多聚酶链反应检测结核杆菌复合群方法的建立及临床应用

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）对结核杆菌复合群基因组进行扩增,得到一２８５ｂｐＤＮＡ条带。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹证实为特异性扩增。用ＰＣＲ方法对临床４０份待测标本进行检测,并与结核杆菌常规培养以及高渗培养等方法进行比较,其阳性率分别为６０．０％、７．５％和０％,差异均有显著性意义（均为Ｐ〈０．０１）。     

聚合酶链反应检测泌尿系结核患者尿中结核杆菌

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对３４例泌尿系结核病人的２４小时尿液标本进行结核杆菌染色体中３３６－ｂｐ重复序列ＤＮＡ片段的扩增检测，阳性率为９４．１％。ＰＣＲ检测２４小时尿样中结核杆菌比尿沉淀物涂片法找抗酸杆菌（阳性率５６％）及结核杆菌快速培养法Ｂａｃｔｅｃ培养结核杆菌（阳性率７０．６％）更敏感。我们还用ＰＣＲ、涂片法、Ｂａｃｔｅｃ培养法检测了１０例非泌尿系结核者中结核杆菌，阳性结果分别为０、０、３     

用聚合酶链反应检测咽拭子和痰液中的肺炎支原体

采用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增肺炎支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，Ｍｐ）特异的１４４ｂｐＤＮＡ片段，并将ＰＣＲ扩增与常规培养或血清冷凝集素测定相比较。结果表明，该法的阳性率明显高于常规培养或冷凝集素测定。２５例患者标本常规培养阳性６例（２４．０％），ＰＣＲ扩增阳性１１例（４４．０％），５０例患儿咽拭子ＰＣＲ扩增阳性１５例（３０．０％），其中２７例同时进行了ＰＣＲ和血清冷凝集素测定，阳性率分别为４０．７％（１１／２７）和２５．９％（７／２７）。ＰＣＲ扩增阳性病例改用红霉素或四环素治疗均获显著疗效。本法具有快速、特异、灵敏度高等优点，可望成为早期诊断Ｍｐ感染的常规方法。     

用聚合酶链反应技术诊断结核病

用聚合酶链反应技术对结核杆菌特异性重复序列ＩＳ６１１０部分基因１２３ｂＰ的片段进行扩增。该法检测人型结核杆菌灵敏度可达到１０ｆｇＤＮＡ，对１４９份结核患者临床标本检测结果显示ＰＣＲ总阳性率（６９．１％）明显高于直接涂片荧光镜检（１５．４％）与细菌培养（１０．１％）的阳性率（Ｐ＜０．０１）。研究表明ＰＣＲ是一种特异、敏感、快速诊断结核病的好方法，值得推广。     

聚合酶链反应早期诊断结核性关节炎的临床价值

目的 探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ技术）对诊断结核性关节炎的临床价值。方法 对４２例结核性关节炎与２０例非结核性关节炎的关节积液分别应用酸染色镜检，分离培养和ＰＣＲ检测。结果 ４２例结核性关节积液三种方法的检出率分别为：镜检法１９．０％，培养法３８．１％，ＰＣＲ法６６．７％，后者显著高于前二者（Ｐ〈０．０１）。２０例非结核性关节积液抗酸染色镜检和分离培养结果均为阴性，ＰＣＲ阳性率１０％。结论 ＰＣＲ技术检测关节积液中的结核杆菌具有快速、敏感和高效等优点。对关节结核的早期诊断和鉴别诊断具有重要价值。     

用聚合酶链反应快速检测痰液中结核杆菌

本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为１２３个碱基对（ｂｐ）的ＤＮＡ片段作为聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增的模板，合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ），乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ－２Ｎａ）和三硝基甲苯（Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００）加热、震荡处理，裂解结核杆菌，再作ＰＣＲ扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时，与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该ＰＣＲ检测的检出率为９１．４％（３２／３５），而涂片抗酸染色的检出率仅为３４．３％（１２／３５）。两者相比有非常显著性差异（ｘ２＝２４．４７６，Ｐ＜０．００１）。由于改进了ＰＣＲ前痰液标本的处理方法，使整个ＰＣＲ检测过程所需时间缩短至９ｈ。我们认为该ＰＣＲ检测结核杆菌是特异、敏感和快速的，可在临床实验室应用。     

PCR对结核性胸水诊断价值的探讨

采用ＰＣＲ技术检测６７例胸水标本中的结核杆菌ＤＮＡ，并与细菌学检查（细菌培养）进行对比观察，结果表明：用ＰＣＲ方法检测结核性胸水中结核杆菌ＤＮＡ阳性的检测率达５２．２４％（３５／６７）；胸水细菌培养出结核杆菌者１３．４６％（７／５２），两者相比具有高度显著性（ｐ＜０．０１）。对３例大量的结核性胸水患者进行动态观察，经抗痨治疗２～３周后复查胸水ＰＣＲ仍为阳性。认为ＰＣＲ是敏感、快速、特异性的方法，对结核性胸水诊断和治疗具有实用价值。     

聚合酶链反应在诊断肺结核中的应用

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对７８例患者的痰、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和胸水标本进行结核菌检测；并同时进行涂片抗酸染色、皮肤结核菌素试验及血结核菌抗体检测。结果：ＰＣＲ阳性率为４６．１５％，与涂片镜检、结核菌素试验强阳性、血结核菌抗体阳性率（分别为３．８５％、１７．９５％、１１．５４％）相比均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。由此可见ＰＣＲ方法比传统方法具有更高的结核杆菌检出率。     

聚合酶链反应在结核性脑膜炎早期快速诊断中的价值

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１４例结脑患者脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ，并与细菌培养、Ｅｌｉｓａ法比较，三种方法的敏感性和特异性分别为８５．７１％和１００％，２１．４３％和１００％，５０％和９５．０％。２０例对照组中，ＰＣＲ均为阴性。结脑组与对照组相比差异显著（Ｐ〈０．０１）。作者认为，ＰＣＲ是目前结脑最敏感和特异的早期、快速病原学诊断方法，值得临床推广。     

采用聚合酶链反应检测肺结核病患者中的结核杆菌

目的：建立一种快速，敏感及特异的早期诊断肺结核病方法。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测了６４例肺结核患者的外周血与痰标本结核杆菌－ＤＮＡ。结果：外周血结核杆菌－ＤＮＡ的阳性率为６７．２％（４３／６４），痰标本的阳性率为２９．６％（１９／６４）（Ｐ〈０．０５），结论：用ＰＣＲ技术诊断肺结核病，可提高临床检测的特异性和敏感性。     

老年结核性脑膜炎的临床研究

对经脑脊液（ＣＳＦ） 和ＣＴ证实为脑积水的老年结核性脑膜炎患者（ＯＴＢＭ） ４２ 例进行回顾性分析, 并与同期无脑积水的ＯＴＢＭ ３９ 例对照, 以研究ＯＴＢＭ 的ＣＳＦ变化、影像学改变与脑积水形成的关系及其预后。发现ＯＴＢＭ临床症状、ＣＳＦ变化不典型, 基础疾病多, 病死率较高 （２８．５７％ ）, 与对照组比较有显著差异 （Ｐ＜ ０．０５）。结果表明：脑膜纤维蛋白渗出、增殖和老年性脑室变窄是形成脑积水的直接因素。ＣＳＦ指标的动态检测对脑积水的早期诊断、疗效判断、预后评估具有重要价值。早期规范抗痨, 早用激素, 对减轻脑膜炎症与脑积水、提高治愈率至关重要     

聚合酶链反应-微孔板杂交法检测结核杆菌的临床应用及其评价

目的　对聚合酶链反应 ( PCR) -微孔板杂交法检测结核杆菌的临床适用性和可行性进行评价。方法　收集 1130份临床标本 ,分别用抗酸染色、培养、PCR电泳及 PCR微孔板杂交法进行结核杆菌检测 ,并结合临床诊断和疗效观察对实验结果进行分析。结果　 10 0份临床证实无结核病的体液标本经抗酸染色和 PCR电泳 ,分别有 1例和 2例假阳性 ,但经培养和 PCR微孔板杂交法未查出阳性 ;其余 10 30份高度怀疑含有结核杆菌的体液标本的检测结果 ,以 PCR微孔板杂交阳性检出例数最高 ( 481/ 10 30 ) ,其次为 PCR电泳 ( 40 6 / 10 30 )、培养 ( 36 5 /10 30 )以及抗酸染色 ( 2 5 6 / 10 30 ) ;χ2 检验结果显示 ,PCR微孔板杂交的结核杆菌阳性检出例数与其它三种方法比较均呈显著或极显著性差异 ( P<0 .0 0 83及 P<0 .0 0 17)。结论　 PCR-微孔板杂交方法是特异、灵敏、准确、快速的结核杆菌检测方法 ,具有推广应用价值     

斑点杂交法检测结核分枝杆菌临床应用价值探讨

目的:探讨斑点杂交法检测结核分枝杆菌的临床应用价值.方法:用抗酸染色法、L-J培养法、PCR法和斑点杂交法平行检测76例临床标本和28种标准菌株. 结果:46例肺结核患者痰标本抗酸染色法、L-J培养法、PCR法和斑点杂交法结核分枝杆菌检测阳性率分别为43.4%、50.0%、73.9%和56.5%;30例非结核患者痰标本、19种非结核分枝杆菌和9种非分枝杆菌标准株培养法和斑点杂交法检测结果均为阴性,PCR法有3例阳性.结论:斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,结果可靠,可用于结核病的快速诊断.     

三种不同剂量的吗啡硬膜外持续输注用于术后镇痛临床观察

观察了术后硬膜外腔应用３ 种不同剂量的吗啡和０．６２５ ｇ／Ｌ布比卡因混合液, 持续输注对镇痛效果和副反应的影响。以视觉模拟标定法 （ＶＡＳ） 评分观察镇痛效果并记录２４ ｈ 副反应。结果３ 组镇痛效果无显著性差异, ２４ ｈＶＡＳ评分各点均＜ ３ 分。恶心、呕吐发生率随吗啡剂量增大而增加。３ 组与１ 组比较有显著性差异 （Ｐ＜ ０．０５, Ｐ＜０．０１）。术后肛门排气时间３组间均无显著差异。结果表明： 硬膜外持续输注小剂量吗啡（≤０．０６７ ｍ ｇ／ｈ） 术后镇痛, 安全、可靠, 镇痛水平衡定。恶心、呕吐发生率与剂量相关。３组肛门排气时间无显著性差异, 可能与局麻药的联合应用及吗啡剂量较小有关     

国产西替利嗪片治疗荨麻疹的临床观察

采用严格的双盲平行组对照试验的方法, 用国产西替利嗪片和进口西替利嗪片分别治疗各种类型的荨麻疹３０例和３１ 例。结果前者有效率为９３．３％ , 后者有效率为９６．７％ , 经Ｒｉｄｉｔ检验及治疗前后积分对比分析, 均显示两组病人的疗效相当, 且国产药和进口药均具有显著疗效。两药的副作用均较轻微, 主要是轻微的中枢神经系统镇静作用,但发生率均较低, 前者为１６．６％ , 后者为１２．９％ 。说明国产西替利嗪片治疗各种类型的急慢性荨麻疹, 无论其疗效和安全性都相当于进口西替利嗪片, 是较理想的抗组胺药     

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核菌

目的：本研究评价聚合酶链反应（PCR）技术检测支气管肺泡准洗液中结核杆菌DNA的作用。方法：应用PCR技术对161例（肺结核81例，非肺结核80例作为对照）支气管肺泡灌洗液（BALF）进行结核菌DNA检测。结果：结核组BALF的阳性率：PCR为69．l％、徐片抗酸染色为86％、培养为98％，PCR的阳性率与涂片和培养比较，差异有显著性（P＜0．01）。非结核对照组BALF的阳性率为：PCR2.5％，涂片0％，培养0％。结论：PCR技术测定BALF中的结核菌是诊断肺结核的一种快速、敏感、特异的方法，尤其适用于无痰的患者。     

蠲痹历节清方治疗急性痛风性关节炎湿热证疗效观察

目的：观察蠲痹历节清方治疗急性痛风性关节炎湿热证的临床疗效。方法将急性痛风性关节炎患者110例随机分为观察组及对照组各55例。观察组口服蠲痹历节清方,对照组口服秋水仙碱及别嘌醇,疗程1个月。观察比较两组临床疗效及治疗前后患者的血尿酸及血沉水平。结果两组患者的临床疗效比较,观察组的总有效率为92.7%,对照组为78.2%,两组差异具有统计学意义（P＜0.05）;两组治疗后血尿酸、血沉均较治疗前下降（P〈0．05）,且观察组下降更为显著（P〈0．05）。结论蠲痹历节清方能提高急性痛风性关节炎的临床疗效,降低患者血尿酸及血沉水平,同时可以减少复发率和不良反应的发生,值得临床推广。     

DNA AMPLIFICATION OF A REPETITIVE SEQUENCE - IS 6110 IN THE EARLY DIAGNOSIS OF EXTRA PULMONARY TUBERCULOSIS

DNA amplification by Polymerase Chain Reaction (PCR) of a repetitive sequence specific for Mycobacterium tuberculosis, from clinical samples of extra pulmonary origin were evaluated. The 123 base pair fragment of the insertion element IS 6110 in Mycobacterium tuberculosis was amplified. A total of 50 samples were analysed by PCR and compared with culture on Lowenstein-Jensen medium (LJ) and the clinical findings of the patient. Out of the total 26 samples were positive by PCR, while only seven grew the bacilli in culture. 24 samples were negative by PCR and culture. All the seven samples that grew the bacilli on culture were positive by PCR. In remaining 19 cases that were positive by PCR but did not grow the bacilli clinical features, radiological findings and Mantoux test were strongly suggestive of M. tuberculosis. All the amplification negative cases had no positive evidence of tuberculosis but were being followed up. When correlated with culture and clinical history the sensitivity of PCR for the diagnosis of active tuberculosis was 100%. However, the specifity was only 55.8% as culture on LJ (Gold Standard) was positive in only 7 samples out of 26 samples that were positive by PCR.KEY WORDS: DNA Amplification, IS 6110, Mycobacterium tuberculosis.     

RG50864对血小板衍生生长因子诱导的肺动脉平滑肌细胞DNA含量及增殖细胞核抗原表达的影响

为研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４ 对血小板衍生生长因子 （ＰＤＧＦ） 诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ） ＤＮＡ 含量及增殖细胞核抗原表达的影响, 应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞, 用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４ 对ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣＤＮＡ百分含量及增殖细胞核抗原的变化。结果表明： 与对照组相比, ＲＧ５０８６４ 处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达的荧光强度及荧光指数 （Ｐ＜ ０．０１）, 增加ＰＡＳＭＣ生长周期中的Ｇ０／Ｇ１ 期的ＤＮＡ百分含量, 抑制Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期的ＤＮＡ 百分含量 （Ｐ＜ ０．０１）。ＲＧ５０８６４ 可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达,抑制ＰＡＳＭＣ周期Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期ＤＮＡ 百分含量,阻止ＰＡＳＭＣ周期由Ｇ０／Ｇ１ 期向ＤＮＡ合成的Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期转化