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相似文献
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1.
目的 分析Alport综合征(AS)的诱导多能干细胞(iPSCs)全基因微小核糖核酸(microRNA)的表达谱,筛选出具有差异性表达的microRNA与发生碱基突变的microRNA.方法 收集1例AS患者与1例健康人的尿液,从尿液中分离尿肾脏管细胞,尿肾脏管细胞分化诱导成iPSCs.运用高通量测序方法对iPSCs的microRNA进行测序与表达量测定,比较分析两人microRNA的表达差异,寻找具有特异性的microRNA靶点.同时,将mi-croRNA序列与miRBase数据库(http://www.mirbase.org/)中已知成熟microRNA序列进行比对,比较两标本mi-croRNA碱基编辑数量,找出发生了碱基突变的microRNA.结果 在两人标本中发现30个microRNA具有显著的差异性表达,其中19个microRNAs表达上调,11个microRNA表达下调.has-miR-3117-3p的倍比值(log2 Ratio)为7.79,在表达上调的microRNA最具有特异性;has-miR-544b的倍比值为-9.09,在表达下调的microRNA最具有特异性.同时在两标本中共有208个microRNA发生了碱基突变,其中104个microRNA,AS患者发生碱基编辑概率比健康人大;77个microRNA,健康人发生碱基编辑概率比AS患者大.结论 AS患者与健康人肾脏组织中的microRNA存在差异性,AS发生碱基编辑引起基因突变的microRNA比健康人更常见.这些差异性表达的microRNAs与microRNA碱基突变的概率可能在AS发病机制中起重要作用.  相似文献   

2.
目的探讨Eaf2基因敲除小鼠中micro RNA的表达情况,以及Eaf2基因对人晶状体上皮细胞凋亡及晶状体内micro RNA表达的影响。方法利用Lipofectamine 2000瞬时转染p EGFP-C1-Eaf2质粒过表达Eaf2基因,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,利用Real time q-PCR方法检测人晶状体上皮细胞中micro RNA的表达情况;利用Real time q-PCR方法检测Eaf2基因敲除小鼠micro RNA的表达情况。结果 p EGFP-C1-Eaf2质粒转染组细胞凋亡率显著低于对照组,mi R-125b、let-7a的表达显著高于对照组,而mi R-204的表达显著低于对照组;Eaf2基因敲除小鼠mi R-125b、let-7a的表达显著低于对照组,而mi R-204的表达显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Eaf2基因可能通过调控micro RNA的表达抑制人晶状体上皮细胞凋亡,从而在白内障发生中发挥晶状体保护作用。  相似文献   

3.
目的分析活动性肺结核患者(TB)外周血CD14+单核细胞mi RNA表达谱,筛选一组用于结核诊断及鉴别诊断的分子标志物。方法选取健康对照(HD)、结核菌潜伏感染者(LTBI)、TB各6例,采集外周抗凝血并分离外周单个核细胞(PBMC),再用免疫磁珠技术分选CD14+单核细胞,提取总RNA,利用mi RNA芯片检测CD14+单核细胞中mi RNA表达谱。筛选差异表达的mi RNA分子,利用Taq Man探针q PCR技术在大样本人群中进行验证(HD、LTBI、TB各25例)。结果基因芯片结果显示mi R-487家族可以将三组人群进行有效区分,依据其在不同人群中表达趋势共分为4个基因簇。从每个基因簇中筛选具有代表性的4个mi RNA分子进行Taq Man q PCR验证,包括mi R-487b-3p、mi R-134-5p、mi R-487a-3p、mi R-539-3p,其表达趋势与芯片结果一致。其中TB人群mi R-487b-3p表达量显著低于HD、LTBI,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01);mi R-487a-3p在LTBI、TB人群中表达水平显著低于HD(P<0.01,P<0.05);TB人群mi R-539-3p表达水平显著高于HD、LTBI(P<0.05,P<0.05)。结论 mi R-487家族与结核菌感染、发病的关系密切,其中mi R-487b-3p联合mi R-539-3p可以作为活动性结核诊断标识,而mi R-487a-3p可以作为结核菌感染诊断标识。  相似文献   

4.
目的:对慢性心力衰竭(CHF)患者的血浆miRNA进行二代测序,探讨CHF患者血浆中miRNA的表达差异。方法收集2013年7月至2015年6月间在北京大学深圳医院治疗的40例CHF患者和10例健康对照个体,应用第二代高通量测序技术对其血浆miRNA进行测序,寻找差异表达的miRNA。另收集同期CHF患者和健康对照个体各96例,用逆转录-实时荧光定量聚合酶链反应对差异表达的miRNA进行验证。结果与健康对照者相比,高通量测序显示在CHF患者的血浆中miR-184、miR-651-5p、miR-130b-5p、miR-203a-3p、miR-548e-3p和miR-106a-5p的表达水平存在显著上调,miR-31-5p和miR-5091的表达水平存在下调,逆转录-实时荧光定量聚合酶链反应检测血浆miRNA的表达差异与高通量测序的结果相符。结论 CHF患者的血浆miRNA与健康个体的表达谱存在差异,差异表达的miR-184、miR-651-5p、miR-130b-5p、miR-203a-3p、miR-548e-3p、miR-106a-5p、miR-31-5p和miR-5091或许与CHF的发生有关。  相似文献   

5.
目的:探讨卵巢子宫内膜异位症(ovarian endometriosis,OEM)外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)的表达谱。方法:采用芯片技术对3例OEM患者及3例健康对照者的在位内膜间质细胞外泌体miRNA进行分析,筛选出组间差异miRNA。结果:获得存在差异表达miRNA共12条,其中hsa-miR-6829-5p、hsa-miR-5188、hsa-miR-4430、hsa-miR-584-5p、hsa-miR-4485-5p、hsa-miR-4257在实验组表达上调,hsa-miR-188-5p、hsa-miR-4741、hsa-miR-4516、hsa-miR-1229-5p、hsa-miR-7150、hsa-miR-5787表达下调。对表达差异较大的外泌体miRNA进行靶基因预测及其基因功能(gene ontology,GO)分析和信号通路(pathway)分析,发现靶基因聚集的生物学功能多数参与生物进展过程的调控。结论:OEM患者与健康对照者的在位内膜间质细胞外泌体miRNA存在着差异性表达。差异性表达的miRNA特异性很高,对进一步阐明该疾病的发病机制和寻找新的诊断标记物具有重要意义。  相似文献   

6.
7.
目的 分析长链非编码RNA(Lnc RNA)X染色体失活特异转录本(XIST)和微小RNA-101-3p(mi R-101-3p)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞中的表达及临床应用价值。方法 选取2019年4月至2021年10月在新乡市中心医院治疗的180例SLE患者作为观察组,选择同期180例健康体检者作为对照组。根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分将观察组分为稳定期组80例和活动期组100例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法对患者外周血单核细胞中Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的相对表达水平进行检测。分析Lnc RNA XIST与mi R-101-3p的相关性以及二者与SLEDAI评分的相关性;对影响SLE的因素进行logistic回归分析;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Lnc RNA XIST、mi R-101-3p的表达对SLE的诊断价值。结果 与对照组相比,观察组患者外周血单核细胞Lnc RNA XIST水平升高,mi R-101-3p水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);活动期组患者较稳定期组外周血单核...  相似文献   

8.
目的:研究炎症相关因子Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-kappa B(NF-κB)在特发性膜性肾病(IMN)患者肾组织的表达水平,探讨炎症因子TLR4、NF-κB在IMN发病过程中的临床意义。方法:本研究纳入于蚌埠医学院第一附属医院肾病科经肾活检初次诊断为IMN的患者45例为特发性膜性肾病组(IMN组),同期选取因肾挫伤、肾肿瘤或输尿管肿瘤等行肾脏切除留取健康肾脏组织20例为正常对照组(NC组)。收集两组相关临床指标并分析比较两组间差异性。采用免疫组化的方法分别检测炎症因子TLR4、NF-κB在两组肾组织中的表达,并进行平均光密度值分析,比较两组间炎症因子表达差异。将IMN组分为纤维化组29例,无纤维化组16例,分析比较两组间炎症因子表达的差异性,了解炎症在肾间质纤维化中的作用。应用Pearson相关性分析两组炎症因子之间及其与临床指标间的相关性。结果:IMN组患者肾组织中TLR4、NF-κB的表达水平显著高于NC组(P<0.01)。IMN纤维化组TLR4、NF-κB表达明显强于无纤维化组(P<0.05)。相关性分析显示:TLR4与NF-κB两者之间密切相关(P&...  相似文献   

9.
目的 探讨宫颈癌组织中micro RNA-129-5p(mi R-129-5p)、性别决定区Y框蛋白4(SOX4)表达与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2017年6月—2019年8月湖北民族大学附属民大医院101例宫颈癌患者的宫颈癌组织、癌旁组织标本及其临床资料,根据患者生存情况将其分为生存组79例和死亡组22例。采用免疫组织化学法检测SOX4蛋白阳性表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测mi R-129-5p m RNA相对表达量。绘制Kaplan-Meier曲线分析mi R-129-5p、SOX4表达与宫颈癌患者3年生存率的关系;采用多因素Cox回归分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果 宫颈癌组织mi R-129-5p m RNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05),SOX4蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。FIGO分期Ⅱ期、低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者组织中mi R-129-5p高表达、SOX4蛋白阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ期、中/高分化、无淋巴结转移患者(P<0.05)。mi R-129-5p低表达患者3年生存率低...  相似文献   

10.
王建才  徐哲  林志淼  杨勇  马琳 《北京医学》2012,34(5):368-370
目的通过检测1例散发型角膜炎、鱼鳞病、耳聋综合征患儿的基因突变情况,明确其诊断。方法总结患儿临床资料,提取外周血DNA,采用PCR扩增GJB2基因编码区的全部外显子及其侧翼序列并测序。并以50例健康者作为对照。结果该患者GJB2基因外显子中的第148位碱基发生G→A杂合突变(C.148G>A),导致其编码的第50位氨基酸发生错义突变(p.D50N),患者父母均未发现该突变。患者诊断为角膜炎、鱼鳞病、耳聋综合征。结论对从临床表现上诊断困难的病例,在完善全面检查的基础上寻找基因的诊断依据是有效的诊断方法。  相似文献   

11.
目的 筛选初发和复发急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿血液中单核细胞差异表达的microRNA。方法 分离初发和复发B-ALL患儿及正常儿童单核细胞,提取核酸行HiSeq测序。筛选差异表达的microRNA并预测与之相关的候选靶基因和信号通路。结果 初发组/复发组共检出差异表达的microRNA 20个,10个上调,10个下调。其中差异最显著的是has-miR-30a-3p,has-miR-30a-5p,has-miR-30c-2-3p,has-miR-139-5p,has-miR-99b-5p。富集到的候选靶基因功能主要集中在细胞成分和蛋白结合方面,即细胞质、细胞内组分、蛋白结合、细胞内、细胞质部分。结论 复发是儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗难题,从microRNA水平研究儿童ALL在初发和复发之间的差异。为ALL的病理机制研究提供数据基础,为诊断、治疗 和预后寻找新的靶点。  相似文献   

12.
目的?探讨特应性皮炎(AD)患者皮损中炎症相关microRNAs及趋化因子的表达水平与其中医证型的关联。方法?AD患者79例辨证分型(湿热内蕴、脾虚湿盛、血虚风燥)后,分别采用qPCR和免疫组化法检测皮损标本中的5个炎症相关microRNAs及趋化因子的表达情况,并对不同证型皮损中microRNAs差异表达的免疫调节作用进行分析。结果?湿热内蕴组中miR-21相对表达量上调而miR-125b下降明显,两者与血虚风燥组及正常对照组相比差异均有显著性意义(P<0.01);此时TARC/CCL17表达量较高,阳性颗粒主要分布于基底层和真皮层。脾虚湿盛组中miR-155表达量较高,明显高于其他2组和正常对照组(P<0.01),miR-203虽有所下调,但与其他几组相比差异均不具有统计学意义(P>0.05);此时皮损中表达最高的是CTACK/CCL27分子,散在分布于表皮与真皮,RANTES/CCL5与湿热内蕴组相比亦表达上调。血虚风燥组中miR-146a的表达水平有所上调,与湿热内蕴组及正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);RANTES/CCL5表达增高,明显高于湿热内蕴组(P<0.01);TARC/CCL17分子与脾虚湿盛组相比亦有所上调。结论?microRNAs分子表达谱在AD不同证型患者皮损中存在差异表达,其介导的不同免疫炎症组织损伤可能是AD不同临床表现的物质基础。   相似文献   

13.
目的: 运用生物信息学技术分析胃癌中microRNA表达特征。方法: 使用R语言软件包分析GEO芯片数据集的两个子集中的miRNA表达量的差异;采用qRT-PCR技术检测本院60例胃癌患者癌组织及20例胃癌手术患者癌旁组织中miR-125b-5p的表达量,统计分析其表达特征与分化程度、TNM分期、性别、年龄、家族史及肿瘤直径之间的关系。结果: miR-125b-5p在GSE93415和GSE99415中的表达均上调,且其在胃癌组织与癌旁胃组织表达量差异具有统计学意义(P<0.05)。使用qRT-PCR验证了miR-125b-5p在胃癌组织中的表达高于癌旁组织的趋势,miR-125b-5p表达量与TNM分期和浸润程度有关(P<0.05),与年龄、性别、家族史、肿瘤直径和分化程度均无关(P>0.05);高表达miR-125b-5p的胃癌患者生存期明显缩短。结论: 胃癌组织miR-125b-5p高表达,且与胃癌TNM分期、浸润程度及总生存率有关。  相似文献   

14.
目的 评价血浆microRNA(miRNA)在室间隔缺损(VSD)早期诊断中的临床应用价值以及作为VSD分子诊断标志物的可行性,并建立临床早期诊断模型。方法 采用以济南市儿童医院、泰安市妇幼保健院为基础的病例-对照研究方法开展本次研究。研究分为VSD组85例和对照组80例,分3个阶段进行检测:首先选取VSD组及其匹配对照组各3例,应用miRNA全基因组表达谱芯片进行初筛;然后扩大样本量(20例VSD组vs 15例对照组),对选定的8个有差异的miRNA采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进行芯片结果的验证;最后进一步扩大样本(62例VSD组vs 62例对照组)进行qRT-PCR检测,筛选先天性心血管病早期诊断的生物标志物,建立多指标的Logistic回归模型,并应用MedCalc软件进行受试者工作特征(ROC)曲线分析评价诊断模型的价值。结果 芯片杂交初筛结果显示,与对照组比较,有36个表达有差异的miRNA(P?<0.05),两阶段大样本qRT-PCR验证,检测到5种血浆miRNA(let-7e-5p、miR-155-5p、miR-222-3p、miR-433-3p和miR-487b-5p)在VSD中的表达差异有统计学意义(P?<0.05),可以选择作为具有VSD早期诊断意义的生物标志物。5种血浆miRNA的ROC曲线下面积(AUC)分别在0.678~0.832,其中miR-222-3p的ROC曲线下面积最大为0.832。建立多指标Logistic回归分析模型,5种血浆miRNAs联合模型可提高VSD的诊断效率,ROC曲线下面积达到0.955,敏感性和特异性分别为83.87%和95.16%;3种血浆miRNA(let-7e-5p、miR-155-5p、miR-222-3p)联合诊断模型,ROC曲线下面积达到0.910,敏感性和特异性分别为82.30%和90.30%,接近5个miRNA的诊断效率。结论 5种血浆miRNA作为VSD早期诊断标志物,具有一定的可信性。将其整合后可建立起多指标的联合诊断模型。联合3种血浆miRNA构建诊断模型可提高VSD的诊断效率,临床应用价值更大。  相似文献   

15.
目的 检测和比较乙肝病毒相关性膜性肾病( HBV-MN )和原发性膜性肾病( IMN )中IgG亚型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)组间及组内的表达差异,探讨IgG亚型在二者诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法 32例肾活检确诊为乙肝病毒相关性膜性肾病病例为实验组,20例原发性膜性肾病为对照组,分别进行IgG各亚型的免疫荧光染色。结果 实验组中30例肾组织以IgG1沉积为主, 6例出现IgG4阳性表达,其中5例同时伴有IgG1沉积,21例IgG2阳性,13例IgG3阳性。对照组中19例以IgG4沉积为主,15例可见IgG1沉积,但以弱阳性为主,伴有IgG2阳性7例,IgG3阳性4例。结论 乙肝病毒相关性膜性肾病以IgG1沉积为主,原发性膜性肾病以IgG4沉积为主,可伴有IgG1。两组间IgG1阳性率无明显差异,但实验组的表达强度明显高于对照组。结果提示二者发病机制不同可能引起不同类型的免疫复合物的沉积,IgG4与IgG1有望成为二者鉴别诊断的有应用价值的生物学指标。  相似文献   

16.
目的 用Has-miR-100-3p抑制剂的慢病毒来建立稳定感染人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞株,为进一步研究miR-100在NSCLC细胞中的机制奠定基础.方法 用has-miR-100-3p抑制剂的重组慢病毒液,以其最适浓度感染A549细胞,获得稳定感染慢病毒的A549细胞株.荧光显微镜观察细胞感染效率,实时定量聚合酶链锁反应(qRT-PCR)和流式细胞术(FCM)分别检测稳定感染慢病毒的A549细胞株中miR-100的表达量和细胞株中绿色荧光蛋白(GFP)表达情况.结果 荧光显微镜下可见绿色荧光在细胞中表达.qRT-PCR检测结果显示,感染抑制剂的A549细胞中miR-100的表达量显著减少;流式细胞术检测感染组细胞中均有GFP的表达.结论 获得了has-miR-100-3p抑制剂的慢病毒稳定感染的A549细胞株,该细胞株中内源性miR-100的表达下调.  相似文献   

17.
背景 膜性肾病(MN)是成年人肾病综合征的常见原因,目前被认为是一种抗体介导的自身免疫性疾病。增殖诱导配体(APRIL)已被证实参与多种自身免疫性疾病的发病,但其是否参与特发性膜性肾病(IMN)的发病,目前不得而知。目的 检测IMN患者血清APRIL水平,探讨APRIL水平与IMN患者临床病理指标及治疗效果的关系。方法 收集2015年2月-2016年2月收治于郑州大学第一附属医院肾内科108例IMN患者肾穿刺当日的10 ml全血,同时收集同时间段本院体检中心20例体检健康者10 ml全血。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清APRIL水平。根据IMN患者血清APRIL表达中位数,将其分为APRIL低水平表达组(n=54)与APRIL高水平表达组(n=54)。同时收集患者临床及病理资料。对患者随访6个月,根据尿蛋白转归情况将其分为有效组和无效组,比较两组APRIL水平。结果 IMN患者血清APRIL水平为(14.3±4.1)μg/L,高于健康者的(7.7±4.8)μg/L(t=6.383,P<0.001)。APRIL高水平表达组尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿酸(UA)水平均高于APRIL低水平表达组(P<0.05)。APRIL高水平表达组免疫球蛋白G(IgG)染色强度高于APRIL低水平表达组(P<0.05)。共54例患者参与随访,随访6个月后,有效组29例,无效组25例。有效组血清APRIL水平为15.7(13.0,17.9)μg/L,无效组血清APRIL水平为14.4(11.5,16.5)μg/L,两组比较,差异无统计学意义(Z=0.950,P=0.327)。结论 血清APRIL水平与IMN患者疾病严重程度相关,且与IgG的肾脏沉积水平呈正相关,提示可能参与IMN疾病发生。  相似文献   

18.
目的:本研究通过毓麟珠方加减治疗反复移植失败非移植周期患者,观察其中医症状体征,黄体中期血清miRNA31水平及子宫内膜Foxp3、eNOS表达变化,以此探讨该方对反复移植失败患者子宫内膜内膜容受性影响的作用机制。方法:选择反复移植失败非移植周期患者30例为治疗组,欲行人工受精曾有妊娠史的育龄期女性30例为对照组。治疗组予中药毓麟珠方加减口服,从月经第5天开始,连续服用21天为一个疗程,治疗3个疗程。对照组:不予任何药物治疗。观察治疗组治疗前后肾虚证候评分,测定两组黄体中期血清miRNA-31水平,随机数字表法抽取对照组25例和治疗组25例患者测定黄体中期子宫内膜Foxp3 miRNA、eNOS miRNA表达。结果:治疗组治疗后中医症候评分较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。RIF治疗组治疗前黄体中期血清miRNA31 mRNA水平显著高于对照组,RIF治疗组治疗后黄体中期血清miRNA31 mRNA水平显著低于治疗前,差异均有统计学意义(P均<0.01)。RIF治疗组治疗前子宫内膜Foxp3 mRNA、eNOS mRNA水平均显著低于对照组,RIF治疗组治疗后子宫内膜Foxp3 mRNA、eNOS mRNA水平均显著高于治疗前,差异均有统计学意义(P均<0.01)。治疗组和对照组的血清miRNA-31与子宫内膜Foxp3 mRNA、eNOS mRNA均呈负相关关系(P均<0.05)。结论:毓麟珠方加减治疗反复移植失败患者非移植周期患者,可改善其肾虚临床症状及体征,可能通过降调节血清miRNA-31水平,增加植窗口期子宫内膜Foxp3、eNOS表达,调控母胎界面免疫平衡紊乱,促进血管新生,利于子宫内膜蜕膜化,从而改善子宫内膜容受性。且血清miRNA31作为无创评价RIF种植窗期子宫内膜容受性指标具有一定的临床意义。  相似文献   

19.
目的:检测特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)、继发性膜性肾病(secondary membranous nephropathy,SMN)患者肾组织中磷脂酶A2受体(phospholipase A2 receptor,PLA2R)的表达及血清抗PLA2R 抗体滴度,分析其在诊断IMN中的价值。方法:2014年5月至2015年2月中南大学湘雅二医院肾内科肾活检患者73例, 分为IMN组(n=48)、SMN组(n=17)和微小病变性肾病组(n=8)。采用间接免疫荧光法检测各组肾组织PLA2R及血清抗 PLA2R抗体的表达。结果:IMN组肾组织PLA2R阳性率为91.7%,SMN组阳性率为29.4%,IMN组阳性率、荧光强度明 显高于SMN组(均P<0.05);IMN组血清PLA2R抗体阳性率为85.4%,SMN组阳性率为29.4%,IMN组抗体阳性率及滴度 明显高于SMN组(均P<0.05);微小病变性肾病组肾组织PLA2R抗原及血清抗体均呈阴性。IMN组血清PLA2R抗体滴度 与24 h尿蛋白呈正相关(r=0.432,P<0.01),与血清白蛋白呈负相关(r=–0.307,P<0.05)。结论:检测肾组织PLA2R和血 清PLA2R抗体的表达有助于IMN的诊断及鉴别诊断,监测血清PLA2R抗体滴度有助于评估疾病活跃程度和治疗效果。  相似文献   

20.
microRNA是一类小的非编码蛋白质的RNA,17~25个核苷酸长度,在物种进化中相当保守,其功能通过与靶基因mRNA的3′-UTR配对起负调控基因表达作用,从而调节细胞的代谢、增殖、分化和凋亡等过程.目前认为microRNA在食管癌的发生、发展过程中,起到与癌基因或抗癌基因相似的作用.本文对microRNA功能、microRNA表达与食管癌的关系,以及研究microRNA表达的研究方法等进行综述.  相似文献   

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