RP—HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度

目的：建立测定血浆中头孢拉定浓度的高效液相色谱法。方法：色谱柱为DiamonsilC18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相：0．05mol／LKH2PO4-乙腈（85：15）；柱温：35℃；流速：1．0ml／min；检测波长：262nm；进样量：20μl。结果：头孢拉定在0．5-40．0μg／ml范围内有良好的线性关系，r=0．9999；血浆中药物最低检测浓度为0．25μg/ml（S／N=3）：提取回收率为75％；血浆中三种浓度回收率分别为（106．0±6．3）％、（103．0±4．6）％、（97．5±1．2）％，日内、日间RSD分别为419％-26％、1．0％及7．9％、3．2％、1．9％。结论：本法操作简单、快捷、专属性强，方法灵敏度和准确度均较高，适用于头孢拉定血药浓度及生物利用度的测定。     

液相色谱-串联质谱法测定尿中乳果糖、甘露醇和乳糖含量

目的建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS／MS）测定人尿中乳果糖、甘露醇和乳糖含量。方法尿样用水和乙腈直接稀释后，以LunaNH2（100×2．0mm，5μm）为分析柱，乙腈-水（80：20，v／v）为流动相，0．3mL／min流速进行色谱分离。采用负离子化电喷雾、多反应监测（MRM）扫描方式进行质谱定量分析，离子通道选择m／z为：甘露醇181．1／88．9，乳果糖和乳糖341．3／160．9，内标353．4／166．9。结果甘露醇、乳果糖、乳糖和内标的保留时间分别为2．9、4．1、4．7和4．7min。在0、1～40μg／mL浓度范围内线性关系良好（r≥0．9980）。最低定量限分别为0．1μg／mL（甘露醇、乳果糖）和0．2μg／mL（乳糖）。日内、日间精密度（CV％）分别为0．60％～4．31％、2．55％～7．71％，准确度分别为86．4％～107．6％、95．9％～102．9％。回收率为84．7％～105．5％。结论该方法的样品处理简单快速，检测专一灵敏、准确可靠，可用于肠通透性评价中甘露醇及乳果糖的含量测定。     

高效液相色谱法测定复方烟酰胺沙星软膏中烟酰胺含量

目的：建立高效液相色谱法测定复方烟酰胺沙星软膏中的烟酰胺的含量。方法：采用ThermoExtend—C18柱（4．6mm×150mm，5μm）；以甲醇-水（30：70）为流动相；检测波长230nm；流速1．0ml／分；柱温：40℃。结果：烟酰胺在10．0～60．0μg／ml浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系，r=0．99995（n=6）；平均回收率为99．95％，RSD％=1．5％（n=6）。结论：方法结果准确，简便，可靠，可用于复方烟酰胺沙星软膏中烟酰胺的含量测定。     

RP-HPLC法测定人血清中水杨酸的浓度

目的：建立测定人血清中水杨酸浓度的方法。方法：采用反相高效液相色谱法，HYPERSIL ODS（200×4．6mm，5μl）色谱柱；流动相：甲醇：1％乙酸（45：55）；流速：0．9ml／min；检测波长：299nm；柱温：35℃。结果：水杨酸在0．51-32．64μg／ml范围内有良好的线性关系，r=0．9999，血清中药物最低检测浓度为0．1μg／ml（S／N=3），提取回收率为90％，血清中三种浓度回收率分别为103．92％、99．68％、99．51％，日内、日间RSD分别为3．9％、1．6％、1．0％及5．9％、3．2％、1．9％。结论：本法操作简单、快捷，方法灵敏度和准确度较高，适用于血药浓度及生物利用度的测定。     

RP-HPLC同时测定苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的血药浓度

目的采用反相高效液相色谱法同时测定苯巴比妥（PB）、苯妥英（PHT）和卡马西平（CBZ）血药浓度。方法色谱柱为Agilent Zorbax 8nm Extend—C18（5μm，4．6mm×150mm），流动相为y（甲醇）：v[v（o．1mol／L乙酸钠）：v（o．05％β环糊精）=32：18]=68：32，柱温为室温，流速为0．8mL／min，检测波长为230nm，进样量为20μL。结果PB、DPH和CBZ分离良好，分离度皆大于1．5；最低检测浓度分别为0．3802、0．1823和0．1444μg／mL；线性范围分别为0．4-60、0．2-30和0．2-30μg／mL；回收率分别为97．04％、96．52％和97．09％；日内和日问相对标准偏差皆小于5．80％。结论本方法简便、快速、重现性好，结果可靠，适用于临床常规检查。     

苦豆子总碱注射液中苦参碱和槐果碱的含量测定

目的用反相液相色谱法测定苦豆子总碱注射液中苦参碱、槐果碱的含量。方法用YMC．packed ODS—A（150mmx4．6mm，5pm）色谱柱。以V（乙腈）：V（0．05mol／LKH2PO3）：V（三乙胺）：12：88：0．18为流动相，紫外检测波长210nm，流速1．0mL／min，柱温为25。C。结果在所确立的色谱条件下，两种生物碱得到很好地分离，标准曲线显示苦参碱、槐果碱分别在5-60μg／mL和2-40μg／mL范围内线性关系良好，平均回收率分别为96．4％和95．2％，RSD分别为2．2％和1．2％。结论测定方法简便、快速、准确，可用于苦豆子总碱注射液中苦参碱、槐果碱的含量测定。     

丙硫乙烟胺抗结核分枝杆菌临床耐药界限的研究

目的通过测定丙硫乙烟胺（Th）对128株临床分离的结核分枝杆菌的最低抑菌浓度（MIC），分析MIC与既往Th的用药史及经过含Th方案治疗的疗效相关性，以期确定Th的临床耐药界限。方法住院的结核病患者128例，留取痰或体液进行结核分枝杆菌培养、药敏试验及MIC测定，并系统观察47例肺结核患者接受Th治疗方案的痰菌阴转率，各组间率的比较用x^2检验。结果（1）既往未接受Th药物治疗的临床分离株中，MIC=2．5μg／mL者占72．5％，MIC≤5．0μg／mL者占77．5％；（2）既往曾接受Th药物治疗的临床分离株中，MIC〉5．0μg／mL者占96．4％；（3）如以MIC≥5．0μg／mL为临床耐药界限。MIC〈5．0μg／mL与MIC≥5．0μg／mL比较，3、6、12个月患者痰菌阴转率分别为53．6％、75．0％、82．1％及≥5．0μg／mL 3、6、12个月患者痰菌阴转率分别为53.6%,75.0%,82.1%及15．8％，31．6％、42．1％，两组比较差异均有非常显著性（P〈0．01）。结论（1）曾接受Th药物治疗的结核病患者分离株MIC显著高于未接受Th治疗的患者，随着用药时间的延长，MIC随之升高；（2）根据MIC与临床疗效分析结果，提示采用MIC≥5．0μg／mL为临床耐药界限为宜；（3）既往曾接受Th药物治疗的结核病患者，应进行Th的药敏试验，并坚持合理、联合用药的原则，防止耐药株的产生。     

HPLC法测定氨磺甲酯的含量

目的建立用外标法测定氨磺甲酯原料含量的简单高效液相色谱方法。方法采用PurospherStarc。色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；规格4．6×250mm；流动相为：磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾6．8g和辛烷磺酸钠1g加水溶解并稀释至1000ml，用磷酸调节pH至33）：乙腈：甲醇（8：1：1）；检测波长240mm；进样20μl，流量1．0ml／min；温度35℃。结果氨磺甲酯在0．80～2．40μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0．9993）；平均回收率为99．2％，回收率的RSD为0．6％。结论本测定方法简便快速，灵敏度高，准确度好，可用于氨磺甲酯原料的含量测定。     

曲咪新乳膏中两种成分的含量测定研究

目的建立高效液相色谱法测定曲咪新乳膏中醋酸曲安奈德及硝酸咪康唑的含量。方法（1）采用C18色谱柱；以甲醇：水（75：25）为流动相；流速1．0mL/min；柱温为室温；检测波长为240nm测定醋酸曲安奈德的含量。（2）采用C18色谱柱；以乙腈：甲醇：0．5％的醋酸铵溶液（42．5：42．5：15）为流动相；流速1．0mL／min；柱温为室温；检测波长为230nm测定硝酸咪康唑的含量。结果醋酸曲安奈德在7．68～38.38μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9996，n=5），平均回收率为99．8％（RSD=0．52％）；硝酸咪康唑在85．10。425．52μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9993，n=5），平均回收率为99．9％（RSD=0．81％）。结论反相高效液相色谱法测定曲咪新乳膏中醋酸曲安奈德及硝酸咪康唑的含量方法简便、灵敏、准确。     

HPLC—MS法测定克拉霉素浓度

目的建立快速、简便的HPLC—MS法测定人血浆中克拉霉素浓度的方法。方法以罗红霉素为内标,采用Shim—packODSC18柱（250mm×2．0mm5m）甲醇-水溶液（含0．1％甲酸）（60：40v／v）为流动相,流速0．2mL／min,柱温30℃。采用质谱电喷雾离子源正源（ESI＋）将样品离子化,选择性离子监涮（SIM）准分子离子峰。结果克拉霉素在0．025～6．4μg／ml范围内线性关系良好（r=0．999）,最低定量限为0．025μg／ml,提取回收率均大干85％,批内与批间RSD均小于15％。结论该方法简单,快速、灵敏度高、专属性强．可较好应用于临床克拉霉素血浆浓度检测。     

HPLC-MS法测定人血浆奥美拉唑的水平

目的建立LC-MS法测定人血浆中奥美拉唑水平。方法采用YMC-Pack ODS柱（150×4．6mm，5μm），柱温40℃；流动相为30mmol／L醋酸铵溶液（含0．5％甲酸，0．02％三氟乙酸）-乙腈（60：40），流速为1．6mL／min，分流比为2：1，约0．53mL/min流入MS检测器；采用电喷雾电离源正离子模式，选择性监测质荷比（m／z）为200．2（奥美拉唑）和198．1（泮托拉唑）的离子峰。血浆样品用乙腈沉淀蛋白后进样。结果奥美拉唑在1．06～2648．00ng／mL浓度范围内线性关系良好，最低定量限为1．06ng/mL，萃取回收率和方法回收率均大于90％，日内、日间精密度均小于10％。结论该方法的血样处理过程简便、灵敏度高，适用于奥美拉唑的药物动力学和生物等效性研究。     

RP-HPLC测定格列齐特缓释片的血药浓度

目的：采用反相高效液相色谱法（RP—HPLC）测定格列齐特缓释片的血药浓度。方法：以ODS C18为固定相,甲醇-0．01M NaH2PO4缓冲液（1．0ml／L磷酸）（60：40）为流动相,紫外检测波长为229nm。结果：在0．0625—8．0000μg／ml浓度范围线性良好,最低检测浓度为0．0625μg／ml。其相对回收率（n=5）大于91．3％,日内差（n=5）及日间差（n=5）RSD分别小于6．9％和6．5％。生物样品稳定性试验变异系数在15％以下。结论：RP—HPLC法简便、快速、灵敏度高,可用于格列齐特缓释片的人体药代动力学研究和生物利用度测定,为临床用药提供依据。     

高效液相色谱法测定大鼠组织样品中马兜铃酸A的含量

目的建立用高效液相色谱法（HPLC）测定大鼠脾虚模型组织与血浆样品中马兜铃酸A含量的方法。方法色谱条件为HypersilODS2柱（4．6mm×250mm,5μm）,柱温30℃,流动相为甲醇：乙腈：水（0．6％冰醋酸,pH=3．60）（30：30：40）,流速为1ml／min,检测波长为250nm,20μl进样。结果空白血浆中马兜铃酸A在0．05～25μg／ml范围内与峰面积线性关系良好（Y=57672X-10065,R^2=0．9994）,提取回收率为83．46％～94．13％,方法回收率为99．67％～106．43％。低、中、高3个浓度的日内精密度RSD分别为6．28％、3．36％、1．88％,日间精密度RSD分别为9．67％、4．27％、4．56％。血浆中马兜铃酸A的最低检测浓度为0．05μg／ml,组织中最低检测浓度为0．31ng／g。结论建立的HPLC法准确、稳定、重复性好、灵敏度高,可应用于大鼠脾虚模型组织和血浆样品中马兜铃酸A的含量测定。     

高效液相色谱法测定氟康唑血药浓度及生物等效性研究

目的测定血浆中氟康唑的浓度，评价试验制剂和对照制剂的生物等效性。方法与服药不同时间内采血，采用高效液相色谱法测定血药浓度。结果试验制剂中氟康唑的峰浓度（Cmax）为（27．314±5．13）μg/mL；达峰时间（Tmax）为（1．75±0．26）h；半衰期[t1／2（Ke）]为（28．84±4．78）h；AUC0→96为（883．55±126．08）μg／ML·h^-1；AUC0→∞为（956．64±137．33）μg/mL·h^-1；对照制剂中氟康唑的Cmax为（26．730±3．47）μg／mL；Tmax为（1．72±0．26）h；t1／2（k0）为（26．90±4．63）h；AUC0→96为（929．92±155．84）μg/mL·h^-1；AUC0→∞为（985．35±162．19）pg／mL·h^-1。结论试验制剂与对照制剂比较其氟康唑的Cmax，Tmax和AUC0→∞均没有显著性的统计学差异。     

HPLC 法测定兔血浆中阿西美辛和吲哚美辛的浓度

目的：建立家兔血浆中阿西美辛和吲哚美辛浓度的测定方法。方法：采用高效液相色谱法,以酮洛芬为内标,色谱柱：Hypersil BDS C18（4．6 mm＆#215;250mm,5μm）,流动相为pH 4．5醋酸盐缓冲液-乙腈-甲醇（50∶40∶10）,流速为0．6 mL/min,柱温为25℃,检测波长为250nm,进样量为20μL。结果：阿西美辛在0．04-2．56μg/mL浓度范围内线性关系良好,平均回收率为89．4％,RSD＝5．2％（ n＝5）;吲哚美辛在0．03-1．92μg/mL浓度范围内线性关系良好,平均回收率为89．7％,RSD＝5．7％（ n＝5）。结论：本法简单、灵敏、结果准确,可用于测定兔血浆中阿西美辛和吲哚美辛的浓度。     

姜酚肟对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用

【目的】探讨姜酚肟对谷氨酸（glutamate，Glu）诱导PC12细胞损伤的保护作用。【方法】体外培养PCI2细胞，建立谷氨酸诱导PC12细胞损伤的模型；采用MTT法检测细胞活力，流式细胞术和Hoechst 33258 DNA染色法检测细胞凋亡。【结果】经5mmol／L的谷氨酸处理24h后，PC12细胞活力比对照组降低，仅为对照组的58．3％。在一定浓度范围内，姜酚肟能保护PC12细胞免受谷氨酸（5mmol／L）的影响，但较高浓度时对细胞有一定的毒性。经不同浓度姜酚肟（3.125、6．25、12．5、25μg／mL）预处理后，细胞活力明显提高，其保护作用随浓度降低而升高，当浓度为6．25μg／mL时效果最好，使PC12细胞的存活率达到75．2％（P〈0．01），浓度为3．125μg／mL时，细胞存活率降为70．2％（P〈0．01）。谷氨酸（5mmol／L）能诱导PCI2细胞凋亡，处理24h后细胞凋亡率为20．1％，经姜酚肟（3．125、6．25、12．5、25μg／mL）预处理后，细胞凋亡率明显降低，分别为3．5％（P〈0．01），2．8％（P〈O．01），9．6％（P〈0．01），17．7％（P〈0．05）。【结论】谷氨酸能诱导PCI2细胞凋亡，较低浓度的姜酚肟能有效保护PC12细胞免受谷氨酸诱导的细胞损伤。其中6．25μg／mL的姜酚肟效果最好。     

高效液相色谱法同时测定复方氨林巴比妥注射液中氨基比林和安替比林的含量

目的：建立同时测定复方氨林巴比妥注射液中氨基比林和安替比林含量的方法。方法：采用HPLC法，C18柱（150mm×6．0mm，5μm）；流动相为甲醇-水（45：55）；检测波长285nm。结果：氨基比林在21．4~214．0μg／ml浓度泡围内线性关系良好（R=0．9999），平均回收率98．6％，RSD=1．53％。安替比林在9．4~94．0μg／ml浓度范围内线性关系良好（r=-0．9999），平均回收率100．7％，RSD=0．85％。结论：所建立的含量测定方法简单、灵敏、准确、重现。     

循环酶法测定血浆同型半胱氨酸的方法学评价

目的：评价测定血浆同型半胱氨酸（HCY）的循环酶方法。方法：血浆氧化型同型半胱氨酸经三-乙-羧乙基膦（TCEP）还原成游离型HCY，基于HCY甲基转移酶（HMTase），S-腺苷同型半胱氨酸水解酶（SAHase）构成的循环酶体系以及脱氢酶-辅酶体系的原理，用自动生化分析仪测定血浆HCY。结果：测定线性范围达1．5μmol／L～50．0μmol／L：批内CV分别为2．1％、1．7％；日间CV分别为3．7％、4．1％，总CV分别为4．9％、5．2％；回收率96．8％-101．3％；本法和高效液相色谱法比较：R^2=0．9737，Y=0．972X＋1．595。t=2．01，P〉0．05，差异无显著性；血氨〈50．0μmol／L，三酰甘油〈11．0mmol／L，抗坏血酸〈10．0mmol／L，胆红素〈500．0μmol／L，血红蛋白〈2．0g／L，谷胱甘肽〈0．05mmol／L时，对结果无明显干扰。结论：本方法具有简便、灵敏等特点，适合血浆HCY的常规和自动化分析。     

二次萃取法测定人血浆中芬太尼浓度

目的探讨高效液相色谱法一紫外二次萃取法测定人血浆中芬太尼浓度的方法。方法本实验采用内标法，以盐酸瑞芬太尼为内标，以Zorbax-CN（250mm×46mm，5μm）为固定相，以含0．015mol／L磷酸氢二钠和0．05mol／L戊烷磺酸钠的乙腈一水溶液（70：30，v／v）为流动相，流速1．5mL／min，紫外检测波长200nm。结果标准曲线在1～100ng／mL范围内线性关系良好忙0．999），最低检测浓度为lng／mL,方法回收率为（91．45±4．55）％，提取回收率为（95．63±4．02）％，日内变异RSD（6．23±2．90）％，日间变异RSD（6．45±4．12恸。结论本方法简便、准确、检测浓度低，能够满足血浆中低浓度芬太尼的测定及临床药代动力学研究的要求。     

肠易激综合征和胶原性结肠炎患者粪便中炎性标志物的检测

目的：与腹痛及腹部不适症状相关的排便习惯改变的长期反复发作是肠易激综合征（IBS）和胶原性结肠炎（CC）的共有症状。该研究旨在明确IBS和CC患排泄物中能否检测到炎性标志物，并探讨此种检测能否作为一种无创性方式用于这些功能紊乱性疾病的鉴别。材料与方法：采集18例CC患、46例IBS患和20例健康对照（HC）的粪便，经处理后留取上清液，采用免疫法测定嗜酸粒细胞蛋白X（EPX）、髓过氧化物酶（MPO）、纤维蛋白溶酶、白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果：与IBS组（中位数0．44μg／g，95％CI0．25～1．8；P〈0．001）和HC组（中位数0．46μg／g，95％CI0．21～1．3；P〈0．001）相比，EPX水平在CC组中有所增加（中位数3．81μg／g，95％CI0．47～16．2）。另外，MPO水平在CC组中也有所增加（中位数11．7μg／g，95％CI2．0～124），显高于IBS患组（中位数1．7μg／g，95％CI0．81～5．2；P〈0．01）和HC组（中位数2．5μg／g，95％CI1．1～6．3；P〈0．05）。