高尿酸血症动物模型的实验研究

[目的] 制备稳定持续、简便易行的高尿酸血症动物模型。[方法] 采用单纯氧嗪酸钾、氧嗪酸钾+次黄嘌呤、腺嘌呤+乙胺丁醇、单纯酵母膏、酵母膏+腺嘌呤、酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾不同药物与不同浓度进行实验,检测模型动物血清尿酸值。[结果] 单纯氧嗪酸钾、氧嗪酸钾+次黄嘌呤模型组尿酸值升高,与空白组比较有差异,但模型不稳定,重复性差,个体差异较大。腺嘌呤+乙胺丁醇、单纯酵母膏、酵母膏+腺嘌呤模型组尿酸值与空白组比较无差异。酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾模型组尿酸值升高,与空白组比较有显著性差异(P<0.01),且模型稳定,个体差异小。[结论] 采用酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾复制高尿酸血症动物模型最佳。     

不同程度肝肾损伤的高尿酸血症大鼠模型研究

目的筛选稳定的高尿酸血症大鼠模型方法。方法单用或联合氧嗪酸钾、果糖、次黄嘌呤造模,观察不同给药方式和时间制备的高尿酸血症大鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮水平、黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XO)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)活性、肝肾病理切片变化、肾三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP binding cassette subfamily g member 2,ABCG2)蛋白表达情况。结果与正常组相比,单用氧嗪酸钾造模7 d大鼠血清尿酸、尿素氮水平、AST、XO活力显著上升(P0.05),肝肾有轻微损伤,肾ABCG2蛋白表达显著下降(P0.05)。果糖和氧嗪酸钾联合造模7 d大鼠血清尿酸显著升高(P0.05),血清肌酐、尿素氮水平、AST、ALT、XO活力、肾ABCG2蛋白表达无差异变化(P0.05),联合造模14 d大鼠血尿酸、尿素氮水平和XO活力显著上升(P0.05),AST和ALT活力无差异变化(P0.05),肝肾损伤不显著。次黄嘌呤和氧嗪酸钾联合造模7 d,大鼠血尿酸、肌酐、尿素氮水平、AST、ALT、XO活性显著升高(P0.05),肝肾损伤严重,肾ABCG2蛋白表达量下降(P0.05)。结论单用氧嗪酸钾可建立轻微肝肾损伤的急性高尿酸血症模型,果糖联合氧嗪酸钾可建立肝肾损伤小的慢性高尿酸血症模型,次黄嘌呤联合氧嗪酸钾可建立肝肾损伤严重的急性高尿酸血症模型。     

急、慢性高尿酸血症模型的建立

目的拟通过建立急性小鼠与慢性大鼠高尿酸血症模型,并采用阳性药验证两种模型的可治愈性,为抗高尿酸药物的研发提供模型工具。方法急性痛风模型小鼠采用腹腔注射次黄嘌呤联合皮下注射氧嗪酸钾的方法造模,造模后半小时阳性组给予别嘌醇片,造模后2 h测定血尿酸、血肌酐、血清尿素氮及肝黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。慢性痛风大鼠每天灌胃腺嘌呤及乙胺丁醇盐酸盐造模,阳性组每天给予别嘌醇片,连续21 d后检测血尿酸、血肌酐、血清尿素氮、肝XOD活性并进行肾组织病理学检测。结果急、慢性痛风模型动物血尿酸、血肌酐均显著升高(P0. 05),慢性痛风大鼠还可见血清尿素氮及肝XOD活性显著升高(P0. 05),肾小管间质损伤及尿酸盐结晶加重,评分显著升高(P0. 05)。阳性药别嘌醇可显著降低急、慢性高尿酸动物的血尿酸值,降低慢性高尿酸动物的血肌酐值、肝XOD活性,改善肾损伤及减少尿酸盐结晶(P0. 05)。结论本实验所采用的方法适用于建立急、慢性高尿酸血症动物模型,并可用于药物药效学观察。     

鸡矢藤提取物对酵母膏和氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症的影响

目的探讨鸡矢藤提取物(EPS)对酵母膏和氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症的影响及可能的作用机制。方法采用酵母膏和氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,观察EPS对模型小鼠血清尿酸水平及体重和肾功能的影响,并进一步观察其对模型小鼠黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶的抑制作用。结果EPS(6.3、3.15、1.57g/kg,ig,qd×14d)在显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的同时,对模型小鼠体重和肾功能均无明显影响;EPS(6.3、3.15、1.57g/kg,ig,qd×14d)可显著抑制高尿酸血症小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶的活性,EPS(6.3g/kg)对模型小鼠血清腺苷脱氨酶的活性也具有一定的抑制作用。结论EPS可显著降低酵母膏和氧嗪酸钾致高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,其机制可能与抑制黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶活性有关。     

浅谈买麻藤等治疗高尿酸血症的作用机制

目的观察买麻藤等四种中草药及别嘌醇、苯溴马龙对高尿酸血症小鼠的影响,为中药治疗高尿酸血症提供实验依据。方法将64只小鼠分成8组,除空白组外,对其余7组分别采取氧嗪酸钾加次黄嘌呤构建小鼠高尿酸血症模型,给予每组相应药物,然后分别测定血清黄嘌呤氧化酶（XOD）活性及血尿酸值。结果小鼠血尿酸水平均显著降低。结论买麻藤抗高尿酸血症的作用机制是抑制XOD活性,从而减少体内尿酸的生成;苍术、金钱草、萆薢抗高尿酸血症的作用机制是促尿酸排泄从而降低体内尿酸蓄积。     

不同造模因素复制小鼠高尿酸血症模型的比较研究

[目的]通过观察不同造模因素对两种品系小鼠血尿酸(uric acid,UA)水平的影响,筛选简单、有效的小鼠高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)造模方法,为HUA的防治和药物早期筛选提供参考。[方法](1)采用氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、腺嘌呤100mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)、腺嘌呤200mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)、黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)、黄嘌呤600mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)等7种造模因素,对昆明(Kunming mate,KM)小鼠灌胃7d,检测血清UA、肌酐(creatinine,CR)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平,比较不同造模因素造模效果的差异。(2)从实验一的7种造模因素中筛选出效果较好的造模因素对ICR小鼠灌胃7d,检测血清UA、CR、BUN水平,比较相同造模因素作用于不同品系小鼠造模效果的差异。[结果](1)KM小鼠连续造模7d后,氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)可使KM小鼠血清UA水平显著升高(P0.01),成功诱导HUA模型,且后者造模效果更佳;而腺嘌呤100mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)组、腺嘌呤200mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)组、黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)组KM小鼠血清UA水平不升反降(P0.01,P0.05),且伴随CR、BUN水平显著升高(P0.01,P0.05);黄嘌呤600mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)组、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)组KM小鼠血清UA水平无统计学差异(P0.05)。(2)用氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)灌胃后,ICR小鼠血清UA水平与正常对照组比较,无统计学差异(P0.05)。[结论]UA前体物质(次黄嘌呤)复合尿酸酶抑制剂(氧嗪酸钾)可成功诱导KM小鼠HUA模型,且造模效果优于单独氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)。在相同造模因素作用下,KM小鼠造模敏感度高于ICR小鼠,更适合HUA造模。     

通络止痛合剂对高尿酸血症大鼠血尿酸、黄嘌呤氧化酶的影响

目的：观察通络止痛合剂对高尿酸血症大鼠的治疗作用。方法：将大鼠按照性别、体重随机分为正常组、模型组、通络止痛合剂组、别嘌呤醇组和苯溴马隆组。按照腺嘌呤、氧嗪酸钾连续灌胃复制大鼠高尿酸血症模型。观察各组用药后28d大鼠血清中尿酸含量的变化及黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）的活性。结果：用药28d后,药物组血清中尿酸含量明显降低,与模型组比较（P〈0.05）,有统计学意义。各药物组XOD活性较模型组明显降低（P〈0.05）。结论：通络止痛合剂可降低血清尿酸含量及XOD活性,对高尿酸血症有一定的治疗作用。     

通痹降浊汤治疗高尿酸血症大鼠的药效学观察

目的观察通痹降浊汤对高尿酸血症大鼠模型的药效学影响。方法通痹降浊汤由北京中医药大学深圳医院制剂室制备,将60只雄性SD大鼠按体质量随机分为空白对照组、模型组、低剂量中药组、高剂量中药组和别嘌醇组,每组12只。实验周期14 d,药物组大鼠预先灌胃给药7 d,第8天开始使用酵母膏15 g/kg+腺嘌呤100 mg/kg灌胃,连续7 d,最后1 d灌胃氧嗪酸钾300 mg/kg造模。检测大鼠血尿酸、尿素氮,苏木素-伊红染色(HE染色)法检测肾组织病理。结果与空白对照组相比,模型组大鼠血清尿酸、尿素氮含量显著升高,且肾脏病理组织有一定程度损害,两个剂量中药均具有降低高尿酸血症大鼠血清尿酸的作用,且可显著降低大鼠血清尿素氮水平,减轻肾脏病理改变,其作用无明显剂量依赖性。结论通痹降浊汤对于高尿酸血症大鼠具有明显治疗作用。     

健脾化湿泄浊方对实验性高尿酸血症大鼠肾功能及XOD活性的影响

目的探讨健脾化湿泄浊方对实验性高尿酸血症大鼠模型肾功能及黄嘌呤氧化酶(XOD)活性的影响。方法 SD大鼠60只,随机分成6组:正常对照组,模型组,健脾化湿泄浊方高、中、低剂量组和阳性对照(别嘌醇)组,每组10只。建立腺嘌呤+氧嗪酸钾致高尿酸血症大鼠模型,同时连续给药30 d。在给药前及给药第30天取血,分离血清测定尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和XOD活性,并取动物肾脏作HE染色。结果与模型组比较,健脾化湿泄浊方高、中剂量组在给药30 d后可显著降低高尿酸模型大鼠血UA水平、血清XOD活性(P0.01);血清BUN、Cr的检测结果和肾组织病理学检查结果显示,健脾化湿泄浊方高、中剂量组对高尿酸血症大鼠肾功能有一定的保护作用。结论健脾化湿泄浊方具有良好的降尿酸作用,对肾功能有一定的保护作用,其降尿酸作用可能与其抑制XOD活性有关。     

高脂高嘌呤饮食联合氧嗪酸钾诱导鹌鹑糖脂代谢紊乱及其并发症

目的旨在建立一种实用的动物慢性代谢疾病模型,探讨高尿酸血症与糖脂代谢的相关性,以及其病理损伤机制。方法采用高脂高次黄嘌呤饮食+氧嗪酸钾联合造模,检测鹌鹑血清尿酸和甘油三酯动态含量变化,并在实验结束后测定血清中各相关指标,并对肝、肾、主动脉进行病理检测。结果高脂高次黄嘌呤饲料+氧嗪酸钾诱导可以明显升高鹌鹑血清尿酸和甘油三酯含量。糖耐量实验表明,联合造模组鹌鹑血糖峰值较高,血糖变化曲线下面积均大于其他各组,胰岛素水平也明显较其他组高。联合造模组还能升高血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活力及尿素氮、肌酐含量,对肝脏、主动脉和肾脏具有明显的损伤作用,这些损伤作用能被苯扎贝特和非布索坦不同程度缓解。结论高脂高次黄嘌呤食饵+氧嗪酸钾联合诱导可以建立一种简便、稳定、持久的动物慢性代谢疾病模型。     

无症状高尿酸血症动物模型的建立及初步研究

目的:建立新型的无症状高尿酸血症小鼠模型。方法:选取雄性尿酸氧化酶基因敲除杂合子C57BL/6J小鼠和野生型C57BL/6J小鼠各20只,两类小鼠均按随机数字表法分为对照组和模型组,每组各10只,模型组给予高酵母饲料饲养并予以氧嗪酸钾盐悬液(1次/d,250 mg/kg)腹腔注射。分别于造模前和造模后第1、2、3、4周时鼠尾静脉取血检测小鼠血清尿酸水平(UA),并于造模后第5周取小鼠肾脏行病理切片及HE染色。结果:造模1周后,两模型组小鼠血清尿酸水平均较对照组明显升高,且杂合子模型组尿酸水平明显高于野生型模型组,比较差异均有统计学意义(P0.05),但肾脏病理切片HE染色显示,两种小鼠对照组和模型组均无明显病理变化。结论:以高酵母饲料饲养并予以氧嗪酸钾盐悬液腹腔注射处理的尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠所构建的高尿酸血症动物模型具有尿酸值高,模型稳定的特点,为较理想的小鼠高尿酸血症动物模型。     

高尿酸血症动物模型的研究进展

高尿酸血症已成为危害人类健康的一种常见症状,而高尿酸血症动物模型是研究痛风防治新策略、药物研发和评价的基础。就常用的高尿酸血症动物模型进行了梳理,将高尿酸血症动物模型分为药物性模型和基因敲除模型。前者造模主要用到尿酸合成前体物质腺嘌呤等嘌呤类物质、尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾和尿酸分泌抑制剂乙胺丁醇等药物;后者主要涉及到尿酸酶Uox和转运体ABCG2基因的敲除。与药物造成的高尿酸动物模型相比,Uox基因敲除大鼠和小鼠是以后高尿酸血症动物的发展方向。     

矢志方对高尿酸血症大鼠尿酸代谢的影响及相关机制研究

目的:探索化瘀祛痰复方矢志方对尿酸代谢的影响及机制。方法:以酵母粉每日15 g/kg灌胃及氧嗪酸钾每日600 mg/kg腹腔注射2周诱导SD大鼠高尿酸血症模型。设正常组、模型组、中药(矢志方)组及苯溴马隆组,给予相应干预。2周后,检测各组大鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮、血清黄嘌呤氧化酶(XOD)活性、尿尿酸、尿β2-MG及观察肾组织病理变化。结果:与空白组比较,模型组血尿酸、24 h尿量、尿尿酸水平、24 h尿酸总排泄量和XOD活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),而血尿素氮、血肌酐、尿β2-MG差异无统计学意义(P>0.05),说明该高尿酸血症模型成功建立。给药后,与模型组比较,中药组及苯溴马隆组血尿酸显著降低、24 h尿尿酸总排泄量显著增加、血清XOD活性显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01);中药组和苯溴马隆组各指标差异均无统计学意义(P>0.05);肾组织病理显示两治疗组病变程度较模型组均减轻。结论:矢志方可以有效降低高尿酸血症模型大鼠血尿酸的水平并可促进尿尿酸的排泄,可降低血清XOD活性,可能为其降低血尿酸的机制之一。     

土茯苓对高尿酸症小鼠作用的研究

目的:观察土茯苓对酵母致高尿酸症小鼠的血清尿酸(UA)、肾功、胆固醇、甘油三酯等指标的影响,探讨寻找防治高尿酸血症的中药制剂。方法:80只昆明种小鼠随机分为4组,空白组、模型组、土茯苓组、别嘌呤醇组,除空白组外,其余组采用酵母造模,土茯苓组、别嘌呤醇组分别给予土茯苓(10g生药/kg)、别嘌呤醇(40mg/kg)灌胃,空白组及模型组灌胃等体积蒸馏水,7d后检测各组小鼠血中UA、肌酐、尿素氮、胆固醇、甘油三酯水平及黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。结果:治疗7d后,与空白组相比,模型组小鼠血清UA、肌酐、胆固醇、甘油三酯、尿素氮水平均明显升高,XOD活性明显增强,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,土茯苓组UA、肌酐、胆固醇、甘油三酯、尿素氮水平均有不同程度降低,XOD活性减弱,差异有统计学意义(P<0.05～0.01)。结论:土茯苓对高尿酸症小鼠尿酸有明显的治疗作用。     

慢性高尿酸血症大鼠模型建立方法的探讨

目的探讨慢性高尿酸血症大鼠模型的建立方法。方法雌性Wistar大鼠40只,随机分为对照组和模型组,模型组饲以高酵母饲料并给予腺嘌呤100 mg/(kg.d)灌胃,定期监测大鼠血尿酸水平,血尿酸水平开始下降时,改进造模方法,模型组饲以高酵母饲料,并以腺嘌呤溶液50 mg/(kg.d)灌胃,同时给予氧嗪酸钾乳悬液100 mg/(kg.d)分2次皮下注射,以维持大鼠高尿酸血症状态。结果实验第14天始,模型组大鼠血尿酸水平均显著高于对照组(t=5.438~8.404,P<0.05)。结论以高酵母饲料加腺嘌呤灌胃并适时给予氧嗪酸钾乳悬液皮下注射所复制的大鼠慢性高尿酸血症模型,具有血尿酸值高、维持时间长、模型稳定的特点。     

茯苓皮提取物对高尿酸血症小鼠的尿酸水平和肾脏的影响

目的：研究茯苓皮提取物对高尿酸血症（HUA）小鼠的降尿酸和肾脏保护作用。方法：用醇和水溶剂提取茯苓皮活性成分，用次黄嘌呤和氧嗪酸钾建立高尿酸血症模型，70只雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组（500 mg/kg次黄嘌呤+250 mg/kg氧嗪酸钾）、茯苓皮醇提物（PCE）高（388 mg/kg）、低（97 mg/kg）剂量组、茯苓皮水提物（PCW）高（96 mg/kg）、低（24 mg/kg）剂量组、苯溴马隆（BEN）组（7.5 mg/kg），分别给药治疗16 d。末次给药后，收集24 h尿量（UV），测定尿液中尿酸（UUA）、肌酐（UCr）；收集左右肾，观察左肾的形态及右肾的病理变化；测定血清中尿酸（SUA）、肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）；计算尿酸排泄分数（FEUA）和尿酸清除率（CUr）；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肾脏中阴离子转运蛋白1(OAT1)、尿酸转运体1(URAT1)、葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)含量。结果：与模型组比较，PCE和PCW能增加HUA小鼠的UUA、UCr、FEUA、CUr、OAT1(P<...     

持续性高尿酸及尿酸性肾损害模型的建立

目的建立持续稳定的高尿酸及尿酸性肾损害大鼠模型。方法采用高酵母饮食加氧嗪酸钾高、中、低3个剂量灌胃,观察实验前后大鼠摄食的变化,测定大鼠血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平的变化,并行肾脏病理观察。结果高、中剂量组血尿酸升高,高剂量组饮食减少较为显著(P<0.01),高剂量组肾脏损害严重。结论中剂量组作为高尿酸血症动物肾损害模型较为合适。     

丹溪痛风方对小鼠高尿酸血症的影响

目的研究丹溪痛风方对高尿酸血症小鼠影响。方法小鼠腹腔注射化学诱导剂氧嗪酸钾盐造成高尿酸血症模型,不同剂量丹溪痛风加减方水提取物灌胃给药,持续7d,取血分离血清测定小鼠血清尿酸（UA）水平,同时取肝脏测定黄嘌呤氧化酶（XOD）的活性。结果不同剂量的丹溪痛风方水提取物能显著地降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,抑制肝脏黄嘌呤氧化酶的活性,对正常小鼠的血清尿酸水平无显著性影响。结论丹溪痛风方水提取物对高尿酸血症小鼠具有降低血清尿酸水平作用,其机制可能与抑制黄嘌呤氧化酶的活性有关。     

大鼠高尿酸血症肾损害模型的建立

目的 建立大鼠高尿酸血症肾损害动物模型。方法 采用腺嘌呤加乙胺丁醇给高、中、低3个剂量组灌胃，测定实验前后大鼠血清尿酸、尿素氮、肌酐，行肾组织病理与超微病理观察。结果 高剂量组、中剂量组血尿酸升高，高剂量组肾损害严重。结论 中剂量组作为高尿酸血症动物肾损害模型较为合适。     

高尿酸血症肾损害大鼠模型的建立

目的考察3种不同的造模方法,以建立高尿酸血症肾损害大鼠模型,确定建立高尿酸血症肾损害大鼠模型的有效实验方法。方法选用清洁级雄性SD大鼠24只,体质量（200±20）g,随机分为正常组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、模型Ⅲ组,每组6只。正常组实验过程中正常饲养,模型Ⅰ组根据大鼠体质量以腺嘌呤(0.1 g/kg·d^-1)与氧嗪酸钾(1.5g/kg·d^-1)混悬液灌胃给药;模型Ⅱ组根据大鼠体质量以腺嘌呤(0.15 g/kg·d^-1)与氧嗪酸钾(0.6g/kg·d^-1)的混悬液,每日腹腔注射两次;模型Ⅲ组大鼠以腺嘌呤（20mg/d）和乙胺丁醇（50mg/d）的混悬液灌胃给药。连续给药28 d,检测第7天、第14天、第21天、第28天各组大鼠的血清尿酸（serum uric acid,SUA）、肌酐（creatinine,CRE）、尿素氮（urea nitrogen,BUN）,28 d后留取大鼠肾脏标本行H-E及MASSON染色,观察肾脏病理变化情况。结果模型Ⅰ组大鼠第7天、第14天、第21天及第28天的血尿酸较正常组升高（P<0.05）,血肌酐、尿素氮在第14天、第21天及第28天较正常组均升高（P<0.05）;模型Ⅱ组大鼠仅第14天及第28天的血尿酸值较正常组有所升高（P<0.05）,其血肌酐、尿素氮在第7天、第14天、第21天及第28天较正常组升高（P<0.05）;模型Ⅲ组大鼠仅第7 d的血尿酸值较正常组升高（P<0.05）,其余时间点无明显差异,其血肌酐在第7天、第14天、第21天及第28天较正常组升高（P<0.01）,血尿素氮在第14天、第21天及第28天较正常组升高（P<0.01）;肾组织病理结果提示各模型组可见明显肾小管和间质损伤,其中模型Ⅲ组肾脏组织结构存在广泛性损害。结论腺嘌呤和氧嗪酸钾联合灌胃的造模方法可以成功地制备出尿酸稳定升高、类似于人类尿酸性肾病的高尿酸血症肾损害大鼠模型。