雄性"肾阳虚"亚健康大鼠模型的研究

目的 研究雄性"肾阳虚"亚健康大鼠模型,为调理男性肾阳虚亚健康找寻科学配方.方法 控制用药剂量及灌胃时间,用维生素B4建立雄性"肾阳虚"亚健康大鼠模型,检测腺垂体-睾丸轴激素、氧化损伤因子及抗氧化损伤因子、睾丸组织微细结构作为判断亚健康组织学依据.结果 与正常大鼠相比较,模型大鼠血清FSH、LH、T均降低,均有统计学意...     

四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠血清炎症因子及结肠组织核因子κB p65的影响

目的观察四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及结肠组织核因子κB(NF-κB) p65蛋白表达的影响,从而探讨四神丸治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用随机数字表法将大鼠分为空白组,模型组,阳性对照组,四神丸高、中、低剂量组6组,采用"病-证结合"的方法制备脾肾阳虚型UC大鼠模型,各组给予相应药物灌胃。观察各组大鼠结肠黏膜损伤情况并评分,采用酶联免疫法(ELISA)和免疫组化SP法分别检测各组大鼠血清IL-8、TNF-α的含量及结肠组织NF-κB p65蛋白的表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠结肠黏膜损伤评分,血清IL-8、TNF-α含量均明显升高,结肠组织NF-κB p65蛋白表达明显增强,差异均有统计学意义(P0.01);与模型组比较,各治疗组(阳性对照组及四神丸高、中、低剂量组)大鼠结肠黏膜损伤评分,血清IL-8、TNF-α含量均明显降低,阳性对照组及四神丸中、高剂量组结肠组织NF-κB p65蛋白表达明显下调,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论四神丸可明显降低脾肾阳虚型UC模型大鼠血清IL-8、TNF-α的含量,下调结肠组织NF-κB p65蛋白的表达,改善结肠黏膜损伤。     

赞化鹿茸丸治疗肾阳虚模型大鼠药效学研究

[目的] 探讨赞化鹿茸丸对肾阳虚模型动物的干预作用。[方法] 通过肌注氢化可的松建立肾阳虚大鼠模型。将雌性/雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组以及模型给药组,每组6只。观察记录各组大鼠的毛发颜色、体态、尿量、体质量等形态学指标,评价雄性大鼠睾丸组织结构的形态变化,比较睾丸、子宫、肾脏等脏器的脏器指数,以及睾酮（T）、雌二醇（E₂）、肿瘤坏死因子（TNF-α）相关生化指标的水平变化,评价赞化鹿茸丸对肾阳虚模型大鼠的干预作用。[结果] 本研究通过肌肉注射氢化可的松3周造肾阳虚大鼠模型。肾阳虚大鼠模型经赞化鹿茸丸干预后发现体毛枯燥无光泽、弓背蜷缩、畏寒、尿量增加、体质量下降情况有所改善;雄性模型给药组经赞化鹿茸丸干预后发现睾丸组织生精小管细胞层数增多,精子细胞和精子生成增加,间质细胞数量恢复。与模型组脏器指数相比,雄性模型给药组睾丸和肾脏脏器指数显著提高（P<0.01）,雌性模型给药组肾脏脏器指数也显著提高（P<0.05）,子宫指数有提高趋势,但无显著性差异。此外,雄性模型给药组大鼠血清中T水平和雌性模型给药组大鼠血清中E₂水平与造模组相比显著提高（P<0.01）;雌性/雄性模型给药组大鼠血清中TNF-α水平与造模组相比显著降低（P<0.01）。[结论] 赞化鹿茸丸改善因肾阳虚病症引起的一系列症状,赞化鹿茸丸干预后改善肾阳虚证之畏寒肢冷、精神萎靡、尿多、形体消瘦等症状以及睾丸组织病变情况;同时提高睾丸、子宫和肾脏的脏器指数,并调节肾阳虚大鼠血清中受扰动的T、E₂、TNF-α的水平。     

Cdyl、G9a、及HDAC1在肾阳虚大鼠睾丸组织中的表达

目的 观察Cdyl、G9a、HDAC1在肾阳虚大鼠睾丸组织中的表达,探讨Cdyl及相关因子引起雄性大鼠肾阳虚的机制.方法 20只健康雄性SD大鼠随机分为空白组与模型组,模型组采用环磷酰胺50 mg/kg·d腹腔注射,空白组给予等量生理盐水注射.大鼠造模后第6天,将大鼠取血处死,分离睾丸、附睾进行相关指标检测. 结果 与空白组比较,模型组大鼠精子浓度、活力及活率明显降低;模型组大鼠睾丸组织Cdyl、G9a表达明显降低(P<0.01),HDAC1表达明显升高(P<0.01). 结论 Cdyl、G9a表达降低,HDAC1表达升高与雄性大鼠肾阳虚相关.     

针刺对海洛因依赖雄性大鼠血清睾酮含量影响的实验研究

目的 观察针刺对海洛因依赖雄性大鼠血清睾酮含量的影响.方法 40只雄性大鼠随机分为4组:正常组、模型组、美沙酮组、针刺治疗组.用累进固定比率程序建立大鼠海洛因依赖模型,针刺结束后比较各组血清睾酮含量及睾丸组织形态的变化.结果 正常组、针刺治疗组血清睾酮含量及右侧睾丸脏器指数比美沙酮组高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 针刺能帮助海洛因依赖雄性大鼠血清睾酮含量及睾丸脏器指数较好地恢复.     

健脾益肺口服液对慢性阻塞性肺疾病肺脾气虚证大鼠核因子-κB的影响

目的:观察健脾益肺口服液对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)"肺脾气虚证"大鼠肺组织核因子-κB活性的影响,探讨其是否通过核因子-κB途径抑制COPD的气道炎症及调节其免疫功能。方法:将65只SD成年雄性大鼠随机分为6组,分别为空白组,健脾益肺口服液低剂量组、中剂量组、高剂量组,模型组,地塞米松组;用香烟烟熏加脂多糖复制"肺气虚证"模型;接着用大黄液灌胃,复制"脾气虚证";造模时间共为28 d,在第14天开始给药,造模后取大鼠肺组织,用试剂盒提取组织蛋白质,利用Western Blot方法,测定大鼠肺组织I-κB及核因子-κB的表达水平。结果:1模型组大鼠核因子-κB显著高于正常组(P<0.01),I-κB显著低于正常组(P<0.01)。2健脾益肺口服液各剂量组及地塞米松组大鼠核因子-κB表达明显下降,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);健脾益肺口服液高剂量组、中剂量组及地塞米松组I-κB显著升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);随剂量的增加,疗效亦增加,但健脾益肺口服液各组与地塞米松组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾益肺口服液可增强I-κB活性,抑制COPD"肺脾气虚证"大鼠核因子-κB,从而推断其可能通过抑制核因子-κB改善COPD免疫功能,抑制其气道炎症。     

穿山龙总皂苷对胶原诱导性关节炎大鼠血清及滑膜组织肿瘤坏死因子α影响的研究

目的探讨穿山龙总皂苷对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠血清及滑膜组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响,探讨其治疗类风湿关节炎(RA)的免疫调节机制。方法选取48只清洁级Wistar大鼠,随机分成4组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、雷公藤多苷片组(C组)和穿山龙总皂苷组(D组),每组12只。B、C、D组大鼠均建立CIA大鼠模型,待模型建立成功后,C、D组大鼠分别给予相应的药物灌胃;A、B组大鼠给予等体积0.9%氯化钠注射液灌胃;均连续给药21 d,然后处死大鼠取材。应用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测4组大鼠血清TNF-α水平,同时应用逆转录联合酶链式反应(RT-PCR)方法测定4组大鼠滑膜组织TNF-αmRNA表达量。结果 B组大鼠血清TNF-α水平及滑膜组织TNF-αmRNA表达量均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);而C、D组大鼠血清TNF-α及滑膜组织TNF-αmRNA表达量均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);但C、D组大鼠上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论穿山龙总皂苷可能通过调节细胞因子TNF-α的水平来发挥其对RA有益的免疫调节作用。     

腺嘌呤致大鼠睾丸损伤中标志酶的变化及淫羊藿总黄酮的干预作用

目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对腺嘌呤致大鼠睾丸损伤中标志酶的干预作用。方法将70只Sprague Dawley雄性大鼠随机分为5组:正常对照组(蒸馏水灌胃)、模型组(蒸馏水灌胃)、TFE组(TFE 100mg/kg灌胃)、维生素E组(维生素E 10mg/kg灌胃)和甲基睾酮组(甲基睾酮5mg/kg灌胃),每组14只。除正常对照组外,其余每组大鼠均予腺嘌呤150mg/kg灌胃14d建立大鼠睾丸病变模型,第15天开始各组大鼠分别给予相应处理。30d后处死大鼠,称量睾丸、附睾、精囊腺及大鼠质量,计算脏器指数;检测血清睾酮、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH);睾丸中乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、谷氨酰转肽酶(γ-GT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及丙二醛(MDA)含量。结果与正常对照组比较,模型组各性腺脏器指数下降,血清睾酮下降,睾丸中LDH、ACP及γ-GT活力降低,MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,TFE组大鼠脏器指数、血清睾酮水平及特异性酶类活力提高(P<0.05)。结论 TFE可能通过促进睾酮释放及抗氧化作用而显著提高腺嘌呤致大鼠睾丸损伤中标志酶活力。     

香烟烟雾对雄性大鼠血清及睾丸组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响

目的探讨被动吸烟模型中香烟烟雾对雄性大鼠血清及睾丸组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(i NOS)活性的影响。方法根据Haber理论建立大鼠被动吸烟模型,观察其体重变化、睾丸组织病理改变,并测定其血清及睾丸组织匀浆中NO含量和i NOS活性。结果对照组大鼠体重随时间的增加呈匀速增长状态(P 0. 05),实验组大鼠体重随染毒时间、剂量不断增加呈现缓慢增长状态,有的甚至出现负增长,高剂量组大鼠体重变化尤其明显(F=30. 24,P 0. 05);实验组大鼠睾丸组织出现明显病理病变,其血清和睾丸组织中NO含量明显大于对照组比值(P 0. 05),且i NOS活性均有改变且差异有统计学意义(F=6. 13,P 0. 05)。结论香烟烟雾对雄性大鼠血清及睾丸组织匀浆中NO含量和i NOS的活性均有影响,使其NO含量增加、i NOS活性发生改变,是大鼠睾丸组织出现损伤的可能机制之一。     

糖尿病对雄性大鼠生殖功能的影响

目的 研究糖尿病对雄性SD大鼠生殖功能的影响.方法 采用腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病大鼠动物模型,造模后监测血糖变化并继续饲养12周.用10%水合氯醛腹腔注射将大鼠麻醉,腹主动脉取血,离心后测定血清中睾酮、促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)的浓度;分离睾丸、附睾,分别称重,行睾丸病理学检查.结果 糖尿病组睾丸和附睾重量低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清睾酮水平低于空白对照组,LH水平高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血清FSH水平与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).病理学检查发现糖尿病组大鼠睾丸曲细精管病变明显,生精细胞层次减少,管腔内无成熟精子生成,曲细精管之间间质萎缩.结论 糖尿病导致大鼠睾丸病理学改变和生精障碍,激素水平紊乱,从而影响生殖能力.     

亚健康状态肾阳虚证基因差异表达研究

目的探讨亚健康状态肾阳虚证的特征性基因差异表达谱。方法选取亚健康状态肾阳虚证患者作为研究对象,确诊为肾阳虚证患者为实验组,选择健康志愿者作为正常对照组;应用基因芯片技术,研究亚健康状态肾阳虚证的基因表达谱;结合MAS软件对差异表达基因进行分析。结果亚健康状态肾阳虚证组和正常对照组间存在差异基因表达特征图谱。获得差异表达基因共75条。其中,表达水平上调(Ratio值大于2)的有22条,表达水平下调(Ratio值小于0.5)的有53条。结论基因芯片技术可以快速、高通量筛选亚健康状态肾阳虚证的相关基因;初步获得亚健康状态肾阳虚证的相关基因。     

四味甘温归肝肾经中药对性激素致肾阳虚大鼠血流变的影响

[目的]观察杜仲、何首乌、海马、菟丝子四味中药对性激素致肾阳虚大鼠血液流变学的影响,认识"甘,温,入肝、肾经"中药药性的现代科学内涵.[方法]采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成雄性大鼠肾阳虚模型、采用腹腔注射丙酸睾酮造成雌性大鼠肾阳虚模型.SD大鼠70只,随机分为7组:正常对照组、模型对照组、金匮肾气丸组、杜仲组、何首乌组、海马组、菟丝子组,每组10只.每天给予性激素造模后给药,连续12天,取血.用普利生血流变平台对大鼠的血液流变状态进行测定.[结果]何首乌、菟丝子能改善肾阳虚大鼠低切变率下的全血粘度、全血还原粘度;海马能降低血沉方程K值;菟丝子可以降低大鼠血液的聚集指数.这表明何首乌、海马、菟丝子能在不同程度上改善血液流变学,这可能与其温补入肝肾从而"养血行血"有关.[结论]何首乌、海马、菟丝子均能改善血液流变学,这为探讨"甘温归肝肾经"中药的共同规律提供了新的内容.     

Levels of sexual hormones in relation with syndrome-differentiation of TCM in patients of chronic renal failure

Determinations of plasma levels of sexual hormones in 43 male patients of chronic renal failure showed that the content of testosterone (T) decreased markedly, while estradiol (E2) and E2/T ratio were obviously higher than in normal subjects, with no significant correlation between the levels of these sexual hormones and renal function. According to syndrome-differentiation of TCM, 17 of the 43 cases belonged to deficiency of Kidney-yang, and the other 26 cases deficiency of Kidney-yin. In the patients with deficiency of Kidney-yang, the E2 level was not increased, but the T content decreased to make the E2/T ratio apparently elevated; whereas in the patients with deficiency of Kidney-yin, both E2 and E2/T were elevated. The level of E2 in deficiency of Kidney-yin was markedly higher than that in deficiency of Kidney-yang. The results indicated that patients of chronic renal failure of the type of deficiency of Kidney-yang differed in syndrome as well as in levels of the sexual hormones from the type of deficiency of Kidney-yin; however, the sexual hormones were not correlated with the renal functions in the two types of patients.     

肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝组织蛋白质双向电泳图谱的建立与分析

目的:建立具有高分辨率和稳定性的大鼠肝组织蛋白质组研究的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析.方法:正常大鼠和肾上腺切除造成的肾阳虚模型大鼠,肝组织匀浆后提取总蛋白,用Cy3或Cy5标记,每一个Cy3标记样品和一个Cy5标记样品与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同波长单色光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱.所获得的图谱用DeCyder软件进行分析.结果:在肾阳虚大鼠肝组织,有8个蛋白质表达水平显著增加,9个蛋白质表达水平显著下降.结论:分析所得的17个差异蛋白质可能与肾阳虚疾病有关.     

菟丝子不同提取部位对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响

目的：观察菟丝子4个提取部位对雌二醇致肾阳虚模型小鼠的影响，探讨其药性的现代科学内涵。方法：ICR雄性小鼠84只，随机分为正常对照组、模型对照组、桂附地黄丸组、菟丝子水提取部位组、菟丝子正丁醇提取部位组、菟丝子乙酸乙酯提取部位组和石油醚提取部位组等7组，每组12只。采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型。测定各组体征、肛温、抓力、游泳时间、自主活动、血清肌酐及尿素、血液学指标、睾丸和精囊腺指数。结果：菟丝子4个提取部位都能提高小鼠游泳时间、自主活动次数、睾丸和精囊腺指数，降低血清UR水平。水提取部位、正丁醇提取部位均能提高抓力、RBC、Hb、MCV、PLT；水提取部位还能提高肛温、WBC、LY、NE、EO；乙酸乙酯提取部位可升高肛温，石油醚提取部位可升高肛温、抓力，降低Cr水平。结论：菟丝子的药性有其科学内涵。菟丝子水提取部位、正丁醇提取部位的药效作用相似，有共同药效物质群，为临床应用和产品开发提供了一定的基础。     

束缚应激致亚健康状态大鼠脑组织iNOS的表达及其中药干预作用

目的 研究束缚应激致亚健康状态模型大鼠脑组织诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达情况,同时观察抗衰老片和六味地黄丸的干预作用.方法 取雄性SD大鼠40只,随机分成4组,即正常对照组、模型对照组、抗衰老片组、六味地黄丸组,每组10只,采用每天限制活动3 h模拟人类心理应激,建立大鼠亚健康状态模型,造模同时,用抗衰老片、...     

不同因素致亚健康大鼠血液生化、血气电解质指标的影响

目的观察不同因素致亚健康模型大鼠血液生化和血气电解质指标的变化。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即多因素(MF)组、热水游泳(WS)组、睡眠不足(SD)组、单纯束缚(PC)组和正常对照(C)组,每组12只。采用热水游泳、睡眠剥夺和单纯束缚等单因素或多因素联合建立亚健康大鼠模型,各组造模5d后,处死6只,剩余动物进行恢复性饲养3 d后处死。分别测定造模结束后和恢复3 d时大鼠的血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和血气电解质等指标。结果 (1)与正常对照(C)组比,造模5d后MF组的大鼠BUN和TG水平显著降低(P<0.05,P<0.01),同时CREA、AST、CK、CK/AST和LDH水平显著升高(P<0.01),WS组的大鼠TC、CK、CK/AST和LDH水平亦升高显著(P<0.01),且各模型组的大鼠GLU浓度明显增加(P<0.01);恢复3 d后,MF组的大鼠TC、AST、ALT、ALB、BUN、CK、CK/AST和LDH水平均明显高于C组(P<0.05,P<0.01);WS组的大鼠血清AST、CK、CK/AST比值和LDH水平亦显著高于C组(P<0.01),SD组的大鼠CK显著高于C组(P<0.05);(2)与C组比,造模5d后MF组、SD组和PC组的大鼠PCO2、Hct和Hb均明显升高(P<0.05,P<0.01),WS组Hct和Hb升高显著且Na+显著降低(P<0.01),MF组的大鼠PO2和SO2%均显著降低且K+明显升高(P<0.05),且各造模组的大鼠HCO3-♂的浓度均显著升高(P<0.05,P<0.01);恢复3 d后,除各造模大鼠的血液pH值和PO2均明显下降(P<0.05,P<0.01)外,MF组、SD组和PC组的大鼠PCO2升高并伴有SO2%的降低(P<0.05,P<0.01),MF组和WS组Na+仍明显低于C组(P<0.05,P<0.01),SD组的大鼠K+和Mg2+则明显高于C组(P<0.05,P<0.01)。结论不同因素诱导的亚健康状态大鼠的血液生化、血气电解质指标均出现了不同程度上的改变,故血液生化和血气电解质指标能有效评估亚健康状态机体血液微环境的改变。     

湖南地区大学生亚健康状态中医证候特点及其影响因素调查分析

目的调查分析湖南地区大学生亚健康状态的中医证候特点及其影响因素。方法制定符合大学生人群特点的问卷调查表,采用横断面调查法,对湖南地区8所高校的907例亚健康状态的大学生进行现场调查问卷的填写．并对其中医证候特点及影响因素进行分析。结果湖南地区大学生亚健康的中医证型排名前8位的分别是：肝郁脾虚、肝肾阴虚、肝气郁结、气血亏虚、肝郁化火、湿热蕴结、脾虚湿阻、心脾两虚,涉及到的病位主要有肝、心、脾、肾。不同学校、不同专业、不同性别及不同民族的湖南地区大学生亚健康的中医证候分布特点不同．这与不同的学习环境、睡眠时间、学校与专业、性别、民族、地域及生活习惯的差异有关。结论湖南地区大学生亚健康状态中医证候分布具有一定的独特性。     

复健片对大鼠脑梗死后不同时间点Nogo-A表达的影响

目的观察束缚应激致亚健康状态大鼠模型的行为学变化以及血清中CORT的含量,脑组织中TChE活性和5-HT含量变化,探讨中药的干预作用及其机制。方法取雄性SD大鼠40只,体重320～360g,随机分成4组,即正常对照组、模型对照组、抗衰老片组、六味地黄丸组,每组10只,采用束缚方法限制活动模拟人类心理应激因素,建立大鼠亚健康状态模型,在造模同时,用抗衰老片、六味地黄丸等中药进行干预,测定亚健康状态大鼠的耐力,学习记忆力及血清中CORT的含量,脑组织TChE活性和5-HT含量。结果与正常对照组比,模型对照组大鼠的挣扎次数明显减少和静止时间明显延长俨〈0．01）,游泳路程和搜索平台的潜伏期明显延长（P〈0．05）;主动回避的潜伏期、电击次数和电击时间均有所延长,但差异不显著（P〉0．05）：血清cORT显著升高p〈0．05）,脑组织TChE活性和5-HT含量明显升高（P〈0．05）。而给予抗衰老片和六味地黄丸后,大鼠的挣扎次数明显增多,静止时间呈缩短趋势,其中抗衰老片组的挣扎次数差异显著（P〈0．01）;大鼠游泳路程显著缩短（P〈0．05）,且搜索平台的潜伏期有减少趋势（P〉0．05）,主动回避的潜伏期、电击次数和电击时间变化不明显。血清CORT含量、脑组织中TChE活性和5-HT含量显著降低俨〈0．05,P〈0．01）。结论束缚应激致亚健康状态大鼠的的耐力和学习记忆力下降,血清CORT含量、脑组织中TChE活性和5-HT含量升高,而抗衰老片、六味地黄丸等中药可有效改善心理应激致亚健康状态大鼠的耐力及学习记忆能力,其机制可能与调节激素含量及神经递质功能有关。