5-FU按所需的剂量分别加入到各组培养瓶中作用于细胞24h,应用基于酶标仪的MTT方法检测各组细胞的OD值,计算不同浓度药物处理对细胞生长的抑制率。结果四君子汤血清与5-FU联用能显著抑制结肠癌HT-29细胞的生长(均P0.01),且高剂量四君子汤血清与5-FU合用组细胞生长抑制率显著高于5-FU单用组(P0.01)。四君子汤血清与5-FU联用对结肠癌HT-29细胞周期的运行产生显著的影响。结论四君子汤可以增强5-FU对结肠癌HT-29细胞的生长作用和细胞周期的干扰作用。     

人类新血小板反应素R-spondin 3的细胞定位及其对肿瘤细胞功能的影响

目的观察人类新血小板反应素R-spondin 3(Rspo 3)的细胞定位,并探讨其在肿瘤发生发展中的可能作用。方法利用荧光显微成像法观察EGFP-Rspo 3在HEK293细胞中的分布。将重组质粒pcDNA-Rspo 3转染结肠癌细胞HT-29、LoVo,采用流式细胞术观察Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞周期与凋亡的影响;采用Matrigel、Transwell实验分别检测Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞黏附及侵袭能力的影响。结果荧光显微成像法观察发现,EGFP-Rspo 3融合蛋白在细胞核表达,呈弥散点状分布。流式细胞术观察发现,Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞生长周期没有明显影响;Rspo 3基因过表达不影响低恶性的HT-29细胞凋亡,但诱导高恶性的LoVo细胞凋亡(P<0.01)。Rspo 3基因过表达增强肿瘤细胞黏附性(P<0.01),降低肿瘤细胞的侵袭力(P<0.01),对肿瘤细胞移行有一定抑制作用。结论 Rspo 3有核定位功能,能诱导部分肿瘤细胞凋亡并抑制其转移扩散。     

马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖作用的机理研究

目的探讨马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖能力的影响及其作用机制。方法对结肠癌干细胞进行无血清培养,CCK-8法测定不同浓度马齿苋醇提取物对结肠癌HT-29细胞及HT-29干细胞的生长抑制情况,流式细胞仪检测其对HT-29细胞及其干细胞的凋亡情况及对细胞周期的影响。RT-PCR法以及Western blot分析马齿苋醇提取物对HT-29细胞及其干细胞Notch、Wnt双信号通路中Notch1、Notch2及β-catenin基因及蛋白表达的影响。结果马齿苋醇提取物对HT-29细胞及HT-29干细胞增殖有抑制作用,其作用时间、剂量与细胞增殖抑制率呈正相关,且对HT-29细胞增殖的抑制作用及凋亡率的影响较HT-29干细胞显著(P0.05)。马齿苋醇提取物可下调HT-29细胞及其干细胞Notch1、β-catenin基因表达,并下调Notch1、Notch2及β-catenin蛋白表达(P0.05)。结论马齿苋醇提取物可以通过下调Notch-1、Notch-2、β-catenin蛋白的表达发挥体外抑制结肠癌细胞及其干细胞增殖的作用。     

苦参碱逆转人结肠癌细胞株（HT-29）奥沙利铂耐药性的作用及机制研究

目的：研究苦参碱对结肠癌耐药细胞HT-29/奥沙利铂(Oxaliplatin, OXA)耐药性的逆转作用并探讨其可能的作用机制。方法采用逐步增加药物浓度的方法建立奥沙利铂耐药结肠癌细胞株HT-29/OXA;CCK-8法测定苦参碱对HT-29/OXA细胞的耐药性逆转作用,流式细胞术检测细胞凋亡、周期变化;实时定量PCR 检测各组细胞肺耐药蛋白（lung resis-tance protein LRP)和 P-glycoprotein (P-gp) mRNA表达水平; Western blot 检测各组细胞LRP和P-gp蛋白的表达水平。结果苦参碱使HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的敏感性增加,耐药性得到部分逆转。奥沙利铂(0.5μg/mL)和苦参碱(3.0μg/mL)单独用药对结肠癌耐药细胞株HT-29/OXA细胞周期以及细胞凋亡没有影响;联合用药对HT-29/OXA生长增殖具有明显抑制作用并且能够通过改变细胞周期引起凋亡（P<0.05）。奥沙利铂(0.5μg/mL)和苦参碱(3.0μg/mL)单独用药对HT-29/OX-ALRP和P-gp mRNA以及蛋白的表达没有影响;联合用药作用后LRP mRNA和P-gp mRNA表达水平降低（P<0.01）,同时下调了LRP和P-gp蛋白表达（P<0.01）。结论苦参碱部分逆转HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的耐药性,其机制可能与细胞内LRP和P-gp表达降低有关。