肺炎支原体感染对小鼠干扰素γ和白细胞介素-4的影响

目的探讨肺炎支原体(MP)感染对小鼠干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的影响,研究MP感染Th1/Th2免疫应答状况。方法 60只小鼠随机分为实验组与对照组,每组30只。实验组建立MP感染小鼠模型,对照组小鼠滴鼻吸入等量磷酸盐缓冲液,分别在3、5、7、14、21 d取小鼠肺组织,测量肺指数及肺泡灌洗液中IFN-γ和IL-4水平。结果 2组小鼠不同时间点肺指数比较差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组小鼠3 d时肺泡灌洗液中IFN-γ水平较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠3、5、7 d肺泡灌洗液中IL-4水平与对照组比较均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2组小鼠3、5、7 d时IFN-γ/IL-4比值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MP感染后以Th2介导的免疫反应为主,IFN-γ/IL-4失衡是MP感染发病的危险因素之一。     

急性化脓性扁桃体炎证候层次与Th1/Th2漂移相关性研究

目的研究急性化脓性扁桃体炎患者不同证候层次外周血Th1/Th2漂移变化。方法通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证、气分证、营分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4明显升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4继续明显升高,Th1/Th2比值却明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。与卫分证组比较,气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4显著升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th2、IL-4继续明显升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与气分证组比较,营分证组Th1、IFN-γ水平、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著降低,Th2、IL-4显著升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。结论急性化脓性扁桃体炎卫分证、气分证、营分证证候层次变化与Th1/Th2漂移存在相关性。     

Th1/Th2及其细胞因子在脓毒症患者中的改变和临床价值

目的 研究Th1/Th2及其细胞因子在脓毒症患者中的临床价值。方法 选择2017年1月至2019年12月我院治疗的320例脓毒症患者作为观察组,选择同时期300例健康者作为对照组。观察组根据急性生理与慢性健康APACHE-Ⅱ评分分为2个亚组,APACHE-Ⅱ评分20分为非危重亚组(n=192),APACHE-Ⅱ评分≥20分为危重亚组(n=128)。收集两组一般临床资料,比较观察组治疗前、后,与对照组血清中Th1、Th2、IFN-γ、IL-4水平。结果 两组患者的一般临床资料比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗前,观察组Th1占比、Th1/Th2比值、IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值均明显低于对照组,Th2占比、IL-4水平明显高于对照组;治疗后,观察组Th1占比、Th1/Th2比值、IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值均明显提高,但仍低于对照组,Th2占比、IL-4水平明显下降,但仍高于对照组;治疗前,危重亚组Th1占比、Th1/Th2比值、IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值均明显低于非危重亚组,Th2占比、IL-4水平明显高于非危重亚组;治疗后,危重亚组Th1占比、Th1/Th2比值、IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值均明显提高,但仍低于非危重亚组,Th2占比、IL-4水平明显下降,但仍高于非危重亚组。结论 脓毒症患者Th1/Th2比值下降、IFN-γ/IL-4比值下降,且随着病情加重,上述比值下降更明显,机体免疫功能处于抑制状态,治疗后,Th1向Th2转化得以纠正,可根据Th1/Th2比值判断机体的免疫状态。     

过敏性腹泻小鼠大肠黏膜中T细胞亚群的表达与Th1/Th2型细胞因子的关系

目的 检测小鼠过敏性腹泻模型大肠黏膜中T细胞亚群的表达和血清中Th1型细胞因子(IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4)和OVA-IgE水平,探讨腹泻小鼠大肠黏膜中T细胞亚群的表达特点与Th1/Th2型细胞因子的关系.方法 雌性BALB/c小鼠20只随机分成两组,即对照组和实验组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IFN-γ,IL-4及OVA-IgE的水平,取大肠组织HE染色观察大肠组织病理改变,免疫组织化学染色观察T细胞亚群的表达情况.结果 与对照组相比,实验组小鼠非特异性炎症反应明显,上皮不规则排列,腺区存在大量白细胞(WBC)浸润,固有层可见大量嗜酸性粒细胞(EOS)浸润.CD3,CD4,CD8免疫组织化学染色显示,与对照组相比,肠黏膜固有层可见大量CD3+,CD4+,CD8+细胞.实验组IL-4,OVA-IgE分泌水平明显升高,IFN-γ分泌水平和IFN-γ/IL-4比值显著降低(P<0.01).嗜酸粒细胞百分比与CD4+/CD8+比值呈显著正相关(P<0.05).结论 过敏性腹泻小鼠大肠黏膜局部CD4+T细胞亚群明显增加,CD4/CD8细胞比例失衡,并与Th1/Th2型细胞因子向Th2型漂移及EOS浸润程度相关.     

大蒜新素对MCMV感染小鼠脾细胞Th1/Th2类细胞因子水平的影响

目的:探讨大蒜新素对鼠巨细胞病毒(MCMV)感染小鼠脾细胞Th1/Th2类细胞因子水平的影响及其抗MCMV作用机制.方法:复制小鼠巨细胞病毒感染模型,将模型小鼠随机分成大蒜新素治疗组和安慰剂组,于MCMV感染后48 h开始分别给予大蒜新素一般剂量(25 mg·kg-1/d)和等量9.0 g/L氯化钠注射液腹腔注射;另设大蒜新素处理组和空白对照组,不接种病毒,分别给予大蒜新素一般剂量(25 mg·kg-1/d)和等量9.0 g/L氯化钠注射液腹腔注射.用ELISA法检测小鼠脾细胞Th1类细胞因子IL-2、IFNγ和Th2类细胞因子IL-4,IL-10水平.结果:MCMV感染可导致BALB/c小鼠Th1类细胞因子IL-2表达明显下降(P《0.01),Th2类细胞因子IL-10表达显著增高(P《0.01).大蒜新素能诱导正常BALB/c小鼠和MCMV感染模型鼠脾细胞Th1类细胞因子IL-2和IFNγ的表达显著增加(P《0.01),Th2类细胞因子IL-10表达明显下降(P《0.01).结论:大蒜新素能显著上调正常和MCMV感染模型小鼠脾细胞 Th1类细胞因子IL-2和IFNγ的表达,并抑制Th2类细胞因子IL-10的表达,通过诱导和促进特异性Th1优势应答反应来发挥抗CMV效应.     

致病性大肠杆菌胃肠感染小鼠模型血浆Th1、Th2、Th17淋巴细胞因子变化及意义

目的检测小鼠致病性大肠杆菌（enteropathogenic E.coli,EPEC）腹泻模型的外周血血浆中的辅助性T淋巴细胞1、2、17型（Th1、Th2、Th17淋巴细胞）代表因子,探索小鼠胃肠道感染时免疫反应的变化。方法普通健康昆明小鼠40只随机分成生理盐水对照组（20只）和实验组（20只）。实验组EPEC灌胃,建立小鼠感染性腹泻动物模型。对照组生理盐水灌胃。细菌灌胃后24 h取实验组和对照组外周血,离心后取血浆。采用流式液相多重蛋白定量技术（CBA技术）检测血浆中的白介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子（TNF）、伽马干扰素（IFN-γ）、白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）、白介素4（IL-4）、白介素17A（IL-17A）淋巴细胞因子水平。结果实验组小鼠灌胃前白细胞（WBC）[7.10（5.825,8.625）×10^9]较灌胃后WBC[28.85（18.80,38.35）×10^9]差异有统计学意义（P〈0.05）;灌胃细菌24 h后外周血浆中IL-2[2.60（2.33,2.70）ng/L]、IL-6[5.65（3.93,28.35）ng/L]、IL-10[15.40（12.10,18.65）ng/L]、IL-4[2.95（2.70,3.30）ng/L]、IL-17A[2.85（2.53,3.48）ng/L]较对照组升高且差异有统计学意义（P〈0.05）,TNF[11.85（9.38,12.65）ng/L]、IFN-γ[4.50（3.40,10.70）ng/L]细胞因子水平与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 EPEC感染小鼠后IL-2、IL-6、IL-10、IL-4、IL-17A淋巴细胞因子水平改变,Th1/Th2/Th17细胞参与此免疫反应,小鼠体内以Th2细胞介导的体液免疫为主,Th1细胞介导的免疫反应在小鼠模型的炎性反应过程中占非主导地位。     

基因重组IFN-γ对RSV毛细支气管炎Th细胞功能状态的调节作用

目的 :评价基因重组干扰素γ( IFN-γ)对呼吸道合胞病毒感染 Th1/Th2 亚群功能的调节作用。方法 :将 40例 RSV毛细支气管炎患儿随机分为 IFN-γ治疗观察组 2 0例及治疗对照组 2 0例。 1 5例健康婴儿为正常组。用 EL ISA方法检测患儿血清中细胞因子IFN- γ、IL- 4水平。经 IFN- γ治疗后 7～ 1 0 d复查 IFN- γ、IL- 4水平。结果 :与正常组相比RSV毛细支气管炎患儿血清中 IFN- γ、IL- 4水平均有降低 ,其中 IFN- γ水平下降非常明显( P<0 .0 1 ) ,IFN- γ/IL- 4比值降低 ( P<0 .0 5 )。经 IFN- γ治疗后 ,IFN- γ治疗观察组 IFN- γ水平明显升高 ,IFN- γ/IL- 4比值升高 ,IFN- γ治疗观察组及治疗对照组 IL- 4水平均没有明显变化。提示 :婴幼儿 RSV毛细支气管炎患儿存在 Th细胞免疫功能状态紊乱 ,主要表现为Th1功能下降 ;Th2 功能相对增强。经 IFN- γ治疗后 ,IFN- γ/IL- 4比值升高 ,Th1/Th2 失衡得到纠正 ,但未发现 IFN-γ对 IL - 4有明显的抑制作用。     

干预协同刺激分子CD86对生殖道沙眼衣原体感染小鼠妊娠结局的影响

目的 了解小鼠感染沙眼衣原体后的妊娠结局,以及CD86mAb干预治疗后对妊娠结局的影响及与体内Th1型、Th2型细胞因子水平的关系.方法建立小鼠沙眼衣原体生殖道感染模型,合笼受孕后为模型组,受孕后孕4d腹腔注射CD86 mAb100μg作为治疗组,将未受衣原体感染孕鼠作为对照组.孕12d用酶联免疫法检测各组小鼠血清中Th1型(IFN-γ)和Th2型(IL-4)细胞因子的表达水平.结果(①模型组Th1型细胞因子(IFN-γ)上升,较对照组和治疗组差异有统计学意义(P＜0.05),②模型组胚胎吸收率升高,较对照组和治疗组差异有统计学意义(P＜0.05).③3组的受孕情况、胚重、孕期体质量增加量差异无统计学意义.结论 小鼠感染沙眼衣原体后体内Th1细胞因子IFN-γ增加,形成Th1型偏倚,增加了胚胎吸收率;CD86mAb干预可降低Th1型偏倚程度,降低小鼠胚胎吸收率.     

尖锐湿疣患者外周血Th1/Th2淋巴细胞比的改变

目的探讨CA患者Th1/Th2淋巴细胞分布失衡情况及其与发病的相关性。方法采用流式细胞分析技术检测40例CA患者及20例健康志愿者的外周血CD4 T淋巴细胞中胞内细胞因子(IFN-γ、IL-4),并分析Th1/Th2比值在CA发病中的作用。结果CA患者外周血分泌IFN-γ的Th1细胞显著减少(P<0.05),而分泌IL-4的Th2细胞显著增高(P<0.05);Th1/Th2比值降低,与健康对照组相比有显著差异(P<0.01)。结论CA患者存在Th1/Th2淋巴细胞分布失衡情况。外周血中Th1细胞减少,Th2细胞增多并相对占优势。Th1/Th2淋巴细胞平衡在CA发病机制及复发中具有重要作用。     

过敏性紫癜患儿外周血miR-145表达水平及其与Th1/Th2失衡的关系研究

目的探讨微小RNA-145(miR-155)在过敏性紫癜(HSP)患儿血清中的表达水平及其与Th1/Th2失衡的关系。方法选择2017年5月-2019年3月许昌市第二人民医院收治的HSP患儿101例为HSP组,并选择本院同期健康体检儿童107人为对照组。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测血清miR-145水平;利用流式细胞仪检测外周血中Th1细胞、Th2细胞占CD4~+T细胞的比例,并计算Th1/Th2比值;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平;分析HSP患儿血清中miR-145、Th1、Th2、Th1/Th2水平与IFN-γ、IL-4及miR-145表达水平与Th1/Th2比值的相关性。结果 HSP组患儿血清miR-145、IFN-γ表达水平及外周血Th1、Th1/Th2细胞比例明显低于对照组,IL-4水平、Th2细胞比例明显高于健康组,差异均有统计学意义(P均0.05);HSP患儿血清miR-145水平、Th1细胞比例、Th1/Th2比值与IFN-γ水平(r=0.381、0.366、0.445,P均0.05)、Th2细胞比例与IL-4水平(r=0.537,P0.05)、miR-145表达水平与Th1/Th2比值均呈正相关(r=0.566,P0.05),HSP患儿血清miR-145水平、Th1/Th2比值与IL-4水平呈负相关(r=-0.426、-0.395,P均0.05)。结论 HSP患儿血清miR-145水平、Th1/Th2比值均呈低水平,miR-145与Th1/Th2具有一定正相关性,两者可能通过相互影响,从而共同在HSP发病进程中发挥重要作用。     

CD_4~+T细胞在哮喘中的作用

哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的呼吸道慢性炎症性疾患。其发病机制复杂,T淋巴细胞中CD4+T细胞在哮喘的发生发展中起重要作用。目前认为Th1/Th2失衡可导致Th2极化反应,并释放大量细胞因子产生呼吸道慢性炎症;CD4+CD25+调节性T细胞通过细胞接触和分泌细胞因子抑制哮喘的发展;Th17主要是通过分泌细胞因子参与炎性反应。     

T细胞在结核杆菌感染中的研究进展

结核病患者体内由CD4+T细胞分化而来的Th1、Th2和Th17细胞亚群失衡。Th1表达降低,Th2增加。Th17细胞分泌的细胞因子白细胞介素17、白细胞介素23水平升高,为结核病发病的重要机制之一。因此,Th1、Th2和Th17细胞及其相关因子可能为此类疾病的治疗提供新的靶点和途径。     

IFN-γ/TL-4在儿童免疫性血小板减少性紫癜中的表达

目的：分析儿童急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）血中细胞因子IFN-γ/IL-4的含量,从细胞因子水平探索急性ITP患儿Th1/Th2细胞分化趋势,可望揭示其部分发病机理。方法：应用实验研究策略,选择急性ITP患儿发作期组30例,缓解期组28例,于同群体中选择健康儿童20名为对照组,用ELISA法检测血浆IFN-γ和IL-4含量,进行分析比较。结果：①IFN-γ血浆含量发作期组（269.33±13.03）pg/ml明显高于缓解期组（178.84±7.22）pg/ml和对照组（149.26±10.66）pg/m,且缓解期组亦高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01,95%可信区间内不包含1）;②IL-4发作期组（12.34±1.14）pg/ml明显低于缓解期组（21.38±1.36）pg/ml和对照组（26.41±1.53）pg/ml,且缓解期组亦低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01,95%可信区间内不包含1）。结论：血中IFN-γ增高,IL-4降低,显示儿童急性ITP存在明显的Th1优势分化现象。     

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群

目的建立人和小鼠Th1和Th2细胞的检测方法,探讨两者在流式细胞仪检测方面的不同.方法采用PMA和离子霉素共同刺激外周血单个核细胞,观察在不同时间和不同剂量的PMA刺激下外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8表达的变化;采用多色荧光共同标记分析技术检测外周血单个核细胞IL-4和IFN-γ的表达.结果在PMA和离子霉素共同刺激后4 h,人外周血T淋巴细胞表面CD4表达迅速下降,而小鼠T淋巴细胞表面CD4表达仅轻度下降;采用多色分析技术可以有效的检测Th1细胞和Th2细胞;采用CD3、CD8设门分析可以有效的区分人Th细胞;采用CD4设门可以有效区分小鼠Th细胞.结论人Th细胞检测宜采用4色染色分析技术,小鼠Th细胞检测采用3色染色技术即可.     

肺纤维化中细胞因子网络

目前,细胞因子网络在介导炎症及肺纤维化过程中所起的作用日益受到重视。根据分泌细胞因子不同将Th细胞分为I型辅助性T细胞（Th1）和Ⅱ型辅助性T细胞（Th2）两种类型。I型细胞因子具有抗纤维化作用,可抑制成纤维细胞的增殖及纤维的形成。Ⅱ型细胞因子可促进成纤维细胞的增生、导致胶原蛋白合成增加、抑制胶原蛋白的降解。有研究表明,肺纤维化形成过程中存在Th1和Th2细胞因子间的免疫失衡,从而促进了成纤维细胞激活、增生、细胞外基质沉积,最终导致肺纤维化。     

肾综合征出血热患者外周血Th1/Th2水平及意义

目的探讨肾综合征出血热(HFRS)患者外周血Th1/Th2细胞因子的水平及意义。方法采用放射免疫分析法(IRA)测定HFRS患者病程各期IL-2、IFN-γI、L-4I、L-10的水平。结果HFRS患者外周血IL-2、IFN-γI、L-10均见升高(P<0.05或<0.01),以低血压少尿期最为明显,IFN-γ增幅最大,IL-4在轻症组低血压少尿期和重症组发热期稍低于正常水平(P<0.05),其他各期均在正常范围。低血压少尿期IFN-γI、L-10水平轻症组高于重症组,病程前三期Th1/Th2比值均显著增高,以低血压少尿期增高最为明显。结论Th1/Th2平衡偏移引起免疫网络紊乱,免疫平衡偏向Th1类,细胞因子在HFRSV的致病与免疫过程中起重要作用。     

地塞米松对哮喘小鼠气道炎症反应和STAT6表达的影响

目的：研究地塞米松对支气管哮喘小鼠急性气道炎症反应的作用及对信号转导子和转录激活子6（STAT6）表达的影响。方法：用免疫组织化学法检测给予地塞米松后哮喘小鼠肺组织中STAT6的表达。结果：哮喘组小鼠肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、嗜酸粒细胞（EOS）绝对值显著高于对照组（P〈0.01）,上述炎症细胞计数地塞米松组比哮喘组明显减少（P〈0.01）。HE染色示地塞米松组小鼠气道炎症反应程度较哮喘组减轻。STAT6在气道上皮细胞表达,哮喘组气道上皮细胞中STAT6表达较对照组增加,地塞米松组STAT6表达与哮喘组比较明显减少,较对照组增加。支气管上皮细胞STAT6蛋白与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关。结论：地塞米松可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症反应,作用机制可能是通过下调肺脏组织中STAT6蛋白的过度表达,从而抑制依赖于STAT6/IL-4通路的急性气道炎症反应。     

慢性乙型肝炎Th1/Th2失衡分析

目的:探讨慢性乙型肝炎发病过程中Th1/Th2细胞平衡失调的原因. 方法:用CD3和CD28 mAb, LPS分别体外刺激慢性HBV感染者和健康对照者的PBMC,ELISA法检测培养上清液中IL-10, IL-12及IFN-γ的水平. 结果:用mAb诱导刺激PBMC后,慢性HBV感染组IFN-γ和IL-10水平与健康对照组无差异;LPS诱导刺激后,慢性HBV感染组IL-12水平显著低于健康对照组(34±8 vs 77±9, P<0.05),且HBV阳性者IL-10分泌水平显著高于阴性者(975±101 vs 895±97, P<0.05). 结论:慢性HBV感染时Th1/Th2失衡并非T细胞本身缺陷所致,APC功能缺陷可能为Th1/Th2失衡的原因. APC功能缺陷可能与HBV侵犯APC有关.     

阿德福韦酯治疗前后慢性乙型肝炎患者血清中Th1/2型细胞因子水平的变化及其意义

目的：观察阿德福韦酯治疗前后慢性乙型肝炎患者血清中Th1/2型细胞因子水平的变化,探讨阿德福韦酯抗乙型肝炎病毒(HBV) 的免疫效应机制。方法：22例乙型肝炎患者每日服用阿德福韦酯10 mg,于治疗前及治疗12、24周通过三色法流式细胞术检测细胞因子水平、HBV DNA和肝功生化指标。结果：应用阿德福韦酯治疗后,各时相点Th1分泌的细胞因子IL-2、IFN、TNF与Th2细胞分泌的细胞因子IL-4、IL-6、IL-10水平均明显高于治疗前（P<0.05）。治疗前,Th1分泌的细胞因子TNF水平明显高于Th2细胞分泌的细胞因子IL-6及IL-10水平（P<0.05）。治疗后（12及24周末）,Th1分泌的细胞因子水平仍高于Th2分泌的细胞因子水平,但两者比较差异无显著性（P>0.05）。治疗12周时与对照组比较,阿德福韦酯组患者Th1/Th2细胞分泌的细胞因子水平无明显变化;24周时,与对照组比较,IFN、IL-4和IL-6水平明显增加（P<0.05）。结论：阿 德福韦酯在抗乙型肝炎病毒治疗过程中,可调动机体的免疫反应,打破机体的免疫耐受,恢复T细胞的功能。     

溃疡性结肠炎患者Th17和Th1／Th2细胞亚群的研究

目的检测溃疡性结肠炎（Ulcerativecolitis,UC）患者外周血中辅助性T细胞亚群（Th1、Th2和Th17）数量和比例的变化,探讨其在UC发病机制中的作用。方法选择40例UC患者,分离外周血单核细胞（PBMc）,采用流式细胞术（FCM）检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1／Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γIL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并与患儿的病情进行相关性分析。结果UC患者PBMC中IFN-γ＋Th1细胞的数量、IL--γ7＋Th17细胞的数量均高于健康对照组[（27．0±2．9）％,（23．2±1．7）％,P〈O．05;（26．61±2．6）,（11．4±1．2）,P〈0．011;Th1／Th2比值高于健康对照组[（12．8±1．6）,（8．60±1．9）,P〈0．01],Th17细胞的数量与疾病程度呈正相关（P〈0．05,r=0．42）。结论IL-17＋Th17细胞与Th1／Th2比值变化可能参与UC患者的免疫学发病机制。