宫颈上皮内瘤变中不同高危型HPV感染与p53表达的相关性研究

目的 探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)病例中不同高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染时p53的表达情况.方法 60例CIN病例(HC2检测高危型HPV为阳性,宫颈活检组织学证实为CIN)的石蜡标本,采用原位杂交方法检测HPV16/18、HPV31/33,并用免疫组织化学检测其p53蛋白的表达.以20例宫颈鳞状细胞癌为阳性对照,20例正常宫颈为阴性对照.结果 CIN病例中HPV16/18感染组、HPV31/33感染组及其他高危型HPV感染组(HPV35、39、45、51、52、56、58、59、68)p53阳性表达率分别为15.56％、13.75％、17.14％,三者之间差异无显著性(P＜0.05).结论 不同亚型高危型HPV感染的CIN病例,p53表达率相近,推测不同亚型高危型HPV对宿主p53影响可能相同,与宿主p53结合的量可能相同;CIN与不同高危型HPV的相关程度和p53的突变可能无明显相关性.     

高危HPV DNA与E-钙粘素在宫颈鳞癌中的表达及临床意义

目的 探讨浸润性鳞状细胞癌(invasion squamous cell carcinoma of the cervix,ISCC)和宫颈癌前病变:低级别鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)和高级别鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)以及宫颈正常鳞状上皮(normal cervical epithelium,NCE)中高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16/18、31/33 DNA及E-钙粘素(E-cadherin,E-cad)的表达,并分析它们与宫颈鳞癌临床病理特征的关系,进而分析它们在宫颈鳞癌发生发展过程中的作用,为临床早诊早治提供实验室依据.方法 原位杂交法检测73例ISCC,30例HSIL,32例LSIL和21例NCE 中HPV16/18,31/33 DNA的表达;将73例ISCC,30例HSIL,32例LSIL和21例NCE制成组织芯片,、免疫组织化学PV-9000二步法检测E-cad在其中的表达.SPSS13.0版统计软件分析结果.结果 (1)HPV16/18,31/33 DNA的表达在各宫颈病变组间差别有统计学意义(p＜0.01),HPV16/18 DAN阳性的鳞癌患者更容易发生脉管内瘤栓(OR=3.875),HPV31/33 DAN阳性的鳞癌患者临床期别更容易进展(OR=3.5).(2)E-cad在各宫颈病变组间差别有统计学意义(p〈0.01);随着鳞癌中E-cad异常表达阳性率的升高,临床分期增高(p=0.046).(3)随着年龄增大临床期别增高(OR=1.063)结论HPV16/18、31/33的感染与宫颈鳞癌的发生密切相关,并与不良预后有关;E-cad可作为宫颈病变严重程度诊断的客观参考指标.     

p16和p53蛋白在宫颈上皮内瘤变中的表达及与HPV16/18感染的关系

目的 观察p16和p53蛋白在宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达,以及与人乳头瘤病毒(HPV) 16/18感染的关系,探讨其在CIN演变过程中的作用及在CIN分级诊断中的应用价值.方法 应用免疫组化S-P法检测96例CIN中p16和p53蛋白的表达,HPV16/18感染通过基因芯片技术检测.结果 在CIN中p16和p53蛋白均有较高表达,且随CIN级别升高而表达增强,其差异有统计学意义(p16:x2=9.41,P＜0.05;p53:x2=11.13,P＜0.05).p16蛋白表达在HPV16/18阳性组中的阳性率明显高于HPV16/18阴性组,其差异有统计学意义(x2=6.618,P＜0.05),而p53蛋白表达在HPV16/18阳性组与阴性组间比较差异无统计学意义(x2=1.328,P＞ 0.05).结论 在CIN中HPV16/18感染可能引发了p16蛋白的异常表达,进而引起细胞的转化和癌变,而p53蛋白的异常表达可能参与了CIN的发生,但不占主导地位;另外p16和p53蛋白的表达随CIN级别的增加而增加,可作为CIN分级诊断的辅助方法,具有较好的应用价值.     

MDM2和p53在宫颈鳞癌中的表达及与高危型HPV感染的关系

目的 探讨宫颈鳞癌组织中MDM2、p53的表达及与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系.方法 选取实验组30例宫颈鳞癌组织及对照组20例正常宫颈组织,石蜡包埋后,采用免疫组化法检测组织中MDM2、p53蛋白的表达;采用杂交捕获二代实验(HC2)的方法检测实验组及对照组宫颈分泌物中高危型HPV的表达.结果 MDM2、p53在宫颈鳞癌组织中的表达阳性率分别为90％、86.7％,高危型HPV(HR-HPV)在宫颈鳞癌患者宫颈分泌物中的检出率为83.3％;p53在HR-HPV阳性的宫颈鳞癌患者中阳性表达率为92％,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);经Spearman相关分析显示,P53与高危型HPV在宫颈鳞癌中的表达呈正相关(r =0.822,P＜0.05).结论 MDM2、p53与宫颈鳞癌的发生有关;高危型HPV感染可能是p53由抑癌基因转变为癌基因的关键因素.     

HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白在人喉鳞癌中的表达及相关性研究

目的:探讨HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用EnVision免疫组织化学法检测72例喉鳞癌、24例喉癌前病变、15例声带息肉和8例癌周正常喉组织标本中HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白的表达并比较,对喉鳞癌与临床病理因素进行相关性分析.结果:癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和喉鳞癌组织中 HPV16/18-E6蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、6.7%(l/15)、12.5%(3/24)和 37.5%(27/72),p53蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、13.3%(2/15)、25.0%(6/24)和52.8%(38/72),MDM2蛋白的阳性表达率分别为0(0/8)、6.7%(l/15)、37.5%(9/24)和70.8%(51/72),HPV16/18-E6、p53和MDM2蛋白的阳性表达在声带息肉、喉癌前病变与喉鳞癌组之间均有显著性差异(P＜0.05).HPV16/18-E6蛋白和MDM2蛋白的阳性表达在病理Ⅰ～Ⅲ级肿瘤之间呈明显升高趋势,有显著性差异(P＜0.05).HPV16/18-E6蛋白的阳性表达与临床分期和淋巴结转移明显相关(P＜0.05).p53蛋白阳性表达与HPV16/18-E6蛋白、MDM2蛋白阳性表达有显著正相关性(P＜0.05).结论:HPV16/18-E6、MDM2蛋白的过表达和p53的失活与人喉鳞癌的发生发展密切相关.     

宫颈上皮内瘤样病变及宫颈鳞癌组织中细胞凋亡和P53的表达

目的探讨细胞凋亡和P53蛋白在宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和鳞癌中的表达。方法采用DNA末端缺口标记技术和免疫组织化学技术检测15例正常宫颈组织、14例CINⅠ、10例CINⅡ、20例CINⅢ和52例浸润性宫颈鳞癌(ISCC)中细胞凋亡标记指数(A-LI)和增殖细胞核抗原标记指数(PCNA-LI)。结果在正常宫颈组织未检测到凋亡细胞,从CINⅠ→CINⅡ→CINⅢ,A-LI逐渐增加(P＜0.05),ISCC中A-LI明显低于CIN(P＜0.01),PCNA-LI随宫颈癌各级病变的进展逐渐增加(P＜0.05);在正常宫颈和CINⅠ,未检测到P53蛋白表达,在CINⅡ可检测到少量阳性细胞,P53-LI在CINⅢ明显低于ISCC(P＜0.01)。结论细胞凋亡在宫颈癌发生发展中发挥了重要作用,P53蛋白的调节可能阻断了细胞凋亡。     

P16和Ezrin在宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 检测P16和Ezrin在正常宫颈组织(NCE)、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈鳞状细胞癌(SCC)中的表达和意义.方法 收集NCE9例,CIN40例,(其中CINⅠ级10例、CINⅡ级15例、CINⅢ级15例)SCC28例,采用免疫组化SP法检测P16、Ezrin在NCE、CIN及SCC中的表达状态.结果 在NCE、CIN和SCC组中P16的阳性表达率分别为11.1 ％(1/9)、67.5％(27/40)和89.3％(25/28),CSS与CIN、CIN与NCE相比其差异均有显著性(P＜0.01);Ezrin在NCE、CIN和SCC组中的阳性表达率分别为22.2％(2/9)、65％(26/40)和96.4％(27/28),SCC与CIN、CIN与NCE相比其差异均有显著性(P＜0.01).结论 P16蛋白和Ezrin蛋白在NCE、CIN和SCC组织中的阳性表达呈现明显增加,联合检测P16和Ezrin,可能作为SCC的早期诊断、判断恶性潜能及肿瘤进展的指标.     

宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中HPV16／18感染与ki-67、P16^INK4a表达的关系

目的探讨宫颈浸润性鳞状细胞癌（ISCC）、宫颈上皮内瘤变（CIN）中HPV16／18感染与ki-67、P16^INK4a蛋白的表达及其在宫颈鳞癌发生、发展中的作用与相关性,以利于宫颈癌的防治和早期诊断。方法采用免疫组织化学方法对116例宫颈组织标本进行ki-67、P16^INK4a的检测,同时应用原位杂交技术检测HPV16／18。结果（1）HPV原位杂交结果：ISCC组、CIN组、宫颈尖锐湿疣组、分别与正常宫颈组相比,HPV阳性表达有显著性差异,且阳性率从CINI到CINⅢ到ISCC呈上升趋势;（2）免疫组化结果：与正常宫颈组相比,Ki-67、P16^INK4a的阳性表达在ISCC组、CIN组均有显著性差异;（3）在宫颈浸润性鳞癌组织中表达的相互关系：ki-67、P16^INK4a与HPV16／18间的表达具有相关性。结论ki-67、P16^INK4a在宫颈鳞癌中的高度表达与HPV16／18感染有关,它们均可能作为有价值的诊断指标应用于宫颈癌高危人群筛查。     

DNA裂解因子-45在宫颈癌中的表达及与HPV感染的关系

目的 探讨DFF45蛋白在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌(CC)组织中的表达及其临床意义,分析DFF45蛋白的表达和HPV16/18感染的关系.方法 用免疫组化方法检测DFF45蛋白在正常宫颈组织、CIN组织及CC组织中的表达情况.结果 DFF45在正常官颈组织、CIN组织和官颈癌组织中的表达呈递增趋势(x2=18.65,P＜0.01).DFF45蛋白在CIN Ⅰ中的表达低于CINⅡ-Ⅲ(P＜0.01);DFF45的表达改变与临床分期及HPV感染有关(P＜0.05),与年龄、组织类型、分化程度及淋巴结转移无关.结论 DFF45蛋白的表达与HPV的感染密切相关,DFF45和HPV相互协调、相互促进,促进了宫颈癌的发生和进展.DFF45蛋白具有抑制凋亡的作用,有望成为一抗癌基因治疗的作用靶点.     

survivin、bcl-2在宫颈癌和癌前病变组织中的表达及与人乳头瘤病毒16/18感染的相关性

目的 探讨宫颈癌中survivin、bcl-2、人乳头瘤病毒(HPV)16/18的表达及其相关性.方法 采用原位杂交法检测74例宫颈上皮内瘤变(CIN)、81例宫颈癌及20名正常宫颈组织(对照组)中survivin mRNA及HPV16/18 DNA的表达.采用免疫组织化学法检测各组中bcl-2蛋白的表达.结果 survivin mRNA、bcl-2蛋白及HPV16/18在CIN中的表达率分别为44.6%、39.2%和41.0%,在宫颈痛中的表达率分别为77.8%、70.4%和81.2%.3者在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌中的表达呈逐渐增强(P＜0.01).survivin mRNA、bcl-2蛋白在CINⅢ级的阳性表达率高于CIN I～Ⅱ级,在宫颈癌中,Ⅱb～Ⅲ期的阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ a期,低分化组的阳性表达率高于中至高分化组,差异均有统计学意义(均P分别＜0.05,＜0.01).survivin在有淋巴结转移组的阳性率显著高于无转移组(P＜0.01),而bcl-2的表达则与淋巴结转移无关.两者均与宫颈癌的病理类型、肿块类型无关,HPV16/18感染与宫颈癌临床分期、组织学分级及肿块类型无关(P＞0.05).在宫颈癌中survivin与bcl-2的表达与生存率均呈负相关,survivin与bcl-2及survivin与HPV16/18的表达呈正相关.结论 survivin、bcl-2及HPV16/18的异常表达参与了宫颈癌的发生发展,联合survivin、bcl-2、HPV16/18有望为宫颈恶性肿瘤的早期诊断、手术及化疗疗效的评价、预后的判断提供有力的临床指导.     

补肾填精复方对WI38细胞周期及相关基因表达的影响

目的:观察补肾填精中药复方对衰老细胞周期及相关基因表达的影响.方法:选用衰老细胞模型WI38常规培养至33代,加入补肾填精复方含药血清作用至40代,并以流式细胞仪、RT-PCR、wester-blot等方法检测补肾填精含药血清对衰老细胞周期及相关基因表达影响.结果:33代后传代细胞出现明显衰老特征;衰老细胞阻滞于G1期;补肾填精含药血清可以延缓WI38细胞衰老,促进细胞进入细胞周期;补肾填精含药血清可降低细胞衰老相关基因P53、P21、P16转录与表达水平.结论:补肾填精中药复方可以影响细胞周期,减缓细胞衰老,其作用的环节可能与降低细胞衰老相关基因P53、P21、P16表达水平相关.     

Stat3和Stat5在分化型甲状腺癌组织中的表达及意义

目的:研究分化型甲状腺癌(DTC)组织中信号转导和转录激活因子Stat3和Stat5的表达情况及其与甲状腺癌临床病理因素和相关抑癌基因之间的关系,探讨Stat3和Stat5在DTC发生、发展中的作用。方法：应用免疫组织化学 SABC法检测42例DTC［包括38例乳头状癌(PTC)和4例滤泡状癌(FTC)］、30例甲状腺腺瘤（TA）及15例正常甲状腺组织(NTT)中Stat3、Stat5、P53及P21蛋白的表达,比较不同组织中阳性细胞表达率,分析其与DTC临床病理参数的相关性。结果：Stat3和Stat5在DTC组织中的阳性率显著高于TA和NTT(P<0.05) ,二者表达率与DTC病理分型密切相关（r=0.76,P<0.05;r=0.80,P<0.05）;Stat3和Stat5在PTC中的表达率明显低于FTC(P<0.05),且Stat5 的表达率明显高于Stat3,二者呈正相关（r=0.78,P<0.05）。DTC组织中P53蛋白阳性表达率（30.9%）明显高于TA(0%)和NTT（0%）(P<0.05) 。P21蛋白阳性表达率（14.3%）在DTC组织中明显降低。Stat3和Stat5在DTC组织中表达率分别为54.8%和66.7%,明显高于P53表达率（30.9%）,且分别与P53表达率呈正相关(r=0.77,P<0.05;r=0.72,P<0.05),与P21表达率呈负相关（r=－0.87,P<0.05;r=－0.67,P<0.05）。结论：Stat3和Stat5参与DTC病理分型,其异常表达率可能与p53基因的突变、抑癌基因p21的失活有关。Stat3和Stat5表达率的异常增高可能是DTC发生、发展的原因之一。     

深呼吸时P—R间期,P—P间期变化的临床意义

目的：通过深呼吸心电图试验,探讨观察心脏自主神经功能的无创性方法。方法：１０９名健康成人,描记１２导联心电图,在Ⅱ导联上分别描记平卧平静呼吸、深呼吸时心电图。分析Ｐ－Ｒ间期、Ｐ－Ｐ间期的变化。结果：深吸气时Ｐ－Ｒ间期、Ｐ－Ｐ间期均较平静呼吸缩短,深呼气时Ｐ－Ｒ间期、Ｐ－Ｐ间期均较平静呼吸时延长,均Ｐ〈０．０１。结论：呼吸时Ｐ－Ｒ间期、Ｐ－Ｐ间期的变化可为评价心脏自主神经功能提供参考依据。     

食管鳞癌P16、P15基因杂合子缺失的研究

目的：探讨P16和P15基因与ESCC发生发展的关系。方法：应用显微切割、PCR、凝胶电泳、AgNO3染色等技术，检测食管鳞癌（ESCC）和高级别不典型增生中P16、P15基因杂舍子缺失（LOH），对照正常细胞，分析ESCC和高级别不典型增生组织中LOH的变化，并就LOH率与患者的临床病理参数分别进行单因素分析。结果：ESCC组织中的LOH率为29．7％，高级别不典型增生组织中的LOH率为16．5％。应用SPSS软件对LOH率与患者的性别、组织分化、淋巴结转移进行单因素分析，差异均无显著性（P〉0．05）。结论：①从正常鳞状上皮到不典型增生再到癌变的过程中存在基因的异常累积。②P15基因可能与食管鳞癌的发生发展相关。（3）D9S162住点或其附近可能存在与ESCC发展相关的抑癌基因。     

食管上皮内瘤变和癌组织中P15 P16的表达及其生物学意义

目的检测食管上皮内瘤变及鳞癌组织中P15、P16的表达,探讨它们在食管癌发生、发展过程中的意义。方法收集山西省肿瘤医院病理科2003—2005年手术切除的食管鳞癌标本105例,病理复诊证实为食管鳞癌并伴有食管上皮内瘤变和正常食管鳞状上皮组织,用免疫组织化学S-P法检测P15、P16蛋白的表达。结果P15、P16蛋白在鳞癌组织中的表达明显低于食管上皮内瘤变和正常食管鳞状上皮组织(P<0.01)。结论P15、P16蛋白的失表达参与了食管癌的发生发展。     

胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺与胃癌BGC-823细胞系P16、P21蛋白的表达研究

目的：探讨丙谷胺（PGM）抑制胃癌BGC-823细胞增殖及胃泌素的促增殖作用，通过P16及P21蛋白表达的变化，为内分泌途径治疗胃癌提供理论依据，并提供内分泌途径治疗癌症疗效的指标。方法：通过体外细胞培养及对癌细胞进行分组实验研究，应用免疫荧光技术及Northern blot方法测定癌细胞内P16及P21蛋白的表达情况。结果：P16蛋白的表达量随PGM的抑癌作用而升高，两者呈负相关；P21蛋白的表达量与PGM的抑癌作用无明显相关。结论：丙谷胺作为胃癌的一种内分泌治疗手段，可采用P16的表达情况作为其疗效的一个指标。     

P16、P53、PCNA在膀胱癌中的表达及意义

目的：研究P16、P53、PCNA在膀胱癌中表达及其意义。方法：应用免疫组化S-P法检查52例膀胱癌组织中P53、P16、PCNA表达水平。结果：52例膀胱移行细胞癌中P16、P53、PCNA阳性表达率分别为42.3%5、7.6%、59.6%,P16阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为58.8%3、8.5%和22.2%,P53阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为41.2%、57.7%和88.9%,PCNA阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为17.3%3、0.8%和66.7%;随着膀胱癌病理分级上升,P16表达阳性率逐渐下降,P53和PCNA阳性率逐渐上升。结论：P16、P53、PCNA的免疫组化检测具有评估膀胱癌预后的价值。     

计算机和网络之隐私问题探析

计算机和互联网对个人隐私形成很大威胁.介绍计算机和网络威胁个人隐私的几种形式,包括欺骗安装、网虫、电子付费机制以及其它具有潜在隐私破坏性的计算机或网络应用,提出保护隐私的策略,包括健全法律制度,利用网站隐私徽章等.     

丙戊酸对HL-60/HT细胞P27Kip1 、P170表达水平及耐药性的影响

目的 观察丙戊酸对白血病细胞P27Kip1、P170表达水平和耐药性的影响,探讨其可能的作用机制. 方法 递增压力选择培养法建立白血病耐药细胞株HL-60/HT,MTT法检测丙戊酸作用前后细胞的增殖情况及对Ara-C耐药性的改变,流式细胞术测定HL-60细胞、HL-60/HT细胞中P27Kip1、P170的表达和细胞周期. 结果 成功诱导培养建立耐药HL-60/HT细胞,其对HT、VCR、DNR、Ara-C的耐药倍数分别为9.30、5.20、4.91、3.65倍,耐药性能稳定.HL-60/HT细胞P27Kip1表达水平明显低于正常人单个核细胞及HL-60细胞(P<0.05),P170表达水平则明显高于正常人单个核细胞及HL-60细胞(P<0.05). 丙戊酸+Ara-C联合用药对HL-60、HL-60/HT细胞的生长抑制率明显高于单独用药的丙戊酸组和Ara-C组,q值分别为1.37和1.51,说明合用具有协同作用.丙戊酸作用于HL-60、HL-60/HT细胞后,细胞中P27Kip1表达水平、G1期细胞比加药前增加(P<0.05);P170表达水平在加药前后无明显变化(P>0.05). 结论 耐药白血病HL-60/HT细胞中P27Kip1的表达低于敏感细胞HL-60,丙戊酸能抑制HL-60/HT细胞增殖,并降低其对Ara-C的耐药性.作用机制可能与改变P27Kip1的表达、增加G1期细胞含量有关,与P170作用无关.     

P504s、P63和Ck34βE12联合检测在前列腺腺癌鉴别诊断中的应用价值

目的探讨P504s、P63和Ck34βE12联合免疫组化染色在前列腺良、恶性病变鉴别诊断中的价值。方法采用免疫组织化学方法观察P504s、P63、Ck34βE12和PSA在82例不同前列腺疾病中的表达情况。结果在18例前列腺腺癌中P63、Ck34βE12染色均(-),17例P504s呈( );良性前列腺增生及低度前列腺上皮内瘤(PIN)的腺泡和导管周围可见连续的P63和Ck34βE12( ),少数呈间断表达,但P504s染色皆呈(-);PIN,P63和Ck34βE12染色基底细胞呈不连续表达或(-);而增生的腺上皮,部分细胞P504s呈弱( );非典型腺瘤性增生P63和Ck34βE12呈( ),P504s呈(-)。PSA在所有病例中均强阳性表达。结论P504s对判断前列腺腺癌具有重要参考价值;P504s、P63和Ck34βE12联合检测可提高前列腺癌诊断的正确率;PSA对前列腺组织有极高的敏感性,但在良、恶性病变鉴别诊断中意义不大。