复合骨在兔腰椎融合过程中相关基因表达调控的影响

目的 观察复合骨即重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)/异体骨不同时间点融合骨组织中BMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法 将新西兰大白兔60只随机分为3组,在L5、L6横突间行后路植骨融合术,分别植入复合骨条、自体骨条及异体骨条,于术后第1、2、3、4、5周取融合标本,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)分析内源性BMP-2和VEGF基因水平的变化.结果 术后第3周,复合骨组BMP-2为(5.3519±1.0384),VEGF为(0.9257±0.2534),均达到峰值且高于异体骨组和自体骨组(P<0.05),之后则缓慢下降.第4周后,内源性BMP-2表达仍保持较高水平,但VEGF的水平与自体骨组和异体骨组差异无统计学意义(P>0.05).结论 复合骨能有效地诱导内源性BMP-2和VEGF的表达,促进了成骨效应.     

不同方法提取石蜡包埋组织DNA的比较分析

目的:比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种提取DNA的方法对DNA质量和回收率的影响,探讨一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法. 方法:选取新疆医科大学第一附属医院2004～2007年手术切除的10%甲醛固定石蜡包埋甲状腺癌组织标本,分别以试剂盒法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳分析. 结果:改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得样本DNA的OD260/OD280比值为(1.82±0.15),改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法为(1.86±0.17),两者比较无明显差异(P>0.05);分别与试剂盒法(1.75±0.14)相比,差异有统计学意义(P<0.01).改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得 DNA产量和质量均高于试剂盒法. 结论:改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯法简单快捷,是较理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法.     

光甘草定的制备方法及药理作用研究进展

光甘草定（Glabridin）足光果甘草（Glycyrrhiza glabra L．）所特有的异黄酮类成分。近年国内外对Glabridin的研究报道较多,此分子在药理实验研究中显示较强的抗氧化、抗动脉粥样硬化、降血脂、降血压、神经保护、增强记忆、抑制黑色素形成、抗肥胖症可抗菌等作用,从而在心脑血管疾病的防治中以及在化妆品领域内显示出良好的研究开发潜力。     

维吾尔族妇女宫颈病变组织中HLA-Ⅰ类抗原、CD3和CD8的表达

目的通过检测维吾尔族妇女子宫颈病变组织中人类白细胞抗原Ⅰ(human leukocyte antigen classⅠ,HLA-Ⅰ)、CD3和CD8分子的表达,探讨子宫颈病变中HLA-Ⅰ类抗原与CD3和CD8分子表达的关系。方法采用免疫组织化学方法检测HLA-Ⅰ蛋白、CD3和CD8分子在慢性子宫颈炎、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和子宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)患者石蜡包埋组织中的表达水平。结果 HLA-Ⅰ蛋白在子宫颈炎、CIN和子宫颈癌组织中的阳性表达率分别为96%、70.3%和50.6%,并且随着子宫颈癌病理分级和临床分期的增加其阳性表达率减少(P0.05)。CD3和CD8分子在子宫颈炎、CIN和子宫颈癌组织中的阳性表达率分别为96%、78.1%、66.7%和96%、84.4%、55.6%;CD8分子在子宫颈病变中的表达趋势与HLA-Ⅰ蛋白表达相似,并且与FIGO分期进展和肿瘤分化程度以及淋巴结转移密切相关(P0.05);HLA-Ⅰ类抗原与CD3在CIN和子宫颈癌中表达呈正相关(r=0.422,P0.001;r=0.421,P0.001),HLA-Ⅰ类抗原与CD8分子在子宫颈病变中的表达呈正相关(r=0.422,P0.001;r=0.410,P0.001)。结论 HLA-Ⅰ类抗原、CD3和CD8分子在子宫颈病变中的表达减少可能与子宫颈癌的发生、发展有关。     

MGMT蛋白在甲状腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O6-methylguanine-DNA methyltransferase, MGMT）在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：用免疫组织化学SP法检测61例甲状腺癌、21例甲状腺良性腺瘤、15例桥本氏甲状腺炎、8例结节性甲状腺肿和12例癌旁正常组织中MGMT蛋白的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果：MGMT在甲状腺癌组织中的表达与正常组织中的表达差异有统计学意义（P＜0.05）。MGMT表达从正常组织（16.67%,10/12）、结节性甲状腺肿（25.00%,2/8）、桥本氏甲状腺炎（60.00%,9/15）、甲状腺腺瘤（52.38%,11/21）到甲状腺癌（60.66%,38/61）中表达水平基本呈上升趋势。在甲状腺乳头状癌与甲状腺滤泡癌的表达差异有统计学意义（P＜0.05）,表达水平随甲状腺癌恶性程度的增加而降低,分别为乳头状癌（72.22%,26/36）、滤泡癌（50.00%,8/16）。MGMT在性别、年龄及民族组中表达差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：MGMT高表达现象可能与甲状腺癌恶性程度有关,可成为候选的临床分子诊断指标。甲状腺癌组织的MGMT蛋白在性别、年龄和民族组表达均无差异,有望成为通用的临床检测指标。     

配伍红花籽油对大鼠嗜铬细胞瘤细胞抗氧化损伤的保护作用

目的研究配伍红花籽油(CSSO)对过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤的影响。方法建立H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤模型用不同浓度的配伍红花籽油(CSSO)进行药物干预,用MTT法和流式细胞技术检测细胞损伤和凋亡情况,倒置荧光显微镜下进行一般形态学观察。结果200μmol.L-1H2O2诱导PC12细胞6h,细胞呈现明显损伤形态,配伍红花籽油(CSSO)0.3～0.5g.L-1处理24h后,其存活率显著增加(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05)。结论CSSO可显著的抑制H2O2诱导PC12细胞损伤,其作用机制可能与细胞内的氧化-抗氧化环节有关。     

维吾尔族宫颈癌患者 Th1／Th2型细胞因子表达水平及临床意义

目的：评估宫颈癌及癌前病变患者免疫水平，进一步探讨维吾尔族宫颈癌患者血浆中Th1／Th2型细胞因子表达水平及临床意义。方法本研究收集宫颈癌、癌前病变（ CIN Ⅲ）患者及对照组外周血标本，使用ELISA法检测血浆中Th1型细胞因子IL－2、IFN－γ及Th2型细胞因子IL－4、IL－10的表达水平，绘制ROC曲线分析四种细胞因子在宫颈癌辅助诊断中的价值。结果与对照组相比，宫颈癌和癌前病变组Th1型细胞因子IL－2、IFN－γ表达量显著降低（P＜0．05），Th2型细胞因子IL－4、IL－10表达量显著升高（P＜0．05）；在宫颈癌组中，IL－10表达量随肿瘤分期逐渐升高（P＜0．05）；维吾尔族宫颈癌患者血浆IL－2表达量较汉族患者显著降低（ P＜0．05）；在区分宫颈癌组与对照组中，IL－2、IFN－γ、IL－4和IL－10的AUC分别为0．979、0．766、0．736和0．903。结论宫颈癌患者细胞免疫水平低下，体内发生Th1／Th2漂移，提示这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一，Th1／Th2型细胞因子的检测对宫颈癌的辅助诊断具有一定参考价值，此外IL－2表达量的下调可能在维吾尔族宫颈癌发生发展过程中起到重要作用。     

维吾尔族妇女宫颈癌患者的免疫状态及其与临床病理因素的关系

目的：利用新疆特有的病例资源,评估维吾尔族妇女宫颈癌患者的免疫水平,探讨宫颈癌患者血浆中白细胞介素（IL-2和IL-10）的表达水平及其与临床病理因素之间的关系。方法：收集宫颈癌50例、癌前病变（CIN Ⅲ）患者20例及对照组（正常或慢性宫颈炎患者）18例的外周血标本,使用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测血浆中细胞因子IL-2和IL-10的表达水平。结果：与对照组相比较,宫颈癌和癌前病变组IL-2的表达水平显著降低（P<0.05）,IL-10的表达水平显著升高（P<0.05）;在宫颈癌组中,IL-10的表达水平随肿瘤分期逐渐升高（P<0.05）;对照组中汉族与维吾尔族人群血浆中IL-2表达水平无显著差异（P>0.05）,宫颈癌组中维吾尔族患者血浆IL-2表达水平较汉族患者显著降低（P<0.05）。结论：宫颈癌患者细胞免疫水平低下,体内发生免疫抑制,提示这可能是宫颈癌细胞发生免疫逃逸的机制之一,IL-2可能在维吾尔族宫颈癌发生发展过程中起到重要作用。     

维吾尔族妇女宫颈病变与RARβ基因启动子甲基化的关系

目的通过对宫颈癌特异性RARβ基因启动子甲基化水平研究,探讨宫颈癌发生与该基因表达的表观遗传学调控的关系。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)、宫颈内上皮瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈炎患者的新鲜组织标本56例,应用Sequenom MassARRAY甲基化DNA定量分析平台,对组织DNA的RARβ基因启动子区CpG位点进行甲基化水平定量分析。结果 RARβ基因启动子区的目的CpG片段含有16个CpG位点,通过Sequenom MassArray(质谱)对单一CpG位点的甲基化定量测试,发现CpG-6、CpG-12.13(联合位点)和CpG-14等4个CpG位点甲基化率在宫颈癌与宫颈炎组之间有显著差异(P<0.05),并且各个CpG位点的甲基化水平变化存在密切相关性(r>0.5,P<0.01)。但是,从整体CpG片段的甲基化水平角度分析,不同宫颈病变组织之间无统计学差异(P>0.05)。结论 RARβ基因启动子区CpG岛的特定CpG位点高甲基化是宫颈癌演进过程的重要标志,可能与维吾尔族宫颈癌的关系比较密切。从表观遗传学角度分析,此种甲基化引起基因转录水平下调,继而导致蛋白质表达缺失。     

维吾尔族妇女宫颈癌人乳头状瘤病毒感染与人类白细胞抗原Ⅰ类基因表达缺失的关系及其意义

目的 研究维吾尔族妇女宫颈癌中人乳头状瘤病毒(HPV)感染和人类白细胞抗原Ⅰ类(HLA-Ⅰ)家族基因HLA-A、B和C表达的关系,探讨HPV感染和HLA-Ⅰ类家族基因表达缺失在宫颈癌演进过程中的作用.方法 收集维吾尔族妇女宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ和宫颈鳞癌患者的新鲜组织标本共78例,提取总RNA,采用半定量RT-PCR方法鉴定HLA-A、B和C基因的mRNA表达水平.提取组织DNA,采用HPV通用引物和HPV分型芯片确定HPV亚型.结果 HLA-A、B和C基因的总体mRNA表达缺失率随着宫颈病变的加重而增加,在宫颈炎组织内为1/12,在CIN及宫颈鳞癌分别占70.0%(14/20)和84.8%(39/46),在恶性程度高的低分化癌组织中高达90.6%(29/32),并与高危型HPV16感染呈正相关(r=0.803,P＜0.01).结论 HLA-Ⅰ类基因的表达缺失是维吾尔族妇女宫颈癌发生的重要标志,而HPV16感染可能是HLA-Ⅰ分子表达缺失的前提条件.