基于体外鼠胚实验评估辅助生殖实验室质量

目的 通过监测体外鼠胚胎培养实验中卵裂率和囊胚率,评估本院新建的生殖胚胎实验室是否符合人类胚胎体外培养要求。方法 采用SPF级昆明系小鼠行体内和体外受精实验,雌鼠通过腹腔注射PMSG 10 U/只,48 h后腹腔注射hCG 10 U/只进行促排卵,促排卵后,体外受精组经手术获得精子和卵子行体外受精培养;体内受精组在雌鼠促排卵后,将雌鼠和雄鼠合笼饲养过夜,第二天清晨处死可见阴栓的雌鼠,手术获取受精原核胚进行培养,观察两组胚胎培养过程中的发育情况。结果 体外受精实验进行20个周期,共获卵946枚,受精率、囊胚率分别为（79.02±4.05）%、（80.12±5.27）%。体内受精实验进行14个周期,共获卵618枚,其受精率、囊胚率分别为（80.65±4.22）%、（81.35±3.06）%,两组间受精率和囊胚率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 通过监测体外鼠胚培养实验中卵裂率和囊胚率评估我院生殖胚胎实验室环境,结果表明符合各项指标质控标准。     

鼠胚实验在新建IVF胚胎培养室中的质控研究

目的:利用昆明系小白鼠行体、内外受精技术,对新建IVF胚胎培养室及技术员操作水平进行评估。方法:①手术获得昆明小白鼠雌雄配子,行体外受精;②手术获得昆明小白鼠体内受精胚(原核胚);培养观察两组鼠胚的受精率、卵裂率、囊胚率。结果:共进行24个周期的体外受精实验,取卵938枚,受精率89.87%、卵裂率96.32%、囊胚率95.39%;共进行24个周期的体内受精实验,取卵916枚(包括原核胚),受精率96.29%、卵裂率97.21%、囊胚率93.57%。结论:两组鼠胚实验结果表明,体内受精胚在体外发育更稳定,其对新建IVF胚胎培养室能够进行很好的质量控制;体外受精胚随小鼠批次及饲养环境等不同,在体外培养时其受精率、2-细胞率等会发生波动,但其对技术人员的操作水平能进行更好的评估;两者结果均能对新建胚胎培养室进行各项质控的监测。     

重复促排卵对小鼠卵母细胞发育潜能的影响

目的 研究重复促排卵治疗对成熟卵母细胞的发育潜能的影响,其与卵母细胞生长分化因子-9(GDF-9)表达是否存在关联.方法 实验组昆明小鼠接受孕马血清和人绒毛膜促性腺激素重复3次促排卵,对照组接受3次生理盐水注射,其后两组同时接受促排卵得到成熟卵世细胞并分别进行GDF-9免疫组化染色和体外受精胚胎培养,比较两组卵母细胞GDF-9表达量和受精后卵裂率、囊胚形成率.结果 实验组得到成熟卵母细胞253个,平均每只鼠11.5个;对照组共得到521个,平均每只鼠32.6个(p<0.05);实验组GDF-9染色平均光度(0.60±1.32)×104,积分光度(2.54×2.10)×104;对照组平均光度(4.81±2.65)×104,积分光度(10.20±2.33)×104(P<0.05,P<0.01);实验组成熟卵母细胞受精后卵裂率85.6%,对照组卵裂率88.8%,无统计学差异;实验组囊胚形成率20.8%,明显低于对照组囊胚形成率35.2%(P<0.01).结论 昆明小鼠经重复促排卵后排卵数目减少,GDF-9表达下降,囊胚形成率下降,重复促排卵影响卵母细胞的发育潜能,可能与GDF-9表达改变有关.     

新建体外受精实验室的鼠胚实验质控和氧气浓度对胚胎体外发育的影响

目的采用鼠胚实验（MEA）检测新建体外受精（IVF）实验室的培养环境和培养体系是否符合辅助生殖技术人类胚胎体外培养的要求,并探讨不同培养环境（O2浓度）对小鼠早期胚胎体外发育的影响。方法利用ICR小鼠进行体内受精和IVF实验,观察不同受精方式来源的早期胚胎的受精及发育情况,并比较不同O2浓度下体内受精/IVF早期胚胎的受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果体内受精组共获卵1387个,受精率、卵裂率和囊胚形成率分别为86.37%、94.74%和91.72%;IVF组共获卵1345个,受精率、卵裂率和囊胚形成率分别为80.67%、94.75%和91.05%。体内受精组的受精率明显高于IVF组（P＜0.05）,但两组卵裂率和囊胚形成率比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。体内受精组中,二气培养（三气培养）的受精率、卵裂率和囊胚形成率分别为87.04%、93.09%和88.19%（85.79%、96.21%和94.75%）,二气培养与三气培养受精率比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但二气培养卵裂率和囊胚形成率均低于三气培养（均P＜0.05）。IVF组的二气和三气培养环境下的鼠胚发育情况与体内受精组一致。结论MEAIVF和体内受精的囊胚形成率均达到了IVF实验室的质控标准。建议IVF实验室进行早期胚胎体外培养时选用三气培养,其可有效减少活性氧对早期胚胎的氧化应激作用,并可提高其发育潜能。     

新建辅助生殖实验室的鼠胚实验报告

目的 探讨用鼠胚实验对新建辅助生殖实验室的培养体系进行评估的可行性.方法 对昆明系小鼠进行体内、体外受精实验,观察常规培养条件下不同受精方式来源小鼠胚胎的发育情况以及不同培养环境对小鼠体外受精胚胎发育的影响,并计算受精率、卵裂率及囊胚率.结果 常规培养条件下,体内受精组的受精率和卵裂率均显著高于体外受精组(P＜0.05),两组囊胚率比较差异无统计学意义(P＞0.05).在体外受精中,三气培养组的卵裂率和囊胚率显著高于两气培养箱组(P＜0.05),两组受精率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小鼠体内、体外受精获得的受精卵均有较高的成胚率,鼠胚培养可对新建辅助生殖实验室的培养体系进行评估.常规培养条件下体内受精胚胎的发育潜能优于体外受精,而体外受精胚胎在三气培养环境下的发育潜能优于两气培养环境.     

补肾中药复方对小鼠精子受精能力影响的研究

目的观察补肾中药复方对小鼠精子受精能力的影响,并探讨其作用机制。方法正常雄性小鼠随机分为服用补肾中药复方的实验组和服用生理盐水的对照组,实验组灌服补肾中药复方溶液,1次/d,每次1mL,共14d,对照组同时间灌服等量的生理盐水。于末次灌胃后第7d与超排的雌鼠合笼,合笼成功后处死雌鼠取出受精卵(1cell胚),体内实验观察卵裂率和囊胚生成百分率;体外实验观察体外受精百分率(IVF%)和囊胚率,并观察与精子受精能力相关的完整顶体百分率(AIS%)和顶体酶活性。结果体内实验发现实验组卵裂率(88.3%±1.29%)高于对照组(62.1%±3.48%),P=0.005;体外实验发现实验组IVF%为82.4%±2.89%,高于对照组(62.5%±3.58%),P=0.015;而体内、外实验均发现两组的囊胚生成百分率差异无统计学意义。实验组顶体酶活性为(44.29±5.49)IU,与对照组〔(27.12±4.87)IU〕的差异有统计学意义(P=0.048),两组AIS%差异无统计学意义。结论补肾中药复方能提高小鼠精子的受精能力,其作用机制有可能通过调节顶体酶活性来影响小鼠精子的受精能力。     

短时受精对体外受精结果的影响

目的观察短时受精在IVF中的临床作用。方法35例IVF-ET患者经促排卵治疗后获得的卵子,孵育4~6h,先与精子共培养3h后,一半的卵子经洗涤后去除外周的精子,在新鲜培养液滴中培养,作为实验组,剩余的一半卵子在精子液滴中过夜培养至16~18h,作为对照组。比较两组的受精率(2PN、1PN、≥3PN)、卵裂率、优质胚胎率,进行统计学分析。结果实验组卵子数为219个,受精率、2PN率、1PN率、≥3PN率、卵裂率、优质胚胎率分别为73.6%、59.7%、6.1%、3.6%9、5.7%、43.4%,而对照组卵子数为228个,受精率、2PN率、1PN率、多PN率、卵裂率、优质胚胎率分别为75.9%、58.9%5、.4%、9.8%、96.1%、45.8%。两组的受精率、卵裂率、优质胚胎率及正常受精2PN率差异无显著性(P>0.05),多精受精率差异有显著性(P<0.05)。结论短时受精可作为降低多精受精的一种补充办法。     

新建IVF实验室使用前的生物学检测

目的检测新建IVF实验室培养体系的可靠与否。方法采用鼠胚生物学实验(小鼠体外受精和小鼠体内胚的体外培养)和人精子体外存活实验检测IVF实验室的培养体系,并观察鼠胚的体外发育情况和人精子体外存活情况。结果小鼠体外受精实验的平均囊胚形成率低于小鼠体内胚实验组(85.50%vs 90.51%),人精子体外存活实验结果稳定(SMI0.85),受测样品合格。结论上述方法很好地检测了IVF实验室的稳定情况,而小鼠体内胚的体外培养更能准确地检测新的IVF实验室。     

IVF实验室质控中影响鼠胚体外培养的因素分析

目的 :建立适宜的小鼠胚胎体外培养体系 ,探讨CO2 气体纯度和培养器皿对小鼠胚胎体外发育的影响。 方法 :采用微滴法培养 2 细胞鼠胚 ,以 4～ 8 细胞鼠胚和桑椹胚形成率作为判断培养效果的指标。 结果 :普通纯度CO2 气体培养组的 4～ 8 细胞形成率、桑椹胚形成率分别为 12 .5 %、0 .0 % ,高纯度CO2 气体培养组分别为6 7.6 %、4 4 .1% ,两组比较差异有统计学意义 (P均 <0 .0 0 1)。国产玻璃器皿培养组的 4～ 8 细胞形成率、桑椹胚形成率分别为 74 .4 %、5 3.5 % ,进口一次性器皿培养组分别为 85 .7%、6 2 .8% ,两组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :高纯度CO2 气体更适宜鼠胚的体外发育 ;国产玻璃器皿与进口一次性器皿对鼠胚体外发育的效果相近     

精卵孵育时间对胚胎质量的影响

目的 比较体外受精中精卵孵育不同时间(短时与过夜)对胚胎质量的影响.方法 共55个体外受精(IVF)周期常规促排卵,获卵649枚.将116枚卵子作为短时受精组,精卵孵育2 h后将卵子转移至新鲜培养基中;533枚卵子作为常规受精组,精卵孵育18 h;比较两组的受精率、卵裂率及优质胚胎率.结果 缩时受精组的受精率为75.0%、卵裂率为97.7%、优质胚胎率为55.3%,常规受精组分别为73.7%、95.9%、44.6%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),但短时受精组的优质胚胎率高于常规受精组.结论 缩短精卵孵育时间不影响受精及卵裂,相反能提高胚胎质量,从而提高胚胎的种植潜能.     

纳米碳在cN_0期甲状腺癌手术中对甲状旁腺及喉返神经的保护作用研究

目的研究纳米碳在c N0期甲状腺癌手术中对于甲状旁腺及喉返神经的保护作用。方法将2012年5月-2013年10月期间在我院接受治疗的59例c N0期甲状腺癌患者随机分为两组:未使用纳米碳手术组(对照组)29例,使用纳米碳手术组(实验组)30例。两组手术方式均为甲状腺全切除术+患侧中央组(Ⅵ区)淋巴结清扫术。比较两组患者术后喉返神经及甲状旁腺损伤发生情况。结果术后随访1年,实验组术后暂时性、永久性甲状旁腺损伤和暂时性喉返神经损伤率分别为:10.00%、3.33%、6.67%;对照组术后暂时性、永久性甲状旁腺损伤和暂时性喉返神经损伤率分别为:31.03%、20.69%、27.59%,差异有统计学意义(P0.05)。结论 c N0期甲状腺癌患者手术中应用纳米碳可有效保护甲状旁腺和喉返神经。     

短时受精在体外受精的临床应用

目的：探讨短时受精与过夜受精对胚胎质量的影响。方法：80例体外受精(IVF)周期,常规促排卵获取卵母细胞。根据患者接受体外受精的方式不同分为两组：短时受精组40个周期(实验组),精卵孵育5 h;常规受精组40个周期(对照组),精卵孵育16～18 h;比较两组的正常受精率、卵裂率、优质胚胎率及妊娠率。结果：短时受精组的正...     

团体认知护理模式对老年精神障碍伴糖尿病患者血糖水平的影响

目的研究团体认知护理模式对老年精神障碍伴糖尿病患者血糖水平的影响。方法选择2014年4月‐2015年4月在该院住院治疗的72例老年精神障碍伴糖尿病患者作为研究对象,随机分为两组,对照组采用常规护理模式进行护理,实验组采用团体认识护理模式进行护理。比较两组护理前后患者血糖控制情况。结果实验组进行团体认知护理模式后患者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2h PG)及糖化血红蛋白(Hb A1c)分别为(6.7±1.2)mmol/L、(8.0±0.7)mmol/L及(6.8±1.4)%,显著低于护理干预前和对照组干预后,差异具有统计学意义(P0.05)。结论团体认知护理模式可有效控制老年精神障碍伴糖尿病患者的血糖水平,临床应用价值较高,值得推广。     

腹腔镜与经耻骨后前列腺癌根治术的临床疗效对比研究

目的探讨腹腔镜与经耻骨后前列腺癌根治术的临床疗效。方法选取2014年1月至2015年6月在该院泌尿外科行前列腺癌根治术的患者100例,依照手术方式的不同分为实验组和对照组,其中实验组51例给予腹腔镜下前列腺癌根治术,对照组49例给予经耻骨后前列腺癌根治术,分别比较两组患者术后一般情况。结果实验组的手术时间为(340.4±126.6)min,对照组为(180.6±82.4) min,比较差异有统计学意义(P 0.05);实验组术中出血量为(766.2±653.1) ml,对照组为(1 354.4±972.4) ml,两组比较差异有统计学意义(P 0.05);实验组的住院时间为(14.9±7.4) d,对照组为(24.3±8.7)d,两者比较差异有统计学意义(P 0.05);两组留置导尿时间相比较,差异无统计学意义(P0.05)。两组患者在尿失禁、尿漏、吻合口狭窄及勃起功能障碍等并发症发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。术后随访2年,两组患者的生化复发率和完全控尿率相比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论腹腔镜前列腺癌根治术术中出血量少、微创、术后易恢复,且与经耻骨后前列腺癌根治术疗效相似,值得在临床上大力推荐。     

鼠胚实验在新建胚胎培养实验室质量控制中的作用

目的采用鼠胚实验(mouse embryo assay,MEA)检测新建的胚胎培养实验室的培养体系是否符合人类胚胎体外培养的要求。方法采用配子体外授精法和收集2细胞胚胎培养法进行实验。在胚胎体外培养的过程中定时对胚胎的发育状况进行观察并拍照记录。结果配子体外受精法的囊胚形成率为90.84%±7.09%。收集2细胞胚胎培养法的囊胚形成率为91.17%±6.97%。两种方法的囊胚形成率之间差异无显著性。结论配子体外授精法和收集2细胞胚胎培养法均可作为新建胚胎培养实验室的质量控制方法。     

常规M受精失败后转ICSI与直接ICSI的临床结局比较

目的 探讨常规体外受精(IVF)-胚胎移植受精失败后再次助孕治疗转卵泡浆内单精子注射(ICSI)的临床效果.方法 自2007年1月至2007年12月对27例因女方输卵管因素行常规IVF受精失败的患者再次助孕治疗转为ICSI(A组),并与同期57例因男方因素而用射出精液直接行ICSI(B组)进行临床结局的比较.结果 A组ICSI前、后的受精率分别为(32.3±30.3)%和(80.4±16.6)%(P<0.01);A组平均每周期正常受精率、优良胚胎率、临床妊娠率分别为(77.14±15.98)%、(28.68±23.86)%和48.1%,B组平均每周期正常受精率、优良胚胎率、临床妊娠率分别为(70.59±21.53)%、(27.18±23.97)%和54.4%,两组间比较无显著性差异(P>0.05);A组胚胎分裂率、移植胚胎数分别为(96.66±6.55)%、(2.67±0.56)个,而B组胚胎分裂率、移植胚胎数分别为(92.33±19.41)%、2.12±0.57个,两组间比较有显著性差异(P<0.05).结论 常规IVF受精失败后再次助孕治疗转ICSI可显著提高受精率,改善临床结局.     

常规IVF受精失败后转ICSI与直接ICSI的临床结局比较

目的 探讨常规体外受精(IVF)-胚胎移植受精失败后再次助孕治疗转卵泡浆内单精子注射(ICSI)的临床效果.方法 自2007年1月至2007年12月对27例因女方输卵管因素行常规IVF受精失败的患者再次助孕治疗转为ICSI(A组),并与同期57例因男方因素而用射出精液直接行ICSI(B组)进行临床结局的比较.结果 A组ICSI前、后的受精率分别为(32.3±30.3)%和(80.4±16.6)%(P<0.01);A组平均每周期正常受精率、优良胚胎率、临床妊娠率分别为(77.14±15.98)%、(28.68±23.86)%和48.1%,B组平均每周期正常受精率、优良胚胎率、临床妊娠率分别为(70.59±21.53)%、(27.18±23.97)%和54.4%,两组间比较无显著性差异(P>0.05);A组胚胎分裂率、移植胚胎数分别为(96.66±6.55)%、(2.67±0.56)个,而B组胚胎分裂率、移植胚胎数分别为(92.33±19.41)%、2.12±0.57个,两组间比较有显著性差异(P<0.05).结论 常规IVF受精失败后再次助孕治疗转ICSI可显著提高受精率,改善临床结局.     

人早孕绒毛膜匀浆和脐静脉内皮细胞对早期鼠胚体外发育的影响

目的:观察人早孕绒毛膜匀浆(UPHC)和人脐静脉内皮细胞(ECHUV)对早期鼠胚体外发育的影响。方法:观察早期鼠胚在UPHC培养液及ECHUV联合培养液中的发育情况;用ELISA法检测两培养系统上清液中表皮生长因子(EGF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量。结果:在UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,早期鼠胚的桑葚胚形成率分别为79.5%和81.2%,囊胚形成率分别为60.2%和61.2%,囊胚孵出率分别为41.0%和42.1%,均明显高于对照组(P<0.05)。早期鼠胚A和B级桑葚胚形成率,在UPHC培养系统中分别为45.2%和32.3%,在ECHUV培养系统中分别为44.6%和27.7%,均显著高于对照组(P<0.05)。UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,EGF的浓度分别为(52.65±7.37)pg/ml和(58.14±3.03)pg/ml;GM-CSF的浓度分别为(11.81±3.76)pg/ml和(9.20±2.59)pg/ml;VEGF的浓度分别为(61.43±11.38)pg/ml和(256.54±9.15)pg/ml,均显著高于对照组(P<0.05);ECHUV培养系统的VEGF浓度又显著高于UPHC培养系统(P<0.01)。结论:UPHC和ECHUV培养系统促进早期鼠胚体外发育,提高桑葚胚和囊胚形成率、囊胚孵出率和胚胎质量,其作用与EGF、GM-CSF及VEGF有关。     

异位妊娠的急救护理

目的探讨异位妊娠至子宫破裂的急救护理。方法选取2010年1月-2012年3月我院急诊科收治的160例异位妊娠至子宫破裂患者,随机分为实验组和对照组,其中实验组患者采用精心的急救护理干预,而对照组患者则采用常规的急救护理措施。记录和分析两组患者接诊至进入手术室抢救完毕所需时间、术中出血量、抢救成功率及满意情况。结果实验组患者接诊至手术时间及术中出血量分别为(29.3±4.5)min、(1219.6±351.8)m L,而对照组患者分别为(43.2±5.1)min、(1517.2±265.3)m L,实验组患者的接诊至手术时间明显短于对照组患者(P0.05),术中出血量也明显少于对照组患者(P0.05)。两组患者的生存率均为100.0%。实验组患者的满意度达100.0%,而对照组患者的满意度为86.25%。两组患者的满意度比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论护理人员具有熟练的急救技术、高度的责任心及敏锐的观察能力,对于异位妊娠至子宫破裂患者的抢救成功具有重要的临床意义。     

不同定位方案在行胸腔镜手术孤立性肺小结节患者中的应用效果比较

目的探讨医用胶和Hook-wire定位用于行胸腔镜手术孤立性肺小结节患者临床效果差异。方法选取该院2017年1月至2018年12月收治行胸腔镜手术孤立性肺小结节患者共150例,随机分为A组(75例)和B组(75例),分别在CT引导下行Hook-wire和医用胶定位;比较两组操作时间和术后并发症发生率。结果 A组衔接期和楔形切除时间分别为(3.84±0.61) h、(18.93±4.55) min;B组衔接期和楔形切除时间分别为(12.57±1.77) h、(20.05±4.91) min;B组衔接期时间显著长于A组(P0.05);两组楔形切除时间比较差异无统计学意义(P0.05);A组术后气胸、肺部出血、咳嗽及胸痛不适发生率分别为24.00%(18/75)、60.00%(45/75)、4.00%(3/75)、5.33%(4/75);B组术后气胸、肺部出血、咳嗽及胸痛不适发生率分别为21.33%(16/75)、9.33%(7/75)、6.67%(5/75)、2.67%(2/75);两组气胸、咳嗽及胸痛不适发生率比较差异无统计学意义(P0.05);B组肺部出血发生率显著低于A组(P0.05)。结论相较于Hook-wire,医用胶定位用于行胸腔镜手术孤立性肺小结节患者可有效缩短操作时间,降低术后并发症发生风险,更具临床应用价值。