基于体外鼠胚实验评估辅助生殖实验室质量

目的 通过监测体外鼠胚胎培养实验中卵裂率和囊胚率,评估本院新建的生殖胚胎实验室是否符合人类胚胎体外培养要求。方法 采用SPF级昆明系小鼠行体内和体外受精实验,雌鼠通过腹腔注射PMSG 10 U/只,48 h后腹腔注射hCG 10 U/只进行促排卵,促排卵后,体外受精组经手术获得精子和卵子行体外受精培养;体内受精组在雌鼠促排卵后,将雌鼠和雄鼠合笼饲养过夜,第二天清晨处死可见阴栓的雌鼠,手术获取受精原核胚进行培养,观察两组胚胎培养过程中的发育情况。结果 体外受精实验进行20个周期,共获卵946枚,受精率、囊胚率分别为（79.02±4.05）%、（80.12±5.27）%。体内受精实验进行14个周期,共获卵618枚,其受精率、囊胚率分别为（80.65±4.22）%、（81.35±3.06）%,两组间受精率和囊胚率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 通过监测体外鼠胚培养实验中卵裂率和囊胚率评估我院生殖胚胎实验室环境,结果表明符合各项指标质控标准。     

小鼠体外受精胚胎培养在新建IVF实验室质量控制中的作用

目的:利用昆明小白鼠体外受精-胚胎培养技术对我院新建辅助生殖实验室进行IVF启动前质量评估检测.方法:手术获取昆明小白鼠配子,体外受精后培养至第6天,观察其受精率、卵裂率、囊胚形成率.结果:共进行体外受精53周期,获卵1274枚,受精率79.2％,卵裂率96.2％,囊胚形成率81.3％.结论:利用昆明小白鼠体外受精胚胎...     

鼠胚在人类辅助生殖培养环境质量控制的作用研究

目的:利用小鼠体外受精技术对新建辅助生殖实验室进行质量控制的研究.方法:手术获得昆明小白鼠配子,体外受精后培养6d,观察受精率、卵裂率、囊胚率.结果:共进行6个周期的体外受精周期,取卵233枚,受精率85.8%,卵裂率96.0%,2-细胞胚胎囊胚形成率86.5%.结论:用鼠胚对新建辅助生殖胚胎培养环境进行质量控制,结果符合各项标准.     

新建体外受精实验室的鼠胚实验质控和氧气浓度对胚胎体外发育的影响

目的采用鼠胚实验（MEA）检测新建体外受精（IVF）实验室的培养环境和培养体系是否符合辅助生殖技术人类胚胎体外培养的要求,并探讨不同培养环境（O2浓度）对小鼠早期胚胎体外发育的影响。方法利用ICR小鼠进行体内受精和IVF实验,观察不同受精方式来源的早期胚胎的受精及发育情况,并比较不同O2浓度下体内受精/IVF早期胚胎的受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果体内受精组共获卵1387个,受精率、卵裂率和囊胚形成率分别为86.37%、94.74%和91.72%;IVF组共获卵1345个,受精率、卵裂率和囊胚形成率分别为80.67%、94.75%和91.05%。体内受精组的受精率明显高于IVF组（P＜0.05）,但两组卵裂率和囊胚形成率比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。体内受精组中,二气培养（三气培养）的受精率、卵裂率和囊胚形成率分别为87.04%、93.09%和88.19%（85.79%、96.21%和94.75%）,二气培养与三气培养受精率比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但二气培养卵裂率和囊胚形成率均低于三气培养（均P＜0.05）。IVF组的二气和三气培养环境下的鼠胚发育情况与体内受精组一致。结论MEAIVF和体内受精的囊胚形成率均达到了IVF实验室的质控标准。建议IVF实验室进行早期胚胎体外培养时选用三气培养,其可有效减少活性氧对早期胚胎的氧化应激作用,并可提高其发育潜能。     

新建辅助生殖实验室的鼠胚实验报告

目的 探讨用鼠胚实验对新建辅助生殖实验室的培养体系进行评估的可行性.方法 对昆明系小鼠进行体内、体外受精实验,观察常规培养条件下不同受精方式来源小鼠胚胎的发育情况以及不同培养环境对小鼠体外受精胚胎发育的影响,并计算受精率、卵裂率及囊胚率.结果 常规培养条件下,体内受精组的受精率和卵裂率均显著高于体外受精组(P＜0.05),两组囊胚率比较差异无统计学意义(P＞0.05).在体外受精中,三气培养组的卵裂率和囊胚率显著高于两气培养箱组(P＜0.05),两组受精率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小鼠体内、体外受精获得的受精卵均有较高的成胚率,鼠胚培养可对新建辅助生殖实验室的培养体系进行评估.常规培养条件下体内受精胚胎的发育潜能优于体外受精,而体外受精胚胎在三气培养环境下的发育潜能优于两气培养环境.     

精卵孵育时间对胚胎质量的影响

目的 比较体外受精中精卵孵育不同时间(短时与过夜)对胚胎质量的影响.方法 共55个体外受精(IVF)周期常规促排卵,获卵649枚.将116枚卵子作为短时受精组,精卵孵育2 h后将卵子转移至新鲜培养基中;533枚卵子作为常规受精组,精卵孵育18 h;比较两组的受精率、卵裂率及优质胚胎率.结果 缩时受精组的受精率为75.0%、卵裂率为97.7%、优质胚胎率为55.3%,常规受精组分别为73.7%、95.9%、44.6%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),但短时受精组的优质胚胎率高于常规受精组.结论 缩短精卵孵育时间不影响受精及卵裂,相反能提高胚胎质量,从而提高胚胎的种植潜能.     

鼠胚胎培养在辅助生殖实验室质量控制中的应用研究

目的探究鼠胚培养在辅助生殖实验室培养质量控制中的作用。方法利用昆明白鼠进行体内外受精实验,体外受精实验组在小白鼠促排卵后,手术获得配子后进行培养;体内受精实验组在促排卵后合拢交配,手术获取原核胚进行培养。观察并记录两组小鼠胚胎发育情况。结果体内外受精组的受精率分别为(77.64±5.38)%、(79.01±1.24)%,卵裂率分别为(95.48±1.06)%、(92.04±1.01)%,囊胚形成率分别为(81.42±1.13)%、(78.15±0.98)%,两组间差异无统计学意义(P0.05)。结论利用鼠胚实验可建立一套健全、完整的质量控制体系以确保培养环境及系统的可靠性,能为临床诊治提供依据。     

短时IVF与传统IVF临床结果比较

目的探讨短时受精的临床应用价值。方法全部病例接受常规超促排卵治疗获得卵母细胞,根据患者接受体外受精(IVF)的不同方式分为2组:短时受精组(n=35),采用精卵4孔皿混合培养,加精后4 h将卵母细胞转移至分裂期胚胎培养液,共35个周期;传统受精组(n=35),采用传统的IVF方式,加精后18 h拆除卵母细胞外围颗粒,随后将卵母细胞转移至分裂期胚胎培养液行早期胚胎体外培养,共35个周期。分别比较两组MⅡ率、受精率、正常受精率、总卵裂率、双原核(2PN)卵裂率及妊娠率,并进行统计分析。结果短时受精组共获卵母细胞数629枚,MⅡ数577枚,受精数560枚,正常受精数500枚,总卵裂数549枚,2PN卵裂数500枚,临床妊娠18例;传统受精组共获卵母细胞594枚,MⅡ数550枚,受精数523枚,正常受精数463枚,总卵裂数495枚,2PN卵裂数457枚,临床妊娠12例。两组女方年龄差异无统计学意义,受精率、正常受精率、总卵裂率及2PN卵裂率的组间比较差异无统计学意义,妊娠率的组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论加精后4 h拆颗粒的短时IVF与传统IVF相比具有较大的优势,既简便有效,又能获得超出传统IVF的临床效果,短时IVF可应用于常规IVF。     

体外受精-胚胎移植多精受精的发生与妊娠结局的关系

目的研究体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中多精受精对妊娠结局的影响。方法分析595个IVF周期多精受精的发生率,比较多精受精组与非多精受精周期的女方年龄、获卵数、成熟卵率、受精率、卵裂率、可移植胚胎数、优质胚胎数、妊娠率、流产率及活产率。结果 IVF周期多精受精的发生率为3.48%,多精受精组与非多精受精组在成熟卵率、受精率、卵裂率、可移植胚胎数、优质胚胎数、妊娠率、活产率差异均有统计学意义(<0.05)。结论多精受精的发生可能预示较好的IVF妊娠结局。     

不同来源小鼠2-细胞胚胎体外发育情况的比较

目的比较小鼠配子体外授精法与2-细胞胚胎收集法所得鼠胚体外发育情况,探讨适合人类体外受精实验室的质量控制系统。方法采用雌雄小鼠配子体外授精和体内受精收集2-细胞胚胎,同时对2-细胞胚胎在相同条件下进行体外培养,观察胚胎发育情况。结果小鼠配子体外授精法的受精率为82.2%;对两种方法所获2-细胞胚胎进行培养,48 h卵裂率及72 h囊胚形成率均无显著差异。结论体内受精2-细胞胚胎收集法较小鼠配子体外授精法操作简便,是较理想的人类胚胎实验室质控方法。     

早期原核分裂对于胚胎发育潜能预测的研究

目的通过比较移植早期原核与晚期原核分裂胚胎的临床妊娠率和种植率,探讨早期原核分裂与胚胎发育潜能之间的关系。方法回顾性分析05年11月至07年1月在生殖医学中心行体外受精胚胎移植的妇女240例,通过移植不同时期的原核分裂胚胎将其分为早期原核分裂组（143例）,晚期原核分裂组（47例）和混合组（50例）,比较三组的妊娠率和种植率。结果早期原核分裂组的受精率和早卵裂率分别为80．39％和54．16％,而晚期原核分裂组的受精率和早卵裂率分别为71．01％和8．99％,差异具有统计学意义（P〈0．001）。早裂组的妊娠率（47．55％）高于晚裂组的妊娠率（38．30％）,差异具有统计学意义（P〈0．001）。种植率前者为29．72％,高于后者（22．99％）,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论早期原核分裂有更好的妊娠结局,能够预测胚胎发育潜能,评价早期原核分裂是筛选高质量胚胎的一种简单有效、非侵袭性方法。     

序贯培养体系和单一培养体系对人卵母细胞受精和早期胚胎发育的影响

目的：比较在体外受精/卵胞质内单精子显微注射（IVF/ICSI）治疗周期中序贯培养体系和单一培养体系对人类早期胚胎发育的影响，为人类辅助生殖技术中胚胎培养体系的选择和评估提供参考。方法：选取155例行IVF/ICSI助孕的患者，将同一个患者的卵子分为2组，分别在Vitrolife的序贯培养体系G-IVF/G1/G2培养液（序贯培养组）和Irvine的单一培养体系CSCC培养液（单一培养组）中进行体外受精和胚胎培养，观察2组不同培养体系中胚胎受精和胚胎早期发育情况。结果：与单一培养组比较，序贯培养组受精率、双原核（2PN）受精率和多核受精率差异均无统计学意义（P>0.05）。在IVF患者中，序贯培养组和单一培养组的卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率和囊胚形成率比较差异均无统计学意义（P>0.05）；在ICSI患者中，序贯培养组和单一培养组的卵裂率、可用胚胎率和囊胚形成率比较差异均无统计学意义（P>0.05），但序贯培养组优质胚胎率明显高于单一培养组（P=0.015）。在IVF和ICSI患者中，单一培养组第3天胚胎致密化的比例均明显高于序贯培养组（P=0.001）。在序贯培养组中胚胎形态表面光滑均匀，单一培养组中胚胎表面较为粗糙且有颗粒状。结论：G-IVF/G1/G2序贯培养体系和CSCC单一培养体系对人卵母细胞受精和早期胚胎发育的影响无明显差异。     

胚胎早裂联合胚胎发育速度及形态评分在胚胎选择中的应用

目的探讨胚胎早裂联合胚胎发育速度及形态评分对于体外授精／卵母细胞单精子显微注射（IVF／ICSI）周期中胚胎选择的意义。方法IVF／ICSI610周期,随机分为A、B两组。A组（269周期）单以授精后72h（D3）胚胎发育速度及形态评分选择胚胎;B组（341周期）在此基础上联合胚胎早裂情况进行胚胎选择。比较两组的临床妊娠率和单胚着床率;比较B组移植胚胎中有早裂胚胎和无早裂胚胎者的妊娠结局。结果B组临床妊娠率和单胚着床率均高于A组（P〈0．05）;B组移植胚胎中有早裂胚胎者的临床妊娠率和单胚着床率均高于无早裂胚胎者（P〈0．01）。结论与单纯的胚胎发育速度及形态评分比较,胚胎早裂联合胚胎发育速度及形态评分进行胚胎评价可显著改善IVF／ICSI的临床结局。     

胚胎早裂联合胚胎发育速度及形态评分在胚胎选择中的应用

目的 探讨胚胎早裂联合胚胎发育速度及形态评分对于体外授精/卵母细胞单精子显微注射(IVF/ICSI)周期中胚胎选择的意义.方法 IVF/ICSI 610周期,随机分为A、B两组.A组(269周期)单以授精后72 h(D3)胚胎发育速度及形态评分选择胚胎;B组(341周期)在此基础上联合胚胎早裂情况进行胚胎选择.比较两组的临床妊娠率和单胚着床率;比较B组移植胚胎中有早裂胚胎和无早裂胚胎者的妊娠结局.结果 B组临床妊娠率和单胚着床率均高于A组(P<0.05);B组移植胚胎中有早裂胚胎者的临床妊娠率和单胚着床率均高于无早裂胚胎者(P<0.01).结论 与单纯的胚胎发育速度及形态评分比较,胚胎早裂联合胚胎发育速度及形态评分进行胚胎评价可显著改善IVF/ICSI的临床结局.     

不同来源小鼠胚胎培养在辅助生殖实验室质量控制中的应用

目的:利用小鼠胚胎体外培养技术对新建人类辅助生殖实验室进行质量控制,以保证培养体系的可靠性,并比较两种小鼠胚胎培养方法在实验室质量控制中的作用。方法:采用小鼠配子体外授精法和2-细胞胚胎收集法对胚胎进行培养,观察胚胎发育情况。结果:小鼠配子体外授精法的受精率为80.98%,受精卵的卵裂率、优质胚胎率及囊胚形成率分别为90.60%、68.15%、85.93%与收集的体内2-细胞卵胚胎的88.98%、70.33%、83.89%比较无显著性差异,P>0.05。结论:两种不同来源鼠胚培养方法均可作为实验室培养体系检测的评价指标。对于新建的胚胎培养实验室,小鼠配子体外授精法可对IVF的全过程进行检测,更能反映培养体系对胚胎的影响,同时还可熟练IVF的操作技能。     

IVF-ET周期中单原核胚胎的形态学及体外发育潜能

摘 要: 【目的】 探讨IVF-ET周期中单原核(1PN)胚胎形态学及继续体外培养潜能,指导其临床利用价值?【方法】 对受精后16 ~ 18 h观察到的486个1PN胚胎进行体外培养,观察其原核大小?极体及卵裂情况;通过囊胚序贯培养法将其中374个1PN胚胎培养至囊胚期,观察囊胚形成情况?【结果】 374个1PN胚胎共形成囊胚179个(47.86%),其中优质囊胚41个(22.91%)?行囊胚培养的374个1PN胚胎原核直径为(27.64 ± 3.30)μm,大于未达囊胚培养标准的81个胚胎的(26.22 ± 3.38)μm,以及对照组2PN胚胎(24.08 ± 1.85)μm(P 0.05)?IVF来源的1PN胚胎原核直径为(27.80 ± 3.44)μm大于ICSI组(26.77 ± 2.29)μm(P 0.05)均高于后者?不同极体数目(不确定?2PB?1PB)的1PN胚胎间原核大小无统计学差异(P > 0.05),但其优质囊胚率有统计学差异(39.39%,20.00%,17.65%;P < 0.05)?D3评分级别越优?卵裂球数目越多者,其囊胚形成率(P < 0.05)和优质囊胚率(P < 0.05)越高?【结论】 对于IVF来源的1PN(2PB)胚胎,可通过对其形态学和胚胎发育潜能进行初步筛选,冷冻发育良好的1PN囊胚,在无可利用的2PN胚胎情况下,可选择进行移植?     

新建IVF实验室使用前的生物学检测

目的检测新建IVF实验室培养体系的可靠与否。方法采用鼠胚生物学实验(小鼠体外受精和小鼠体内胚的体外培养)和人精子体外存活实验检测IVF实验室的培养体系,并观察鼠胚的体外发育情况和人精子体外存活情况。结果小鼠体外受精实验的平均囊胚形成率低于小鼠体内胚实验组(85.50%vs 90.51%),人精子体外存活实验结果稳定(SMI0.85),受测样品合格。结论上述方法很好地检测了IVF实验室的稳定情况,而小鼠体内胚的体外培养更能准确地检测新的IVF实验室。     

利用废弃胚胎行人原核移植方法的初步建立

 【目的】 探索利用废弃胚胎进行人原核移植的方案?【方法】 收集废弃多原核受精卵117个?用显微操作-电融合的方法构建原核移植重构胚胎?分别比较钙离子浓度0.05 mmol/L(n=39)和0.1 mmol/L(n=58)的两种电融合液以及电压分别为1 800 V/cm(n=58)和2 000 V/cm(n=20)的两种电场条件对重构合子融合率和发育的影响?【结果】 操作成功率70.1%,融合成功率59.8%,得到43个卵裂胚胎,其中23个(53.5%)6细胞以上胚胎?共14个重构胚发育至8细胞或以上,得到3个囊胚?将电压由2 000 V/cm下降到1 800 V/cm,重构胚胎融合率?卵裂率和囊胚率的差异没有统计学意义(P > 0.05),但6-细胞率明显上升(22.2% vs. 60.9%, P < 0.05)?和钙离子浓度为0.05 mmol/L的融合液比较,0.1 mmol/L的融合液融合率明显上升(39.3% vs. 69.0%,P < 0.05),卵裂率?6-细胞率和囊胚率皆无统计学差异(P > 0.05)?【结论】 通过显微操作-电融合的方法,用废弃胚胎重构人核-质异质的胚胎模型,是可行的?经济的?     

体外授精胚胎移植在不孕症治疗中的应用

目的 评价体外授精-胚胎移植（IVF-ET）治疗不孕症的价值。方法 分析在本中心行IVF-ET治疗60例不孕症患者的临床资料。结果 60例不孕症患者进行61个IVF周期治疗,其中10个周期因卵巢反应不良而取消。周期获卵率10.34个,卵子授精率72.5%,卵裂率67%,周期胚胎移植数4.9个。其中14例妊娠,占27.45%。自然流产5例,占35.7%。重度OHSS发生率7.8%。结论 IVF-ET是治疗输卵管因素、子宫内膜异位症、不明原因等不孕症的重要手段,可解除部分不孕症患者终身不孕的痛苦。