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1.
LY294002抑制小细胞肺癌干细胞样细胞自我更新 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究Akt活性抑制剂LY294002抑制源自人小细胞肺癌NCI-H446细胞系肺癌球形成细胞即肺癌干细胞样细胞(LCSLCs)自我更新作用。方法:体外培养NCI-H446细胞系细胞。以干细胞条件培养基用超低粘附6孔细胞培养板悬浮培养富集和扩增LCSLCs。裸鼠皮下成瘤实验鉴别LCSLCs高致瘤特性。Western blot分析LCSLCs中Akt蛋白磷酸化水平。肿瘤球形成试验检测LY294002对LCSLCs自我更新的影响。结果:干细胞条件培养基悬浮培养6d,NCI-H446细胞系细胞呈三维非粘附性球体生长。LCSLCs具有高致瘤特性。与NCI-H446细胞系细胞比较,LCSLCs信号分子Akt组成性活化。LY294002有效降低LCSLCs中Akt磷酸化水平,并以剂量依赖方式抑制LCSLCs肺癌球形成(P<0.05)。结论:靶向干预小细胞肺癌LCSLCs信号分子Akt组成性活化可能成为抑制肺癌干细胞特性治疗小细胞肺癌的新策略。 相似文献
2.
目的 :观察紫花牡荆素(CAS)是否能抑制HeLa细胞系宫颈癌球形成细胞即宫颈癌干细胞样细胞(CCSLCs)自我更新能力。方法:体外培养HeLa细胞系细胞。干细胞条件培养基悬浮培养得到和扩增CCSLCs。MTT法测定细胞活性,肿瘤球形成法检测自我更新能力,Western blot分析磷酸化Akt蛋白表达。结果:CAS优先抑制CCSLCs细胞活性,同时,显著抑制CCSLCs自我更新能力,呈浓度依赖性(P<0.05)。与亲本HeLa细胞系细胞比较,CCSLCs细胞磷酸化Akt表达水平增高。CAS有效地降低CCSLCs细胞磷酸化Akt蛋白表达水平。结论:CAS抑制源自HeLa细胞系CCSLCs自我更新作用与其下调细胞磷酸化Akt蛋白表达有关。 相似文献
3.
目的:研究芹菜素对人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞自我更新的影响及机制。方法:采用干细胞条件培养基超低黏附板悬浮培养法从体外培养NCI-H446细胞系得到球细胞。测定球形成率用以评价0(0.1% DMSO对照组),5.0,10.0,20.0 μmol/L芹菜素对NCI-H446细胞系球细胞自我更新的抑制作用;Western印迹分析球细胞尿激酶型纤维蛋白酶原激活物受体(urokinase-type plasminogen activator receptor,uPAR)的表达。结果:0,5.0,10.0,20.0 μmol/L
芹菜素呈剂量依赖性抑制NCI-H446细胞系第2代球细胞的球形成率[球形成率分别为(18.2±1.9)%,(13.6±1.7)%,(10.6±1.6),(6.9±1.3)%],并呈浓度依赖性下调uPAR蛋白的表达(P<0.05)。结论:芹菜素抑制人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞自我更新作用,可能与下调uPAR表达相关。 相似文献
4.
目的探讨P13K抑制剂LY294002对肺癌Akt2、p-Akt表达的影响。方法体外实验是取对数生长期的A549细胞制备细胞爬片,体内实验先用裸鼠建立移植瘤模型,通过P13K抑制剂LY294002干预后,分别用免疫组织化学法和W estern b lot法检测Akt2、p-Akt蛋白的表达。结果肺腺癌细胞株A549细胞中存在Akt2和p-Akt蛋白的高表达,应用P13K抑制剂LY294002可抑制该细胞株细胞中Akt2和p-Akt蛋白的表达,而且其表达呈浓度依赖型降低。LY294002组移植瘤组织Akt2和p-Akt蛋白的表达用免疫组织化学法检测较对照组染色变淡,用W estern b lot法检测显示其蛋白表达量低于对照组。结论LY294002可通过抑制P13K活性,抑制Akt的表达及活化,使Akt2和p-Akt蛋白的表达降低,提示抑制P13K/Akt途径可能是LY294002发挥抗癌作用的重要机制,P13K/Akt可能成为肺癌治疗的靶点。 相似文献
5.
目的:研究紫花牡荆素(casticin,CAS)是否抑制卵巢癌OVCAR-3细胞系肿瘤球形成能力。方法:肿瘤球形成法检测不同浓度CAS(1.0、3.0、10.0μmol/L)对OVCAR-3细胞系肿瘤球形成能力的影响。Western Blot分析探讨CAS影响OVCAR-3细胞系肿瘤球形成机制是否涉及其下调干细胞标志物CD44蛋白表达。结果:CAS以浓度依赖方式抑制OVCAR-3细胞系肿瘤球形成能力。与亲本细胞相比,OVCAR-3细胞系球形成细胞高表达CD44蛋白。CAS显著下调OVCAR-3细胞系球形成细胞CD44蛋白表达。结论:CAS抑制卵巢癌OVCAR-3细胞系肿瘤球形成与其下调干细胞标志物CD44蛋白表达相关。 相似文献
6.
金雀异黄素下调Gli1表达抑制MHCC97H细胞系肝癌干细胞样细胞侵袭 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究金雀异黄素能否和如何抑制肝细胞癌MHCC97H细胞系肝癌干细胞样细胞侵袭。方法:干细胞条件培养基悬浮培养MHCC97H细胞系球形成细胞,作为肝癌干细胞样细胞。不同浓度金雀异黄素处理后,Transwell小室侵袭试验检测体外细胞侵袭能力;Western blot分析Gli1和Snail1蛋白表达。结果:干细胞条件培养基悬浮培养MHCC97H细胞能形成肿瘤球。金雀异黄素(5、10和20μM)作用第3代球形成细胞即肝癌干细胞样细胞72 h降低肿瘤球形成率和细胞侵袭率;呈浓度依赖性。金雀异黄素(5、10和20μM)孵育肝癌干细胞样细胞24 h下调Gli1和Snail1蛋白表达。结论:金雀异黄素可能通过调控Gli1抑制Snail1蛋白表达抑制肝癌干细胞样细胞侵袭。 相似文献
7.
目的 分离肝癌干细胞样细胞,初步探讨PI3 K/Akt通路调节其对化疗药物阿霉素的敏感性.方法 将人肝癌细胞株PLC、HepG2、Hep3B置于无血清条件培养基中培养,形成细胞球,选用PLC细胞株进行后续实验.采用流式细胞仪、克隆形成实验、SCID小鼠体内成瘤实验鉴定PLC细胞球(肝癌干细胞样细胞)的肿瘤干细胞特性.MTT法、流式细胞仪测定PLC细胞球对化疗药物阿霉素的敏感性.流式细胞仪分析加入PI3 K/Akt通路特异性抑制剂LY294002、阿霉素共同孵育细胞球后,其凋亡率的变化.Western blot法比较PLC细胞球、PLC贴壁细胞中p-Akt1(Ser473)蛋白分子表达量及加入抑制剂LY294002作用于细胞球后,p-Akt1(Ser473)、Akt1蛋白分子表达量的变化.结果 肝癌干细胞标志物CD90在细胞球中的表达较贴壁细胞显著升高(P<0.01).细胞球的克隆形成数目(123.00±28.48)为贴壁细胞(56.33±7.37)的2.18倍(P<0.05).同样细胞数接种于SCID小鼠皮下7周后,细胞球的致瘤率明显大于贴壁细胞.以5μg/mL的阿霉素分别处理细胞球和贴壁细胞48 h后,细胞球的增殖率明显高于贴壁细胞[(71.83±12.30)% vs (45.68±5.95)%,P <0.05],凋亡率显著低于贴壁细胞[(11.73 ±3.77)% vs (41.22±6.73)%,P<0.01],而以阿霉素5μg/mL和LY294002共同孵育细胞球后,其凋亡率[(35.44±6.65)%]显著增加(P<0.01).Western blot检测到细胞球的p-Akt1(Ser473)蛋白分子表达量显著高于贴壁细胞(P<0.01),加入抑制剂LY294002处理细胞球后,p-Akt1(Ser473)蛋白表达量明显降低(P<0.05),Akt1的表达量无明显变化(P>0.05).结论 肝癌干细胞样细胞对化疗药物阿霉素具有耐药性,其耐药机制与Akt信号通路第473位点磷酸化Akt1分子有关. 相似文献
8.
目的:研究锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)沉默对人小细胞肺癌NCI-H446细胞
系球细胞体外致瘤性的影响及其潜在的机制。方法:采用悬浮培养法得到人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞,用
Western印迹分析MnSOD和尿激酶型纤溶原酶激活物(urokinase type plasminogen activator,uPAR)表达。利用腺病毒感染
技术沉默NCI-H446细胞MnSOD,球形成法和软琼脂集落形成法评价MnSOD沉默对NCI-H446球细胞体外致瘤性的影
响,用Western印迹检测uPAR的表达。结果:与NCI-H446细胞比较,NCI-H446细胞第2代球细胞的球形成率和集落形
成率及MnSOD和uPAR表达明显增加(P<0.05)。表达shMnSOD的腺病毒抑制NCI-H446细胞第2代球细胞球形成率、集
落形成率及uPAR的表达。结论:MnSOD可能通过调控uPAR表达维持小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞的体外高致
瘤性。 相似文献
9.
【目的】观察VEGF(内皮生长因子)和PlGF(胎盘生长因子)对小鼠胎肝造血干细胞髓系分化的影响,并探讨其调控机制;【方法】体外培养E13胎肝造血细胞,培养造血集落CFU-GM,观察VEGF和PlGF对胎肝造血干细胞髓系分化的作用,应用Western-Blot检测不同处理条件对胎肝造血细胞Akt蛋白以及p-Akt蛋白表达水平的影响,用MTT法来评估不同浓度的LY294002(PI3K/Akt抑制剂)对胎肝造血细胞增殖的影响,通过CFU-GM观察LY294002对VEGF和PlGF调控胎肝造血作用的影响;【结果】VEGF和PlGF均可促进胎肝造血干细胞髓系分化,集落数分别为对照组的141%(P < 0.01)和123%(P < 0.05); PlGF可上调胎肝造血细胞p-Akt蛋白表达,其表达水平为对照组的143%(P < 0.05);VEGF及其与PlGF联合应用对胎肝造血细胞p-Akt蛋白表达水平无明显影响;LY294002可抑制胎肝造血细胞的增殖,并具有明显的剂量依赖关系(r = 0.9647,P < 0.01),在LY294002存在的条件下加入VEGF或PlGF,其CFU-GM产率与单独应用LY294002相比无明显差异(P > 0.05);【结论】VEGF和PlGF均能促进胎肝造血干细胞的髓系分化;PlGF可通过上调胎肝造血细胞Akt的磷酸化水平调节胎肝造血细胞的髓系分化;LY294002可通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制VEGF和PlGF对胎肝造血干祖细胞髓系分化的调控作用; 相似文献
10.
目的:研究金雀异黄素对SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞特性以及氟尿嘧啶敏感性的影响。方法不同浓度金雀异黄素处理SMMC-7721细胞系球形成细胞。肿瘤球形成法检测自我更新能力。MTT比色法测定氟尿嘧啶药物敏感性。Western blot分析干细胞标志物CD133、CD44、Gli1和ABCG2蛋白表达。结果金雀异黄素显著抑制SMMC-7721细胞肿瘤球形成,并优先抑制球形成细胞增殖活性(P<0.05)。金雀异黄素(10μmol/L)有效逆转球形成细胞对氟尿嘧啶的耐药性。金雀异黄素降低CD133、CD44、Gli1和ABCG2蛋白表达水平。结论金雀异黄素抑制肝癌干细胞样细胞特性和氟尿嘧啶耐药性,其作用机制与抑制干细胞标志物蛋白表达和阻断Hedgehog信号传导有关。 相似文献
11.
目的 比较中心型与周围型广泛期小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)一线治疗的疗效及预后.方法 回顾性分析2010年1月- 2014年1月本院肿瘤科使用依托泊苷联合顺铂(etoposide and carboplatin,EP)或依托泊苷联合卡铂(etoposide and cispatin,EC)方案一线治疗的122例广泛期SCLC患者的临床资料,按影像学表现分为周围型组和中心型组,统计分析两组的一线治疗疗效及预后的差异.结果 一线治疗有效率两组无统计学差异(78.2%vs73.6%,P=0.57);疾病控制率两组无统计学差异(87.0%vs 89.5%,P=0.67);一线治疗无进展生存期两组无统计学差异(8.0个月vs 5.3个月,P=0.46),总生存期周围型组显著优于中心型组(18.5个月vs12.9个月,P=0.00).结论 一线治疗使用EC或EP方案,周围型SCLC的总生存期好于中心型SCLC. 相似文献
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体外转流技术在局部晚期肺癌侵犯心脏大血管切除重建中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的总结近年来应用体外循环技术切除局部晚期肺癌侵犯心脏大血管的经验。方法回顾分析所施行的8例手术经验及结果。8例中2例肺癌侵犯降主动脉采用左心转流的方法完成了手术,其余6例均采用常规体外循环技术完成了切除手术。结果术后仅1例发生了血胸并发症,经再次开胸止血顺利恢复。术后随访1例存活6个月因脑转移死亡,另1例26个月死于全身转移。2004年所施行的6例均存活。结论扩大切除应强调良好的术前准备,严格手术适应证,病理类型仍以非小细胞肺癌为主。 相似文献
13.
肺癌第版TNM分期解读与展望 《首都医科大学学报》2016,37(6):753-757
在过去的6年多时间里,肺癌的诊断和治疗研究取得了巨大的进步,但是第7版肺癌TNM分期难以满足目前的临床需求。于是国际肺癌研究协会(International Association for the Study of Lung Cancer,IASLC)收集了1999年至2010年间94 708例新确诊的肺癌患者,患者来自16个国家的35个中心,形成第8版肺癌TNM分期。第8版肺癌TNM分期较第7版TNM分期能够更好地反映不同分期患者的预后。 相似文献
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目的 探讨血清同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)水平在肺癌诊断及分期中的临床意义。方法 收集2016年1月—2018年5月期间未经任何治疗的95例初发肺癌患者住院期间的血清Hcy的检测结果。同时收集62例健康体检者及62例肺部感染者空腹血清,采用酶循环法检测血清Hcy水平。所有肺癌患者均明确病理分型。所得数据使用GraphPad Prism 6.0进行分析。结果 肺癌组的血清Hcy水平显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.0001),其中肺癌组中TNM分期Ⅳ期的肺癌患者血清Hcy水平显著高于TNM分期Ⅰ~Ⅲ期肺癌患者(P<0.0001)。肺部感染组的血清Hcy水平显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),肺癌组和肺部感染组之间的血清Hcy水平无差异(P>0.05)。结论 肺癌患者血清Hcy水平增高,晚期肺癌患者Hcy水平高于早、中期患者。血清Hcy水平对肺癌具有一定的诊断价值,但对于肺部感染患者与肺癌的鉴别诊断无价值。 相似文献
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青年人肺癌的临床特点及其治疗(附67例分析) 总被引:10,自引:0,他引:10
本文报告<40岁青年人肺癌67例,其中小细胞肺癌占43.3%、腺癌37.3%。手术治疗28例,非手术治疗35例。作者就青年人肺癌临床及病理特点、手术治疗和非手术治疗效果进行了讨论,认为青年人肺癌之所以病情进展快,恶性度高,与小细胞为主有关。早期应用纤维支气管镜和痰瘤细胞学检查有助于早期诊断,尽早手术治疗可取得与中老年患者相似的治疗效果。建议青年人肺癌术后采用辅助化疗、放疗。 相似文献
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目的分析总结58例Ⅲ期肺癌的外科治疗经验。方法结合文献总结58例Ⅲ期肺癌的手术资料,并于患者出院后随访,观察起点为出院日期,终点为死亡日期。结果术后并发症4例占6.9%;手术后1个月内死亡1例,死亡原因是术后早期循环呼吸衰竭,手术死亡率为1.7%。全组随访57例,探查术7例均在术后1年内死亡。其余50例行肺切除术及淋巴结清扫的患者随访时间为1~8年,1、3、5年生存率分别为82%(41/50)、47.4%(18/38)、29.4%(5/17)。结论Ⅲ期肺癌病例中有相当部分通过手术为主的综合治疗也可获得较好疗效。 相似文献
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本文报告了7例胸片阴性肺癌,男性6例、女性1例。平均年龄56.1岁(37~74岁)。全部病例均经病理检查确定:5例由痰脱落细胞检查,1例经支气管镜活检,另1例经肺叶切除标本检查确诊。临床上,咳嗽是最常见的症状,但易被忽略,特别是有慢性支气管炎或长期吸烟史者;原因不明的咳血为重要的线索。痰的细胞学检查结合胸片是发现早期肺癌的方法。 相似文献
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Cheng Shen Xin Wang Long Tian Yubin Zhou Dali Chen Heng Du Weiya Wang Lunxu Liu Guowei Che 《European journal of medical research》2015,20(1)