褪黑素对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用

目的 探讨褪黑素对实验性糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法 将实验动物随机分为正常对照组（C组）、糖尿病组（D组）及糖尿病褪黑素治疗组（M组）。给予褪黑素治疗4周。检测血糖、血肌酐、肾脏肥大指数（肾重／体重），放免法测定24h尿白蛋白排泄量，对肾脏标本进行光镜观察，用图像分析仪测量各组大鼠平均肾小球面积、平均肾小球体积。同时用实时荧光定量RT-PCR法对糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA表达进行半定量分析。结果 褪黑素治疗组较糖尿病组24h尿白蛋白排泄量、肾脏肥大指数均明显下降（P〈0.05）。实时荧光定量RT-PCR检测糖尿病大鼠肾脏皮质TGF-β1 mRNA表达明显高于正常对照组，为C组的9．2倍，给予褪黑素治疗后，糖尿病大鼠TGF-β1 mRNA表达水平下降3．95倍，但仍明显高于正常对照组（P〈0.01）。肾小球平均面积、平均肾小球体积M组显著低于D组（P〈0.01）。结论 褪黑素可抑制糖尿病大鼠肾脏皮质TGF-β1mRNA表达，减少糖尿病大鼠的尿白蛋白，减轻及延缓肾小球硬化，发挥保护肾脏的作用。     

丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏VEGF mRNA的影响

目的：探讨丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾脏病理结构和血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、纤维素连接蛋白（FN）表达的影响。方法：雄性SD大鼠24只随机分成4组,分别为正常对照组（C组）、糖尿病组（D组）、依那普利治疗组（E组）以及丹芪合剂治疗组（Y组）。尾静脉注射链脲菌素（STZ）复制糖尿病大鼠模型,12周处死大鼠,生化方法测血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂及24h尿蛋白量,计算肾脏指数（KI）;HE染色光镜观察肾组织形态;免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、FN的表达;RT-PCR检测肾组织VEGF mRNA表达情况。结果：与C组相比,糖尿病大鼠KI、血糖、血肌酐、胆固醇、甘油三脂、24h尿蛋白量均显著增高并出现蛋白尿,E组和Y组大鼠除血糖、KI外均显著低于D组。免疫组织化学结果显示正常。肾组织中TGF—β1几乎没有阳性染色,FN有少量表达,而DN时,TGF-β1和FN表达都显著增加（P〈0．01）,E组和Y组大鼠,FN和TGF—β1表达下调（P〈0．01）。RT—PCR结果提示,与C组相比,D组VEGF mRNA明显上调（P〈0．05）,而E组和Y组大鼠较D组表达减少。结论：依那普利和丹芪合剂对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与其下调肾组织中VEGF mRNA有关。     

螺旋藻对阿霉素肾硬化大鼠肾脏的保护作用

目的研究螺旋藻对阿霉素肾硬化大鼠肾脏的保护作用及相关机制。方法将32只SD大鼠随机分为4组：假手术组（S组）,阿霉素肾硬化对照组（M组）,螺旋藻组（SP组）,贝那普利治疗组（B组）。8周后观察各组大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）及肾脏病理改变,免疫组化观察肾脏组织纤连蛋白（FN）、IV型胶原（Col IV）、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。RT-PCR测定肾皮质TGF-β1mRNA的表达。结果螺旋藻能减少尿蛋白、降低BUN和Scr,减轻基质增生和肾小球硬化,且能减少FN、Col IV、TGF-β1的表达。下调肾皮质TGF-β1mRNA的表达。结论螺旋藻能减轻阿霉素肾硬化大鼠肾脏损害,对肾脏有保护作用。     

左旋氧氟沙星联合甲基泼尼松龙对慢性逆行性肾盂肾炎大鼠肾皮质瘢痕的影响及机制

目的探讨抗生素联合皮质激素防治肾盂肾炎延迟治疗时肾皮质瘢痕的效用及机制。方法大鼠分为正常组（A）,模型组（B）、左旋氧氟沙星及时治疗组（C）、左旋氧氟沙星加激素延迟治疗组（D）、左旋氧氟沙星延迟治疗组（E）,分别于30d、60d、90d测量各组肾小管功能（尿NAG/Cr）、肾功能（Scr、BUN）、24h尿蛋白定量,第90天统计各组肾皮质瘢痕率,RT-PCR及免疫组化测量肾组织TGF-β1mRNA及蛋白水平表达。结果B组第90天出现尿NAG/Cr显著升高,与A、C、D组比较有显著性差异（P﹤0.01）;实验期间各组肾功能、24h尿蛋白均无显著差异。C、D组二级及以上瘢痕发生率显著减少（P﹤0.05）,D组总体瘢痕率显著减少。RT-PCR及免疫组化提示各组较A组TGF-β1表达增加;相对于B组,C、D组TGF-β1肾内表达显著抑制,E组无此作用。结论延迟治疗时抗生素联合皮质激素有助于减少肾皮质瘢痕发生,单独使用抗生素无此作用。     

芪术胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1和CTGF表达的影响

目的 观察芪术胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏保护作用.方法 采用单侧肾脏切除和腹腔注射链脲佐菌素的方法来建立大鼠糖尿病肾病模型,随机分为正常（NC）组、模型组（DM）、芪术胶囊（QZ）组、氯沙坦钾（LSTJ）组;成模1周后,QZ组按 1 g·kg-1给药,LSTJ组按 1.67 mg·kg-1给药.实验8周末观察各组大鼠血尿素氮BUN、血肌酐（Scr）、糖化血红蛋白（HbAlc）、胱抑素（CysC）以及24 h尿蛋白定量,并进行肾组织病理形态学观察以及免疫组化法检测肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）与结缔组织生长因子（CTGF）的蛋白表达.结果 与DM组相比：QZ组大鼠血清 BUN、Scr、HbAlc、Cys-c和24 h尿蛋白定量明显减低,肾组织病理形态学改变程度均明显改善,大鼠肾小球TGF-β1和CTGF表达均减弱.结论 芪术胶囊可以减少尿蛋白,降低血糖,改善肾功能,下调肾组织TGF-β1和CTGF表达,起到保护肾脏,延缓DN进展的作用.     

通络泄浊方对糖尿病肾病大鼠TGF-β1和CTGF的影响

目的：观察通络泄浊方对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGr）的影响。方法：采用随机数字表法将实验动物分为正常组、模型组、通络泄浊方组（中药组）、氯沙坦组（西药组）和通络泄浊方＋氯沙坦组（中西药组）。采用链脲菌素（STZ）法制作DN大鼠模型,药物干预后以免疫组织化学法和荧光定量PCR分别检测肾组织TGF-β1,和CTGF蛋白及其mRNA的表达。结果：中药组、西药组和中西药组大鼠TGF-β1和CTGF蛋白及其mRNA表达均显著低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）,且中西药组CTGF蛋白及其mRNA水平较中药组和西药组均明显降低（P〈0．01）。结论：通络泄浊方和氯沙坦均能抑制DN大鼠肾组织TGF-1与CTGF表达,而且联合使用对CTGF表达作用更明显。     

联合用药延缓阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的研究

目的：探讨贝那普利和蝙蝠蛾拟青酶Cs-4联合应用对阿霉素肾病模型大鼠肾纤维化的保护作用及调节机制。方法：将60只SD大鼠随机分为模型组（M组）、贝那普利组（B组）、联合治疗组（U组）3组，每组20只。8周后观察各组大鼠24h尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白（TP）、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的水平及肾脏病理改变，免疫组化检测肾层粘连蛋白（LN）、肾组织中纤连蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅳ(Col Ⅳ)、转化生长因子β1(TGF-β1)的表达，RT PCR方法测定肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）和纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）、组织性金属蛋白酶抑制物1(TIMP 1)mRNA的表达。结果：U组、B组分别和M组相比，24h尿蛋白定量、BUN、Scr、甘油三脂(TG)、总胆固醇(Cho)明显降低（P＜0.01），TP和ALB明显升高（P＜0.01）,U组和B组相比，BUN、Scr、TG、Cho亦明显降低（P＜0.05）；M组肾脏病理肾间质纤维化较重，而B组较轻，U组最轻；免疫组化可见B组和U组中LN、FN、Col Ⅳ、TGF-β1的表达明显低于M组（P＜0.01），并且U组和B组相比，Col Ⅳ、TGF-β1的表达明显降低（P＜0.05）；RT PCR显示B组、U组TGF-1mRNA、PAI-1mRNA、TIMP-1mRNA的表达，均较M组降低（P＜0.01），U组较B组亦明显降低（P＜0.05）。结论：蝙蝠蛾拟青酶Cs-4和贝那普利联合应用有相加作用，能有效的延缓肾间质纤维化。     

ALA对STZ诱导的DN大鼠肾组织中TGF-β1和CTGF表达的影响

目的探讨抗氧化剂α-硫辛酸（α-lipoic acid,ALA）对糖尿病肾病（DN）的肾保护作用及其对肾组织转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）和结缔组织生长因子（connective tissue growth factorCTGF）表达的影响。方法建立STZ诱导的DN大鼠模型,给予ALA（35 mg/kg·d~（-1））腹腔注射预防性治疗,分别于第12周和第20周处死动物。检测血糖、肾功能、24 h尿蛋白定量,PAS染色观察肾组织结构改变,分光光度仪检测肾组织和血清中还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,GSH/GSSG比值。免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1和CTGF表达。结果与对照组相比,第12周和20周DN大鼠血糖明显升高,24 h尿蛋白定量增高,肾小球滤过率增加。病理组织PAS染色显示肾小球系膜增生、肾小管上皮空泡变性等改变。肾组织匀浆及血清中GSH水平下降,GSSG水平增高,GSH/GSSG比值降低,肾组织中TGF-β1和CTGF表达明显上调。而ALA组24 h尿蛋白定量减少,病理改变减轻,GSH水平上升,GSH/GSSG比值增高,肾组织中TGF-Bl和CTGF表达较DN组明显下调。结论 ALA可通过增强谷胱甘肽活性,减少氧化应激而下调肾组织TGF-Bl和CTGF表达,进而改善DN大鼠肾组织结构和肾功能,在防治DN方面有良好的应用前景。     

硝基酪氨酸对糖尿病肾病大鼠肾脏NF-κB、MCP-1 及TGF-β1表达的影响

目的观察硝基酪氨酸（NT）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏核因子-κB（NF-κB）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和转化生长
因子-β1（TGF-β1）表达的影响,探讨其在DN发生发展中的作用机制。方法用链脲佐菌素腹腔注射法建立DN大鼠模型,造模
成功的大鼠随机分3组：DN模型组、DN+NT组和DN+NT+Ebselen组（NT抑制剂）,另设正常对照组。各组分别干预8周后,观
察24 h尿蛋白定量变化,采用免疫组织化学染色检测肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检
测肾组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1 mRNA表达,光镜观察肾脏病理改变。结果与DN模型组比较,DN+NT组大鼠24 h尿蛋
白定量、肾脏组织中NF-κB、MCP-1和TGF-β1的蛋白及mRNA水平均显著增加,肾脏病理改变加重;NT抑制剂Ebselen可明显
减轻这些变化。结论硝基酪氨酸可上调DN大鼠肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1 蛋白及其mRNA的表达,加重炎性反应,
促进DN的进展。
     

Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织TGF-β1mRNA与蛋白表达的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达的影响.方法 采用腹腔内一次性注射STZ 55 ms/kg复制糖尿病大鼠模型.各组分别给予相应药物灌胃治疗;每周测体重,于第4、8、12周末用考马斯亮蓝法测24 h尿蛋白.12周后检测BUN、Scr、TG,计算肾重体重比,肾组织进行HE、Mallory染色,观察大鼠肾脏病理学变化.用免疫组化、原位杂交方法 分别检测肾组织TGF-β1mRNA及其蛋白的表达.结果 Rg1、Rb1组大鼠体重各周均高于模型组,但没有统计学差异.Rb1组大鼠肾重体重比具有极显著性差异(P<0.01),Rg1大剂量组、Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05).与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组大鼠在第4周、第8周,可以降低24 h尿蛋白含量,有极显著性差异(P<0.01),第12周,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组有显著性差异(P<0.05).血液生化方面与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组可以降低大鼠BUN,均有极显著性差异(P<0.01);可以降低Scr,Rg1大剂量组及Rb1组有极显著性差异(P<0.01),而Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05);同时Rg1、Rb1可以减轻肾脏病理学改变.与模型组比较,Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组可以减少肾组织TGF-β1蛋白的表达,均有极显著减少(P<0.01);Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组TGF-β1mRNA表达,具有有极显著性差异(P<0.01).结论 Rg1、Rb1通过抑制DN大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达,进而保护DN大鼠肾脏功能,这可能是Rg1、Rb1防治糖尿病肾病进展的机制之一.     

普罗布考对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子-β1及血红素加氧酶-1表达的影响

目的:观察普罗布考(PB)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响,探讨PB延缓肾间质纤维化的机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分为实验组及对照组。实验组行高糖高脂饮食,并以链脲佐菌素腹腔注射建立DN大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为DN组和PB组。PB组经口灌胃PB 500 mg·kg-1·d-1。实验结束称大鼠体质量并查24 h尿蛋白定量及尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG);处死大鼠抽取血液,观察血清生化指标,摘除肾脏行组织切片,观察肾间质纤维化程度,免疫组织化学学检测肾组织内HO-1、TGF-β1的表达,RT-PCR检测肾组织内TGF-β1、HO-1核酸表达。结果:PB能减轻DN大鼠蛋白尿,降低尿NAG水平,改善血清总胆固醇;降低血清肌酐、尿素氮水平。上调肾组织HO-1mRNA水平,下调TGF-β1mRNA水平。结论:PB可延缓肾组织纤维化,其机制可能与PB考上调HO-1的表达,进而下调TGF-β1的表达相关。     

帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠肾保护机制的研究

目的探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DN）大鼠的肾保护作用及其可能机制。方法采用腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）构建DN大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为帕立骨化醇组（P组）、DN组（D组）,并设置健康对照组（N组）。P组大鼠每周腹腔注射帕立骨化醇3次,剂量为0.4μg/kg,给药12周后检测24h尿蛋白定量及血生化指标,以实时PCR检测肾组织肾素及环氧化酶-2（COX-2）mRNA表达,免疫组化检测肾组织COX-2蛋白的表达,并以ELISA法检测尿前列腺素E2（PGE2）水平。结果与N组相比,D组与P组24h尿蛋白定量、血肌酐（SCr）、空腹血糖及甲状旁腺激素（PTH）均显著升高（均P＜0.05）,肾组织肾素和COX-2 mRNA及蛋白表达,以及尿PGE2水平均显著升高（均P＜0.05）,且D组显著高于P组（P＜0.05）。肾素水平与尿PGE2水平及COX-2 mRNA表达均呈正相关（r=0.798、0.722,均P＜0.01）。结论帕立骨化醇可显著减少DN大鼠早期蛋白尿,其机制可能与通过抑制肾组织COX-2表达,下调尿PGE2水平,从而抑制肾组织肾素表达有关。     

安体舒通对糖尿病肾病大鼠肝细胞生长因子的影响

目的:探讨安体舒通(Antisterone)对实验性糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的影响及其可能机制。方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病组(DN组)和安体舒通治疗组(AT组),同时设正常对照组(NC组)。记录FBG、Scr及24 h尿微量白蛋白(24 h Upro)等指标。ELISA和Western blot法分别检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、HGF的表达情况。结果:⑴DN组和AT组大鼠FBG、SCr、24 h Upro和RHI水平较NC组显著升高(P均<0.01),其中AT组Scr、24 h Upro和RHI均低于DN组(P<0.05,P<0.01);⑵DN组、AT组肾皮质TGF-β1蛋白表达较NC组显著升高(P<0.05),且AT组低于DN组(P<0.05);⑶DN组、AT组HGF表达量显著低于NC组(P<0.01),但AT组高于DN组(P<0.05)。结论:安体舒通可上调HGF的表达,减轻肾小球系膜区增生,延缓糖尿病大鼠肾脏病进展。     

1，25—（OH）2D3对糖尿病肾病大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨1，25～（OH）。D3对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织VEGFmRNA及蛋白质表达的影响。方法SD大鼠分为3组，对照组，糖尿病肾病（DN）组，1，25—（OH）2D3组。链脲菌素腹腔注射诱导DM大鼠模型，尿蛋白定量≥30mg／24h为DN大鼠，诱导成功后1，25—（OH）2D3组给予3ng／（100g·d）皮下注射。实验12周末检测大鼠体重、血糖、血肌酐、24h尿白蛋白。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测VEGFmRNA及蛋白质的表达。结果DN组大鼠体重、血糖、尿白蛋白，肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达，肾小球细胞数，细胞外基质（ECM）均高于对照组（P〈0．01）。与DN组相比，1，25—（OH）2D3组大鼠体重、血糖、尿白蛋白，肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达，肾小球细胞数，ECM聚积显著降低（P〈0．01或P〈0．05）。尿VEGF与尿白蛋白呈正相关（rs=0．41，P=0．037），与体重、血糖、血肌酐无相关性（rs分别为0．18，0．13，0．21，P〉0．05）。结论1，25-（OH）2D3可减轻DN大鼠尿白蛋白的排泄，抑制肾小球系膜增殖，降低VEGFmRNA及蛋白质的表达。     

凝血酶敏感蛋白-1活化TGF-β_1在糖尿病肾病中作用的实验研究

目的测定糖尿病肾病中活性TGF-β1的水平,研究阻断TSP-1介导的TGF-β1活化能否延缓糖尿病肾病的纤维化进程。方法采用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病模型,将30只SD大鼠随机分为3组,正常对照组（NC组）、糖尿病肾病组（DM组）、多肽干预组（DT组,给予人工合成多肽LSKL 100μg/d）,每组10只。每隔4周,测定24小时尿蛋白、血肌酐;16周取肾标本,行病理组织检查,ELISA法检测肾组织中活性及总体TGF-β1的水平,免疫组化检测TSP-1及TGF-β1的表达。结果 DT组24小时尿蛋白、血肌酐明显低于DM组（P〈0.01）,肾组织病理改变也明显较轻;DM组、DT组与NC组相比,肾组织总体TGF-β1、活性TGF-β1水平明显增高;DT组与DM组相比,总体TGF-β1含量差别不明显（P〉0.05）,但活性TGF-β1含量明显下降,差别显著（P〈0.05）。NC组肾组织TSP-l无阳性表达、TGF-β1少量表达,而DT组与DM组两者的阳性表达面积显著增强;DT组与DM组TSP-l、TGF-β1阳性表达差别不明显（P〉0.05）。结论在糖尿病肾病发病进程中,TSP-1是活化TGF-β1的重要因子,阻断TSP-1介导的TGF-β1活化,能延缓肾纤维化进程。     

雷公藤多苷对IgA肾病者肾功能、TGF-β1和部分免疫指标的影响效果观察及其探讨

目的对雷公藤多苷对IgA肾病者肾功能、TGF-β1部分免疫指标的影响效果进行观察与探讨。方法选取42例给予雷公藤多苷进行治疗的IgA肾病者视为试验组,于同期选取42例给予常规西医治疗的IgA肾病者作为对照组,同时对两组患者治疗效果、肝肾功能、尿蛋白定量和TGF-β1和CD4+、CD8+指标实施检测,然后对所得数据进行统计学分析。结果两组患者总有效率相比,差异有统计学意义(P<0.05),试验组患者治疗前后24 h尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平相比,差异有统计学意义(P<0.05),而给药后两组患者上述肾功能指标、24 h尿蛋白定量相比,差异有统计学意义(P<0.05);试验组患者给药前后尿TGF-β1/尿肌酐(Cr)、血TGF-β1水平相比,差异有统计学意义(P<0.05),而给药后两组患者上述指标相比,差异有统计学意义(P<0.05);试验组患者给药前后CD4+、CD8+水平相比,差异有统计学意义(P<0.05),而给药后两组患者上述指标相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论雷公藤多苷能够明显改善尿TGF-β1/尿Cr、血TGF-β1以及CD4+、CD8+水平,保护肾功能。