鼻咽癌患者自体树突状细胞疫苗治疗对机体免疫功能的影响

目的比较鼻咽癌患者自体树突状细胞（DCs）疫苗治疗前后对患者机体免疫机能的影响,探讨热休克的鼻咽癌细胞抗原负载的鼻咽癌自体DCs疫苗激发机体免疫应答的能力与趋势。方法 20例鼻咽癌患者随机分为对照组及治疗组,对照组实施常规放疗,治疗组在常规放疗后给予1个疗程的DCs免疫治疗（4次皮内注射）。治疗过程中动态检测T细胞亚群、自然杀伤（NK）细胞、Th1类细胞因子（IL-2、IL-12、TNF-α、IFN-γ）水平,进行分析比较。结果 DCs治疗前与治疗后外周血CD3＋、CD3＋CD4＋、CD4＋/CD8＋、NK细胞比率无明显变化（P〉0.05）;治疗后治疗组细胞因子IL-2、IL-12、TNF-α和IFN-γ的水平较治疗前明显升高（P〈0.05）。结论鼻咽癌自体DCs疫苗免疫治疗可明显提升鼻咽癌患者Th1类细胞因子水平,激发Th1型免疫应答,增强机体抗瘤能力。     

CIK细胞免疫治疗对转移性肾细胞癌患者免疫功能的影响

目的：观察CIK细胞免疫治疗对转移性肾癌患者免疫功能的影响。方法选取2010-2012年收治的转移性肾癌患者,在常规治疗措施的基础上联合应用CIK细胞免疫方法进行临床治疗,治疗3个疗程后,监测治疗前后CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比值等免疫功能指标,进行统计学分析。结果治疗后患者外周血中CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋水平优于治疗前（P〈0.055）。结论采用悦陨运细胞免疫治疗能有效提高转移性肾癌患者的免疫功能。     

T细胞亚群、NK细胞活性及Th1/Th2细胞因子漂移在FOLFOX化疗前后的动态变化

目的研究FOLFOX化疗对肠癌根治性术后患者免疫功能的影响。方法83例肠癌患者根治性术后6周取外周静脉血,采用抗体标记流式细胞仪检测T细胞亚群细胞,MTT法测NK细胞活性,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中Th1/Th2细胞因子。1个月为1个疗程,共化疗6个疗程。分别于化疗开始前、化疗结束时和化疗结束后6个月监测外周血CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T数量比例,NK细胞活性,以及血清中白细胞介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）的动态水平变化。结果CD8^＋T、CD4^＋T/CD8^＋T化疗后明显下降（均〈0.05）,化疗结束后6个月恢复至化疗前水平。化疗组的NK细胞活性在化疗结束时较对照组和自身化疗前低（均〈0.01）;化疗结束后6个月NK细胞活性略低于自身化疗前及对照组同期水平,但差异无显著意义（P〉0.05）。化疗结束时IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平较对照组或自身化疗前低,化疗结束后6个月恢复正常（均P〈0.05）。结论FOLFOX化疗可能降低肠癌根治性术后患者的CD8＋T的数量比例及NK细胞活性,引起Th1、Th2细胞因子血清水平下降,抑制抗肿瘤免疫功能。     

肝癌患者血清Th1/Th2细胞因子含量检测及其与机体免疫功能的关系

目的：研究肝癌患者血清中Th1/Th2细胞因子的含量及其与机体免疫功能的关系。方法：将在本院就诊的肝癌患者纳入研究的观察组,同期在我院体检的健康者纳入研究的对照组,采用酶联免疫吸附法检测两组受试者血清中Th1、Th2细胞因子以及补体C3和C4的含量,流式细胞法检测T细胞亚群含量。结果：（1）Th1/Th2细胞因子：观察组的Th1细胞因子肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、干扰素-γ（IFN-γ）含量低于对照组,Th2细胞因子白介素-6、10（IL-6、IL-10）含量高于对照组（P〈0.05）;（2）免疫功能：观察组的CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4含量低于对照组,CD8＋T细胞的含量高于对照组（P〈0.05）;（3）细胞因子与免疫功能的关系：TNF-a、IFN-γ含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈正相关,与CD8＋T细胞含量呈负相关;IL-6、IL-10含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈负相关,与CD8＋T细胞含量呈正相关。结论：肝癌患者存在Th1/Th2漂移,血清中Th1细胞因子TNF-a和IFN-γ含量降低、而Th2细胞因子IL-6、IL-10含量升高,且与机体的天然免疫和细胞免疫功能密切相关。     

IL-2和IL-15诱导的CIK细胞联合化疗治疗直肠和结肠癌的临床疗效

目的 探讨IL-2＋IL-15共同刺激CIK （Cytokine induced killer cell）过继性免疫治疗联合化疗对结直肠癌的疗效及安全性.方法 选取在昆明市延安医院医院普外1科治疗的110例结直肠患者,55例CIK联合化疗组,55例行单纯化疗组,评价2组患者治疗后免疫功能、疗效、毒副反应和生活质量.结果 IL-2＋IL-15刺激的CIK细胞较单纯IL-2刺激细胞具有较强的细胞毒性和较快的增殖效率;CIK联合化疗组治疗前后外周血T细胞亚群均有升高,但差异无统计学意义（P＞0.05）,化疗组治疗后外周血中CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD16＋CD56＋、NKp46、NKG2D、CD11b、CD27细胞比例较治疗前下降;联合免疫治疗组与单纯化疗组治疗后Kamofsky评分总提高率分别为87.3％与69.1％,2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 IL-2＋IL-15刺激CIK过继性免疫治疗联合化疗可以明显改善结直肠癌患者的免疫功能,提高总体疗效,减轻化疗不良反应,延长无进展生存,改善患者生活质量。     

吸毒人群中HIV、TB感染者免疫细胞和细胞因子监测

目的测定吸毒人群外周血中T细胞亚群、Th1—Th2细胞因子,评价HIV、TB感染后免疫学指标的变化。方法对吸毒人群中9例HIV阳性者、5例患活动性结核病者、40例吸毒人群中健康者及40例正常人群,应用流式细胞技术（FCM）分别检测CD3^＋、CD3^＋CD4^＋．CD3^＋CD8^＋细胞百分率,计算CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋即Th细胞与Ts细胞的比值,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测Th1（IL-2、IFN-γ）/Th2（IL-4、IL-6）细胞因子浓度。结果HIV感染组、TB感染组及吸毒者健康组、正常人组各项指标间差异有统计学意义,CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋即Th细胞与Ts细胞的比值及Th1（IL-2、IFN-1）浓度均明显低于对照组,HIV〈TB〈吸毒人员健康者〈正常人群（P〈0．05）。而Th2（IL-4、IL-6）细胞因子浓度则明显高于正常人群。结论CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋即Th细胞与Ts细胞的比值及Th1（IL-2、IFN-γ）/Th2（IL-4、IL-6）细胞因子浓度的检测在评价HIV、TB感染者的免疫状况、进展和预后判断等方面具有重要作用。     

急性戊型肝炎病毒感染后免疫状态及转归

目的：探讨急性戊型肝炎病毒感染后免疫状态的变化及转归.方法：采用双抗体酶联分析法检测急性戊型肝炎病毒感染患者不同时期外周血细胞因子IFN-γ,IL-4和IL-12的水平; 流式细胞仪免疫荧光法检测急性戊型肝炎病毒感染患者T淋巴细胞亚群细胞含量.结果：观察结束时,96例抗-HEVIgM转阴,14例未转阴.急性戊型肝炎抗-HEVIgM转阴患者,急性期IL-12,IFN-γ,IL-4和Th1/Th2水平、CD3＋,CD4＋和CD4＋/CD8＋细胞亚群比例明显升高（P〈0.05）; 恢复期IL-12,IFN-γ,IL-4和Th1/Th2水平、CD3＋,CD4＋和CD4＋/CD8＋细胞亚群比例明显降低（P〈0.05）.急性戊型肝炎抗-HEVIgM未转阴阳性患者,急性期IL-12,IFN-γ,IL-4和Th1/Th2水平、CD3＋,CD4＋和CD4＋/CD8＋细胞亚群比例明显升高（P〈0.05）,而CD8＋细胞亚群比例无明显变化; 恢复期IL-12、IFN-γ和Th1/Th2水平、CD3＋,CD4＋和CD4＋/CD8＋细胞亚群比例明显降低（P〈0.05）,且Th1/Th2水平、CD4＋/CD8＋细胞亚群比例低于对照组,但IL-4水平、CD8＋细胞亚群比例明显升高,且明显高于对照组（P〈0.05）.结论：急性戊型肝炎抗-HEVIgM未转阴阳性患者,恢复期持续高水平的IL-4不利于疾病恢复,Th1/Th2细胞的失衡可能是戊型肝炎病毒持续感染的一条途径.增高的CD8＋细胞亚群比例和CD4＋/CD8＋失调可能影响机体清除戊型肝炎病毒的能力,导致感染的持续.     

支气管动脉灌注化疗对肺癌患者T细胞亚群及NK细胞的临床意义

目的探讨肺癌患者支气管动脉灌注（BAI）化疗前后T细胞亚群及NK细胞的变化及临床意义。方法选择30例肺癌患者,于支气管动脉灌注化疗前、化疗后2周、4周,采用碱性磷酶抗碱性磷酶（APAAP）法检测T细胞亚群及NK细胞的变化,并与30例健康者作对比分析。结果肺癌患者CD8＋细胞显著高于健康者,同时CD3＋细胞、CD4＋细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞低于健康对照组（P〈0.01）。BAI治疗后2周T细胞亚群、NK细胞与治疗前比较未见明显变化（P〉0.05）,治疗后4周CD3＋细胞、CD4＋细胞、CD1＋/CD8＋比值、NK细胞升高,CD8＋细胞下降（P〈0.01）。结论肺癌患者免疫功能较正常人低下,BAI治疗后4周有可能使肺癌患者免疫水平得到一定程度恢复,临床上观察细胞免疫功能对肺癌患者的BAI治疗和预后有一定的监测作用;接受BAI治疗的患者间隔4周后进行第二次治疗较为恰当。     

再生障碍性贫血患者 NK 和 CIK细胞与疗效的关系

目的：探讨再生障碍性贫血（ AA）患者外周血NK细胞及CIK细胞与疗效的关系。方法应用流式细胞仪检测51例AA患者[急性AA（ AAA）30例,慢性AA（ CAA）21例]治疗前后与40例健康对照组NK细胞、CIK细胞的表达。结果（1） AA患者外周血CD4＋、CD4＋／CD8＋、NK细胞的比例显著低于对照组（ P＜0.05）, CD8＋、CIK细胞的比例显著高于对照组（P＜0.05）,AAA组与CAA组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）疗效好的患者NK细胞比值升高,CIK细胞比值无明显下降。结论 AA患者存在多种免疫异常,多种因素参与AA的发病机制。检测免疫细胞将有助于评估AA的病情及疗效。     

AECOPD患者淋巴细胞亚群监测及意义

目的：探讨COPD患者在急性加重期治疗前后的免疫功能的变化。方法：将AECOPD患者分为常规抗感染治疗组（A组）和免疫治疗干预组（B组）,在治疗前1天与治疗21天后,采用流式细胞仪技术测定外周血淋巴细胞亚群,并与健康人群比较,了解淋巴细胞亚群的变化。结果：A组治疗前CD3＋T、CD4＋T、CD4＋/CD8＋、NK细胞比值较健康成人组明显下降,治疗21天后CD3＋T、CD4＋T、CD4＋/CD8＋、NK细胞比值较治疗前上升,且有统计学意义,B细胞、CD8＋T细胞比值无显著变化;B组治疗前CD3＋T、CD4＋T、CD4＋/CD8＋、NK细胞比值亦较健康成人组明显下降,治疗后CD3＋T、CD4＋T、CD4＋/CD8＋、NK细胞明显上升,有统计学意义;且治疗后,B组CD3＋T、CD4＋T、CD4＋/CD8＋、NK细胞比值明显高于A组。结论：1.AECOPD患者的免疫功能低于健康成人,经常规抗感染治疗好转患者,免疫功能得到恢复;2.免疫干预治疗后免疫功能较常规抗感染治疗明显提高。     

自体CIK细胞免疫疗法治疗中晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的观察自体CIK细胞过继性免疫疗法对中晚期非小细胞肺癌患者的临床疗效。方法体外利用抗CD3单抗、IL-2、IFN-γ等细胞因子从患者外周血单个核细胞（PBMC）中诱导扩增CIK细胞,培养11-14d后,分3个疗程回输患者体内,观察患者临床症状改善及生活质量改善状况,并用流式细胞仪检测回输前后患者T细胞亚群和NK细胞变化。结果86例接受自体CIK细胞治疗患者中,PR＋MR为72例,总缓解率为83．72％。治疗前、后肿瘤患者临床症状有明显改善,有显著性差异（P〈0．01）。CIK细胞经培养后细胞总数和CD3、CD56T效应细胞均获得大量增殖,自体回输免疫治疗后,CD3、CD4T细胞和NK细胞比例均显著提高（P〈0．01）。结论从中晚期非小细胞肺癌患者外周血PBMC中可高效扩增CIK细胞,自体回输能显著提高患者免疫功能,改善临床症状,提高生存质量,延长患者生存期。     

CIK细胞在肿瘤免疫治疗中的作用

目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞（CIKcells）的体外扩增特性及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用。方法通过提取健康供血者的PBMNC,培养诱导CIK细胞,显微镜下观察其扩增倍数、增殖速率,流式细胞仪分析细胞免疫表型,用MTT法观察其对K562细胞的体外杀伤效应,并通过流式细胞仪进一步分析30例实体瘤患者CIK细胞输注前后外周血免疫活性细胞表型的改变。结果经2周培养,CIK细胞平均增加了30倍,总数达（4.8～5.0）×109,活性细胞比例〉90%;体外杀伤率约50%,表型检测效应细胞CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD3＋CD56＋亚群比例显著升高,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。实体瘤患者CIK细胞输注后外周血中免疫活性细胞比例也明显升高,差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论CIK细胞在体内外能明显抑制肿瘤生长,有效改善患者的免疫功能,为晚期肿瘤治疗提供了新的方法。     

CIK细胞免疫疗法联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床疗效

  目的   评价化疗联合CIK（cytokine-induced killer）细胞免疫疗法对非小细胞肺癌NSCLC早期、晚期患者的临床疗效。   方法   收集2013年1月至2016年12月昆明医科大学第三附属医院收治NSCLC患者122例为研究对象,按患者病程分为Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期,将其随机分入4个受试组:化疗A组（n = 30）,联合CIK A组（n = 31）,化疗B组（n = 30）,联合CIK B组（n = 31）。其中,受试组采用化疗方法均为吉西他滨联合顺铂治疗（GP）。评价患者临床疗效、生存质量和外周血淋巴细胞和细胞因子变化。   结果   与化疗组比较,联合CIK治疗组显著提高ORR值和DCR值,分别是（67.74%,45.16%）和（74.19%,64.52%）（P < 0.05）;提高KPS评分和ECOG评分,分别是（80.65%,58.06%）和（80.65%,70.97%）（ P < 0.05）;提高患者外周血中CD3 +、CD8+淋巴细胞亚群比率及CIK细胞比率（P < 0.05）;提高患者外周血中IFN-γ,TNF-α、IL-4、IL-6细胞因子表达水平（ P < 0.05）;延长患者生存期（ P < 0.05）。与联合CIK A组（Ⅰ-Ⅱ期）比较,联合CIK B组（Ⅲ-Ⅳ期）患者外周血中CD3 +、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞比率、CIK细胞比率均显著提高（P < 0.05）,维持和调控增强外周血中IFN-γ,TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6细胞因子表达水平（ P < 0.05）。   结论   化疗联合CIK细胞治疗能显著提高不同阶段NSCLC患者临床疗效、延长生存期、提高近期生存质量,提高化疗期患者体内免疫细胞持续对抗肿瘤的细胞毒性和免疫应答能力,尤其对晚期患者的疗效更佳。      

参附注射液对严重脓毒症患者临床疗效及免疫功能的影响

目的观察参附注射液对严重脓毒症患者的临床疗效及对T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋）、NK细胞、单核细胞人白细胞DR抗原（HLA—DR）表达率的影响。方法将68例严重脓毒症患者随机分为西医常规治疗基础上加用参附注射液治疗组（参附组,36例）和单纯西医常规治疗组（对照组,32例）。观察治疗前及治疗后第3、7天患者临床疗效及T淋巴细胞亚群、NK细胞、单核细胞HLA—DR表达率的变化。结果两组患者治疗前APACHEIl、Marshall评分、lL-6和IL-10水平的差异均无统计学意义（均,P〉0.05）;与健康对照组比较,严重脓毒症患者血清IL-6、IL-10和CRP水平明显升高,CD3＋、CD4＋、CD8＋T淋巴细胞和单核细胞HLA—DR表达降低（均P〈0．05）。与对照组同期比较,治疗后第7天参附组APACHEII、Marshall评分及IL-6和CRP水平均下降,而CD3＋、CD4＋、CD8＋T淋巴细胞、NK细胞及单核细胞HLA—DR表达均升高,差异均有统计学意义（均,J〈0．05）。结论严重脓毒症患者全身炎症反应和免疫抑制同时存在;参附注射液具有维持促炎／抗炎平衡,双向调节严重脓毒症免疫紊乱作用,从而改善临床疗效。     

自体CIK细胞治疗恶性肿瘤免疫表型和杀伤活性变化

目的观察自体CIK细胞治疗恶性肿瘤前后免疫袁型和杀伤活性变化。方法采用流式细胞术检测50例肿瘤患者CIK细胞治疗前、后免疫表型的变化,采用3H—TdR释放法检测杀伤活性的变化。结果CIK治疗后,CD3^＋、CD4^＋细胞百分率上升,CD8^＋细胞百分率下调,CD4^＋／CD8^＋比值上升,CD19细胞百分率下降,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0．05）,但CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞绝对值未达到健康者水平（P〉0．05）。治疗后NK细胞百分率明显升高（P〈0．05）,达到健康者水平（P〉0．05）。在杀伤活性的研究中,与CIK细胞治疗前（19±6）％相比,治疗后杀伤活性百分率（22±5）％明显升高,达17．5％（P〈0．01）,但未达到健康者水平（P〈0．05）。结论自体CIK细胞治疗能明显提高肿瘤患者细胞免疫功能。     

CIK细胞治疗妇科肿瘤的临床研究

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）体外细胞毒活性,并观察CIK细胞治疗妇科肿瘤的近期临床疗效、免疫学活性及副反应.方法共收录2007年7月至2010年3月22例妇科肿瘤患者进行CIK细胞治疗,其中卵巢癌11例,子宫癌11例.经标准治疗方案治疗的患者,取外周血分离单个核细胞（PBMC）,体外诱导出CIK细胞培养后,观察CIK细胞表型,用MTT法测体外细胞毒活性.所有患者均接受一定剂量的CIK细胞过继免疫治疗,观察其近期临床疗效、免疫反应、不良反应.结果当效靶比为16：1、8：1时,CIK细胞体外细胞毒活性杀伤率分别（82.33±9.35）%和（61.59±13.59）%.卵巢癌11例,近期疗效评价中,部分缓解4例,近期有效率为66.67%,疾病控制率为66.67%.子宫癌11例,近期疗效评价中,部分缓解6例,近期有效率为100%,无肿瘤进展时间为4～26个月,中位无肿瘤进展时间为13个月.与CIK细胞回输前相比,患者CD3＋、CD4＋、CD8＋均有明显的升高（P〈0.05）,这表示可以诱导患者产生特异性的免疫反应.22例患者在输注CIK过程中未出现不良反应.结论 CIK细胞对妇科肿瘤有较好的临床疗效.     

聚乙二醇干扰素治疗慢性丙肝患者对于机体细胞免疫功能的影响

目的：研究聚乙二醇干扰素治疗慢性丙肝患者对于机体细胞免疫功能的影响。方法：本研究采用聚乙二醇干扰素治疗慢性丙肝患者,采用流式细胞计数仪检测治疗前及治疗12、48周患者外周血清T淋巴细胞亚群,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定外周血干扰素-γ（IFN-γ）,白介素-2（IL-2）,白介素-6（IL-6）以及白介素-10（IL-10）的水平。结果：应答组治疗12、48周时的CD3＋、CD4＋、NK以及CD4＋/CD8＋均明显高于治疗前及无应答组,CD8＋、CTL低于治疗前及无应答组,治疗48周时的CD3＋、CD4＋、NK以及CD4＋/CD8＋均高于治疗12周时,CD8＋、CTL低于治疗12周时,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;无应答组治疗后12、48周仅CD3＋较治疗前升高;两组治疗12、48周的IFN-γ和IL-2水平均高于治疗前,IL-6和IL-10水平低于治疗前,治疗48周的IFN-γ和IL-2水平均高于治疗12周,IL-6和IL-10水平低于治疗12周,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;组间比较,应答组治疗12、48周的IFN-γ和IL-2水平均高于无应答组,IL-6和IL-10水平低于无应答组。结论：聚乙二醇干扰素可以有效改善患者的细胞免疫功能,且近期疗效显著。