慢性心房颤动对人心房肌钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ表达的影响

目的探讨慢性心房颤动对人心房肌细胞内游离Ca2 浓度、心房肌组织钙调蛋白(calmodulin,CaM)及钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calmodulin dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)表达的影响。方法用激光共聚焦显微镜技术,对急性分离的慢性风湿性心脏病伴慢性房颤或窦性心律患者的心房肌细胞内游离Ca2 浓度进行测定,同时用West-ern blot法检测心房肌组织CaM及CaMKⅡ表达的变化。结果慢性风湿性心脏病伴慢性房颤患者心房肌细胞内游离Ca2 浓度显著高于窦性心律患者[(276.38±38.12)nmol/Lvs(122.28±45.63)nmol/L,(P<0.05)]。慢性风湿性心脏病伴慢性房颤患者心房肌CaM及CaMKⅡ的表达明显强于窦性心律患者。结论慢性房颤患者心房肌细胞内存在钙超载,Ca2 /CaMKⅡ通路可能是慢性房颤心房肌的信号转导途径之一。     

风心二狭房颤患者心房组织的HCN4基因表达及动作电位的研究

目的:通过分析风湿性心脏病二尖瓣狭窄(风心二狭)患者心房肌组织HCN4基因表达及动作电位与心房颤动发生的关系,为风心二狭房颤发生机制的研究提供理论依据。方法:取手术患者心耳组织100mg,提取RNA后应用半定量逆转录-PCR方法检测mRNA含量,并对PCR产物测序分析;以HCN4基因mRNA和内参β-actin含量的比值作为评价HCN4基因mRNA表达水平指标;采用急性分离心肌细胞的方法将其分为MS房颤(atrial fibrillation,AF)组和窦律(Sinus rhythm,SR)组,记录两组的动作电位(AP),观察两组心肌细胞动作电位时程(APD)的改变。结果:风心二狭房颤组及对照组HCN4基因mRNA与β-actin含量的相对表达值比值分别为0.696±0.257和0.125±0.010,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。房颤病人心房肌APD、APD复极至50%的时程(APD50)及APD复极至90%的时程(APD90)较窦性心律组明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:房颤心肌细胞HCN4基因的过度转录表达及APD缩短可能共同参与了调控风心二狭房颤的发生过程,揭示了风心二狭房颤发生的分子机制及电流学机制。     

THE EXPRESSION OF HCN4 GENE AND ACTION POTENTIAL IN ATRIAL FIBRILLATION PATIENTS WITH MITRAL STENOSIS OF RHEUMATIC HEART DISEASE

目的:通过分析风湿性心脏病二尖瓣狭窄(风心二狭)患者心房肌组织HCN4基因表达及动作电位与心房颤动发生的关系,为风心二狭房颤发生机制的研究提供理论依据.方法:取手术患者心耳组织100 mg,提取RNA后应用半定量逆转录—PCR方法检测mRNA含量,并对PCR产物测序分析;以HCN4基因mRNA和内参β-actin含量的比值作为评价HCN4基因mRNA表达水平指标;采用急性分离心肌细胞的方法将其分为MS房颤(atrial fibrillation,AF)组和窦律(Sinus rhythm,SR)组,记录两组的动作电位(AP),观察两组心肌细胞动作电位时程( APD)的改变.结果:风心二狭房颤组及对照组HCN4基因mRNA与β-actin含量的相对表达值比值分别为0.696±0.257和0.125±0.010,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).房颤病人心房肌APD、APD复极至50％的时程(APD50)及APD复极至90％的时程(APD90)较窦性心律组明显缩短,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:房颤心肌细胞HCN4基因的过度转录表达及APD缩短可能共同参与了调控风心二狭房颤的发生过程,揭示了风心二狭房颤发生的分子机制及电流学机制.     

心功能不同的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4的表达水平研究

目的 探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4（HCN4）基因在风湿性心脏瓣膜病心房颤动伴心力衰竭患者与心功能正常的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者心房肌中的表达水平。方法 选取2008-2011年新疆医科大学第一附属医院因心脏瓣膜病需接受开胸换瓣手术患者45例,根据其心功能分级,将美国纽约心脏病协会（NYHA）分级为Ⅱ～Ⅲ级者27例作为试验组,将心功能正常者18例作为对照组。采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western-blotting）分别测定两组患者HCN4 mRNA及蛋白表达水平。结果 对照组HCN4 mRNA表达水平为（1.12±0.69）,低于试验组的（4.91±1.51）（t=0.021,P＜0.05）。对照组HCN4蛋白表达水平为（1.02±0.15）,低于试验组的（2.01±0.92）（t=0.031,P＜0.001）。结论 HCN4在心力衰竭与心功能正常的风湿性心脏瓣膜病心房颤动患者的心房肌中均有表达,且随着心功能不全的加重,HCN4表达水平上调。     

结缔组织生长因子、肝细胞生长因子与风湿性心脏病心房颤动患者心房纤维化的关系

目的:检测风湿性心脏病心房颤动患者心房组织中结缔组织生长因子(CTGF)、肝细胞生长因子(HGF)、MAPKs信号通路分子的磷酸化水平,探讨房颤心房纤维化的可能分子机制.方法:21例风湿性心脏病患者于术中获取约200 mg的右心房肌组织,分为窦律(SR)组11例和房颤(AF)组10例.Masson病理染色观察心房纤维化,免疫组化测定心房肌组织中CTGF、HGF的蛋白表达,western blot测定心房肌组织中MAPKs信号通路分子的磷酸化水平.结果:与SR组比较,CTGF、MAPKs信号通路分子的磷酸化水平及胶原容积分数在AF组显著增加,而HGF的蛋白表达量显著降低,差异具有统计学意义(P＜0.001).结论:风湿性心脏病房颤患者心肌组织中CTGF的表达增加及HGF的表达降低,可能激活了MAPKs信号通路分子的磷酸化表达,从而促进心房纤维化,参与房颤的发生与维持.     

心房颤动患者增殖细胞核抗原基因表达的研究

目的检测风湿性心脏病（风心病）心房颤动（房颤）患者心房组织纤维化程度,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、增殖细胞核抗原的基因表达和蛋白水平,探讨房颤患者心房组织纤维化的分子机制。方法75例风心病接受换瓣手术者分为三组,其中窦性心律组34例;阵发性房颤组11例;持续性房颤组30例,于术中获取右心耳组织约250mg,采用半定量逆转录-聚合酶链反应（1KT—PCR）技术测定心房组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和增殖细胞核抗原（PCNA）的mRNA含量,采用苦味酸天狼猩红染色法对心房组织胶原沉积量及分布情况进行分析,采用免疫组织化学方法对PCNA蛋白水平及分布情况进行分析。结果与窦性心律纽比较,阵发性房颤患者患者心房组织中PCNA基因的mRNA及蛋白表达水平均明显增加p〈0.001;P〈001）;与窦性心律组比较慢性房颤患者心房组织中PCNA基因的mRNA及蛋白表达水平均明显增加∞〈0．001;P〈0．001）;与阵发性屠颤患者比较,慢性颤患者心房组织中PCNA基因的mRNA及蛋白表达水平明显增加（P〈0．01;p〈0．05）。结论心房组织中PCNA基因表达上调可能是导致房颤患者心房纤维化的分子机制之一,可能与房颤的发生和维持有关。     

基质金属蛋白酶在风湿性心脏病二尖瓣病变组织中的表达研究

目的探讨基质金属蛋白酶（MMPs）在风湿性心脏病（RHD）二尖瓣膜病理改变中的作用及其机制。方法实验组为成人RHD患者二尖瓣16例，对照组为同期意外死亡的无心脏病变的成人二尖瓣7例。经HE染色及电镜观察两组形态学和超微结构变化，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学染色（SABC法）测定MMP-2、MMP-13在二尖瓣组织的mRNA含量和蛋白表达。结果实验组为风湿性病理改变，对照组结构基本正常。实验组MMP-2、MMP-13的mRNA表达分别为0．96±0．27，0．93±0．38，较对照组均明显增加（P〈0．01）；其MMP-2、MMP-13蛋白表达亦明显高于对照组。结论RHD患者二尖瓣膜中MMPs表达增强，可能参与二尖瓣细胞外基质（ECM）的重构，是其风湿性改变的重要分子机制之一。     

慢性心房颤动患者心房肌细胞凋亡与血管紧张素Ⅱ受体2的关系

目的：探讨慢性心房颤动（房颤）患者心房肌细胞凋亡与血管紧张素Ⅱ受体2（AT2－R）的关系。方法：23例风湿性心脏病二尖瓣病变患者，心脏外科手术时取右心耳组织。用Tunel法和放射免疫法检测心房组织中凋亡的心房肌细胞和心房组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量，并通过逆转录－聚合酶链反应和免疫组织化学，测量AT2－RmRNA和蛋白相对表达量。结果；慢性房颤患者的心房肌细胞凋亡指数（AI）和心房组织AngⅡ含量显著高于窦性心律患者（P均＜0.01）；与窦性心律患者相比，慢性房颤患者的心房组织AT2－RmRNA水平无显著性的改变（P＞0.05），但AT2－R的蛋白表达明显增高（P＜0.05）。结论：人类慢性房颤心房肌细胞凋亡可能是通过AT2－R所介导。     

心房颤动对风湿性心脏病心房肌细胞Cx40、Cx43表达的影响

目的　研究风湿性心脏病 (风心病 )伴与不伴心房颤动 (房颤 )患者左、右心房肌细胞Cx40、Cx43的表达 ,探讨房颤与Cx40、Cx43之间的关系。方法　 3 1例换瓣病人分为 3组 :①实验Ⅰ组 ( 11例 )为阵发性房颤或房颤持续时间≤ 6个月 ;②实验Ⅱ组 ( 12例 )为房颤持续时间均 >6个月 ;③对照组 ( 8例 )为窦性心律。手术中分别切取左、右心耳处心房肌组织。用免疫印迹法和免疫组化技术检测左、右心房肌Cx40、Cx43的表达与分布。结果　①每例患者左、右心房肌以及每组中左、右心房肌Cx40、Cx43表达量均值无显著性差异。②实验Ⅰ组与对照组比较 ,Cx40表达量明显降低 (P <0 0 5 ) ,而实验Ⅱ组与对照组比较其降低更加明显 (P <0 0 1)。③Cx43的表达量在 3组间均无显著差异 ;④实验组Cx40阳性染色较对照组明显减少 ,且分布紊乱 (除细胞头尾部外 ,细胞侧面染色增多 )。⑤ 3组间Cx43阳性染色的分布无明显差别。结论　①左、右心房肌Cx40、Cx43的表达与分布均无显著差异。②有房颤者心房肌Cx40表达量下调及分布不均可能与房颤的发生与维持有关。     

心房肌基质金属蛋白酶-9和组织金属蛋白酶抑制因子-1表达改变对房颤心房重构机制的研究

目的　探讨心房肌基质金属蛋白酶- 9 (MMP -9)和组织金属蛋白酶抑制因子- 1 (TIMP1)表达水平的改变与慢性房颤心房结构重构的相关关系。方法　选取进行人工瓣膜置换术的风湿性心脏病房颤24例为研究组,风湿性心脏病窦性心律12例为对照组。上述患者术前均进行经胸超声心动图检查,留取相关资料。于手术时取左心耳心肌标本,采用RT -PCR方法检测心房肌中本研究检测慢性房颤患者心房肌中MMP- 9和TIMP- 1的mRNA水平,采用免疫组织化学方法对MMP- 9和TIMP- 1蛋白质表达半定量分析。结果　与对照组比较,风心房颤组左心房内径和右心房内径均显著扩大(P<0 .05~0 .001),心肌中MMP 9mRNA表达水平较对照组升高30 .9% (P<0 .05 );TIMP 1mRNA水平较对照组下调33 .3% (P<0 .05);左心耳心肌组织中MMP 9蛋白质水平增高100% (P<0. 001),TIMP -1蛋白质水平减少36% (P<0 .01)。左心耳心肌组织MMP- 9mRNA水平与房颤持续时间、左心房内径呈显著正相关(P<0. 05~0 .001)。结论　房颤时心房肌组织MMP 9 /TIMP- 1系统相互间的作用失衡对心房壁变薄、心房扩大和几何形状改变具有重要作用,其机制是细胞外基质过度降解。     

风湿性心脏病二尖瓣置换术患者右心室功能评价

目的应用实时三维超声心动图（real-time three-dimensional echocardiography,RT-3DE）评价风心病二尖瓣置换术前、后右心室功能的变化。方法通过RT-3DE对85例二尖瓣狭窄伴（或）二尖瓣反流行二尖瓣置换术患者,采集其手术前、后半年右心室全容积图像;将RT-3DE图像导入Tomtec 4D Cardio View工作站,手动调节图像并描记心内膜边界后,软件分析自动得到RVEDV、RVESV、RVEF;手动计算RVSV,分析其手术前后右心室功能相关指标变化情况。结果无论窦性心律（SR）组（39例）还是心房颤动（AF）组（46例）,RVEDV、RVESV手术后均较手术前有所减小;RVSV、RVEF有所增大;各测值手术前、后均有明显的统计学差异（P〈0.05）;手术前、后,SR组测值均较AF组大,但两组各测值间,仅RVEF有统计学意义（P〈0.05）,相关分析显示：RVEDV手术前后相关性高于RVESV（r=0.784,P＜0.05）,提示风心病患者右心功能不全主要与舒张末容积增大有关。结论风湿性心脏病二尖瓣膜置换术后半年时,SR组及AF组患者右心容积均较手术前明显减小,右心功能较前明显改善,SR组较AF组改善明显,这与临床观察一致;二尖辩病变的解除能有效改善患者右心功能。     

风湿性心脏瓣膜病患者钾离子通道特性变化的实验研究

目的:探讨风湿性心脏瓣膜病(简称风心病)患者心房组织细胞Kvl.5钾通道的变化。方法:将风心病患者分为窦性心律组(SR)、阵发性房颤组(PAF)和慢性房颤组(CAF)。应用全细胞膜片钳技术记录各组单个右心耳组织细胞超快速延迟整流钾电流(ultrarapid delayed rectifier current,IKur)的表达。结果:指令电压为+10~+50mV时,慢性房颤组(n=22)IKur密度较窦性心律组(n=25)明显降低。阵发性房颤组(n=23)IKur密度与窦性心律组差异无统计学意义(P>0.05);其中,在+50mV时,电流由窦性心律组(8.98+1.69)PA/pF降为房颤组的(4.17+1.82)PA/pF(P<0.01),降低幅度为(53.6+1.4)%。阵发性房颤组(8.21+1.54)PA/pF与窦性心律组差异无统计学意义(P>0.05),与慢性房颤组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Ikur密度在发生慢性房颤的风心患者心房肌细胞中密度明显下降,提示Kv1.5钾通道的变化与风心病房颤的发生有关。     

风湿性心脏病慢性房颤患者血清CRP和右心耳TNF-α蛋白表达研究

目的观察风湿性心脏瓣膜病慢性心房颤动患者血清C反应蛋白（C-Reactive Protein,CRP）和右心耳肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）蛋白表达的改变。方法将32例接受心脏外科手术的风湿性瓣膜病患者于术中获取的右心耳分为两组,其中窦性心律组11例,慢性房颤组21例,采用免疫比浊法测定所有入选患者的血清C反应蛋白水平,采用免疫组织化学方法评价TNF-α蛋白表达的变化。结果慢性心房颤动患者血清CRP水平显著高于窦性心房心律组（P〈0.05）心房肌细胞TNF-α的表达阳性率也显著大于窦性心律组（P〈0.05）。结论风湿性心脏瓣膜病慢性房颤患者血清CRP水平和心房组织TNF-α蛋白表达显著增加,炎症反应可能是风湿性心脏瓣膜病慢性房颤患者房颤动发生和维持的机制之一。     

风湿性二尖瓣病变患者外周血炎症标志物水平与心房颤动关系的研究

目的：探讨风湿性二尖瓣病变患者外周血炎症标志物水平与心房颤动之间可能存在的关系。方法：根据心律将40例风湿性二尖瓣病变患者分为二组：窦性心律组20例，心房颤动组20例。分别检测二组患者外周血白细胞总数（WBC）、中性粒细胞百分率（NEU％）、C-反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子仪（TNF-α）浓度。结果：二组患者间WBC、NEU％差异不明显（P〉0．05）。伴有心房颤动的二尖瓣病变患者外周血CRP、IL-6、TNF-α含量与窦性心律患者无明显差异（P〉0．05）。结论：风湿性二尖瓣病变患者其持续性心房颤动与外周血CRP、IL-6、TNF-α含量无关。     

二尖瓣置换术后房颤自动复律因素的临床研究

目的探讨风湿性心脏病心房颤动患者二尖瓣置换术后自动恢复窦性心律的临床因素及护理要点。方法选择由同组医师施行的二尖瓣置换术患者178例，按照术后自动恢复窦性心律情况分为房颤组及自动恢复窦律组，对年龄、性别、左房内径、房颤时间、左室射血分数（EF值）、心胸比、心脏病史、体外循环时间及主动脉阻断时间等指标进行比较分析。结果左心房直径小于55mm的患者窦性心律转复率（43％）明显高于左心房大于55mm的患者（21％，P〈0．05）。房颤时间短于2年的患者48％转为窦性心律，明显高于房颤时间长于2年的患者（P〈0．05）。心胸比率〈0．6的患者窦性心律转复率（38％）明显高于心胸比率〉0．6者（14％，P〈0.05）。性别、年龄、左心室射血分数、有无心脏手术史、手术中体外循环时间及主动脉阻断时间对于手术后窦性心律的恢复没有影响。结论风心病二尖瓣置换术后房颤自动恢复窦性心律情况与左房大小、房颤时间及心胸比有密切关系。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在风湿性二尖瓣狭窄合并心房纤颤中的作用

心房纤颤是临床上较为普遍的一种心律失常,心房纤颤时可加重风湿性二尖瓣瓣膜狭窄的程度。房颤对心脏瓣膜的破坏主要表现为细胞外基质正常结构被破坏,胶原沉积增多,各型胶原比例失调和排列紊乱。影响细胞外基质代谢的最主要的酶类是基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs） 和金属蛋白酶内源性组织抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs）。心房纤颤时MMPs、TIMPs 平衡失调使心脏瓣膜破坏,Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积增多,排列紊乱。MMP 9 和TIMP 2 是心房纤颤发生后MMPs 和TIMPs 中表达最具有意义的指标。本文通过对心房纤颤后心脏瓣膜组织中MMP 9 和TIMP 2 异常表达的研究进行综述,以了解心房纤颤对风湿性二尖瓣瓣膜影响的程度。     

慢性心房颤动患者心房肌mink亚单位基因mRNA水平的定量检测

目的：心房颤动是目前最为常见的快速性心律失常之一。mink是心肌细胞延迟整流钾通道（Iks）的重要辅助亚单位,在Iks发挥正常功能中起着重要的作用,同时参与心肌细胞其它离子通道电流的调控。本研究采用实时荧光定量PCR技术通过对房颤时mink基因mRNA水平进行定量研究,探讨mink在房颤中的作用和潜在调控机制。方法：①16例风湿性心脏病（rheumaticheartdisease,RHD）患者分为2组：窦性心律组（SR组）8例、房颤心律组（AF组）8例,取其常规切除的右心耳组织作为研究对象;②提取心房肌组织总RNA,通过RT-PCR和TA克隆技术构建含有目的基因片段的质粒标准品;③以GAPDH为内参照基因,采用SYBRGreenⅠ法实时荧光定量PCR技术检测慢性心房颤动和窦性心律患者mink基因mRNA水平。结果：①标准曲线和熔解曲线：标准曲线线性关系良好,相关系数R2〉0.99。熔解曲线呈明显单峰状,退火温度与预测值基本一致;②SR组和AF组mink/GAPDH比值分别为0.1890±0.0721（n=8）和0.1413±0.0954（n=8）,AF组mink基因mRNA水平低于SR组,P〈0.05。结论：与窦性心律患者相比,心房颤动患者mink基因明显下调,mink基因表达量的改变可能参与房颤重构的分子基础。     

二尖瓣置换术治疗风湿性心脏病的安全性及与心功能的相关性研究

目的 探究二尖瓣置换术治疗风湿性心脏病（rheumatic heart disease,RHD）的安全性及与患者心功能的相关性。方法 选取2018年1月至2022年4月榆林市第二医院和西安交通大学第一附属医院收治的170例RHD患者的临床资料,根据是否发生术后并发症将RHD患者分为并发症组和对照组。通过单因素分析及多因素Logistic回归比较并发症组和对照组患者的相关资料,分析影响RHD患者术后并发症发生的危险因素。使用ROC曲线分析心功能指标对RHD患者术后并发症的预测价值。结果 149例RHD患者中,15例发生并发症,并发症发生率10.07%。对比两组患者的病程、心房纤颤发生率、左心室舒张末内径（left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD）、左心室质量指数（left ventricular mass index,LVMI）,并发症组均明显高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。病程、心房纤颤、LVEDD、LVMI均为RHD患者二尖瓣置换术后并发症发生的独立危险因素（P<0.05）。LVEDD和LVMI对RHD患者术后并发症发生均具有较好的预测价值。结论 RHD患者二尖瓣置换术后的并发症发生风险较高,其中病程长、合并有心房纤颤、LVEDD和LVMI较高的患者为术后并发症发生的高风险人群。