Antitumor Activities and Apoptosis-regulated Mechanisms of Fermented Wheat Germ Extract in the Transplantation Tumor Model of Human HT-29 Cells in Nude Mice

Objective A subcutaneous transplantation tumor model of human HT-29 cells in nude mice was established to evaluate anticarcinogenic activities, and the apoptosis-regulated mechanism effect of aqueous extract of fermented wheat germ with Lactobacillus plantarum dy-1 (LFWGE).
Methods The HT-29 cells were transplanted via subcutaneous injection of 1×107 cells into the right flank of each nude mouse. Then, nude mice were treated for 30 d with LFWGE (high-dose 2 g/kg/d;low-dose 1 g/kg/d) and for 7 d with 5-fluorouracil (5-FU, 25 mg/kg/d) by gavage and intraperitoneal injection, respectively. An inhibition of tumor growth was observed.
Results Tumor volume and weights decreased significantly in both groups of nude mice treated with LFWGE. In addition, the cell apoptosis rate of the LFWGE group (2 g/kg/d, 60.1%±4.4%; 1 g/kg/d, 58.6%±6.9%) was significantly higher than that of the control group (11.5%±1.6%) and 5-FU group (32.1%±3.5%) as measured by the TUNEL assay. Moreover, the real-time fluorescent quantitative PCR and Western blot method further confirmed these enhancing apoptosis and growth inhibition effects. The involvement of LFWGE in inducing apoptosis was confirmed by the expression of Bax, Bcl-2, Caspase-3, and CyclinD1.
Conclusion The results showed that LFWGE could induce subcutaneous transplantation tumor apoptosis in nude mice and could be as a natural nutrient supplements or chemopreventive agent in the treatment of human colon cancer.     

高剂量脂肪乳剂对极低出生体质量儿钙、磷及碱性磷酸酶的影响

目的 探讨较高剂量豆油基20％中/长链脂肪乳剂对极低出生体质量儿血清钙、磷及碱性磷酸酶的影响. 方法 采用前瞻性随机对照研究方法,选择88例胎龄27～32周的适于胎龄极低出生体质量儿,随机分为2组:研究组生后24 h内给予20％脂肪乳剂2.0 g/kg,每日增加0.5～1 g·kg-1·d-1,直至3.5 g· kg-1·d-1;对照组生后24 h后开始给予20％脂肪乳剂0.5 g/kg,每日增加0.5 g·kg-1·d-1,直至3.5 g·kg-1·d-1;2组均于24 h内给予氨基酸2 g· kg-1·d-1,每日增加0.5～1.0 g· kg-1· d-1,直至3.5 g· kg-1· d-1.糖浓度由10％逐渐增加至12.5％.分别在生后4 h及生后4,10,17,24及39 d抽血检测血清钙、磷、碱性磷酸酶. 结果 2组在男女比例、胎龄、出生体质量、禁食时间、开奶时间、补充维生素AD开始时间、补磷时间、补磷开始时间比较,差别均无统计学意义(P>0.05).研究组生后17 d血磷浓度[(1.81±0.29) mmol/L]明显高于对照组[(1.56±0.54) mmol/L](P<0.05);生后10,17及24 d的碱性磷酸酶[(232.0±83.2),(301.3±96.6),(284.1±78.8)U/L]显著低于对照组[(298.6±80.9),(385.5±157.3),(349.2±111.8) U/L](P<0.05). 结论 早期积极地给予较高剂量的脂肪乳剂对于代谢性骨病可能具有一定的保护作用.     

N-乙酰半胱氨酸对小鼠肺腺癌生长、转移的抑制作用

目的: 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对T739小鼠肺腺癌原发瘤形成及自发性肺转移的影响。方法: T739小鼠51只随机分为3组,其中Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ组分别在每天饮水中加入0.5g/kg、1.0g/kgNAC,72h后皮下接种小鼠LA795肺腺癌细胞(0.2×106个/只),观察小鼠体重变化、皮下肿瘤形成、生长及肺转移情况;采用二硫代对硝苯甲酸显色法测定血中谷胱甘肽(GSH)含量。结果: 接种第4天,肿瘤出现率Ⅱ、Ⅲ组分别为47.1%和38.9%,均明显低于Ⅰ组81.25%(P<0.05)。第22天处死小鼠后皮下肿瘤重量Ⅱ、Ⅲ组明显低于Ⅰ组(P<0.05和P<0.01),且与NAC剂量呈负相关(P<0.01)。各组之间自发性肺转移灶的数目差异均无显著性(P>0.05)。各组小鼠体重实验后均较实验前明显下降(P<0.01),但实验后3组之间体重差异均无显著性(P>0.05)。血GSH含量Ⅰ组明显低于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01)。结论: NAC可明显延长肿瘤形成的潜伏期,抑制原发瘤的生长;NAC对小鼠无明显副作用,是一种安全可靠的制剂。     

榄香烯乳联合化疗对小鼠Lewis肺癌组织S100A4及MMP-9蛋白表达的影响

【目的】观察榄香烯乳联合化疗对Lewis肺癌的抑瘤作用及其对S100A4及MMP-9表达的影响,探讨其作用机制。【方法】将24只接种Lewis肺癌瘤株的C57BL/6小鼠随机分为肺癌模型组、化疗组、榄香烯乳组、榄香烯乳联合化疗组,每组6只。接种后第11天开始给药治疗,化疗组给予小鼠腹腔注射足叶乙甙(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))、顺铂(3 mg·kg~(-1)·d~(-1)),榄香烯乳组给予小鼠腹腔注射榄香烯乳(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),榄香烯乳联合化疗组小鼠腹腔注给予射榄香烯乳(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))、足叶乙甙(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))、顺铂(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))。连续给药7 d后,观察各组小鼠瘤体质量,脾脏、胸腺指数变化,计算抑瘤率及抑制转移率,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测瘤组织中S100A4蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量,采用免疫组化法检测瘤组织中S100A4和MMP-9蛋白表达。【结果】与化疗组比较,榄香烯乳联合化疗组抑瘤率及抑制转移率均明显升高,肺癌小鼠脾脏指数、胸腺指数显著增加,瘤组织中S100A4和MMP-9含量明显降低,S100A4和MMP-9蛋白阳性表达率降低明显(P0.05或P0.01)。【结论】榄香烯乳联合化疗可抑制小鼠Lewis肺癌的生长转移,其机制可能与降低癌组织中S100A4、MMP-9蛋白的表达有关。     

rhEPO和rhG-CSF对小鼠CD90~+细胞的动员作用

目的:探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对小鼠外周血CD90+细胞的动员作用。方法:30只雄性昆明小鼠随机分为对照组、rhG-CSF组和rhEPO组。rhG-CSF 40μg.kg-1.d-1、rhEPO 250 IU.kg-1.d-1连续皮下注射5 d;对照组连续皮下注射生理盐水。每组均于最后一次注射后6 h收集外周血,计数有核细胞(ANC)和单个核细胞(MNC),流式细胞仪检测外周血ANC中CD90+、CD34+CD90+和CD90+CD34-细胞的比例。结果:应用rhG-CSF和rhEPO动员后,小鼠外周血中ANC和MNC的数量均较对照组增加(P<0.05),但rhG-CSF和rhEPO两组之间无差异(P>0.05)。流式细胞术检测显示rhEPO组外周血ANC中CD90+细胞比例为(56.49±9.06)%,较rhG-CSF组明显增加(P<0.05);而rhG-CSF组和对照组CD90+细胞占ANC的比例无明显差异(P>0.05)。rhEPO组的CD90+CD34-细胞比例增至(53.5±8.9)%,占CD90+细胞中绝大多数。结论:rhEPO和rhG-CSF均有较强的造血干细胞动员能力,但rhEPO对CD90+细胞的动员作用强于rhG-CSF,提示rhEPO对早期造血干细胞可能具有更强的动员作用。     

TPL与5-FU联合作用对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究雷公藤内酯醇(TPL)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响。方法:常规培养HT-29细胞,MTT比色法检测不同浓度TPL与5-FU单独或联合应用对HT-29细胞的增殖抑制率,透射电镜在亚细胞结构形态上证实凋亡细胞,流式细胞学定量分析凋亡细胞比例,免疫细胞化学分析突变型P53、bcl-2蛋白表达的变化。结果:①TPL与5-FU单独应用均能抑制HT-29细胞的增殖,且在一定范围内存在浓度依赖性。两药联合作用最高增殖抑制率最高达到(94.92±2.76)%,48 h凋亡率达(41.71±1.38)%。②TPL与5-FU在低剂量联合应用时对HT-29细胞增殖抑制作用有协同效应(CI<1),其机制可能为促进细胞凋亡。③与对照组比较,TPL与5-FU单独应用及联合应用后HT-29细胞突变型P53蛋白表达率均有显著降低,而bcl-2蛋白表达没有明显变化。结论:TPL与5-FU在小剂量联合应用时为协同效应,可能通过下调突变型P53蛋白诱导凋亡从而抑制细胞生长。本结果对于结肠癌的治疗具有一定的临床意义。     

持续小剂量化疗对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤VEGF-C及其受体Flt-4表达的影响

目的探讨持续小剂量(LDM)化疗对肺腺癌A549细胞荷瘤裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)/fms-样酪氨酸激酶-4(Flt-4)轴的影响及其机制。方法将人肺腺癌A549细胞接种于18只裸鼠皮下,建立荷瘤动物模型,以随机数字表法将其分为最大耐受剂量(MTD)组(CTX 100mg.kg-1腹腔注射,隔日1次,连续3次;n=6)、LDM组(CTX 20mg.kg-1.d-1腹腔注射,n=6)和对照组(0.1mL生理盐水腹腔注射,1次/d;n=6)。治疗21d后脱颈处死裸鼠,取皮下肿瘤组织,采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测肿瘤组织中VEGF-C、Flt-4的蛋白及mRNA表达。结果 LDM组裸鼠肿瘤组织VEGF-C、Flt-4蛋白及mRNA的表达水平均显著低于MTD组和对照组(P<0.05)。结论 LDM化疗可能通过降低肿瘤组织VEGF-C、Flt-4的表达而减少肺腺癌A549荷瘤裸鼠肿瘤的淋巴转移。     

ERβ在结肠癌细胞株的表达及他莫昔芬对结肠癌细胞株体外抑制实验

目的：探讨ERβ在结肠癌细胞株Lovo、HT-29的表达和他莫昔（tamoxifen,TAM）对结肠癌细胞株抑制作用.方法：体外培养人结肠癌细胞株Lovo、HT-29,用细胞爬片免疫组化、RT-PCR、Western blot方法检测ER α、ERβ表达,用MTT法检测不同浓度的17β-E2、TAM、5-Fu、TAM＋5-Fu、TAM对结肠癌细胞株的生长影响作用.流式细胞仪（FCM）测定细胞凋亡率.结果：①在结肠癌细胞株Lovo、HT29中稳定表达ERβ而不表达ER α ②TAM、5-Fu能抑制Lovo、HT29细胞株的增殖 ③TAM协同5-FU对Lovo、HT29细胞株有促使细胞凋亡的作用.结论：①结肠癌细胞株Lovo表达ERβ而不表达ER α ②TAM以ERβ为靶点抑制Lovo细胞株的增殖 ③TAM协同5-FU抑制Lovo细胞株的增殖,TAM协同5-FU对Lovo、HT29细胞株促细胞凋亡的作用.     

舒肝宁注射液治疗新生儿高胆红素血症疗效观察

目的探讨舒肝宁注射液治疗新生儿高胆红素血症的效果。方法 87例新生儿高胆红素血症患儿分为2组,对照组43例给予常规综合治疗,观察组44例在常规综合治疗的基础上给予舒肝宁注射液静脉滴注,早产儿1.0 mL.kg-1.d-1,足月儿1.0～1.5 mL.kg-1.d-1加入100 g.L-1葡萄糖10～20 mL中静脉滴注,每日1次,5 d为1个疗程。比较2组日平均总胆红素下降值及总胆红素降至正常水平所需时间。结果 2组患儿治疗前血清总胆红素值比较差别无统计学意义(P>0.05);观察组日均总胆红素下降值明显高于对照组(P<0.01);血清总胆红素降至正常水平所需时间明显短于对照组(P<0.05)。治疗期间2组患儿均未出现明显不良反应。结论舒肝宁注射液治疗新生儿高胆红素血症有较好的疗效,可缩短黄疸持续时间,且无明显副作用。     

芬太尼在学龄前小儿骨折术后镇痛中的应用

目的:探讨学龄前小儿骨科手术后使用芬太尼进行静脉镇痛的最佳剂量。方法:四肢骨折手术患儿60例,年龄3~7岁,ASA Ⅰ或Ⅱ级,随机分为3组,每组20例,均在静吸复合口插管全身麻醉下完成手术。术毕接镇痛泵:A组芬太尼5μg.kg-1.d-1;B组芬太尼7μg.kg-1.d-1;C组芬太尼10μg.kg-1.d-1,以2ml/h恒速静脉输注,观察并记录术后2、4、8、12、24、48h患儿的HR、MAP、RR、sPO2、镇痛、镇静评分、不良反应。结果:60例患儿均完成了48h术后镇痛。镇痛评分:与B组和C组比较,A组各时段评分增加(P<0.05),差异有统计学意义;C组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。镇静评分:与A组和B组比较,C组各时段评分增加(P<0.05),差异有统计学意义;B组与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HR、MAP、RR:与B组和C组比较,A组在术后2、4、8、12、24、48h均升高(P<0.05),差异有统计学意义。sPO2:各组差异无统计学意义(P>0.05)。不良反应:术后恶心、呕吐、瘙痒等并发症,与A组和B组比较,C组出现不良反应的例数明显增多(P<0.05),差异有统计学意义。结论:芬太尼7μg.kg-1.d-1静脉持续输注用于学龄前小儿骨科术后镇痛效果好,不良反应少,安全可行。     

通络方剂对1型糖尿病大鼠肾功能及肾脏CTGF、RAGE、p-ERK1/2表达的影响

目的观察通络方剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病大鼠肾组织CTGF、RAGE、p-ERK1/2表达的影响,并探讨其可能的肾脏保护机制。方法健康SD大鼠随机分为正常组(n=10)和造模组(n=50)。造模组大鼠给予单次腹腔注射STZ 60 mg/kg,造模成功后随机分为5组:糖尿病非治疗组,通络方剂低、中、高剂量组,氯沙坦组(n=10)。适应性饲养1周后,按分组不同每天分别给予不同处理因素,持续12周后处死,称体质量,测血肌酐、尿素氮,留24 h尿检测尿肌酐、尿蛋白、尿微量白蛋白,取左肾称质量,Real-time PCR法检测右肾组织中CTGF mRNA、RAGE mRNA的表达,Western印迹法检测右肾组织CTGF、RAGE、p-ERK1/2、Total-ERK1/2蛋白的表达。结果通络方剂中、高剂量组较糖尿病非治疗组能明显降低糖尿病大鼠血尿素氮、24 h尿蛋白、尿微量白蛋白、肌酐清除率,改善肾功能,降低RAGE mRNA、CTGF mRNA的表达,减少RAGE、CTGF、p-ERK1/2蛋白表达(P<0.05)。结论通络方剂可能通过抑制RAGE-ERK1/2-CTGF信号转导通路发挥对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用。     

正健液影响小鼠血清SOD活力和MDA含量的实验观察

目的:观察正健液对小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的影响。方法:分别给予小鼠正健液1.0,2.0,4.0g·kg~(-1)·d(-1),连接灌胃30d,检测血清中SOD活力及MDA含量。结果:小鼠血清SOD活力随剂量增加而增强,MDA含量随剂量增加而逐步降低。结论:正健液具有提高小鼠血清SOD活力和降低MDA含量的作用。     

前列舒通片对鼠的抗炎及镇痛作用

目的：观察前列舒通片（QLS）对实验性动物一般炎症与镇痛模型的作用,为临床应用提供药效学依据。方法：大鼠和小鼠分别均按体重区组随机方法分为空白对照组（n=8）、阳性对照组（阿司匹林组,n=8）、低剂量组（小鼠：25 mg•kg^-1•d^-1,n=8;大鼠： 17.5 mg•kg^-1•d^-1,n=8）、QLS中剂量组（小鼠：50 mg•kg^-1•d^-1,n=8;大鼠：35.0 mg•kg^-1•d^-1,n=8）、QLS高剂量组（小鼠：100 mg•kg^-1•d^-1,n=8;大鼠：70.0 mg•kg^-1•d^-1,n=8）。QLS各剂量组均连续灌胃给药3 d。采用二甲苯致小鼠耳肿胀、卵白蛋白致大鼠足肿胀和棉球肉芽肿观察其对炎症反应的影响,并采用小鼠热板法和腹腔注射0.6 %醋酸扭体法观察其镇痛作用。结果：QLS 3个剂量组均不同程度地抑制小鼠耳肿胀度,与空白对照组比较,50及100 mg•kg^-1•d^-1 QLS组小鼠耳肿胀度均明显减小（P<0.05或P<0.01）,对小鼠耳肿胀的抑制率分别为53.97%和60.09%;QLS 35.0及70.0 mg•kg^-1•d^-1组均显著抑制大鼠足肿胀（P<0.05）,且对棉球所致肉芽组织增生有明显的抑制作用（P<0.05或P<0.01）,大鼠肉芽肿的抑制率分别为32.40 %和35.65 %。与空白对照组比较, QLS 25、50及100 mg•kg^-1•d^-1组分别在给药后90、90及30 min均明显提高热板法小鼠的痛阈值（P<0.05或P<0.01）,且可明显减少小鼠的扭体次数（P<0.05）,对小鼠痛阈抑制率分别为36.17%、44.13%和46.64%。结论：QLS具有明显的抗炎和镇痛作用。     

MRI 评价抗肿瘤中药康莱特注射液疗效的实验研究

目的 评价功能MRI 是否能反映肿瘤血管在抗肿瘤治疗前后的变化,并获得MRI 相关半定量及定量参数。方法 复制结肠癌无胸腺雄性裸鼠BALB/c-nu 皮下移植瘤模型,共20 只,用中药康莱特注射液对裸鼠进行治疗,监测移植瘤的微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）等参数,评价疗效和MRI 监测结果。应用磁共振弥散加权成像（DWI）扫描,结合药代动力学模型,获得反映肿瘤细胞代谢和微血管通透性的各项半定量及定量参数,评估抗肿瘤治疗的早期疗效;根据药物的体外实验结果选择不同的观测点,分别随机处死一半的载瘤裸鼠,进行免疫组织化学染色。将病理免疫组织化学染色结果与MRI 相关半定量及定量参数进行相关性分析。结果 中药康莱特注射液作用下的人结肠癌HT-29细胞增殖率下降,比对照组降低33.113%（P <0.05）;比对照组HT-29 细胞的凋亡率升高28.243%（P <0.05）。表观弥散系数（ADC）ADCperf 值、ADC3b 及ADC10b 与MVD 呈正相关（P <0.05）。结论 结肠癌裸鼠使用中药康莱特注射液治疗前后,各时期DWI 检测获得的定量参数与免疫组织化学法结果有相关性。     

北五味子总木脂素对D-半乳糖诱导的小鼠脑衰老自噬和凋亡的影响

目的：利用D-半乳糖复制小鼠衰老模型,探讨北五味子总木脂素(SCL)延缓小鼠脑组织衰老的作用及其机制。方法：以50只小鼠为实验对象,实验分为空白对照组(n=10),模型（100 mg?kg-1?d-1）组(n=10),低（35 mg/kg/d）、中（70 mg/kg/d）和高（140 mg/kg/d）剂量SCL组(n=10)。小鼠连续皮下注射D-半乳糖10周制备D-半乳糖小鼠衰老模型,给予SCL（35、70和140 mg/kg/d）处理10周。水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力,Western blotting法检测各组小鼠脑组织中线粒体Bax和Bcl-2蛋白表达、泛素化蛋白（Ub）
及微管相关蛋白轻链3（LC3）表达水平的变化;免疫组织化学法观察小鼠大脑皮质和海马组织中LC3蛋白表达。结果：学习记忆能力测试中,与空白对照组比较,模型组小鼠游泳时间延长（P<0.05）,错误次数增多（P<0.05）;与模型组比较,SCL低、中和高剂量组小鼠游泳时间缩短（P<0.05）,错误次数减少（P<0.05）;Western blotting法检测,与空白对照组比较,模型组小鼠脑组织中Bax蛋白表达水平增加、Bcl-2蛋白表达水平降低,泛素化蛋白Ub 、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平均增加（P<0.05）;与模型组比较,SCL低、中和高剂量组小鼠脑组织中Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平增加,Ub、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平均降低（P<0.05）。免疫组织化学法检测,空白对照组小鼠大脑皮质和海马组织中神经形态正常,神经元细胞浆内无棕黄色颗粒染色,LC3蛋白表达为阴性;模型组小鼠有神经细胞变性,大脑皮质和海马神经元中LC3蛋白阳性细胞数增加（P<0.05）;与模型组比较,SCL低、中和高剂量组小鼠神经细胞变性数量明显减少,大脑皮质和海马神经元中LC3蛋白阳性细胞数减少（P<0.05）。结论：SCL具有缓解D-半乳糖诱导的小鼠脑组织衰老作用,其作用机制与SCL调节自噬作用和抑制细胞凋亡有关联。     

益母草提取液对小鼠遗传物质损伤的保护作用及对淋巴细胞功能的增强作用

目的：观察中草药益母草抗突变作用和对脾T淋巴细胞增殖的影响。方法：小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验(ＭＮＴ):30只小鼠随机分为6组(每组5只),即阴性对照组(NS)、环磷酰胺(CP)组(30 mg•kg^-1)及益母草抗诱变组(益母草1.0、2.0、4.0和8.0 g•kg^-1 +CP 30 mg•kg^-1),按改良方法制片检测微核频率;淋巴细胞转化实验:24只小鼠随机分为4组(每组6只),即生理盐水组、CP组(30 mg•kg^-1)、益母草水煎液组(2.0 g•kg^-1)及益母草水煎液+CP组(2.0 g•kg^-1益母草+CP 30 mg•kg^-1),采用MTT法计算刺激指数(SI)。结果：益母草2.0、4.0和8.0 g•kg^-1剂量组微核率低于CP组(Ｐ<0.05);生理盐水组、益母草水煎液组、益母草水煎液+CP组、CP组的SI分别为1.89±0.19、 2.17±0.14、1.73±0.13和1.45±0.09; 益母草水煎液组的SI显著高于生理盐水组,差异有显著性(P<0.05) ;益母草水煎液+CP组SI高于CP组,差异有显著性(P<0.05)。结论：益母草具有抗诱变作用,即对遗传物质具有保护作用,并且益母草能提高淋巴细胞功能。     

大蒜素联合5-FU对腺样囊性癌ACC-M裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：探讨大蒜素联合5-FU对腺样囊性癌ACC-M裸鼠移植瘤的抑制作用。方法建立ACC-M细胞Balb/c裸鼠肩胛下移植瘤模型30只。造模2周后挑选24只肿瘤大小较均匀的裸鼠随机分为实验组(大蒜素组、5-FU组和大蒜素联合5-FU组)和对照组,各6只。实验组按照体质量0.01 mL/g腹腔注射大蒜素和5-FU浓度均为20μg/mL,对照组注射0.9%PBS液,每两天一次,共3次,末次注射1周后处死动物。测量移植瘤的体积变化,HE染色观察移植瘤的病理学改变。结果移植瘤体积变化比较结果：各实验组移植瘤体积明显缩小,5-FU组体积小于大蒜素组,大蒜素联合5-FU组与大蒜素组、5-FU组比较差异有显著统计学意义(P<0.01);镜下见对照组的癌细胞生长旺盛,异型率高,而各实验组的肿瘤细胞出现不同程度减少,间质增加,大蒜素联合5-FU组最为明显。结论大蒜素和5-FU均能有效抑制ACC-M细胞Balb/c裸鼠移植瘤的生长,且大蒜素联合5-FU的抑制作用明显强于大蒜素或5-FU单独使用。     

通络方剂对实验性糖尿病大鼠胸腺CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的探讨通络方剂对实验性糖尿病大鼠胸腺CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响。方法 112只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组、通络方剂干预组。后两组一次性腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg制备1型糖尿病大鼠模型。通络方剂干预组再分为2组:分别于糖尿病造模成功后当天及普通饲养12周后0.4g.kg-1.d-1)灌胃给药,即预防性给药组(TL-1)和治疗性给药组(TL-2)。灌胃时间均为12周。实验周期6个月,不同时间点(对照组和模型组:4、8、12、16、20、24周;通络方剂组:12和24周)处死大鼠,流式细胞仪检测胸腺CD4+CD25+Treg数量及其占CD4+T细胞比例,H-E染色观察胸腺形态,免疫组化检测Foxp3蛋白表达。结果随糖尿病病程发展,与正常对照组相比,糖尿病大鼠胸腺逐渐萎缩,Treg占CD4+T细胞比例逐渐减少,Foxp3表达减少。两组通络方剂组较糖尿病组Treg比例升高(P<0.01),胸腺指数升高(P<0.05),Foxp3有表达。结论通络方剂可显著提高Treg比例,提高胸腺指数,提高Foxp3表达,可能对实验性糖尿病大鼠的胸腺Treg有保护作用。     

维生素E联合红景天对低氧复合运动小鼠骨骼肌保护作用的研究

目的 探讨维生素E联合红景天对低氧复合运动小鼠骨骼肌细胞损伤的保护性作用及其机制.方法 将40只ICR小鼠按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组均为20只.对照组小鼠给予灌胃维生素E(40 mg·kg-1·d-1),观察组小鼠给予灌胃维生素E(40 mg·kg-1·d-1)+红景天提取液(20 g·kg-1·d-1),两组小鼠连续给药15 d后进行为期4周的低氧(氧浓度11.3%)复合运动(5 ℃,15 m/min,60 min/d).最后一次运动后处死小鼠检测骨骼肌血清甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧类物质(ROS)、丙二醛(MDA);逆转录PCR(RT-PCR)法检测骨骼肌B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因mRNA水平的表达,进行氧复合运动过程中(运动前、1、2、4周)监测外周血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH).结果 运动后各时间点观察组CK与LDH活性均低于对照组(P<0.05).观察组小鼠骨骼肌组织的GSH-PX、SOD活性明显高于对照组(P<0.05),而ROS、MDA低于对照组(P<0.05);观察组小鼠骨骼肌组织Bax基因mRNA水平的表达与Bax/Bcl-2比值均明显低于对照组(P<0.05),而Bcl-2基因mRNA水平的表达明显高于对照组(P<0.05).结论 红景天联合维生素E能通过纠正低氧运动下的氧化与抗氧化失衡而抑制凋亡基因的表达.     

人结肠癌肝转移裸鼠肝组织中端粒酶逆转录酶的表达

目的建立人结肠癌HT-29裸鼠肝转移模型,检测肝脏组织中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达。方法Balb/c裸鼠30只,腹腔内注射戊巴比妥麻醉,经脾脏注入人结肠癌HT-29细胞悬液,并切除脾脏,建立裸鼠肝转移模型。处死动物后观察肿瘤生长情况,并作病理学检查;采用RT-PCR方法检测裸鼠肝脏组织中hTERT mRNA的表达。结果30只裸鼠均发生人结肠癌肝转移,肝转移率100%,病理学证实肝转移发生,肝脏组织中hTERTmRNA表达阳性。结论脾种植HT-29细胞建立人结肠癌裸鼠肝转移模型,肝脏组织中hTERTmRNA阳性表达,提示hTERT在结肠癌肝转移早期诊治中的意义。