神经元特异性烯醇化酶测定标本影响因素的解决办法

目的探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定标本影响因素的解决办法。方法利用全自动电化学发光仪对25份用含促凝剂分离胶真空管抽取的静脉血,分离后经不同放置时间测定其NSE的水平,并对结果进行配对t检验。结果标本放置1h离心测定的结果与离心后3h及随后再冷藏24h测定的结果无显著性差异。结论用含促凝剂分离胶真空管抽取标本解决了NSE测定中样本因素对结果影响的问题。     

肝癌组织中PIVKA-Ⅱ水平及维生素K2对肝癌细胞中PIVKA-Ⅱ的影响

目的 观察肝癌组织中维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导的蛋白质(protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ,PIVKA-Ⅱ)表达情况及维生素K₂(vitamin K₂,VitK₂)对肝癌细胞中PIVKA-Ⅱ的影响,探讨PIVKA-Ⅱ与肝癌的关系及可能机制。 方法 选择浙江省肿瘤医院、浙江省中山医院2012年1月-2015年12月100对手术切除的原发性肝癌组织及癌旁组织标本,采用ABC免疫组织化学法测定组织中PIVKA-Ⅱ的阳性表达情况,采用化学发光免疫分析法测定标本中PIVKA-Ⅱ水平;将HepG-2细胞和浓度为20 μM的VitK₂共同培养,酶联免疫吸附(ELISA)法测定VitK₂对HepG-2肝癌细胞PIVKA-Ⅱ表达的影响,MTT法测定VitK₂对HepG-2肝癌细胞生长的影响,Transwell法测定VitK₂对HepG-2肝癌细胞侵袭能力的影响。 结果 肝癌组织中PIVKA-Ⅱ阳性率(74.0%)高于癌旁组织中PIVKA-Ⅱ阳性表达率(25.0%,P<0.05);肝癌组织中PIVKA-Ⅱ水平(3 786.23±143.24) mAU/g高于癌旁组织中PIVKA-Ⅱ水平(167.34±21.54) mAU/g,P<0.05。对照组肝癌细胞PIVKA-Ⅱ水平为(3.43±0.04) ng/(ml·106细胞),VitK₂组肝癌细胞PIVKA-Ⅱ水平为(2.57±0.02) ng/(ml·106细胞),VitK₂组肝癌细胞PIVKA-Ⅱ水平明显低于对照组(P<0.05)。VitK₂与HepG-2肝癌细胞共同培养,第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第6天时VitK₂对HepG-2细胞的抑制率分别为9.2%、16.5%、26.7%、34.8%、41.2%、46.7%。VitK₂与HepG-2肝癌细胞培养24 h后,VitK₂对HepG-2肝癌细胞侵袭的抑制率为37.2%。 结论 肝癌组织中PIVKA-Ⅱ呈高表达,VitK₂能够降低肝癌细胞中PIVKA-Ⅱ水平、抑制肝癌细胞生长、降低肝癌细胞侵袭能力。      

MEIA法和CLIA法检测鳞状细胞癌抗原的标定问题探讨

[目的]对雅培公司出品的两种检测鳞状细胞抗原（SCC-Ag）的方法——微粒子酶免疫法（MEIA）和化学发光免疫法（CLIA）标定问题存有疑议,对此两种方法进行比较。[方法]分别用MEIA法和CLIA法检测30例健康体检者血清和30例SCC-Ag阳性病人血清。同时对两种方法的检测试剂盒的标准液进行测量分析。[结果]两种方法测定健康体检者血清和SCC-Ag阳性血清的结果经配对t检验差异均具有统计学意义（P〈0.01）。仪器ARCHITECTi2000SR经两种定标液定标后,分别测定16份标本SCC-Ag,其结果相关系数r=0.999,可见ARCHITECTi2000SR分析系统延用了IMX分析系统的标准品。[结论]雅培公司出品的IMX分析系统的微粒子酶免法（MEIA）和ARCHITECTi2000SR分析系统的化学发光免疫法（CLI-A）检测SCC-Ag试剂盒属两种不同的分析方法学,使用相同的定标液及参考范围会引起明显的分析系统误差及结果解释混乱,建议生产厂家进行改进。     

血清胃蛋白酶原及CA199、CA242、CEA联合检测在胃癌早期诊断中的价值

目的 研究联合检测血清胃蛋白酶原(PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ)及糖蛋白抗原199(CA199)、糖脂类抗原242(CA242)、癌胚抗原(CEA)在胃癌早期诊断中的临床应用价值。 方法 血清中的胃蛋白酶原PG用乳胶增强免疫比浊法,CA199、CA242、CEA用化学发光微粒子免疫法,分别检测130例胃癌患者(均有病理学诊断明确为胃癌患者)、30例胃部良性疾病患者、120例正常健康体检人群的水平,统计学分析3组间的差异;并比较上述各单一肿瘤指标与联合肿瘤指标检测的灵敏度、特异度的差异。 结果 相较于胃部良性疾病患者组和正常健康体检对照组,胃癌组血清中各肿瘤标志物PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA含量水平差异均有统计学意义(P＜0.01)。与所有单项肿瘤标志物检测的灵敏度相比较,联合检测5项肿瘤标志物的灵敏度为86.1%,差异均有统计学意义(P＜0.01),而特异度降低差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 胃癌患者血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA联合检测的灵敏度远远高于单一肿瘤标志物项目检测的灵敏度,血清的PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA的联合检测有助于胃癌的早期诊断。联合检测对提高早期胃癌患者的检出率具有临床实用价值。      

细胞质胸苷激酶1在106例肿瘤病人的表达

[目的]探讨肿瘤患者血清细胞质胸苷激酶（TK1）在临床应用上的意义。[方法]利用免疫印迹增强化学发光法,检测106例肿瘤患者血清和20例健康体检者血清的TK1水平。[结果]肿瘤病人TK1阳性率为45.28%,健康体检者血清TK1阳性率为5%。鳞癌TK1阳性率为26.08%,腺癌TK1阳性率为54.28%。其中乳腺肿瘤、消化道肿瘤、其它肿瘤TK1阳性率较高,分别达55.56%、62.50%、53.85%。肺部肿瘤及宫颈肿瘤的TK1阳性率较低,分别为12.50%、14.2%。[结论]血清TK1检测在腺癌的辅助诊断上是一个有价值的标志物。     

粪肠球菌的药敏分析

目的通过对粪肠球菌药敏分析,特别是对氨基糖甙类抗生素高水平耐药肠球菌（HLAR）的耐药情况进行监测,为临床合理用药提供依据。方法对本院2008年从感染标本中分离出的116株粪肠球菌进行药敏分析,并对氨基糖甙类抗生素高水平耐药试验进行方法学评价。结果 116株粪肠球菌检出两株耐万古霉素菌株,对氨基糖甙类抗生素高水平耐药比对试验K-B法和MIC法结果相同。结论粪肠球菌对抗生素仍以万古霉素最为敏感,但已检出耐万古霉素的粪肠球菌,应引起重视。     

粪肠球菌的药敏分析

目的通过对粪肠球菌药敏分析,特别是对氨基糖甙类抗生素高水平耐药肠球菌(HLAR)的耐药情况进行监测,为临床合理用药提供依据。方法对本院2008年从感染标本中分离出的116株粪肠球菌进行药敏分析,并对氨基糖甙类抗生素高水平耐药试验进行方法学评价。结果 116株粪肠球菌检出两株耐万古霉素菌株,对氨基糖甙类抗生素高水平耐药比对试验K-B法和MIC法结果相同。结论粪肠球菌对抗生素仍以万古霉素最为敏感,但已检出耐万古霉素的粪肠球菌,应引起重视。     

多项目复合肿瘤标志物冻干质控品的制备

[目的]探讨多项目复合肿瘤标志物冻干质控品的制备方法。[方法]利用真空冷冻干燥法制备多项目复合肿瘤标志物冻干质控品。[结果]自制冻干质控品外观均匀,复溶后澄清透明。瓶间差为0．60％（称量法）。2-8℃放置至少12个月,与同类进口质控品比较稳定性无显著性差异。[结论]利用真空冷冻干燥法自制复合肿瘤标志物冻干质控品能满足室内质控的要求,具有较好的市场前景。     

解脲脲支原体的N端保守部分MB优化基因在大肠埃希菌中的高效表达

目的 制备N-端保守部分多条带抗原(MB),克隆并在大肠埃希菌中表达其基因,并鉴定重组MB的抗原性.方法分析14个不同血清型解脲脲支原体(Uu)的基因排列,根据大肠埃希菌偏爱密码子,优化、设计合成DNA序列编码的氨基酸保守序列,合成的基因克隆到表达质粒,重组蛋白诱导和亲和层析纯化.结果 通过对Uu 14个血清型MB抗原氮端的氨基酸序列的分析、比对,根据大肠埃希菌的偏好密码子优化、设计并合成碱基序列,目的基因片段与pET-41a构建重组质粒并转化大肠埃希菌后,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,得到了分子量约为45 kd的重组蛋白,纯化后的MB抗原蛋白能够较特异地与特异性抗体结合,敏感性为85.7％,特异性为87.8％.结论 Uu N-端保守部分的MB蛋白已成功表达、纯化并被证明具有良好的免疫原性.     

肿瘤患者产ESBLs大肠埃希菌感染的耐药性分析

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是由质粒介导,主要产生于肠杆菌科细菌,其中又以大肠埃希菌最为常见。通过对本院2005-2007年培养所得的大肠埃希菌进行分析,为临床的抗感染和合理用药提供依据,以达到减少ESBLs耐药菌株的产生,控制其临床感染。材料与方法1材料(1)菌株:所有菌株均来自本院2005-2007年住院患者送检的各类标本(尿液722株,其次为分泌物、痰液标本),并经法国生物梅里埃公司Vitek-32仪器鉴定菌种(去除重复菌株)。(2)药敏纸片:为OXOID公司产品。(3)M-H琼脂:购自法国生物梅里埃公司。2方法2·1仪器鉴定及药敏试验按Vitek-32仪器革兰阴性菌鉴定卡及药敏卡要求标准步骤操作。测定1102株菌的耐药性。2·2 K-B药敏试验以K-B法测定145株菌对16种抗生素的耐药性。(按原则[1]选取其中14种纸片进行测定)2·3 K-B法ESBLs测定使用每片含30μg头孢他啶、头孢噻肟和头孢他啶/克拉维酸(30μg/10μg)、头孢噻肟/克拉维酸(30μg/10μg)的复合纸片进行试验,当任何一种复合纸片抑菌环直径大于其单独药敏纸片抑菌环直径5mm时可确定该菌产ESBLs。2·4药敏实...