NF-κB在腹部火器伤、肠管、穿透后心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨腹部火器伤肠管穿透后NF-κB在心肌细胞凋亡信号转导中的作用,了解腹部火器伤肠管穿透后继发性心脏损伤机制.方法 健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h组,实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用免疫组化图像分析法测定各组心肌内NF-κB表达,同时测定心肌细胞凋亡和血浆内毒素变化情况. 结果伤后各组心肌内NF-κB表达明显高于对照组,心肌细胞凋亡指数和血浆LPS水平于伤后显著增高(P＜0.05),并与NF-κB活性变化基本一致. 结论腹部火器伤肠管穿透后心肌内NF-κB表达增强,心肌细胞凋亡增多,导致心脏损伤.     

猪腹部火器伤肠管穿透后NF-κB在心脏中的表达及其意义

目的探讨NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后心脏中的变化及意义。方法健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2、4、8、12 h和24 h组,实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用免疫组化图像分析法测定各组心肌组织NF-κB活性,同时测定血清中LDH、CK-MB水平,在光镜下观察各组心脏组织学变化,电镜下观察心脏超微结构改变。结果伤后各组心脏NF-κB表达明显高于对照组。伤后各组血清LDH、CK-MB水平均高于对照组。伤后8、12、24 h组光镜下出现逐渐加重的心肌细胞水肿、变性;电镜下4、8、12、24 h组出现逐渐的线粒体肿胀、溶解;对照组光、电镜下未见明显的损伤性变化。相关分析表明,伤后心肌组织NF-κB表达与血清LDH、CK-MB水平均呈正相关（r值分别为0.968、0.957,P〈0.05）。结论腹部火器伤肠管穿透后心肌组织内NF-κB活性增强;NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后继发性心脏损伤中具有重要意义。     

NF-κB及iNOS在猪腹部火器伤肠管穿透后心脏损伤中的作用

目的探讨NF-κB、iNOS在腹部火器伤肠管穿透后心脏损伤中的作用。方法健康长白仔猪42头,随机分为对照组和伤后1h,2h,4h,8h,12h和24h组,用免疫组化图像分析法测定各组心肌内NF-κB、iNOS表达,在光镜和电镜下观察各组心肌组织形态学变化。结果伤后各组心肌内NF-κB、iNOS表达明显高于对照组。伤后8h、12h、24h组光镜下出现逐渐加重的心肌细胞水肿、变性;电镜下4h、8h、12h、24h组出现逐渐加重的线粒体肿胀、溶解;对照组光镜及电镜下未见明显的损伤性变化。相关分析表明,伤后心肌组织NF-κB与iNOS呈正相关（r=0．980）。结论腹部肠管火器伤后可诱导NF-κB、iNOS表达并介导心脏损伤。     

NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后肺损伤中的变化及意义

目的 探讨NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后肺损伤中的变化及意义.方法 健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、 2、 4、 8、 12 h 和24 h 组,实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用免疫组化图像分析法测定各组肺组织NF-κB表达,在光镜下观察各组肺脏组织学变化,电镜下观察肺脏超微结构改变.结果 伤后各组肺组织NF-κB表达明显高于对照组,并于伤后1～8 h 内快速上升,在8h 出现高峰(P＜0.05).伤后各组逐渐出现肺泡腔变窄,肺泡壁增厚;肺充血,肺间质水肿.电镜下4、 8、 12、 24 h 组逐渐出现线粒体肿胀、溶解.结论 腹部火器伤肠管穿透后肺组织NF-κB表达活性增强,与肺脏组织病理损伤基本一致,NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后继发性肺损伤中具有重要意义.     

腹部火器伤肠管穿透后血液毒素及细菌学研究

目的 探讨腹部火器伤肠管穿透后血液中内毒素、细胞因子的变化及伤道细菌学特点.方法 健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h组,实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用显色基质鲎试剂法检测各组血浆内毒素水平,进行伤道分泌物的定量和定性分析以及血液的细菌培养及菌群分析,采用双抗体夹心ELISA法测定各组动物血清TNF-α、IL-6水平.结果 实验各组的血浆内毒素水平及血清TNF-α、IL-6水平均明显高于对照组(P＜0.05), 血浆内毒素于伤后8h达到高峰,伤后12h仍维持在高峰值水平(P＜0.05);血清TNF-α、IL-6水平均于伤后12h达到高峰.伤后8h,伤道的每克组织细菌数为(5.93±0.78)×105,达到感染的临界值;弹道局部渗出物中均有表面菌群,伤后4h开始各组可检测到肠道菌群,血液菌培养阳性,可检测到表面菌群和肠道菌群.结论 腹部火器伤肠穿孔后发生了脓毒症,其可能参与了伤后机体的病理生理过程.     

腹部火器伤肠管穿透后脓毒症的发生及意义

目的探讨腹部火器伤肠管穿透后脓毒症的发生过程及意义。方法健康长白仔猪42头,随机分为对照组和伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h组（每组6头）,实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用显色基质鲎试剂法检测各组血浆内毒素水平,进行伤道分泌物的定量和定性分析以及血液的细菌培养及菌群分析,采用双抗体夹心ELISA法测定各组动物血清TNF-α、IL-6水平,并观察各个时间点的体温变化。结果实验各组的血浆内毒素水平及血清TNF-α、IL一6水平均明显高于对照组（P〈0．05）,血浆内毒素于伤后8h达到高峰,伤后12h仍维持在高峰值水平（P〈0．05）;血清TNF-α、IL．6水平均于伤后12h达到高峰并与伤后血浆内毒素水平变化一致。伤后动物体温逐渐升高,在伤后12h、24h实验组的平均体温达40℃以上。伤后8h,伤道每克组织细菌数为（5．93±0．78）×10^5,达到感染的临界值;弹道局部渗出物中均有表面菌群,伤后4h开始各组可检测到肠道菌群,血液细菌培养阳性,可检测到表面菌群和肠道菌群。结论腹部火器伤肠穿孔后脓毒症发生时间早,其可能参与了伤后机体的病理生理过程。     

TNF-α和IL-6在腹部肠管火器伤后血清中的变化

目的探讨腹部肠管火器伤后血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-6（IL-6）的动态变化规律,为寻找有效的细胞因子拈抗剂来减轻腹部火器伤后机体的损伤以促进机体康复提供理论依据。方法健康长白仔猪42头随机等分为对照组、伤后1、2、4、8、12h和24h组,每组6只,实验各组建立猪腹部肠管火器伤模型后,采用双抗体夹心ELISA法测定各组动物血清TNF—α、IL-6水平。结果实验组各组动物血清TNF—α、IL-6水平均明显高于对照组（P〈0．05）,TNF—α在伤后12h为（94．36±10．18）ng／L,IL-6在伤后12h为（1218．35±74．00）ng／L,二者均于伤后12h达到高峰。结论TNF—α、1L-6参与了腹部肠管火器伤后机体的病理生理过程,可能是引起腹部肠管火器伤后多器官功能障碍综合征（MODS）的重要因素之一。     

丙戊酸钠对50％TBSAⅢ度烫伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 研究丙戊酸钠(VPA)对致死性烫伤大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 48只雄性SD大鼠分为3组,假烫组:采用37℃水浴,浸泡后腹腔内注射0.25 mL生理盐水,烫伤组:100℃水浴中背部浸泡15 s、腹部浸泡8 s,烫伤后腹腔内注射0.25 mL生理盐水;VPA组:烫伤后腹腔注射VPA治疗(300 mg/kg,溶于0.25 mL生理盐水).分别于伤后3、6 h两个时间点取腹主动脉血,测定血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;然后处死动物取心肌组织,TUNEL方法 检测心肌细胞凋亡率,Western blot测定心肌组织内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达,NO检测试剂盒测定心肌内NO水平、caspase-3活性试剂盒测定心肌内caspase-3活性.结果 与假烫组比较,烫伤组伤后3 h和伤后6 h组CK-MB水平、心肌细胞凋亡率明显上升,caspase-3活性明显增加,iNOS表达水平、NO水平明显增高(均P<0.05);VPA组CK-MB水平、心肌细胞凋亡率与烫伤组比较明显下降,caspase-3活性明显降低,iNOS表达水平、NO水平明显减少,差异有统计学意义(均P<0.05).结论 在致死性烫伤大鼠治疗中,VPA能降低CK-MB水平,减少心肌细胞凋亡,保护心脏功能,可能与降低心肌组织内caspase-3活性、iNOS表达水平、NO水平有关.     

apelin-13对阿霉素诱导的大鼠心肌损伤的保护作用机制研究

目的 研究外源性apelin-13对腹腔内注射阿霉素(ADM)诱导的大鼠心肌损伤的保护作用及相关机制.方法 ADM腹腔内注射建立大鼠心肌损伤模型,40只大鼠随机均分4组:对照组、ADM组、低剂量apelin-13组及高剂量apelin-13组,观察apelin-13对大鼠血浆乳酸脱氢酶(LDH)及心脏功能的影响,并检测心肌细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3表达.结果 ADM组血浆LDH比对照组增高,心脏收缩功能明显抑制(P<0.01).高剂量apelin-13组血浆LDH水平比ADM组明显降低(P<0.01),同时左心室内压最大升降速度(LV+dp/dtmax)、左室最大收缩压(LVESP)增高,左室舒张末期压(LVEDP)降低(均P<0.01);高剂量apelin-13组心肌细胞凋亡指数明显减少(P<0.01);Bax、caspace-3蛋白表达下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显增高(P<0.04).结论 外源性apelin-13对ADM诱导的大鼠心肌损伤的保护作用与抑制心肌细胞凋亡有关.     

重度心肌挫伤心肌细胞中COX-2表达的实验研究

目的观察大鼠重度心肌挫伤后不同时间段挫伤区周围心肌细胞的COX-2阳性染色强度变化与损伤后经过时间之间的关系。方法运用免疫组织化学技术(SABC法),结合计算机彩色图像分析技术观察大鼠实验性重度心肌挫伤后COX-2的染色变化。结果 COX-2参与了重度心肌挫伤后细胞的损伤.结论心肌挫伤后的时序性变化规律使COX-2有可能成为重度心肌挫伤时间推断的客观指标以及生前伤和死后伤的鉴别指标。     

环氧合酶-2在实验性酒精性肝炎中的表达及作用机制

目的观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在大鼠酒精性肝炎(alcoholic hepatitis,AH)中的表达,探讨COX-2与AH的关系.方法随机将24只雄性SD大鼠分为正常组,乙醇组和两组实验组(每组各6只).测定血浆内毒素(Lipopolysaccharide,LPS),肝组织丙二醛(Malondialdehyde,MDA),及血清ALT和AST水平,在光镜下观察肝脏的形态学改变,并应用免疫组织化学技术检测COX-2在酒精性肝炎中的表达.结果乙醇组大鼠LPS和MDA水平均较正常组大鼠明显增高(P＜0.05),而实验组大鼠血清ALT和AST浓度均明显低于乙醇组(P＜0.05).HE染色光镜下见乙醇组大鼠肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润及细胞坏死.免疫组织化学研究表明,在正常组大鼠肝组织中COX-2无表达,其余各组表达阳性,但实验组COX-2表达较乙醇组显著降低(P＜0.05).结论在AH时LPS和MDA诱导COX-2的表达,高表达的COX-2将进一步加重肝损害,应用特异性COX-2抑制剂有可能减轻这种损害.     

七氟烷后处理对大鼠在体心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响

目的研究七氟烷（sevoflurane）后处理对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法 SD雄性大鼠60只,随机分为5组（n=12）：假手术组（P组）、缺血再灌注组（ischemia-reperfusion,IR组）,小、中、大剂量组（S1、S2、S3组）,建立心肌缺血再灌注模型。光镜下观察各组心肌组织病理变化,检测心肌细胞中Bax、Bcl-2蛋白含量、心肌细胞凋亡指数（AI）。结果与P组相比,IR组、各S组心肌Bax与Bcl-2、AI均显著升高（P〈0.05）,Bcl-2/Bax显著降低（P〈0.05）;与IR组相比,各S组Bax与AI均显著降低（P〈0.05）,Bcl-2与Bcl-2/Bax均显著升高（P〈0.05）;S1组与S3组各指标间无明显差异（P〉0.05）;与S1、S3组相比,S2组Bax与AI均显著降低（P〈0.05）,Bcl-2与Bcl-2/Bax均显著升高（P〈0.05）。结论七氟烷后处理可通过调节Bax与Bcl-2的表达,提高Bcl-2/Bax来发挥心肌保护作用,且中剂量组效果更明显。     

P53、Bcl-2和C-myc基因表达在心室重构中的作用

目的探讨心肌缺血再灌注损伤导致心室重构的发生机制。方法建立家兔心肌缺血再灌注模型,采用免疫组化,HE染色,血流动力学检测等技术,观察p53、bcl-2c、-myc基因蛋白表达在心肌重构中的作用。结果(1)p53、bcl-2基因蛋白共同调控心肌细胞凋亡,在IR后4 h达到高峰,与对照组比较有极显著的差异(P<0.01)。影响了血流动力学改变。(2)c-myc基因蛋白在缺血再灌注后4~8 h达到高峰。与对照组比较有极显著的差异(P<0.01)。导致心肌细胞肥大。结论在心肌缺血再灌注过程中p53、bcl-2、c-myc基因蛋白的表达导致了心室的重构。     

热休克蛋白70对H2O2损伤心肌细胞凋亡的保护作用

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)对损伤大鼠心肌细胞凋亡的保护作用.方法体外培养大鼠心肌细胞,免疫组化、DNA Ladder、流式细胞仪、细胞色素C氧化酶比活力的测定、电镜观察等作为检测指标,观察过氧化氢(H2O2)造成心肌细胞损伤,以及HSP70的保护作用.结果温度诱导后HSP70在胞浆中大量表达,损伤组与保护组凋亡率、细胞色素C氧化酶比活力有显著性差异(P<0.01).电镜观察损伤组细胞膜、细胞器损伤明显,并出现凋亡小体.结论 HSP70可延迟细胞凋亡,对心肌细胞具有保护作用.     

卡托普利对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及机制研究

目的:研究卡托普利对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:按随机数字表法将48只雄性C57BL/6J小鼠（6～8周龄）分为4组:对照组（Control组）、卡托普利组（Captopril组）、脂多糖组（LPS组）、卡托普利+脂多糖组（Captopril+LPS组）,每组12只。实验前30 min,Captopril组和Captopril+LPS组预先经腹腔给予卡托普利（50 mg/kg）处理,Control组和LPS组给予等量生理盐水对照。采用腹腔注射脂多糖（LPS,15 mg/kg）的方法制备脓毒症模型（LPS组和Captopril+LPS组）,Control组和Captopril组给予等量生理盐水。各组于制模后12 h采集标本,采用无创尾套测压法测量小鼠平均动脉压（MAP）,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清炎性因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,HE染色观察心肌组织病理形态改变,高分辨小动物超声成像系统检测心功能,Western印迹检测心肌组织磷酸化核因子-κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达。结果:造模后12 h,Captopril组各项指标与Control组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与Control组相比,LPS组MAP下降（q=4.377,P＜0.05）;血清IL-6 、TNF-α水平明显升高（q=4.966、10.440,均P＜0.05）; 左室射血分数（LVEF%）、左室短轴缩短率（LVFS%）水平明显降低（q=6.104、6.390,均P＜0.01）;心肌纤维断裂,间质水肿,炎性细胞浸润加重;心肌组织p-NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（q=12.430,P＜0.001）。和LPS组比较,Captopril+LPS组MAP差异无统计学意义（q=2.617,P＞0.05）;血清IL-6、TNF-α水平下降（q=4.085、5.721,均P＜0.05）; LVEF%、LVFS%水平升高（q=4.366、4.297,均P＜0.05）;心肌损伤病理改变减轻;心肌组织p-NF-κB p65蛋白表达水平下降（q=5.124,P＜0.01）。结论:卡托普利可能通过抑制核因子-κB的活化,减少炎性细胞因子（IL-6和TNF-α）产生,抑制脓毒症引起的心肌炎症,从而减轻脓毒症心肌损伤。     

缺血后处理对缺血再灌注大鼠心脏凋亡相关酶活性的影响

目的 观察缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注造成细胞凋亡及凋亡相关酶活性的影响。方法 采用冠状动脉左前降支结扎法制备大鼠心肌缺血再灌注模型,HE染色观察心肌组织病理学改变,TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡水平,比色法检测心肌组织总抗氧化能力(TAOC)、丙二醛(MDA)水平,分光光度法检测心肌组织Caspase-3、Caspase-9活性。结果 缺血再灌注造成大鼠心肌组织抗氧化能力明显降低(P＜0.01),心肌细胞凋亡明显增加(P＜0.01),Caspase-3、Caspase-9酶活性以及MDA水平明显升高(P＜0.01),缺血后处理能够改善上述表现(P＜0.05)。结论 缺血后处理可通过抑制凋亡相关蛋白酶活性减轻缺血再灌注造成的大鼠心肌细胞损伤。