胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病患者胰腺β细胞及血管内皮细胞功能的影响

目的探讨胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病(T2DM)患者胰腺β细胞及血管内皮细胞功能的影响。方法选取初诊T2DM患者196例,随机分为观察组(n=98)与对照组(n=98)。对照组给予口服降糖药治疗,观察组给予胰岛素强化治疗,即于早、中、晚餐15 min前皮下注射门冬胰岛素,睡前皮下注射甘精胰岛素,总疗程均为8周。于治疗前后观察两组患者的血糖、HbA1c和胰岛素水平,计算胰腺β细胞功能指数(Homa-β)和胰岛素抵抗指数(HomaIR),检测血清一氧化氮(NO)和内皮素(ET),超声测定内皮依赖性血管舒张功能(FMEDD)和非内皮依赖性舒张功能(NIEID)。结果治疗后,两组FBG、2hPPG、HbA1c、Homa-IR、ET水平均降低,Homa-β、NO均增高(P0.05或P0.01);且观察组FBG、2hPPG、HbA1c、Homa-IR、ET水平均低于对照组,Homa-β、NO、FMEDD高于对照组(P0.05),血糖达标时间少于对照组(P0.05)。结论短期速效胰岛素联合长效胰岛素强化治疗初诊T2DM有效控制了血糖水平,保护了胰腺β细胞及血管内皮细胞功能,对控制T2DM进展和并发症的发生具有积极的作用。     

腹腔镜Roux-en-Y吻合术治疗肥胖型和非肥胖型2型糖尿病疗效分析

目的：探讨腹腔镜Roux-en-Y胃旁路手术（LRYGB）治疗肥胖型和非肥胖型2型糖尿病（T2DM）的疗效和疗效差异。方法：回顾性分析我院2010年1月至2012年12月收治的72例行LRYGB的T2DM的临床资料,其中肥胖组42例,非肥胖组30例。结果：两组患者术中均无损伤大血管、肠管等严重并发症,无中转开腹病例。两组患者手术出血量、术后初次下床活动时间、术后排气时间、术后并发症发生率无明显统计学差异（均P〉0.05）;肥胖组手术时间高于非肥胖组（P=0.039）。术前肥胖组与非肥胖组空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（2h PBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹C肽、胰岛素抵抗指数（Homa-IR）、胰岛功能指数（Homa-β）比较无明显统计学差异（均P〉0.05）。术后两组患者FBG、2h PBG、HbA1c、Homa-IR较术前均有所下降,空腹C肽、Homa-β均有所升高（均P〈0.05）。肥胖组术后FBG、2h PBG、空腹C肽、Homa-IR、Homa-β与非肥胖组无明显统计学差异（均P〉0.05）;HbA1c较非肥胖组要低（P〈0.05）。肥胖组临床有效率为92.86%,高于非肥胖组83.33%,但差异不具有统计学意义（X2=1.607,P=0.205）。结论：腹腔镜Roux-en-Y胃旁路手术治疗肥胖型和非肥胖型2型糖尿病短期疗效均较好,长期疗效需待随访。     

初发2型糖尿病患者端粒长度与胰岛功能间关系

目的:探讨初发2型糖尿病患者(T2DM)外周血白细胞端粒长度变化与胰岛功能的关系。方法:选取本院初发T2DM住院患者,随机分为胰岛素强化治疗组(胰岛素组,99例)和口服药物组(98例),检测并比较患者治疗前后空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2h PG)、糖化血红蛋白(GHb A1c),胰岛细胞功能指标包括空腹胰岛素(FINS)及餐后2 h胰岛素(2h INS)水平、β细胞功能稳态模型评估(Homa-β)、胰岛素抵抗指数(Homa-IR)。提取所有患者治疗前后外周血白细胞DNA,采用实时荧光定量PCR测端粒长度,比较治疗前后胰岛β细胞功能变化。70例健康体检者做对照。结果:初发T2DM患者治疗前后对比,两组FPG、2h PG、GHb A1c和Homa-IR显著减低,FINS、2h INS和Homa-β明显增加,但胰岛素组2h INS和Homa-β升高更显著。初发T2DM患者外周血白细胞端粒长度较对照组短,口服药物和强化治疗均能增加端粒长度,以强化治疗为甚,接近对照组水平。以治疗前端粒长度为因变量,以治疗前FPG、FINS、2h INS、GHb A1C、Homa-IR和Homa-β为自变量,进行多元线性回归提示端粒长度仅与治疗前指标中年龄负相关;以治疗前后端粒长度差值为因变量,结果显示Homa-β与治疗前后端粒长度差值呈正相关(r=0.207),即端粒长度延长越明显,Homa-β越高。结论:初发2型糖尿病中胰岛素强化治疗可能是通过增加端粒长度保护β细胞,优于口服降糖药。     

糖尿病肾病患者NTN4、MTHFR、FZD2、AKR1B1基因DNA甲基化水平与危险因素分析

目的探讨NTN4、MTHFR、FZD2、AKR1B1基因DNA甲基化水平与糖尿病肾病（DKD）的关系。方法选择2016年10月至2017年10月杭州市红十字会医院收治的单纯糖尿病（DM）患者20例为DM组;糖尿病肾病患者20例为DKD组。另择同期体检健康者20名作为对照组。检测3组对象的血糖、肌酐、糖化血红蛋白（HbA1C）、BMI、尿微量白蛋白与肌酐比值（UACR）等指标,采用甲基化特异性PCR（MS-PCR）及非甲基化特异性PCR（UMS-PCR）方法检测3组对象NTN4、MTHFR、FZD2、AKR1B1基因DNA甲基化水平,采用ImageJ软件分析MS-PCR条带灰度值（Ｍ）和UMS-PCR条带灰度值（Ｕ）,计算DNA甲基化率[M/（M+U）]并进行比较;对DKD组AKR1B1基因DNA甲基化的危险因素进行相关性分析及多元线性回归分析。结果对照组、DM组、DKD组FZD2基因DNA甲基化率分别为（48.82±11.25）%、（55.25±15.35）%、（77.38±25.26）%,AKR1B1基因DNA甲基化率分别为（33.88±7.77）%、（50.02±9.07）%、（62.14±7.10）%,均DKD组＞DM组＞对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;DKD患者的HbA1C、UACR是AKR1B1基因DNA甲基化的影响因素（β=-0.517、-0.471,均P＜0.05）。3组NTN4、MTHFR基因DNA甲基化率差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论FZD2、AKR1B1基因在血液中的DNA甲基化可能参与了DKD的发病过程。     

二甲双胍联合吡格列酮对肥胖糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用

目的 观察二甲双胍联合吡格列酮对肥胖糖尿病（DM）大鼠胰岛β细胞的保护.方法 腹腔注射链脲佐菌素30mg/kg,制成糖尿病动物模型.50只健康Wistar雄性大鼠随机分为5组：正常对照组和糖尿病组给予等量蒸馏水,二甲双胍治疗组给予300mg·kg-1·d-1溶于蒸馏水中灌胃,吡格列酮治疗组给予10mg·kg-1·d-1溶于蒸馏水中灌胃,二甲双胍＋吡格列酮治疗组给予二甲双胍300mg·kg-1·d-1和吡格列酮10mg·kg-1·d-1溶于蒸馏水中灌胃,干预12周.观察治疗后5组DM大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、血脂、空腹胰岛素水平并进行比较.结果 与正常对照组比较,DM对照组大鼠FPG,FINS,TC,TG,HbA1C及Homa-IR均明显升高（P＜0.01）,Homa-β明显下降（P＜0.01）;二甲双胍组与DM对照组比较,大鼠FPG,FINS,TC,HbA1C及Homa-IR均明显下降（P＜0.01或P＜0.01）,Homa-β明显升高（P＜0.01）,而TG无明显降低（P＞0.05）;吡格列酮与DM对照组比较,大鼠FPG,FINS,TG,HbA1C及Homa-IR均明显下降（P＜0.01）,Homa-β明显升高（P＜0.01）,TC无明显降低（P＞0.05）;二甲双胍组和吡格列酮组FPG,HbA1C均较DM对照组明显降低,但两组间比较差异无显著性（P＞0.05）;吡格列酮组和二甲双胍组比较FINS,Homa-IR明显减低,Homa-β明显升高（P＜0.01）;二甲双胍联合吡格列酮组与吡格列酮组比较,大鼠FPG,FINS,TC,HbA1C及Homa-IR均明显下降（P＜0.05）,Homa-β明显升高（P＜0.01）,差异有统计学意义.结论 盐酸吡格列酮联合二甲双胍对肥胖糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用优于单用上述两种药物.     

β-细胞腺苷三磷酸-敏感性钾通道基因E23K多态性与2型糖尿病关系的Meta分析

目的 采用Meta分析系统评价β-细胞腺苷三磷酸-敏感性钾通道(KCNJ11)基因E23K多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系.方法 用 "KCNJ11、E23K、type 2 diabetes、r5219、polymorphism"等关键词检索PubMed、CNKI和VIP数据库中发表于1996-2009年的文献.选择所有有关KCNJ11基因E23K多态性与T2DM相关性的随机病例对照研究,并用Revman 4.2软件进行统计分析.结果 共纳入19篇符合条件的文献,累计T2DM病例11 806例,对照13 556例.数据合并结果显示,病例组K等位基因频率显著高于对照组,OR=1.18,95%CI(1.11,1.26)(P＜0.01);病例组与对照组的KK/(EE+EK)基因型频率间差异有统计学意义,OR=1.37,95%CI(1.20,1.56)(P＜0.01).结论 KCNJ11基因E23K多态性与T2DM易患性相关,其KK基因型可能是T2DM发病的危险因子.     

膀胱癌尿沉渣RUNX3基因启动子区域CpG岛甲基化状况及意义

目的探讨膀胱癌患者尿沉渣细胞中RUNX3基因启动子CpG岛的甲基化状况及其临床意义。方法收集临床病理确诊39例膀胱癌,采用甲基化特异PCR(MSP)的方法,检测膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣RUNX3基因启动子CpG岛的甲基化异常频率,同时以45例非肿瘤性泌尿系疾病患者及14例健康志愿者作为对照。结果膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣RUNX3基因启动子甲基化阳性率分别为64.1%(25/39)和56.4%(22/39),二者密切相关(r=0.420,P=0.008)。膀胱癌组尿沉渣RUNX3基因启动子甲基化阳性率(64.1%,25/39)显著高于非肿瘤组(6.7%,3/45)(χ2=31.015,P=0.000),非肿瘤组与志愿组间(阳性率为0)并无明显差异(P>0.05);尿沉渣RUNX3基因甲基化对膀胱癌诊断的敏感性为64.1%(25/39),特异性为94.9%(56/59)。浸润性(≥pT2)和表浅性(≤pT1)膀胱癌RUNX3基因甲基化阳性率之间的差异有统计学意义(χ2=10.363,P=0.001)。性别、年龄、病理分级与RUNX3基因甲基化均无明显相关性(均P>0.05)。结论 RUNX3基因启动子异因异常甲基化可能是膀胱癌的早期事件,尿沉渣RUNX3基因启动子异常甲基化可作为非侵入性诊断膀胱癌并且判断其预后的分子标志物。     

抑癌基因RAS启动子甲基化与乳头状甲状腺癌的关系

目的观察抑癌基因RAS在乳头状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,分析其启动子甲基化与肿瘤发生的关系。方法 选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤(对照组,包括20例结节性甲状腺肿,12例甲状腺腺瘤)患者,对2组患者手术获取的标本提取RNA后,反转录为cDNA,进行多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),检测RAS基因的表达情况;运用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测上述组织中RAS基因启动子区甲基化的情况,并对2种抑癌基因甲基化和未甲基化的组织随机进行测序。结果 PTC组患者中,有30例(60%)RAS基因启动子发生甲基化;对照组患者中,有10例(31.3%)RAS基因启动子发生甲基化;PTC组织RAS基因启动子甲基化率均显著高于对照组,差异有统计学意义(χ2=6.46,P<0.05)。乳头状甲状腺癌mRNA的半定量的值为0.56±0.10,对照组mRNA半定量的值为0.67±0.16,乳头状甲状腺癌mRNA的表达明显低于对照组,两者差异具有统计学意义(t=2.83,P<0.05)。经DNA测序证实,RAS基因启动子发生甲基化的其CpG岛的碱基未发生改变,仍为CG;未发生甲基化的,碱基由CG变为TG。结论 PTC患者RAS基因启动子甲基化发生率显著高于良性甲状腺肿瘤患者,而RAS基因mRNA的表达则较良性甲状腺肿瘤降低;推测RAS基因启动子甲基化可能与PTC的发生、发展相关。     

2型糖尿病家系中非糖尿病一级亲的胰岛素抵抗与胰岛β细胞功能

目的:了解2型糖尿病(T2DM)患者的不同糖耐量非糖尿病一级亲的胰岛素抵抗(IR)和胰岛β细胞功能情况.方法:在重庆地区251个具2个以上T2DM患者的家系中选取195例糖调节异常(FIGR组)和232例糖耐量正常(FNGT组)一级亲及161例糖耐量正常配偶(NC组)进行研究.FIGR组又分为单纯空腹血糖受损(iIFG)、单纯糖耐量低减(iIGT)和联合糖调节受损(IFG/IGT)3个亚组.所有对象行75g口服葡萄糖耐量试验,测定血糖、血脂和胰岛素.用Homa-IR评估胰岛素抵抗,处置指数DI1(Homa-β/Homa-IR)和DI2(△I30/△G30/Homa-IR)分别评估β细胞基础和早期胰岛素分泌功能.结果:(1)校正年龄、性别和BMI后,与NC组比较,FNGT组收缩压和Homa-IR增加,DI1降低(P＜0.05);FIGR组血压、血脂、血糖、胰岛素及Homa-IR显著升高,而Homa-β、△I30/△G30、DI1及DI2显著下降(P＜0.01).(2)与iIFG组比较,iIGT和IFG/IGT组OGTT60min、120min血糖和120min胰岛素水平增加(P＜0.01);与iIGT组比较,iIFG和IFG/IGT组Homa-IR更高,Homa-β和DI1更低(P＜0.05);DI2在iIFG、iIGT和IFG/IGT 3组依次降低,IFG/IGT组与前两组比较有显著差别(P＜0.01).结论:T2DM家系中非糖尿病一级亲已存在IR和胰岛β细胞功能紊乱.     

膀胱癌尿沉渣PTEN基因启动子CpG岛异常甲基化研究

目的探讨膀胱癌患者尿沉渣细胞中PTEN基因启动子CpG岛的甲基化状况及其临床意义。方法收集临床病理确诊39例膀胱癌,采用甲基化特异PCR(MSP)的方法,检测膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣PTEN基因启动子CpG岛的甲基化异常频率,同时以45例非肿瘤性泌尿系疾病患者及14例健康志愿者作为对照。结果膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣PTEN基因启动子甲基化阳性率分别为53.8%(21/39)和48.7%(19/39),两者密切相关(r=0.381,P=0.017)。膀胱癌组尿沉渣PTEN基因启动子甲基化阳性率(48.7%,19/39)显著高于非肿瘤组(11.1%,5/45)(2χ=15.37,P=0.000),非肿瘤组与志愿组间(阳性率为0)并无明显差异(P>0.05);尿沉渣PTEN基因甲基化对膀胱癌诊断的敏感性为48.7%(19/39),特异性为91.5%(54/59)。性别、年龄、病理分级及临床分期与PTEN基因甲基化均无明显相关性(P均>0.05)。结论 PTEN基因启动子异因异常甲基化可能是膀胱癌的早期事件,尿沉渣PTEN基因启动子异常甲基化可能是膀胱癌早期诊断分子标志物之一。     

肺癌细胞抑制CD4+T细胞 IFN-γ基因表达的机制研究

目的:研究肺癌细胞能否直接影响CD4+T 细胞干扰素-γ(IFN-γ)基因启动子甲基化水平?方法:ELISA法检测肺癌组(n = 30)及健康对照组(n = 30)血浆IFN-γ水平;免疫磁珠分选两组外周血CD4+T 细胞(n = 8),提取DNA后经亚硫酸氢盐修饰,PCR扩增 IFN-γ基因启动子进行TA克隆测序,测序结果采用生物信息学软件进行分析;建立健康人CD4+T 细胞与肺腺癌细胞株SPC-A1体外Transwell共培养体系(n = 6),并设健康人CD4+T 细胞单独培养为对照组,培养5 d后分别收集CD4+T 细胞?CD4+T 细胞按上述法进行TA克隆测序?同时CD4+T 细胞经anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,ELISA法检测两组上清IFN-γ表达水平,RT-PCR检测CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平?结果:肺癌组血浆IFN-γ水平显著低于健康对照组[(69.30 ± 38.56) pg/ml vs (92.62 ± 34.75) pg/ml,P = 0.017];肺癌组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于健康对照组(84.6% vs 68.6%,P < 0.001);肺癌患者血浆IFN-γ水平与其基因启动子甲基化率呈负相关(r = -0.850 3,P = 0.010 7)?体外Transwell共培养实验中,与对照组相比,实验组CD4+T 细胞anti-CD3?anti-CD28刺激6?24 h,IFN-γ表达水平显著下降[6 h:(14.53 ± 7.12) pg/ml vs (36.14 ± 23.51) pg/ml,24 h:(7.81 ± 4.02) pg/ml vs (24.85 ± 15.58) pg/ml],6 h对照组CD4+T 细胞IFN-γ mRNA表达水平为实验组的2.37倍?实验组CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平显著高于对照组(85.4% vs 70.9%)?结论:肺癌细胞可诱导CD4+T 细胞IFN-γ基因启动子发生高甲基化,进而导致IFN-γ基因表达下调,可能对肺癌患者的免疫抑制起重要作用?     

短期应用胰岛素泵强化治疗初发2型糖尿病随访1年疗效观察

目的:观察短期应用胰岛素泵输注胰岛素(CSⅡ)治疗的初发2型糖尿病患者1年的胰岛β细胞功能的变化.方法:26例空腹血糖＞11.1 mmol/L的初发2型糖尿病患者进行2周的CSⅡ强化治疗并随访1年,对治疗前、治疗后不同时期的FBG,2hBG,HbA1c,胰岛β细胞功能Homa-β及胰岛素抵抗指数Homa-IR的变化进行评估.结果:CSⅡ强化治疗2周后,26例患者的FBG、2hBG、HbA1c水平较治疗前显著下降(P＜0.001);Homa-IR较治疗前下降(P＜0.05),Homa-β较治疗前增高(P＜0.01).随访至12个月时仍有17人(65.38%)维持单纯饮食和运动治疗达良好血糖控制,其Homa-IR及Homa-β与停泵时比较无变化,另有9人(34.62%)血糖控制不佳,比较发现此组患者入选时HbAlc水平、治疗后血糖达标天数及达标时胰岛素用量均较高(P＜0.05).结论:对伴有明显高血糖的初发2型糖尿病患者,短期应用胰岛素泵持续皮下输注胰岛素能改善和/或恢复胰岛β细胞功能,重建饮食和运动治疗对血糖的反应性.     

糖尿病患者应用糖皮质激素后24 h血糖波动监测的意义

目的 观察2型糖尿病患者实施不同类型糖皮质激素治疗后的24 h血糖波动特点,为2型糖尿病患者出现的高血糖进行早期监测和进一步治疗提供依据.方法 选取2014年3月至2016年3月来我院皮肤科、内分泌科、风湿免疫科、血液病科就诊的糖尿病患者共60例,所有入选患者均接受糖皮质激素治疗,按治疗方式的不同分为三组,每组各20例.其中DM1组静滴甲强龙40 mg,DM2组静滴地塞米松10 mg,DM3组一次口服强的松30 mg;所有患者均连续治疗6 d.对三组患者分别行3 d动态血糖监测,比较其日间血糖平均绝对差(MODD)、日内平均血糖波动幅度(MAGE)、全天血糖标准差(SDBG)、平均餐后血糖波动幅度(MPPGE)等动态血糖参数的变化.同时在患者行3 d动态血糖监测的第2天清晨采集患者空腹静脉血,监测其血清中糖化血红蛋白(HbA1c).同时,比较三组患者的血糖漂移情况,包括低血糖时间比率、高血糖时间比率、血糖波动系数.结果 DM2组患者的HbA1c、MAGE、SDBG、MPPGE水平均高于DM3组和DM1组,而DM3组的HbA1c、MAGE、SDBG、MPPGE水平均高于DM1组,差异均有显著统计学意义(P<0.01),但三组患者的MODD水平比较差异无统计学意义(P>0.05);DM1组患者的高血糖时间比率为(17.35±4.27)%,血糖波动系数为(2.52±1.22);DM2组患者的高血糖时间比率为(26.30±6.30)%,血糖波动系数为(3.98±1.57);DM3组患者的高血糖时间比率(20.29±4.03)%、血糖波动系数(3.31±1.17);由此可知DM2组患者的高血糖时间比率、血糖波动系数显著高于DM1组及DM3组,差异均有统计学意义(P<0.05).DM1组、DM2组、DM3组三组患者的低血糖时间比率分别为(2.60±1.42)%、(6.61±2.07)%、(3.87±1.92)%,故低血糖时间比率由低到高依次为DM1组、DM3组、DM2组,其中DM2组患者的低血糖时间比率最高,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 应用糖皮质激素治疗糖尿病患者除全程常规监测HbA1c外,还应动态监测血糖,以便制定个体化治疗方案.     

血清真胰岛素、胰岛素原检测在胰岛素抵抗中的应用

目的:探讨不同糖耐量人群血清真胰岛素(TI)、胰岛素原(PI)变化的特点及其在评价胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗(IR)方面的应用。方法:按空腹血糖与口服葡萄糖耐量试验结果分为糖耐量正常组(NGT)、糖耐量减低组(IGT)及2型糖尿病组(T2DM)各60例,各组应用放射免疫分析(RIA)法分别测定空腹免疫反应性胰岛素(IRI)、TI、PI。采用稳态模式评估法(Homa)计算胰岛β细胞功能指数(Homa-β)和胰岛素抵抗指数(Homa-IR),并进行分析。结果:空腹IRI和TI的变化为IRI值在DM组和IGT组低于NGT组(P<0.05);TI值DM组IGT组>NGT组(P<0.05)。TI/IRI的比值DM组IGT组>NGT组。结论:血清IRI和TI水平均可用于计算胰岛素抵抗,TI/IRI比值是反映β细胞功能的良好指标,特别是临床判断T2DM患者的病情发展和指导药物治疗有重要的临床意义。     

CD4+CD25+调节性T细胞及IL-17与老年糖尿病视网膜病变的相关性研究

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞在老年糖尿病视网膜病变(DR)患者中的水平及意义。方法选取2012年1月至2018年2月在我院治疗的DR患者100例(DR组),同时选取无视网膜病变的单纯糖尿病患者100例作为对照(DM组),检测两组CD4+、CD8+、CD4+CD25+调节性T细胞及IL-17水平。结果 DR组CD4+和CD8+T细胞分别为(26.83±3.22)%和(20.01±3.04)%,明显低于DM组,CD4+CD25+T细胞和IL-17分别为(4.50±1.22)%和(34.49±4.33)ng/m L,明显高于DM组,差异有统计学意义(P <0.05);增殖型DR患者CD4+和CD8+T细胞分别为(25.03±3.11)%和(19.03±3.00)%,明显低于非增殖型DR组,而CD4+CD25+T细胞和IL-17分别为(5.23±1.48)%和(38.82±5.02) ng/m L,明显高于非增殖型DR组(P<0.05); DR患者空腹血糖与CD4+、CD8+、IL-17水平平无明显相关性(P>0.05),空腹血糖与CD4+CD25+T细胞呈负相关(r=-0.169,P=0.017)。结论老年DR患者CD4+和CD8+T细胞水平降低,而CD4+CD25+T细胞水平升高,可能在疾病进展中有重要作用,同时CD4+CD25+T细胞与患者空腹血糖可能有一定的相关性。     

非小细胞肺癌患者血浆氧化应激水平和Klotho启动子甲基化分析

目的：探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者血浆氧化应激损伤水平和Klotho蛋白启动子甲基化状态及临床意义。方法：选择66名在四川省人民医院确诊为NSCLC的患者,另选50名健康人群作为对照组,分别采集其血浆。血浆超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）和过氧化氢酶（catalase,CAT）水平采用试剂盒检测。qPCR和Western blot检测血浆Klotho的表达。Klotho表达量与氧化应激的相关性采用Pearson相关性分析。甲基化特异性PCR（MS-PCR）检测Klotho甲基化水平。CpG岛甲基化率采用焦磷酸盐测序法。结果：相对于对照组[（94.56±16.40） mU/L],观察组SOD含量[（79.86±18.24） mU/L]明显降低（t=4.487,P=0.000）,观察组MDA水平[（2.87±2.26） pg/mL]与对照组[（2.52±1.06） pg/mL]无统计学差异（t=1.675,P=0.097）,观察组CAT水平[（18.50±4.62） U/mg]与对照组[（25.26±3.54） U/mg]相比明显降低（t=8.605,P=0.000）。观察组（0.66±0.16）比对照组（1.04±0.10）血浆Klotho基因（t=14.93,P=0.000）降低;观察组（0.70±0.20）比对照组（1.04±0.10）血浆Klotho蛋白表达（t=10.92,P=0.000）降低,且Klotho蛋白表达量与SOD水平（r=0.768,P=0.000）和CAT水平（r=0.708,P=0.000）呈正相关。观察组Klotho启动子CpG岛甲基化水平升高。结论：Klotho甲基化可能是NSCLC患者血浆氧化应激状态的一个临床标志物。     

2型糖尿病家系中初诊糖尿病患者的胰岛β细胞功能

目的 研究2型糖尿病(T2D)家系中初诊T2D患者的胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗(IR)状况;探讨新诊断T2D人群胰岛β细胞功能与糖代谢的关系.方法 来自T2D家系的初诊T2D患者158例、无糖尿病家族史的正常糖耐量配偶(NC)62例进行75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验.据空腹血糖(FPG)的水平,将T2D分为DM1(FPG＜6.1 mmol/L)、DM2(6.1 mmol/L≤FPG＜7.8 mmol/L)和DM3(FPG≥7.8 mmol/L)3组.用胰岛素抵抗指数(Homa-IR)和胰岛素作用指数(IAI)评估胰岛素敏感性;用3种胰岛素分泌指数及3种相应的葡萄糖处置指数(DI)分别评估基础、早期和糖负荷后的胰岛β细胞功能.结果 ①家系的初诊T2D,随着空腹血糖的升高, Homa-IR逐渐增加,IAI、胰岛素分泌指数和DI进行性下降,两组之间差异均具有统计学意义(P<0 01或0.05);与胰岛素敏感性降低相比,胰岛β细胞功能下降更为明显.②在NC组FPG的变化主要由Homa-IR解释(近60%);而初诊T2D各亚组则主要由Homa-β解释,在DM3组Homa-β可解释的比例高达89.6%.结论 T2D家系的初诊T2D患者存在胰岛素敏感性和胰岛β细胞功能下降,但胰岛β细胞功能降低更加突出,对空腹血糖的影响更大,提示胰岛β细胞功能缺陷可能在T2D的发生发展过程中起的作用更大.     

维吾尔族妇女宫颈病变与RARβ基因启动子甲基化的关系

目的通过对宫颈癌特异性RARβ基因启动子甲基化水平研究,探讨宫颈癌发生与该基因表达的表观遗传学调控的关系。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)、宫颈内上皮瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈炎患者的新鲜组织标本56例,应用Sequenom MassARRAY甲基化DNA定量分析平台,对组织DNA的RARβ基因启动子区CpG位点进行甲基化水平定量分析。结果 RARβ基因启动子区的目的CpG片段含有16个CpG位点,通过Sequenom MassArray(质谱)对单一CpG位点的甲基化定量测试,发现CpG-6、CpG-12.13(联合位点)和CpG-14等4个CpG位点甲基化率在宫颈癌与宫颈炎组之间有显著差异(P<0.05),并且各个CpG位点的甲基化水平变化存在密切相关性(r>0.5,P<0.01)。但是,从整体CpG片段的甲基化水平角度分析,不同宫颈病变组织之间无统计学差异(P>0.05)。结论 RARβ基因启动子区CpG岛的特定CpG位点高甲基化是宫颈癌演进过程的重要标志,可能与维吾尔族宫颈癌的关系比较密切。从表观遗传学角度分析,此种甲基化引起基因转录水平下调,继而导致蛋白质表达缺失。     

延边地区朝鲜族ADP-核糖基化样因子15基因和内向整流通道蛋白J 亚单位11号成员基因的基因单核苷酸多态与2型糖尿病的相关性

[目的]探讨ADP-核糖基化样因子15基因(ARL15)和内向整流通道蛋白J亚单位11号成员基因(KCNJ11)的单核苷酸多态(SNP)位点rs26770、rs5219与延边地区朝鲜族2型糖尿病(T2DM)的相关性.[方法]采用病例对照设计,选择延边地区朝鲜族307例,其中T2DM患者255例、糖耐量正常(NGT)人52例.利用单碱基延伸方法检测rs26770、rs5219的基因型.[结果]在显性遗传模型中,T2DM组KCNJ11基因携带rs5219位点的TT+CT基因型频率显著高于NGT组(P=0.001,OR=2.917, 95%CI:1.531～5.558);2个SNPs联合作用结果显示,T2DM组携带AA-CC和AG-CC联合基因型明显小于NGT组(P=0.008,OR=0.320, 95%CI:0.133～0.770;P=0.012,OR=0.357,95%CI:0.156～0.817).[结论]KCNJ11基因rs5219-T可能是延边地区朝鲜族人群罹患T2DM的易感因子,而携带KCNJ11和ARL15基因SNPs rs26770、rs5219的联合基因型AA-CC和AG-CC可能具有保护健康人群罹患T2DM的作用.     

不同糖代谢人群一相胰岛素分泌状况研究

目的:探讨正常糖耐量(NGT)、空腹血糖受损(IFG)、糖耐量受损(IGT)及新诊断2型糖尿病(T2DM)患者第一时相胰岛素分泌水平差异。方法:NGT11例,IFG10例、IGT19例,新诊断T2DM54例。采用静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)测定第一时相胰岛素分泌水平、血糖、血脂,计算Homa-β、Homa-IR和胰岛素敏感指数(ISI)。结果:10min时4组间胰岛素分泌水平差异无显著性;1、2、4、6、10min时NGT、IFG、IGT各组和T2DM组差异具有显著性;2、4、6min时NGT和IGT组也有显著性差异。2T2DM组0min时血糖水平明显高于另三组,4组血糖高峰均出现于1min,NGT组10min内血糖下降迅速,T2DM组血糖水平下降最迟缓。3Homa-βNGT、IFG、IGT组分别和T2DM组差异具有显著性,4组间Homa-IR和ISI差异无显著性。4HDL水平依葡萄糖代谢的恶化而逐渐降低。结论:NGT、IGT及新诊断T2DM一相胰岛素分泌依次递减,存在明显差异。IVGTT各组胰岛素峰值不随血糖峰值迁移,分泌模式一致,血糖峰值出现于1min,而胰岛素峰值出现于2min。