清肺保元汤联合西医治疗对重症肺炎患者外周血淋巴细胞分类计数的影响

目的：观察清肺保元汤联合西医治疗对重症肺炎患者外周血淋巴细胞分类计数的影响.方法：2009年6月至2010年8月在我院呼吸内科住院治疗的重症肺炎患者41例,按简单随机法分为治疗组（Treatment group,T组）21例,对照组（Control group,C组）20例.C组按重症肺炎指南进行常规西医治疗,T组在C组治疗的基础上加用清肺保元汤.于治疗前（第0天）和治疗后第21天分别进行重症肺炎征候评分,计算T组及C组治疗有效率;并分别检测患者外周血CD3＋CD4＋ CD8-及CD3＋ CD4-CD8＋细胞的分类计数,计算外周血CD3＋ CD4＋ CD8-/CD3＋ CD4-CD8＋比值.结果：第0天：T组及C组重症肺炎证候评分无差别;外周血CD3＋ CD4＋ CD8-及CD3＋ CD4-CD8＋细胞的分类计数,CD3＋CD4＋CD8-/CD3＋ CD4-CD8＋比值无差别.第21天：C组死亡1例,无效2例;T组无死亡病例,无效2例,T组有效率较C组有所提高（91％ vs 85％）,但两组对比无统计学差异.T组及C组证候评分下降,但两组间对比无差别;T组及C组外周血CD3＋CD4＋ CD8-和CD3＋ CD4-CD8＋计数均增高,且T组与C组相比上升更为明显,CD3＋ CD4＋ CD8-/CD3＋ CD4-CD8＋比值下降,两组间对比无差别.结论：清肺保元汤可能通过抑制CD3＋ CD4＋ CD8-和CD3＋CD4-CD8＋细胞的过度凋亡治疗重症肺炎.     

肝细胞癌患者外周血中调节性T细胞、NK细胞及NKT细胞的表达及意义

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞在肝细胞癌患者外周血中的表达及意义.方法 利用流式细胞仪对31例肝细胞癌患者、59例慢性肝炎、肝硬化患者及48例正常人外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞进行定量分析.结果 肝细胞癌组外周血中CD4+CD25+T细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显减少(P<0.05),肝细胞癌组外周血中CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显增加(P<0.05).结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过对CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞功能的抑制参与了肝癌细胞的免疫逃逸作用.     

原发性肝癌患者CD8+CD28-和CD8+CD28+细胞亚群的分析

目的研究原发性肝癌(HCC)病人外周血CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子的表达.方法用流式细胞仪对20例原发性肝癌病人的CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子(即CD8+CD28+和CD8+CD28)的表达进行检测.结果HCC病人CD8+细胞百分率升高,CD8+CD28+细胞百分率降低,CD8+CD28细胞百分率升高,与对照组相比具有显著性差异.CD8+CD28+、CD8+CD28-细胞百分率与CD8+T细胞百分率的相关性研究表明,CD8+CD28-细胞数与CD8+T细胞数之间呈正相关.结论HCC病人CD8+细胞升高,CD8+细胞上CD28分子的表达是异常的,即CD8+CD28-细胞数升高,CD8+CD28+细胞数降低;CD8+T细胞的升高是CD8+CD28-细胞亚群升高的结果.     

退白颗粒联合NB-UVB对白癜风患者外周血T细胞亚群的影响

目的 检测白癜风患者外周血CD4+、CD8+T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）的水平,同时对退白颗粒联合NB-UVB治疗后两者的水平进行检测,探讨两者与该病的关系。方法 采用流式细胞仪对120例白癜风患者及30例健康对照组外周血CD4+、CD8+T细胞及CD4+CD25+Treg细胞水平进行检测,同时120例患者分为3组,各40例。联合治疗组采用退白颗粒联合NB-UVB治疗、对照Ⅰ组采用单独NB-UVB治疗,对照Ⅱ组采用退白颗粒治疗,疗程为3月,对3组患者治疗前后CD4+/CD8+比值及CD4+CD25+Treg水平与健康对照组进行比较。结果 白癜风患者外周血CD4+T淋巴细胞明显降低,而CD8+T淋巴细胞则明显升高,与健康对照组比较均有统计学差异（P＜0.01）;进展期患者CD4+/CD8+比值明显低于稳定期（P＜0.01）,稳定期与健康对照组比较无统计学差异（P＞0.05）;白癜风患者CD4+CD25+Treg细胞百分率明显低于健康对照组（P＜0.01）,且进展期患者CD4+CD25+Treg细胞比稳定期下降更明显（P＜0.01）。采用退白颗粒联合NB-UVB治疗后CD4+/CD8+比值及CD4+CD25+Treg明显上调,与单独NB-UVB和单独退白颗粒治疗比较,差异有显著性意义（P＜0.01或P＜0.05）。结论 CD4+/CD8+比值的失衡与CD4+CD25+Treg数量的异常可能参与了白癜风的发病,退白颗粒联合NB-UVB可能通过调节两者的水平对该病发挥治疗作用。      

花姜酮对小鼠CD4+CD25+Treg细胞分化功能的影响及机制

目的：建立小鼠CD4+CD25+Treg细胞的体外诱导及培养方法,同时探讨花姜酮（Zerumbone）对Treg细胞的分化、分泌功能的影响及其机制。方法：从BABL/c小鼠的脾脏分离、纯化CD4+CD62L+T细胞,加入转化生长因子（transforming growth factor,TGF）? β（5 ng/mL）、 白细胞介素（interleukin,IL）?2（30 μg/mL）促进CD4+CD62L+T细胞向Treg细胞分化。Treg细胞被分为5组：正常组、模型对照组、Zerumbone（1 μmol/L）组、Zerumbone（10 μmol/L）组、Zerumbone（30 μmol/L）组。流式细胞术检测各组Treg细胞的比例,酶联免疫吸附试验（enzyme?linked immunosorbent assay,ELISA）方法检测IL?10含量,Foxp3、IL?10 mRNA的表达用实时荧光定量聚合酶链反应（RT?PCR）方法检测。结果：本实验方法使Treg细胞的诱导比例明显升高（P< 0.01）。与模型对照组相比,Zerumbone组的Treg细胞比例呈剂量依赖性升高（P均< 0.05）。IL?10蛋白的表达与模型对照组比较也呈剂量依赖性升高（P均< 0.05）,Foxp3、IL?10 mRNA的表达同样升高（P < 0.05）,其中Zerumbone（30 μmol/L）组升高最明显（P < 0.01）。结论：在体外实验中,Zerumbone可以促进BABL/c小鼠体内的CD4+CD62L+T细胞向Treg细胞分化,并促进IL?10蛋白的表达,其机制可能与诱导CD4+CD25+Treg特异性转录因子Foxp3的表达有关。     

急性有机磷农药中毒与CD^8＋CD2^8＋T细胞、CD8^＋CD28-T细胞相关性及意义

目的探讨急性甲胺磷农药中毒早期血药浓度与T淋巴细胞亚群的关系。方法选择河北大学附属医院急诊医学科2007年1月至2013年6月收治的92例口服急性甲胺磷农药中毒患者,按中毒程度分为轻中度中毒组54例和重度中毒组38例,另选同期健康体检者92例为对照组,检测并分析中毒患者血药浓度与CD3^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^-的关系。结果重度中毒组血药浓度水平较轻中度中毒组明显高（P〈0．01）,CD3^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^＋细胞数较轻中度中毒组明显低（P〈0．01）,而CD8^＋CD28^-细胞数较轻中度中毒组明显高（P〈0．01）。结论急性甲胺磷农药中毒早期血药浓度越高,中毒程度愈重,细胞免疫受损越严重。     

牙周炎发生时外周血中CD4~+CD25~+T细胞表达的变化研究

目的:探讨CD4+CD25+Treg在牙周炎发生时的免疫调节作用。方法:选择35只成年SPF级Wistar大鼠,丝线结扎加高糖饮食建立大鼠牙周炎发生的动物模型,获得类似牙周炎自然病程的连续组织标本,病理切片确定病损,分别获取第4、8、12、16周的大鼠外周血,术前未结扎组对照。以流式细胞仪检测不同时段外周血中CD4+CD25+Treg的比例变化。结果:建立了Wistar大鼠牙周炎发生的动物模型,病理切片确定了牙周病损的存在。结果显示伴随牙周炎发生的牙槽骨的吸收逐渐增多。流式细胞仪结果显示结扎后第4、8、12、16周外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例为7.70%、9.12%、9.74%、10.31%,与术前比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:外周血中CD4+CD25+Treg自牙周炎发生早期逐渐升高,牙周炎发生发展规律一致,从而证实CD4+CD25+Treg细胞参与介导了牙周炎发生的免疫调控。     

EB病毒感染儿童CD4+CD25+变化及意义

目的 探讨EB病毒感染儿童CD4+CD25+变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪(FCM)分别对50例EB病毒感染患儿急性期、治疗两周后恢复期外周血淋巴细胞CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD4+/CD8+,CD3-CD19+,CD3-CD(16+56)+,CD19+CD23+,CD4+CD25+抗原进行检测,并与19例同龄健康对照组儿童比较.结果 急性期CD4+CD25+比健康组均明显下降,恢复期CD4+CD25+比初期升高,有肝功能损害者比肝功能正常组CD4+CD25+低(P<0.05).结论 CD4+CD25+可能参与EB病毒感染过程,EB病毒感染患儿存在细胞免疫功能紊乱,测定其功能对疾病的诊治与预后都有积极意义.     

晚期恶性肿瘤患者CD8及CD28 T淋巴细胞亚群结果分析

目的 分析晚期恶性肿瘤患者CD8及CD28 T淋巴细胞亚群的构成。方法 采用流式细胞术检查55例晚期恶性肿瘤患者T淋巴细胞亚群,并与体检健康者作比较。结果 研究组晚期恶性肿瘤患者CD4+、CD4+/CD8+比值、CD8+CD28+明显低于对照组(P<0.01),CD8+,CD8+CD28-明显高于对照组(P<0.01)。结论 晚期恶性肿瘤患者机体免疫功能低下,表现为CD4+,CD8+CD28+低下,而CD8+CD28-明显升高,因此临床上检测CD8+及CD28+淋巴细胞亚群,更能反映T淋巴细胞的免疫功能,具有一定的临床参考价值。     

晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8~+、CD8~+CD28~+、CD8~+CD28~-T细胞的变化观察

目的 :分析 6 4例晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 的变化 ,并探讨其与病情的关系。方法 :采用流式细胞术检测 6 4例晚期恶性肿瘤患者治疗前后T淋巴细胞亚群 ,并与健康体检者作比较。结果 :实验组晚期恶性肿瘤患者化疗前CD4 + 低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而化疗前后CD4 + CD8+ 明显低于对照组 (P <0 0 1) ,CD8+ 、CD8+ CD2 8- 明显高于对照组 (P <0 0 1)。治疗后 ,化疗有效者CD4 + 、CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 升高 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,而CD8+ CD2 8- 降低 (P <0 0 5 ) ;化疗无效者CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 降低 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,CD8+ CD2 8- 升高 (P <0 0 1)。结论 :晚期恶性肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能低下 ,有效的治疗能提高患者的T淋巴细胞免疫功能 ,临床上检测CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 对恶性肿瘤的治疗和预后有一定的监测作用。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与肿瘤关系研究概况

<正>1995年,Sakaguchi等发现了CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)。近年来有关CD4+CD25+Tr细胞的研究日益广泛和深入,其在肿瘤的相关研究中也越来越受到关注,国     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞在糖尿病发病中作用的研究

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在糖尿病发病中的作用及机制。方法:选取BALB/c小鼠,每日腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40mg/kg,连续5天,建立1型糖尿病模型;从小鼠内眦静脉采血,检测血糖;取小鼠尿液,检测尿糖;流式细胞术检测两种小鼠感染不同时间脾细胞悬液中CD4+T细胞和CD4+CD25+T细胞百分含量;ELISA法检测脾细胞培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果:BALB/c小鼠的IFN-γ水平在注射STZ第2周和4周明显增高(P<0.05);IL-10水平在注射STZ第2周和4周明显降低(P<0.05);CD4+T细胞数量在注射STZ第2周未见明显升高,第4周水平明显升高(P<0.05);CD4+CD25+T细胞数量在注射STZ第2周和4周明显降低(P<0.05)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞通过抑制Th1型细胞因子分泌,分泌IL-10等细胞因子,防止糖尿病的发生,维持自身耐受。     

神经免疫性疾病外周血调节性T细胞的变化及意义

目的通过分析神经免疫性疾病患者外周血中CD4~+CD25~+-Tregs的变化,探讨其在神经免疫性疾病发病中的意义。方法应用流式细胞仪检测44例神经免疫性疾病患者外周血中CD4~+、CD4~+CD25~+及CD4~+CD25highT细胞比例。结果患者与健康对照者比较CD4~+T细胞比例无变化,但CD4~+CD25~+及CD4~+CD25highT细胞比例明显降低。结论神经免疫性疾病患者外周血中CD4~+CD25~+-Tregs比例降低,可能是其发病的重要因素。     

正常妊娠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞和雌二醇水平变化的研究

目的 探讨外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平在正常妊娠整个过程中的变化.方法 采用三色荧光标记流式细胞术检测正常非妊娠健康女性(对照组),早早孕组、早孕组、中孕组、晚孕组各35例妇女外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率;采用电化学发光酶免分析技术分别检测以上各对象外周血雌二醇水平.结果 对照组和早早孕组外周血雌二醇水平明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05);对照组和早早孕组外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05),晚孕组略低于中孕组,但无统计学意义(P＞0.05).结论 正常妊娠过程孕8周左右之后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平均呈现明显升高,并且随孕周增大而升高,正常的CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和外周血雌二醇水平在维持正常妊娠过程中发挥重要作用.     

败血症患者调节性T细胞与CD64指数的相关性分析

目的:检测败血症患者血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)和CD64指数,探讨二者的相关性。方法:采用流式细胞仪检测败血症组及对照组的血CD4+CD25+Treg和CD64指数,同时测定白细胞数(WBC)和C-反应蛋白(CRP)的水平,并进行比较、分析。结果:(1)CD4+CD25+Treg、CD64、WBC、CRP败血症组明显高于对照组;死亡组患者明显高于生存组,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)生存组和对照组CD4+CD25+Treg、CD64两项指标不同时间变化不明显;(3)CD64指数与CD4+CD25+Treg呈正相关关系,有统计学意义(P<0.05)。结论:连续、动态观察败血症患者的CD4+CD25+Treg与CD64指数,有助于正确评估其发展方向和预后,为早期合理使用药物提供支持。     

反复自然流产患者外周血T淋巴细胞亚群比率的变化与作用

目的 探讨T淋巴细胞亚群在反复自然流产患者体内的比率变化及作用.方法 采用流式细胞仪对59例反复自然流产病人,60例正常早孕妇女妇女外周血T淋巴细胞亚群进行检测.结果 反复自然流产病人外周血CD3+T淋巴细胞比率明显高于正常早孕妇女(P＜0.05);CD4+T淋巴细胞比率明显高于正常早孕妇女(P＜0.05);CD4+/CD8+比值明显高于正常早孕妇女(P＜0.05).结论 T淋巴细胞CD3+、CD4+比率及CD4+/CD8+比值升高与反复自然流产的发生有关.     

帕金森病患者T淋巴细胞亚群的检测及意义

目的:研究T淋巴细胞亚群在帕金森病患者(PD)外周血淋巴细胞中的改变,并探讨其在疾病进程中的意义.方法:选取PD患者28例,并依据改良的Hoehn&Yahr分级标准分为PD1(Ⅰ级)、PD2(Ⅱ级)和PD3(Ⅲ级)3个亚组,用流式细胞术检测CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+和调节性T淋巴细胞(CD4+Foxp3+)在-外周血淋巴细胞中的百分率,并与正常对照组18例进行比较.结果:PD3亚组外周血淋巴细胞中CD3+CD8+的百分率高于对照组(P＜0,05).PD2和PD3亚组的CD4+Foxp3+百分率显著低于对照组和PD1亚组(P＜0.05).结论:PD组外周血淋巴细胞中CD3+CD8+和CD4+Foxp3+百分率改变导致细胞免疫失衡,可能参与了帕金森病的病理进程.     

乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞的水平变化及临床意义

目的 探讨乳腺癌（Mammary cancer）患者外周血中CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞(Tregs )的分布情况及临床意义。方法 采用流式细胞仪测定65例乳腺癌患者外周血中的CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞水平,结果与18例正常健康人对比。结果 乳腺癌患者外周血中的CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞均显著高于对照组（P <0.01）;且与乳腺癌的分期呈正相关。 结论 乳腺癌患者外周血中具有免疫负调控功能的CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞水平较高, 可能与乳腺癌的病情及预后相关。     

CD4+CD25+调节性T细胞的体外扩增

 【目的】 探讨有效的体外培养扩增CD4+CD25+Treg的方法。【方法】 收集健康志愿者外周血5例，免疫磁珠法分选出CD4+CD25+Treg。将实验分为三组，第一组在CD4+CD25+Treg中加入100 nM rapamycin (1μg/ml)和包被了CD3/CD28单抗的磁珠培养3周，第8 天开始加入1000U/mL的IL-2，第二组培养条件除不加rapamycin外其余与第一组相同，第三组培养细胞为CD4+CD25-T细胞，培养条件同第一组。培养第7、14、21天收集细胞计数，第21天收集细胞行流式细胞术三标法检测CD4、CD25、FOXP3的表达。MTT法检测体外扩增的CD4+CD25+Treg对自体和异体的CD4+T细胞增殖的抑制作用。 【结果】 三组细胞均有明显的扩增，加rapamycin培养的CD4+CD25+Treg细胞的扩增率比不加rapamycin扩增倍数低，但细胞的纯度明显增加。CD4+CD25-T细胞组在培养第一周扩增迅速，从第二周开始增殖减慢，CD4+CD25+ Treg 细胞的比例较培养前无明显的差别。三组至第三周时扩增倍数分别为 89.4+20.53、338.4+77.64 、215.6+54.58（F=484.655,p<0.0001），细胞的纯度分别为84.32+4.62%、34.04+5.78%、0.68+0.39% (F=24.660,p<0.0001)。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+T细胞对自体和异体的CD4+T细胞增殖均有明显的抑制作用，并且随着效靶比浓度的降低而降低。在CD4+T/Treg比例为8：1、4：1、2：1、1：1时对自体CD4+T细胞的抑制率分别为9.65%、16.43%、28.75%、55.34%，对异体CD4+T细胞的抑制率分别为6.43%、14.72%、26.47%、50.25%，而且在各浓度梯度其抑制作用在自体和异体之间均无明显的差异。结论 我们采用rapamycin+CD3/CD28单抗标记的磁珠+IL-2在体外成功扩增了CD4+CD25+Treg，其扩增的倍数为89.4+20.53，具有免疫抑制功能，有望进一步应用于临床。