三种组织来源的特异性γ—谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ的纯化…

为进一步探讨肝癌特异性γ－ＧＴⅡ的性质，从肝癌、胎肝和肾脏组织中纯化的肝癌特异性γ－谷氨酰转肽酶同功能Ⅱ（γ－ＧＴⅡ），经１０％聚丙烯酰胺凝胶电泳分别显示单一蛋白区带，以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示均由大小两个亚基组成，其分子量分别为５７０００和２３０００。用此酶作抗原免疫兔获得抗γ－ＧＴⅡ抗血清，酶免疫抑制试验表明该抗血清对三种组织来源的γ－ＧＴⅡ、Ⅱ′具有抑制作用。双扩散免疫试验产生单一沉淀线，并     

免疫亲和层析纯化棘球蚴囊液特异性抗原的研究

应用兔抗健康人血清球蛋白吸附柱、兔抗猪囊尾蚴血清球蛋白吸附柱分别对人棘球蚴囊液粗抗原进行了免疫亲和吸附，制得纯化抗原，并用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测其抗原性。试验表明：经兔抗猪囊尾蚴血清球蛋白吸附柱纯化的抗原与人猪囊虫病血清的交叉反应为０，表明基本去除了粗抗原中所含的与猪囊尾的交叉成份。经兔抗健康人血清球蛋白吸附柱吸附后的抗原，并不影响对棘球蚴病人的阳性检出率，并在琼脂扩散试验中与兔抗人血清球蛋白之间没有出现沉淀线，这表明基本除去了粗抗原中的宿主成分。表明免疫亲和层析是一个有效的抗原纯化方法     

牛血清白蛋白的抗血清在免疫学沉淀反应实验中的应用

目的 :制备牛血清白蛋白 (BSA)抗血清 ,以探讨获取高效价抗血清的方法。方法 :用BSA配制一定的浓度 ,免疫家兔 ,以制备兔抗 -BSA血清。利用免疫电泳、双向琼脂扩散试验分析和测定抗血清的效价。结果 :双向琼脂扩散在BSA 0 . 5g/mL的浓度时 ,测得抗血清效价为 1∶32 ,对流免疫电泳结果显示BSA 0. 5g/mL与抗BSA在 1∶16时形成一条清晰可见的沉淀线。结论 :BSA免疫家兔可获取效价较高的抗血清。     

采用TEAE纤维素提取纯C_3血清

上海第二医学院属附第三人民医院慢支组,于1976年起应用TEAE纤维素连续及分步洗脱得到纯C_3抗原。用各种抗血清鉴定本方法提纯的C_3,其结果是:只和正常人血清产生一根沉淀线;和抗丙种球蛋白、抗IgG、抗IgA、抗IgM、抗转铁蛋白都不产生沉淀线。证明其中只含纯的     

抗胸腺淋巴细胞球蛋白的研究

从胎儿胸腺分离淋巴细胞,作为抗原用以免疫家兔、用玫瑰花抑制试验测定效价,当效价达到1:5000以上时采血,分离血清。经杂抗体吸收和Sephadex—A_(50)浴法提纯免疫球蛋白部分。提纯的抗淋巴细胞球蛋白与瑞士制抗淋巴细胞球蛋白等进行了比较。生物效价的对比中自制球蛋白与瑞士球蛋血效价高度相关,经统计学处理γ值为0.9。本文为了减少球蛋白在临床应用中的副作用,在吸收杂抗体时进行了肾组织抗原的制作和用制作肾抗原进行抗体吸收试验。经荧光免疫测定法证明,用此抗原吸收后的抗血清对肾脏切片呈阴性反应。     

艾氏腹水癌患鼠血清高分子量DNA结合蛋白的分离与鉴定

肿瘤相关的血清DNA结合蛋白的分离,具有潜在的诊断价值。我实验室最近在动物实验研究中,首先分离、提纯得到了此种血清DNA结合蛋白。 我们利用免疫吸收法及免疫亲和层析法,从艾氏腹水癌小鼠血清脱氧核糖核酸结合蛋白(DBP)中分离得到了一种高分子量蛋白质(HDBP)。它在免疫双扩散反应中可与抗艾氏腹水癌小鼠血清DBP的兔抗血清产生一条沉淀线。但与正常小鼠血清DBP的兔抗血清不产生可见的沉淀线。用免疫电泳法分析,艾氏腹水癌小鼠血清DBP可与抗DBP的兔血清产生9～10条沉淀线,但与HDBP只产生一条沉淀线。经十二烷基硫酸钠、聚丙烯酰胺-凝胶电泳法测定其分子量,以2巯     

三种组织来源的特异性γ-谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ的纯化及其特性

为进一步探讨肝癌特异性γ－ＧＴⅡ的性质，从肝癌、胎肝和肾脏组织中纯化的肝癌特异性γ－谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ（γ－ＧＴⅡ），经１０％聚丙烯酰胺凝胶电泳分别显示单一蛋白区带，以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示均由大小两个亚基组成，其分子量分别为５７０００和２３０００。用此酶作抗原免疫兔获得抗γ－ＧＴⅡ抗血清，酶免疫抑制试验表明该抗血清对三种组织来源的γ－ＧＴⅡ、Ⅱ′具有抑制作用。双扩散免疫试验产生单一沉淀线，并互相融合在一起，说明三种组织来源的γ－ＧＴⅡ的免疫学特性相一致。     

食管癌免疫原性研究——食管癌瘤组织提取液与病人血清γ球蛋白的相互作用

作者将食管癌病人血清γ球蛋白与食管癌109细胞株提取物和食管癌细胞部份分离液C_(1)在单孔对流电泳中反应,可分别见有a、b、c、d、e和a、c沉淀线。“a”沉淀线是抗原向负极抗体向正极处产生的。正常人血清γ球蛋白与上述两种食管癌细胞提取物出现的“a”沉淀线阳性率比较。差异明显。作者认为“a”沉淀线可能含有食管癌特异的抗原。     

对流免疫电泳法鉴定蚊胃血血源的研究

用对流免疫电泳技术(电泳法),以全血清为抗原,制备3种已知抗体血清检测未知抗原鉴定蚊虫胃血。并用环状沉淀试验法(沉淀法)比较观察不同抗血清及抗原浓度、反应时间与温度的实验。结果证明沉淀法的敏感性比电泳法高约2～3倍。两法同时检测中华按蚊及菲律宾按蚊胃血标本,结果两法牛血阳性率均为100％,但沉淀法尚出现30.43％及17.24％牛、猪血阳性反应,而电泳法则无;当沉淀法抗血清稀释为1:32时,两法反应结果一致。电泳法操作简便,可用于蚊胃血标本的鉴定。     

自上皮性卵巢癌患者腹水中提取抗原在临床诊断上的应用

自上皮性卵巢癌组织中提取抗原用作免疫诊断文献已有报道。我们试从这种患者腹水中提取抗原注射家兔,获得抗血清,经人全血清充分吸收后,与人全血清及正常卵巢组织抗原不起反应,而与上皮性卵巢癌组织抗原及腹水抗原起反应,从免疫电泳及双向琼脂扩散试验得到证实。以此抗血清用反向间接血凝试验检测各种患者血清289例及正常人血清143例,27例原发上皮性卵巢癌中17人阳性,占63％。临床分期中Ⅲ至Ⅳ期91.8％阳性,而Ⅰ或Ⅱ期均只有40％阳     

胃癌相关抗原——胃癌相关抗原及其抗体的制备及应用

近年来,有关胃癌免疫诊断的研究,国内外的报告已逐渐增多。据文献报告,用抗血清检查胃癌患者的胃液及血清中的特殊糖蛋白抗原,阳性率达80％左右,但溃疡病患者相应标本的阳性率亦在10％以上,且抗胃癌免疫血清的制作方法各不相同,所得结果亦很     

疟疾抗原抗体常量交叉免疫电泳分析

本文利用交叉免疫电泳技术对诺氏疟原虫可溶性抗原进行了分析。实验系采用100×100×3mm~3琼脂糖玻璃板和含Ca~(2 )的巴比妥缓冲液、第一向电泳所用电压为8V/cm,电泳1小时,第二向电泳所用电压为2V/cm,电泳6—8/小时。电泳后经压片、洗绦、再压片、干燥、染色、脱色和再干燥步骤后观察结果。实验结果表明,作为标准对照的卵白蛋白抗原和人血清抗原分别与相应的抗血清形成许多沉淀峰,而且其抗原的浓度与沉淀峰高度明显相关。在待测抗原的分析中,诺氏疟原虫可溶性表面抗原能与相应的抗血清形成6条沉淀峰,由于所用抗原预先用同位素进行了标记,因而通过放射自显影提高了敏感性和分辨力。     

人补体Cls纯化及其检测

我们采用中性条件沉淀人血浆优球蛋白,经 DEAE 柱层析,最终获得纯化的 Cls 抗原。用微量免疫法制备人 Cls 血清经免疫化学方法鉴定后证实为单特异性抗人 Cls 血清。随着加入的聚合 IgG 量的增加,血清中可检测的 Cls 逐渐减少,这提示该抗血清仅能特异性地检测未活化的 Cls,而不能检测 Cls,用这种抗血清作免疫单向扩散定量测定 Cls,可以了解 Cl 活化程度。这在补体经典途径激活的研究中不失为一稳定而简易的方法。     

PG结合CEA、CA724在胃癌诊断和腹膜转移判断中的价值

目的观察胃蛋白酶原（PG）结合癌胚抗原（CEA）、糖类抗原724（CA724）在胃癌诊断和腹膜转移判断中的价值。方法40例胃癌患者为胃癌组,62例胃部良性病变患者为胃良性病变组,40例健康人为对照组。测定血清CEA、CA724和PG。结果胃癌组血清CEA、CA724、PGⅠ、PGⅡ和PGI／Ⅱ与正常对照组、胃良性病变组比较差异有统计学意义,胃良性病变组PGⅠ和PGⅠ／Ⅱ与正常对照组比较差异有统计学意义。发生腹膜转移组患者与未发生腹膜转移组血清CEA、CA724、PGⅠ和PGⅠ／Ⅱ比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血清CEA、CA724和PG对胃癌的诊断和判断腹膜转移有重要意义。     

实验性矽肺肺组织各种抗原皮肤延缓试验观察

国内外和我们的实验证明,实验性矽肺病鼠肺组织,肺泡冲洗细胞冻融之上清液和病鼠血清,分别致敏家兔所得之抗血清均与矽肺病鼠血清出现免疫反应(琼脂沉淀反应阳性)。其沉淀线各血清之间呈全部或部份吻合。且这些免疫反应阳性率与矽肺病鼠的病变程度相关,正常大鼠均呈阴性。     

长爪沙鼠IgG的纯化及抗血清的制备

目的纯化长爪沙鼠血清IgG,制备兔抗长爪沙鼠IgG抗血清。方法采用Hitrap Protein G亲和层析预装柱来纯化长爪沙鼠血清IgG;通过SDS-PAGE电泳和Western-Blotting免疫印迹法对长爪沙鼠血清IgG进行纯度鉴定,免疫兔子制备抗血清。结果7 mL长爪沙鼠血清纯化得到11 mg IgG;电泳和免疫印迹测定,IgG纯度大于95%;用纯化的IgG作抗原制备了兔抗血清,免疫双扩散测定效价达1∶32。结论建立了长爪沙鼠血清IgG的纯化方法,制备了长爪沙鼠IgG抗血清,证实长爪沙鼠血清IgG和Protein G具有较高的亲和性。     

用双向琼脂扩散实验检测甲胎蛋白的安全模拟方法

双向琼脂扩散实验是将抗原和抗体分别加到琼脂板相对应的孔中,两者各自向四周扩散,若二者相对应,在比例合适处形成白色沉淀线。若同时含有多种抗原抗体系统,因其扩散速度不同,可在琼脂层中形成多条沉淀线。这项实验可用于多种抗原成分的分析和鉴定,如检测甲胎蛋白。用双向琼脂扩散实验检测甲胎蛋白需要肝癌患者的血清和健康人血清,为避免学生和实验教师接触患者血液标本,我们用模拟方法做这个实验。     

一种用于鉴定食管癌相关抗原特异抗血清的制备(简报)

用封闭食管癌正常抗原成分的食管癌细胞Eca109龟疫动物产生的抗血清,可与食管癌细胞株(Eca190及Ecal7)以及食管癌组织切片产生反应。流式荧光细胞技术证明,正常食管粘膜细胞不能除去其活性,经食管癌细胞吸收则活性全部消失,说明该血清活性是针对食管癌相关抗原的。再次证明食管癌相关抗原是存在的。此血清与肝癌细胞株7402、胃癌细胞株7901和鼻咽癌细胞株均有明显的交叉反应,与肉瘤细胞     

血清CA199、CA125、CEA和胃蛋白酶原联合检测对早期胃癌的诊断价值

目的探讨联合测定血清糖蛋白抗原199(CA199)、血清糖蛋白抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)及胃蛋白酶原(PG)对胃癌早期诊断的临床价值。方法应用化学发光法对142例住院患者血清中CA199、CA125、CEA、PGⅠ、PGⅡ水平进行了检测,观察胃癌组患者各项水平与健康对照组的差异,并用ROC曲线计算各指标的敏感性和特异性。结果胃癌组与健康对照组和其他疾病组比较CA199、CA125、CEA、PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ均有显著差异,萎缩性胃炎组与健康对照组比较仅PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ有显著差异,单项检测中PGⅠ/PGⅡ的敏感性(74.2%)和特异性(88.9%)最高,四项联合检测时敏感性和特异性分别为94.3%和92.3%。结论 CA199、CA125、CEA、PGⅠ/PGⅡ的联合检测对胃癌早期诊断具有较高的临床价值。     

血清胃蛋白酶原及CA199、CA242、CEA联合检测在胃癌早期诊断中的价值

目的 研究联合检测血清胃蛋白酶原(PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ)及糖蛋白抗原199(CA199)、糖脂类抗原242(CA242)、癌胚抗原(CEA)在胃癌早期诊断中的临床应用价值。 方法 血清中的胃蛋白酶原PG用乳胶增强免疫比浊法,CA199、CA242、CEA用化学发光微粒子免疫法,分别检测130例胃癌患者(均有病理学诊断明确为胃癌患者)、30例胃部良性疾病患者、120例正常健康体检人群的水平,统计学分析3组间的差异;并比较上述各单一肿瘤指标与联合肿瘤指标检测的灵敏度、特异度的差异。 结果 相较于胃部良性疾病患者组和正常健康体检对照组,胃癌组血清中各肿瘤标志物PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA含量水平差异均有统计学意义(P＜0.01)。与所有单项肿瘤标志物检测的灵敏度相比较,联合检测5项肿瘤标志物的灵敏度为86.1%,差异均有统计学意义(P＜0.01),而特异度降低差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 胃癌患者血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA联合检测的灵敏度远远高于单一肿瘤标志物项目检测的灵敏度,血清的PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA的联合检测有助于胃癌的早期诊断。联合检测对提高早期胃癌患者的检出率具有临床实用价值。