骨髓细胞移植上调血管内皮生长因子及其受体的表达并改善缺血心脏功能

目的：通过骨髓细胞移植对心肌梗死大鼠模型血管内皮生长因子及其受体表达的影响，探讨骨髓细胞移植改善缺血心脏功能的可能机制。方法：利用左前降支冠状动脉结扎术制备大鼠心肌梗死模型，然后行异体骨髓细胞移植；分别于术后1d，3d，7d，14d和28d取材；利用免疫荧光和RT—PCR技术分析细胞移植对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk一1)表达的影响和移植细胞的分化情况；通过免疫组化计算血管数量；应用血流动力学检测大鼠心脏功能在术后各时间点的变化。结果：VEGF和Flk-1在移植组动物的心肌梗死区残存细胞、梗死周边区细胞以及部分移植细胞内表达。移植组VEGF和Flk-1的mRNA表达明显高于对照组。分别于术后3d和14d达到高峰，以后逐渐减弱。术后7d，14d和28d移植组血管数量较同期对照组明显增加，移植组心脏功能较对照组明显改善。术后14d可在部分移植细胞中检测到心肌细胞或血管内皮细胞特异性蛋白的表达。结论：骨髓细胞移植通过上调移植细胞及受者内源性VEGF和Flk—1的表达，促进血管新生，进而改善缺血心脏功能。     

热休克蛋白HSP70在自体静脉移植中表达的动态变化

目的 观察热休克蛋白HSP70在免自体静脉移植中表达的动态变化,探讨其与移植血管内膜增生的关系.方法 采用兔自体颈静脉移植模型,25只新西兰大白兔随机分为5组,分别于术后3、7、14、28d取材,应用Real-Time PCK法、Western blot法分别检测各组中HSP70 mRNA与蛋白的表达变化.结果 HSP70mRNA在术后3 d时表达升高,而后渐降至正常.蛋白检测表达变化与其一致.结论 静脉移植后热休克蛋白HSP70表达升高,可能与血管平滑肌细胞增殖有关.     

PKC-α与热休克蛋白HSP70在兔自体静脉移植后的表达

目的 观察蛋白激酶C-α(PKC-α)与热休克蛋白HSP70在兔白体静脉移植中的表达的动态变化,探讨其与移植后血管内膜增生的可能关系.方法 采用兔自体颈静脉移植模型,25只新西兰大白兔随机分为5组,分别于术后3、7、14及28 d取材,应用Real-Time PCR法、免疫组织化学法分别检测各组中PKC-α、HSP70 mRNA与蛋白的表达变化.结果 PKC-α、HSP70 mRNA在术后3d时表达升高,而后渐降至正常,两者变化呈正相关(r=0.967,P<0.01),蛋白检测表达变化与其一致.结论 静脉移植后可能通过PKC-α信号传导通路使热休克蛋白HSP70表达升高,与促进血管平滑肌细胞增殖有关.     

人急性白血病淋巴细胞HSP70及 HSP70 mRNA的表达研究

目的：检测急性白血病病人血淋巴细胞热休克蛋白70（HSP70）及其mRNA的表达。方法：ELISA法检测HSP70,RT－PCR法检测HSP70 mRNA。结果：化疗前急性白血病病人淋巴细胞HSP70及mRNA明显低于正常人;而化疗后,急性白血病病人淋巴细胞HSP70及mRNA明显高于正常人（P＜0．01）,结论：HSP70与急性白血病癌细胞关系密切,对癌细胞起保护作用。     

急性心肌缺血／再灌注HSP70和Fos蛋白的表达及其法医病理学意义

目的：研究大鼠急性心肌缺血后不同时间再灌注心脏不同区域HSP70和Fos蛋白表达的规律,为心肌缺血／再灌注损伤所致心性猝死的法医学诊断提供形态学依据。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血／再灌注模。用免疫组织化学方法,观察心肌缺血后不同时间再灌注HSP700和Fos蛋白在心肌组织表达的改变。结果：对照组心肌组织无Fos和HSP70表达,心肌缺血15min再灌注0．5h后Fos蛋白即在缺血区域表达,随着再灌注时间长表达增强;非缺血区域1h始有表达,缺血区域表达明显强于非缺血区域。心肌缺血区域再灌注1h后HSP70始有表达,随着再灌注时间延长表达增强;非缺血区域心肌2h始有表达,且明显弱于缺血区域。再灌注早期HSP70和Fos首先在心肌内层表达,随着时间延长表达向心肌外层扩展。结论：心肌缺血／再灌注早期不同时间HSP70和Fos蛋白表达有不同的区域性及强度,有可能为早期心肌血／再灌注提供一项新的辅助诊断的形态学指标。     

汉坦病毒诱导人脐静脉内皮细胞HSP70的表达及意义

目的: 研究人脐静脉内皮细胞(HUVEC)感染汉坦病毒 (Hantavirus, HTV)后应激反应的规律及意义. 方法: 采用免疫细胞化学染色法和核酸分子原位杂交, 检测热休克蛋白 70(HSP70)的表达; 用RT PCR观察HSP70mRNA水平变化的规律. 结果:HTV感染HUVEC后, 免疫细胞化学染色法可检出HSP70呈高表达, 原位杂交发现细胞质内有HSP70mRNA的阳性信号. 感染后不同时间点RT PCR的结果表明, 与对照组相比较, HSP70mRNA的水平在感染后迅速升高并持续高表达(P<0. 05). 结论:HTV可诱导HUVEC高表达HSP70. HSP70可能具有抑制病毒复制和保护内皮细胞的作用.     

低氧预处理对缺血脑组织HSP70蛋白表达的影响

目的:研究低氧预处理对缺血脑组织热休克蛋白70(HSP 70)表达的影响,探讨低氧预处理的脑保护机制。方法:30只SD大鼠,体重在200~230克,随机分为3组:假手术组(n=10),脑缺血组(n=10),低氧预处理组(n=10)。分别观察3组动物的神经功能评分,按Bederson 6级5分制方法进行,用免疫组化法检测大鼠脑组织凋亡细胞和HSP 70蛋白表达。结果:假手术组的神经功能评分为(0.00±0.00)分,脑缺血组为(2.40±0.97)分,低氧预处理组为(1.40±0.84)分,低氧预处理组与缺血组神经功能评分有统计学差异;预处理组的病变侧海马凋亡细胞数明显少于缺血组而HSP 70蛋白表达明显高于缺血组,两组相比较统计学差异有显著性。结论:低氧预处理能减轻缺血后的细胞凋亡,对脑缺血具有保护作用,其机制可能是增加HSP 70蛋白的表达来实现的。     

热休克预处理诱导HSP70蛋白表达减轻神经细胞的缺血损伤

目的 :研究热休克预处理对脑缺血再灌后热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达影响及对缺血神经细胞损伤的保护作用。方法 :采用沙鼠短暂前脑缺血再灌损伤模型 ,光镜观察缺血再灌后神经细胞损伤情况 ,免疫组化方法检测脑缺血后不同时期额叶HSP70蛋白表达。结果 :沙鼠脑缺血后HSP70蛋白仅在再灌后 1d有少量表达 (P <0 .0 1) ;缺血神经细胞在再灌后第 7d大多出现损伤改变 ;热休克预处理能增加沙鼠脑缺血再灌后各期HSP70蛋白表达 (P <0 .0 1) ,明显减轻缺血神经细胞损伤 (P <0 .0 1)。结论 :热休克预处理能通过增加HSP70蛋白表达 ,减少缺血神经细胞损伤。     

热休克蛋白HSP70在MCAo大鼠脑中的表达

目的：揭示局部脑缺血状态下热休克蛋白（heat shock protein,HSP)HSP70的表达与脑供血的关系,提供探讨针刺治疗脑梗塞研究的实验基础。方法：采用热凝法阻断大鼠一侧大脑中动脉（MCAo)造成局灶性脑缺血实验模型,采用DNA－RNA分子杂交技术研究了MCAo大鼠不同脑区HSP70的表达随缺血时间的改变,同时采用免疫组化的方法研究了HSP70蛋白表达的动态变化。结果：免疫阳性细胞出现较早并出现最多的区域是脑皮层区,纹状体次之,并多出现在缺血核心的周边区,分子杂交结果同样显示该模型中HSP70gRNA在大脑皮层中比在纹状体和海马中较早的出现且转录水平出高于纹状体和海马。结论：热休克蛋白HSP70因缺血被诱导,但其转录与表达又明显与供血状况有关。严重缺血区HSP70的表达受阻,提示改善脑局部微循环可促进HSP70的表达,增强脑组织的修复能力。     

兔脊髓缺血再灌注损伤中二次瘫痪现象与HSP70表达的研究

目的探讨兔脊髓缺血再灌注损伤中二次瘫痪与HSP70表达的关系.方法采用肾下腹主动脉阻断法,建立脊髓缺血再灌注模型.缺血组阻断腹主动脉35 min后开放灌注,术后观察脊髓标本的病理学改变,细胞凋亡情况及HSP70表达情况.结果缺血组中二次瘫痪兔24 h内病理学改变明显好于瘫痪兔,细胞凋亡数明显少于瘫痪兔,HSP70表达明显高于瘫痪兔(P＜0.05).结论兔脊髓缺血再灌注损伤中二次瘫痪现象与HSP70表达存在一定关系,HSP70对兔脊髓具有保护作用.     

川芎嗪对骨髓移植小鼠造血细胞SDF-1表达水平的影响

为探讨川芎嗪对骨髓移植(BMT)后造血重建过程中基质细胞来源因子(SDF-1)的作用,建立了典型同基因BMT小鼠模型,胃饲川芎嗪注射液每次2 mg,2次/d,分别于BMT后第7、14 d计数外周血细胞骨髓单核细胞(BMNC)并测定骨髓组织切片中SDF-1的表达.结果表明川芎嗪组BMT后第7、14 d外周血细胞计数、BMNC计数及骨髓组织切片中SDF-1表达水平均高于BMT组.提示川芎嗪能在骨髓移植造血重建早期促进骨髓基质细胞表达SDF-1,可能是促进BMT后造血干细胞(HSC)回髓、加速造血重建的机制之一.     

自体单个核骨髓干细胞移植对急性心肌梗死后心功能的影响

目的 探讨自体单个核骨髓干细胞(BMSCs)移植对前壁急性心肌梗死(AMI)后心功能的影响.方法 选择2006年1月至2008年12月本院住院的前壁AMI患者32例,按患者意愿分为移植组和对照组,各16例,对照组按常规行心脏介入治疗,移植组术前采集1×108～3×108个自体单个核BMSCs,介入治疗后直接经导管向冠...     

Effects of Platelet Factor 4 on Expression of Bone Marrow Heparan Sulfate in Syngenic Bone Marrow Transplantation Mice

Platelet factor 4 ( PF4) is a negativehematopoietic factor.It can inhibit the prolifera-tion of endothelial cells and hematopoietic stem/progenitor cells,particularly megakaryoryocyticcells,reversibly[1] ,inhibit DNA synthesis,blockcell cycle progression during S phase and reducethe sensibility of normal hematopoietic stem/pro-genitor cells,but not some cancer or leukemia celllines,to cytotoxic drugs and ionizing radia-tion[2 - 3] ,and it also can cause a population in-crease of the stem cel…     

Effects of Ligustrazine on Expression of Bone Marrow Heparan Sulfates in Syngeneic Bone Marrow Transplantation Mice

Hematopoietic reconstitution after bone marrowtransplantation (BMT ) is a complicated process,which concerns notonly with the quality and quanti-ty of hematopoietic stem cells(HSC) ,but also withthe recovery of hematopoietic inducing microenviron-ment (HIM) .The contactof HSC and HIM,whichregulates the proliferation,differentiation and self-maintenance of HSC,is critical for hematopoietic re-constitution.Heparan sulfates (HS) are a kind of gly-cosaminoglycans macromolecules composed of…     

Study on the effect of ligustrazine on hematopoietic reconstitution in bone marrow transplantation mice

Hematopoietic reconstitution after bone marrowtransplantation is a complicated process CXCchemokines and their receptors play important rolesin this process. One of these receptors, CXCR4 expresses on hematopoietic stem cells, and is now takenas a "homing factor" in hematopoietic reconstitu--'tionll' 2]. Ligustrazine can protect the bone marrowmicroenvironment after irradiation or immune damage[', 4]. We established allogenic bone marrow transplantation mice models and explored the effects …     

骨髓干细胞动员与移植治疗心肌梗死的比较

目的比较骨髓干细胞动员与骨髓单个核细胞移植对兔心肌梗塞的治疗作用,探讨更有效、更适用的干细胞治疗心肌梗塞的方法.方法将30支新西兰白兔采用结扎前降支的方法制作心肌梗塞模型,随机分为动员组、移植组和对照组,动员组(n=10)心梗后3h开始皮下注射粒细胞集落刺激因子(G-CSF)30μg/(kg·d),连续使用5 d,第5天抽取静脉血约10mL,分离单个核细胞(mononudear cells,MNCs)用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,Brdu)标记后,经静脉注入动物体内.移植组(n=10)心梗后7～10 d,抽取骨髓3～5mL,分离MNCs用Brdu标记,然后开胸将细胞移植至梗死区,对照组(n=10)不采取任何治疗措施.心梗后1周及5周采用超声心动图(UCG)检查了解心脏功能变化,5周时作血液动力学测定,取心脏作免疫组织化学鉴定.结果心梗后5周,动员组左室射血分数(EF)与1周时相比明显增加,移植组无变化,对照组显著下降.5周时动员组及移植组左室舒张末压(LVEDP)、+dp/dtmax和-dp/dtmax与对照组相比均有显著变化.动员组及移植组在心肌梗死区均发现有Brdu标记的阳性细胞,两组梗死区血管密度明显高于对照组,但均未发现有新生的平滑肌细胞及心肌细胞.结论骨髓干细胞动员治疗心肌梗死,能通过促进梗死区血管新生,明显改善心脏功能,骨髓单个核细胞移植可避免心功能的恶化,但在改善心功能方面的作用有限,骨髓干细胞动员可能为心肌梗塞的治疗提供一种更适用的无创性的手段.     

经冠状动脉病变血管植入体外培养扩增的自体骨髓间充质干细胞对急性心肌梗死区的疗效研究

目的 探讨经冠状动脉病变血管植入体外培养扩增的自体骨髓间充质干细胞(MSCs)对急性心肌梗死区的影响.方法 体外扩增培养巴马香猪MSCs.用球囊扩张封堵冠状动脉前降支制备巴马香猪急性心肌梗死模型,成模1个月后,经冠状动脉前降支植入体外扩增培养的自体MSCs至急性心肌梗死区,观察其对心肌梗死区的影响.结果 梯度离心法分离...     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达及细胞凋亡的影响

[目的]观察亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨亚低温对脑神经细胞保护作用的机制。[方法]将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组。应用大脑中动脉线栓法(MCAO)建立大鼠局灶脑缺血再灌注模型,于缺血2 h再灌注,再灌注后3、6、12、24、72 h和7 d处死。其中亚低温组大鼠于缺血后30 min实施病灶侧脑亚低温并持续4 h。采用HE染色观察神经细胞形态学改变,免疫组化法检测脑组织HSP70表达,TUNEL法检测凋亡细胞。[结果]正常组及假手术组均未见明显病理改变;常温缺血组梗死灶明显,大量神经元坏死消失;亚低温缺血组未见明显梗死灶,但可见神经元固缩。正常组及假手术组未见或偶见HSP70阳性细胞;常温缺血组HSP70阳性细胞较多;与常温缺血组相比亚低温缺血组在相应时间点均明显减少(P<0.05)。常温缺血组TUNEL阳性细胞数随再灌注时间的延长而逐渐增多,至72 h达高峰;与常温缺血组相比,亚低温缺血组各时间点均明显减少(P<0.05)。[结论]亚低温对大鼠缺血再灌注损伤脑有保护作用,通过降低HSP70的表达和减少细胞凋亡可能是其保护机制之一。     

Effect of ligustrazine on hematopoiesis in bone marrow transplantation mice

Hematopoietic reconstitution after bone marrowtransplantation is a complicated process,whichconcerns with the quality and quantity ofhematopoietic stem cell (HSC) ,and also with therecovery of hematopoietic inducing microenvironment(HIM) .The contact of HSC and HIM is critical forhematopoietic reconstitution.1　MATERIALSAND METHODS1 .1　Materials1 .1 .1　 Animals　　 BALB/c mice of both sexes(clean class,close copulatory series (H- 2 d,MLSb) )were 8— 1 0 weeks old,and 1 7— 2 …