自身免疫性糖尿病大鼠T淋巴细胞亚群变化

应用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫组化技术，对１８只自身免疫性糖尿病大鼠外周血Ｔ淋巴细胞亚群进行检测。结果；自身免疫性糖尿病大鼠发病时，ＭＲＣＯＸ－３４阳性Ｔ淋巴细胞与正常对照组组相比，无显著变化；Ｗ３／２５阳性Ｔ淋巴细胞明显增多；ＭＲＣＯＸ－８阳性淋巴细胞显著减少；后得     

冠心病病人血清可溶性白细胞介素－2受体水平及T淋巴细胞亚群的变化

采用双抗体夹心法和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检测了８４例冠心病病人血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平和外周血Ｔ淋巴细胞亚群（ＣＤ４，ＣＤ８）的变化。结果显示，冠心病病人血清ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＣＤ４，ＣＤ４／ＣＤ８明显降低，而ＣＤ８明显增高，与对照组相比差异有极显著意义（Ｐ＜０．００１），且急性心肌梗塞（ＡＭＩ）的变化较不稳定心绞痛（ＵＡ）和陈旧性心肌梗塞（ＯＭＩ）更明显。１周内病死的ＡＭＩ病人ｓＩＬ－２Ｒ和ＣＤ８的增高及ＣＤ４和ＣＤ４／ＣＤ８降低较存活者更明显（Ｐ＜０．００１）。提示血清ｓＩＬ－２Ｒ水平和Ｔ淋巴细胞亚群异常与冠心病的病情和预后有密切关系。     

卵巢早衰和外周血T淋巴细胞亚群及补体的关系

目的：为明确卵巢早衰者外周血Ｔ淋巴细胞亚群及补体的特点。方法：运用免疫酶组化技术———碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）法，检测卵巢早衰（ＰＯＦ）患者（ｎ＝３０）、自然绝经后妇女（ｎ＝２０）及健康育龄妇女（ｎ＝３０）的外周血Ｔ淋巴细胞亚群，同时检测其补体水平。结果：①健康育龄妇女、卵巢早衰者及自然绝经者在外周血成熟Ｔ淋巴细胞总体水平是一致的。②ＰＯＦ患者及自然绝经后妇女的ＣＤ＋８、ＣＤ＋１６Ｔ淋巴细胞数明显升高（Ｐ＜０．０５），ＣＤ＋４／ＣＤ＋８明显降低（Ｐ＜０．０５），卵巢早衰者出现的闭经、衰老与体内存在的免疫异常，不仅与细胞的相对数量有关，还与其调节功能有关，即淋巴细胞亚群失衡有关。③自然绝经者Ｃ３、Ｃ４明显高于健康育龄妇女（Ｐ＜０．０５），卵巢早衰者Ｃ４显著高于健康育龄妇女（Ｐ＜０．０５）。结论：卵巢早衰病因之一可能是自身免疫性卵巢炎。卵巢早衰者与自然绝经者体内细胞免疫、补体水平相似，卵巢早衰者的免疫调节、免疫应答均处于衰老状态。     

慢性肾功能衰竭血、尿内皮素、一氧化氮水平与肾功能、血压相关性

目的　探讨慢性肾衰血浆及尿内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）改变及其与肾功能、血压的关系。方法：采用放免法及比色法测定血浆及尿中ＥＴ－ １、ＮＯ含量及其与血清肌酐（ＳＣｒ）、平均动脉压（ＭＡＰ）的相关性。结果：慢性肾衰组血浆及尿ＥＴ显著高于健康人（Ｐ＜ ０．０１）,其中ＣＲⅠ期血、尿ＮＯ 与健康人无显著差异（Ｐ＞ ０．０５）而ＣＲＦ期尿ＮＯ 低于健康人（Ｐ＜ ０．０５）,血浆及尿ＥＴ 与ＳＣｒ及ＭＡＰ均显著正相关（Ｐ＜ ０．０５）、ＮＯ与ＳＣｒ及ＭＡＰ均呈显著负相关（Ｐ＜ ０．０１）。结论：慢性肾衰时体内ＥＴ增高、ＮＯ 合成减少,且与肾功能及血压密切相关,说明ＥＴ及ＮＯ 在慢性肾衰的进展中可能起重要作用。     

大鼠小肠缺血／再灌注休克中一氧化氮,内皮素检测及意义

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对大鼠小肠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）的作用及内皮素的改变。方法：复制内脏血管阻塞（ＳＡＯ）性休克模型,用左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及硝基精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理动物模型后分别测定血浆中ＥＴｓ、ＭＤＡ、组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量。结果：Ｌ－Ａｒｇ减缓了大鼠Ｉ／Ｒ血压下降（Ｐ＜０．０１）,降低了血浆ＭＰＯ、ＬＤＨ、ＣＤ、ＭＤＡ的含量（Ｐ＜０．０１）及肠组织中伊文思蓝（ＥＢ）的含量（Ｐ＜０．０５）;Ｌ－ＮＡＭＥ与Ｌ－Ａｒｇ相反。ＭＰＯ与ＥＢ正相关（Ｐ＜０．０１）,ＮＯ－２／ＮＯ－３与ＥＴｓ负相关（Ｐ＜０．０５）。结论：ＮＯ对小肠Ｉ／Ｒ损伤有保护作用,ＥＴｓ参与ＳＡＯ休克过程。     

人红细胞量子化过程中氧自由基损伤的实验观察

本文观察了红细胞在量子化过程中的氧饱和度（ＳＯ２）、脆性（ＲＦＴ）、膜流动性（ＬＦＵ）、丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｃａｔ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）和血浆ＳＯＤ、脂质过氧化物（ＬＰＯ）。结果显示，ＳＯ２随时间延长而增加（Ｐ＜０．００１），脆性则下降（Ｐ＜０．０１），膜流动性亦降低（Ｐ＜０．０５）；ＭＤＡ浓度和ＳＯＤ、Ｃａｔ、ＧＳＨ－Ｐｘ活性差异无显著性。血浆     

四氧嘧啶性糖尿病大鼠血清SOD活力及MDA含量的变化

本文在四氧嘧啶性糖尿病大鼠上观测了血糖，血清ＳＯＤ活力及ＭＤＡ含量的变化。结果表明：注射四氧嘧淀后３天，血糖显著升高（Ｐ〈０．０１），血清Ｔ－ＳＯＤ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活力降低，ＭＤＡ含量增加，但均未达到显著水平（Ｐ〉０．０５）；注药后１８天血糖仍维持在较高水平，血清Ｔ－ＳＯＤ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活力显著增加（Ｐ〈０．０５），ＭＤＡ含量下降，但未达到显著水平（Ｐ〉０．０５）。文对并对变化的机理进行了讨     

30例慢性上颌窦炎病人血清中丙二醛含量及超氧化物歧化酶活力测定

对３０例慢性上颌窦炎病人血清中ＭＤＡ含量及ＳＯＤ活力测定结果表明：与健康人相比，ＭＤＡ含量和Ｍｎ─ＳＯＤ活力显著增加（Ｐ＜０．００１；Ｐ＜０．０１），Ｔ－ＳＯＤ和ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活力显著减少（Ｐ＜０．０５；Ｐ＜０．０１）。     

胎肝细胞质液对小鼠IL－2系统的影响

用自制胎肝细胞质液（ＦＬＣ）对小鼠ＩＬ２系统的影响进行研究，结果表明ＦＬＣ对正常小鼠体内Ｔ淋巴细胞有诱生ＩＬ２的作用（Ｐ＜００５），可明显促进淋巴细胞ｍＩＬ２Ｒ的表达（Ｐ＜００１）和血清ｓＩＬ２Ｒ水平的降低（Ｐ＜００５）；对环磷酰胺免疫抑制后小鼠的ＩＬ２诱生、ｍＩＬ２Ｒ表达均有所改善（分别为Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），提示ＦＬＣ对小鼠Ｔ淋巴细胞有一定程度活化和诱导ＩＬ２产生的作用，可降低小鼠血清ｓＩＬ２Ｒ水平。     

急慢性肾功能衰竭常见血清酶的变化及其临床意义

目的探讨急慢性肾衰患者体内常见血清酶含量的变化及两者的差异性。方法急性肾衰（ＡＲＦ）和慢性肾衰（ＣＲＦ）患者及正常健康人３组各３０例,采用全自动生化分析仪检测血清中碱性磷酸酶（ＡＣＰ）,淀粉酶（ＡＭＹ）,肌酸激酶（ＣＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及α一羟丁酸脱氢酶（ＨＢＤＨ）。结果（１）与正常健康人比较,急慢性肾衰患者血清ＡＭＹ、ＬＤＨ、ＨＢＤＨ均显著升高（Ｐ＜０．０１）,ＣＫ次之（Ｐ＜０．０５）;血清ＡＬＰ在ＣＲＦ组明显升高（Ｐ＜０．０５）,而ＡＲＦ组无显著差异（Ｐ＞０．０５）。（２）与ＣＲＦ组比较,ＡＲＦ组血清ＬＤＨ、ＨＢＤＨ明显升高（Ｐ＜０．０１）,而ＡＭＹ、ＡＬＰ明显降低（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）;血清ＣＫ两组比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论血清ＡＬＰ、ＡＭＹ、ＬＤＨ和ＨＢＤＨ变化有助于临床上鉴别急、慢性肾衰。     

幼年和成年大鼠外周血T细胞亚群变化

本实验应用了MAbs和流式细胞仪做为检测方法,比较观察了不同鼠龄的大鼠外周血T细胞亚群分布变化。结果显示,幼鼠(40d)和成鼠(5～6个月)的外周血T细胞亚群变化有明显差异:成鼠的OX-19~+(全T细胞)和W3/25~+(Th/i)细胞细胞较幼鼠有明显减少(P<0.001),而OX-8~+(Ts/C细胞)亚群却较幼鼠明显升高。但W3/25~+和OX- 8+亚群细胞表面的荧光密度变化却与阳性细胞百分率相反。推测造成这种T细胞亚群变化的原因可能与T细胞的发育成熟及T细胞本身的调节有关。实验资料为研究大鼠T细胞亚群的发育成熟过程提供了重要数据。     

鞘内泵入曲马多对甲醛炎性疼痛大鼠免疫功能的影响

目的:观察鞘内泵入不同剂量的曲马多对甲醛炎性疼痛大鼠免疫功能的影响.方法:将32只成年雄性SD大鼠随机分为生理盐水组(NS组)和曲马多组(T组),其中T组分为50 μg/h(T1),25 μg/h(T2)和12.5 μg/h(T3)3种剂量组,每组8只.采用改良Yaksh法进行鞘内置管,Alzet泵持续泵入曲马多或生理盐水.复制甲醛炎性疼痛模型,7 d后采用疼痛加权评分(PIS)评价曲马多的镇痛效应;分离脾脏单个核细胞进行原代培养,检测脾脏T淋巴细胞增殖水平、NK细胞活性;流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞亚群和NK细胞表型变化.结果:与NS组比较,T1,T2,T3组在甲醛炎性疼痛第一时相和第二时相的PIS差异有统计学意义 (P<0.01),且有量效关系,但3组间比较差异无统计学意义 (P>0.05).与NS组比较,T1组降低T淋巴细胞增殖水平(P<0.05),T2和T3组 T淋巴细胞增殖水平无统计学意义(P>0.05);T1,T2,T3组NK细胞活性均无统计学意义(P>0.05); T1组CD3 ,CD3 CD4 数量及百分率降低,CD4 / CD8 降低(P<0.01),而T2和T3组则没有变化(P>0.05).结论:鞘内泵入较大镇痛剂量的曲马多(50 μg/h )降低大鼠T淋巴细胞增殖转化水平,改变T淋巴细胞亚群表型,对NK细胞活性和表型没有影响;一般镇痛剂量曲马多(25 μg/h和12.5 μg/h)对机体免疫功能没有影响.     

大鼠间充质干细胞对BALB/c小鼠体外淋巴细胞实验的影响

目的 研究大鼠间充质干细胞(MSC)对BALB/c小鼠淋巴细胞增殖和CD4+CD25+调节性T细胞亚群的变化。方法 分离、扩增SD大鼠MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定。取第5代MSC与分离的小鼠淋巴细胞在刀豆蛋白(ConA)刺激下共培养5天 ,流式细胞仪测定细胞增殖,CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例的变化。结果 当淋巴细胞: MSCs在1:10及1:50时均可抑制ConA刺激下可抑制小鼠淋巴细胞增殖,淋巴细胞: MSCs在1:10 时CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例明显升高。结论 大鼠MSC具有异种基因免疫抑制作用     

激素敏感型肾病综合征儿童外周血T、B淋巴细胞亚群的研究

【目的】 观察激素敏感型肾病综合征(SSNS)患儿外周血T?B淋巴细胞亚群数量和功能的变化,探讨SSNS的发病机制?【方法】 采用流式细胞术检测疾病组23例初发SSNS患儿活动期及缓解期外周血T?B淋巴细胞亚群数量,同时以16例正常儿童作为对照组进行相同检测?【结果】 SSNS患儿疾病活动期外周血CD3+CD8+T细胞低于对照组,CD4/CD8比值上升,P < 0.05;CD3+T?CD3+CD4+T?mCD25+T?CD40L+T细胞及CD19+B?CD19+CD23+B?CD40+B细胞较对照组无统计学差异?缓解期外周血CD3+T?CD3+CD4+T?CD3+CD8+ T?CD40L+T细胞下降,P < 0.05; CD4/CD8比值较活动期显著降低,与对照组比较无统计学差异?【结论】 T淋巴细胞免疫紊乱,特别是CD4/CD8比值失衡参与了SSNS的疾病过程,糖皮质激素通过影响T淋巴细胞,恢复CD4/CD8平衡,诱导病情缓解?本研究未发现B淋巴细胞参与SSNS发病?     

OX40/OX40L与疾病

OX40/OX40L是机体免疫应答过程中一对重要的协同刺激分子,参与T细胞的活化、增殖和迁移,以及生发中心的形成和树突状细胞的分化成熟。在介导肿瘤免疫应答和自身免疫疾病的发生、发展中具有重要作用。OX40只表达于活化的T细胞表面,且主要是CD4+T细胞。OX40+T细胞是抗原特异性T细胞,集中于淋巴组织的T细胞区和外周的炎性位点,非炎性相关组织及外周血中很少出现,有很强的区域特异性。OX40L能协同刺激T细胞的活化,促进B细胞产生高效价抗体和类别转化,介导OX40+T细胞向炎症部位浸润。     

补肾及健脾复方对皮质酮大鼠T细胞凋亡信号相关基因群调控模式的对比研究

目的:探讨补肾及健脾复方对皮质酮大鼠T细胞凋亡信号相关基因表达的调控模式.方法:采用TUNEL标记的流式细胞技术,对皮质酮大鼠模型及各治疗组激活诱导的T细胞凋亡进行定量分析;采用荧光实时定量PCR技术对各组大鼠T细胞凋亡信号相关基因群mRNA表达水平进行定量与比较;采用分光光度法检测caspase-8、caspase-3的活性.结果:(1)与正常组相比,模型组T细胞凋亡百分率明显增高;右归饮组及补肾益寿胶囊组T细胞凋亡百分率与皮质酮模型组相比明显降低;四君子汤与模型组相比T细胞凋亡百分率无显著性差异.(2)模型组促凋亡的Fas、FasL、TNR1、Bax基因表达上调,抗凋亡的TNFR2、Bcl-2、cIAP1、cIAP2基因表达下调;两个补肾复方均可下调FasL、TNFR1 mRNA表达水平,并可上调Bcl-2、cIAPl、cIAP2 mRNA表达水平;四君子汤仅对Bcl-2,cIAP2 mRNA表达水平有显著上调作用.(3)模型组caspase-8、caspase-3活性显著增高,两个补肾复方均可降低caspase-8、caspase-3的活性,四君子汤对caspase-8、caspase-3的活性无显著下调作用.结论:两个补肾复方下调促凋亡基因FasL、TNFR1的转录,上调抗凋亡基因Bcl-2、cIAPl、cIAP2的转录,并且降低caspase-8、caspase-3的活性,从而降低皮质酮大鼠过度的T细胞凋亡,是补肾法特有的对皮质酮大鼠T细胞凋亡相关基因群的调控模式.     

糖皮质激素在实验性变态反应性脑脊髓炎中对调节性T细胞的作用

目的:研究糖皮质激素在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)治疗中对调节性T细胞的调变作用. 方法:采用从新鲜牛脊髓中提取的髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫诱导Balb/c小鼠成功诱发EAE后,分组注射糖皮质激素或者安慰剂,在采用指标评估基础上,分别采用流式细胞术和ELISA方法检测CD4 CD25 调节性T细胞特异性FOXP3和血中IL-10的表达水平. 结果:与对照组相比,糖皮质激素注射组小鼠发病程度轻,调节性T细胞特异性FOXP3和血中IL-10的表达水平均有明显差异. 结论:糖皮质激素可能通过增加调节性T细胞的数量及活性,减轻EAE的症状,为临床治疗多发性硬化(MS)提供理论基础.     

80例健康儿童淋巴细胞亚群参考范围的调查分析

目的建立健康儿童淋巴细胞亚群正常值的参考范围。方法采用双色流式细胞术分析健康儿童外周血淋巴细胞各亚群的百分率和绝对数量。结果总淋巴细胞、CD3＋T淋巴细胞、辅助／诱导性T细胞（CD3＋CD4＋淋巴细胞）、抑制／细胞毒性T细胞（CD3＋CD8＋淋巴细胞）、CD19＋B淋巴细胞、CD3-CD56＋NK细胞百分率的中位值分别为44．00％、57．91％、27．65％、24．37％、17．44％、14．90％;总淋巴细胞、CD3＋T淋巴细胞、CD3＋CD4＋T淋巴细胞、CD3＋CD8＋T淋巴细胞、CDl9＋B淋巴细胞、CD3一CD56＋NK细胞绝对数的中位值分别3042个／斗l、1653个／μ、762个／μl、740个／μl、553个／μl、509个／μl。男女性别间CD3＋T淋巴细胞、CD3＋CD4＋T淋巴细胞和CD3-CD56＋NK细胞的百分率和绝对值比较差异均有统计学意义（P〈0．05）,而总淋巴细胞、CD3＋CD8＋T细胞、CDl9＋B淋巴细胞的百分率和绝对值比较差异均无统计学意义（P〉0．05）,CD4＋／CD8＋比值性别间差异无统计学意义（P〉0．05）。女性CD3＋细胞、CD3＋CD4＋细胞的绝对值和百分率均高于男性,CD3-CD56＋NK细胞的绝对值和百分率均低于男性。结论在相同地域、相同种族,建立健康儿童外周血淋巴细胞亚群正常参考值是必要的。疾病诊断和疗效评价时应考虑性别间的差异。     

前列腺素E2-EP4受体拮抗剂对大鼠实验性自身免疫性神经炎的作用

目的   探讨前列腺素E2-EP4受体拮抗剂L161982对大鼠实验性自身免疫性神经炎(EAN)的作用及其机制。方法   用牛周围神经髓磷脂(BPM)抗原乳剂免疫大鼠制备EAN模型。将21只Lewis大鼠随机分为治疗A组、治疗B组和对照组,治疗A组于免疫前1天至免疫后第8天(免疫阶段)每日腹腔注射 L161982(5mg/kg),治疗B组于免疫后第5至16天(发病阶段)每日腹腔注射 L161982(5mg/kg),对照组每日腹腔注射相同体积的L161982溶媒。观察各组发病时间和临床评分,于疾病高峰期(免疫后第16天)行坐骨神经组织病理学检查,免疫组化法检测坐骨神经中IFN-γ、IL-17表达,细胞计数试剂CCK-8法检测引流淋巴结淋巴细胞增殖反应。 结果   与对照组比较,治疗A组和治疗B组均能延迟EAN发病时间(P<0.05),减少坐骨神经炎性细胞浸润数目(P<0.05)和IFN-γ、IL-17表达(P<0.05),抑制BPM刺激T淋巴细胞增殖反应(P<0.05)。治疗A组疾病高峰期临床评分明显低于治疗B组和对照组(P<0.05)。结论   L161982可能通过抑制促炎性细胞因子IFN-γ、IL-17过度表达和自身反应性T淋巴细胞增殖减轻EAN病情,免疫阶段应用L161982具有更明显的治疗效果。