创伤后活化T细胞内游离钙,钙调素,钙调素依赖的蛋白激酶…

研究了创伤小鼠活化Ｔ细胞内游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）、钙调素（ＣａＭ）、钙调素依赖的蛋白激酶（ＣａＭ－ＰＫ）活性的变化及其与Ｔ细胞功能之间的关系。结果显示，创伤后活化Ｔ细胞内［Ｃａ＾２＋］ｉ降低，且这一变化同创伤小鼠Ｔ细胞白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ、ＩＬ－２受体α（ＩＬ－２Ｒα）ｍＲＮＡ水平降低，ＩＬ－２生成减少，ＩＬ－２Ｒα表达受抑，Ｔ淋巴细胞转化（ＴＬＴ）降低密度相关。创伤后活化Ｔ细胞内     

淋巴细胞[Ca~(2 )]i变化在小儿反复呼吸道感染发病机制中作用的探讨

目的：探讨反复呼吸道感染（ＲＲＴＩ）患儿Ｔ淋巴细胞增殖及胞浆游离钙浓度［Ｃａ２＋］ｉ的变化,及其在发病机制中的作用。方法：选取ＲＲＴＩ患儿３０例,健康儿童３１例为对照组,测定外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中Ｔ细胞增殖、Ｔ细胞活化及未活化时［Ｃａ２＋］ｉ的变化。结果：ＲＲＴＩ与对照组相比,Ｔ细胞增殖明显降低（Ｐ＜００１）;Ｔ细胞未活化时两组间［Ｃａ２＋］ｉ无明显差异（Ｐ＞００５）;当Ｔ细胞活化时,ＲＲＴＩ组［Ｃａ２＋］ｉ明显低于对照组（Ｐ＜００１）。结论：ＲＲＴＩ患儿Ｔ细胞增殖能力降低,细胞免疫功能低下,这是患儿易发生反复感染的原因之一。Ｔ细胞活化过程中Ｃａ２＋动员存在一定程度异常,这是其增殖能力降低的原因之一。     

环境致癌物阻断NIH3T3细胞间隙连接通讯与细胞内游离钙离子关系初探

选用环境致癌物芥子气（ＭＧ）、苯并（ａ）芘（Ｂ（ａ）ｐ）、４－硝基喹啉－１－氧化物（４ＮＱＯ）、二甲基亚硝胺（ＤＥＮ）、环磷酰胺（ＣＰ）、雌二醇（Ｅｓｔ）、四氯化碳（ＣＣｌ４），作用于该细胞１２ｈ后，用划痕标记染料示踪技术（ＳＬＤＴ）检测其对该细胞间隙连接通讯（ＧＪＩＣ）功能的阻断作用，同时测定该细胞内［Ｃａ２＋］ｉ的变化，结果表明，环境致癌物阻断细胞ＧＪＩｃ与［Ｃａ２＋］ｉ变化密切相关。     

内皮素-1对成纤维细胞内游离钙的影响

目的研究内皮素（ＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎＥＴ）对成纤维细胞（ＨＬＦ）内钙离子浓度（［Ｃａ＋２］ｉ）的影响及维拉帕米（Ｖｅｒ）对ＥＴ促［Ｃａ＋２］ｉ效应的阻断作用。方法采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ钙荧光指示剂测定ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度。结果ＥＴ在很短时间内即可明显提高ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度（Ｐ＜０．０１～０．００１）。并且在细胞外液无Ｃａ＋２存在情况下，亦可提高［Ｃａ＋２］ｉ，且有明显的量效关系（Ｐ＜０．０５～０．０１）。同时，Ｖｅｒ对ＥＴ的上述作用具有显著的作用（Ｐ＜０．０５）。结论ＥＴ对Ｖｅｒ的调控作用是通过［Ｃａ＋２］ｉ转运而产生的。     

含CpG寡聚脱氧核苷酸对肿瘤抗原肽P815AB的免疫佐剂效应研究

目的 以肿瘤抗原Ｐ８１５ＡＢ抗原肽为模式抗原,研究ＣｐＧ寡聚脱氧核苷酸（ＣｐＧ ＯＤＮ）对该肿瘤抗原表位肽的免疫佐剂效应。方法 用［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法研究ＣｐＧ ＯＤＮ体外刺激小鼠脾细胞增殖效应,用ＥＬＩＳＰＯＴ和［＾３Ｈ］－ＴｄＲ释放法检测不同构成形式的疫苗在体诱发特异性ＣＴＬ应答的效应。结果 ＯＤＮ１８２６在体外可刺激小鼠脾细胞显著增殖,经４次免疫,在“肽＋ＯＤＮ１８２６＋ＩＦＡ”组中,４     

反复吗啡处理对小鼠淋巴细胞Ca~（2＋）含量膜流动性及原癌基因表达的影响

应用递增剂量急性吗啡处理４天后，小鼠胸腺细胞或脾细胞［Ｃａ２＋］ｉ下降，脾淋巴细胞膜脂流动性降低，同时ＣｏｎＡ活化的脾脏Ｔ细胞表达Ｃ－ｍｙｂ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ明显减少，提示反复吗啡处置对免疫细胞内的信息传导系统及膜脂系统已产生明显影响。     

反复吗啡处理对小鼠淋巴细胞Ca^2＋含量膜流动性及原癌基因…

应用递增剂量急性吗啡处理４天后，小鼠胸腺细胞或脾细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ下降，脾淋巴细胞膜脂流动性降低，同时ＣｏｎＡ活化的脾脏Ｔ细胞表达Ｃ－ｍｙｂ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ明显减少，提示反复吗啡处置对免疫细胞内的信息传导系统及膜脂系统已产生明显影响。     

商陆多糖I对小鼠淋巴细胞DNA多聚酶α活性的影响

本实验在建立ＤＮＡ多聚酶α活性测定方法的基础上观察了商陆多糖Ｉ（ＰＡＰ－Ｉ）对小鼠淋巴细胞增殖及淋巴细胞ＤＮＡ多聚酶α活性的影响。采用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法和模板活化法（［３Ｈ］－ｄＴＴＰ掺入法）分别检测ＰＡＰ－Ｉ给药组及对照组小鼠淋巴细胞增殖能力和淋巴细胞ＤＮＡ多聚酶α活性。体外实验发现ＰＡＰ－Ｉ显著增强ＣｏｎＡ诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及其ＤＮＡ多聚酶α的活性；小鼠腹腔注射ＰＡＰ－Ｉ（每周１次）对脾淋巴细胞ＤＮＡ多聚酶α活性基本上无影响，但加入ＣｏｎＡ（５μｇ／ｍｌ）刺激后，ＰＡＰ－Ｉ１０ｍｇ／ｋｇ剂量组ＤＮＡ多聚酶α活性显著增强。结果提示ＰＡＰ－Ｉ增强ＤＮＡ多聚酶α活性可能是促进脾淋巴细胞增殖、增强免疫功能的机制之一。     

NIDDM患者血小板Ca_(2+)转运及其与聚集功能的关系

３２例ＮＩＤＤＭ患者，分血小板聚集功能亢进组（ｎ＝１７）和无亢进组（ｎ＝１５），探讨Ｃａ２＋转运影响血小板胞浆游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）变化与最大聚集（ＭＡＲ）的关系。结果：亢进组血小板静息［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（１３４．４±２６．４对１０１．５±１３．３ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。［Ｃａ２＋］ｉ与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３２１９，Ｐ＜０．０５）以凝血酶刺激，有胞外Ｃａ２＋内流及胞内Ｃａ２＋释放时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（９１８．９±２０７．６对７９１．２±１１９．６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），并与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３３７１，Ｐ＜０．０１）；以ＴＭＢ８阻滞胞内Ｃａ２＋释放，组间差异仍然显著（Ｐ＜０．０５）；当缺乏胞外Ｃａ２＋内流时，则组间不呈显著差异（Ｐ＞０．０５）。以钙载体Ａ２３１８７刺激，在有或无胞外Ｃａ２＋时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ均高于对照组（Ｐ均＜０．０５）然而，无亢进组上述各指标与对照组间均未呈显著差异。提示ＮＩＤＤＭ患者血小板聚集功能亢进与［Ｃａ２＋］ｉ变化有关，可能涉及胞浆内Ｃａ２＋稳态异常，凝血酶刺激胞外Ｃａ２＋内流及Ａ２３１８７作用胞内Ｃａ２＋释放增强等环节     

钙拮抗剂TMB-8抑制BHQ,NE和KCl引起的培养乳牛基底动脉单个平滑肌细胞内游离钙的升高

用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统,测量单个细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）,研究８－（Ｎ,Ｎ－二乙胺）－ｎ－辛基－３,４,５－三甲氧基苯甲酸酯（ＴＭＢ－８）对培养乳牛基底动脉平滑肌［Ｃａ２＋］ｉ的作用。在细胞外钙浓度为１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１时,Ｔ...     

PDGF-BB对肾小球系膜细胞[Ca~(2 )]_i和细胞增殖的影响

目的研究肾小球系膜细胞 [Ca2 ]i的变化与系膜细胞增殖之间的关系。　方法以体外培养的系膜细胞为研究对象 ,激光共聚焦显微术结合Fura- 3染色法 ,动态测定细胞 [Ca2 ]i,MTT法测定细胞增殖。　结果血小板衍生生长因子 (PDGF) -BB可浓度依赖性地引起肾小球系膜细胞 [Ca2 ]i 的升高 ,并促进细胞增殖。钙通道阻滞剂和血管紧张素转换酶抑制剂均可同时抑制PDGF -BB引起的细胞钙浓度升高和细胞增殖。中药成分雷公藤多甙在显著抑制系膜细胞增殖的同时 ,对细胞游离钙却无影响。　结论肾小球系膜细胞 [Ca2 ]i 的升高和细胞增殖之间存在着正性关联 ,但 [Ca2 ]i 的升高并非细胞增殖的唯一途径     

Relationship of Intracellular Free Ca^2＋ Concentration and Calcium-activated Chloride Channels of Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells in Rats under Hypoxic Conditions

Hypoxic pul monary hypertension ( HPH) ischaracterized by an elevation of pul monary vascularreaction and pul monary vascular reconstruction.Cytoplasmic free Ca2 concentration ([ Ca2 ]i)plays a key role in the regulation of vascular tone ,pul monary vasoconstriction and proliferation ofsmooth muscle cells[1]. The present study evalua-ted the role of [Ca2 ]iin the regulation of pul mo-nary vascular tone through regulation of calcium-activated chloride (Clca) channels in rats under a-cute h…     

芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖和细胞[Ca2+]i变化的影响

目的研究芦荟大黄素对植物血凝素(PHA)引起的大鼠T淋巴细胞增殖和细胞内Ca2 浓度([Ca2 ]i)变化的影响,探讨芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖的作用和机制。方法采用MTT法检测细胞增殖,用单细胞钙成像系统记录细胞胞浆[Ca2 ]i。结果芦荟大黄素对PHA引起的细胞增殖有显著抑制作用,且其抑制作用与剂量有关;加入PHA引起细胞[Ca2 ]i迅速升高,并持续维持高[Ca2 ]i水平,芦荟大黄素对PHA引起的[Ca2 ]i升高有显著抑制作用,其作用途径包括阻断胞内Ca2 释放和抑制胞外Ca2 内流。结论芦荟大黄素可抑制T淋巴细胞增殖,其作用机制可能与抑制淋巴细胞内[Ca2 ]i升高相关。     

血小板衍生生长因子对肝细胞游离钙浓度影响

目的观察血小板衍生生长因子（PDGF）对SD大鼠肝细胞内游离钙浓度（[Ca2 ]i）的影响,同时观察钙拮抗剂（Ca－A）对PDGF作用的影响。方法应用Fura－2／AM荧光示踪法检测肝细胞（n=15）内[Ca2 ]i的变化;及PDGF存在下和PDGF、Ca－A同时存在下细胞内[Ca2 ]i变化。结果PDGF可明显升高细胞内[Ca2 ]i,Ca－A具有抑制PDGF的增钙作用。结论PDGF参与SD大鼠肝细胞内Ca2 浓度的转运,Ca－A对肝细胞具有保护作用。     

啮齿类小鼠γ-干扰素原核表达、纯化及功能鉴定

目的：构建γ-干扰素的高效原核表达载体，进行γ-干扰素表达、纯化和鉴定，并探索优化啮齿类γ-干扰素的制备工艺。方法：用RT-PCR技术，从ConA活化的小鼠脾细胞中扩增出mIFN-γcDNA，与原核表达载体pET30a（＋）重组，表达和纯化重组蛋白His6-mIFN-γ，并用Western Blot检测该重组蛋白的生物学活性。结果：构建了啮齿类γ-干扰素的高效原核表达载体，并实现了γ-干扰素的可溶性表达，且验证该γ-干扰素具有生物学活性。结论：成功优化了生产干扰素的工艺，为国内外进行γ-干扰素研究奠定基础。     

Effects of remifentanil on intracellular Ca2+ and its transients induced by electrical stimulation and caffeine in rat ventricular myocytes

Background Preconditioning with remifentanil confers cardioprotection. Since Ca^2＋ overload is a precipitating factor of injury, we determined the effects of remefentanil on intracellular Ca^2＋ （[Ca^2＋]i） and its transients induced by electrical stimulation and caffeine, which reflects Ca^2＋ handling by Ca^2＋ handling proteins, in rat ventricular myocytes. Methods Freshly isolated adult male Sprague-Dawley rat myocytes were loaded with Fura-2/AM and [Ca]i was determined by spectrofluorometry. Remifentanil at 0.1-1000 μg/L was administered. Ten minutes after administration, either 0.2 Hz electrical stimulation was applied or 10 mmol/L caffeine was added. The [Ca^2＋]i, and the amplitude, time resting and 50% decay （t50） of both transients induced by electrical stimulation （E[Ca^2＋]i） and caffeine （C[Ca^2＋]i） were determined. Results Remifentanil （0.1-1000.0 μg/L） decreased the [Ca^2＋]i in a dose-dependent manner. It also decreased the amplitude of both transients dose-dependently. Furthermore, it increased the time to peak and tso of both transients dose-dependently. Conclusion Remifentanil reduced the [Ca^2＋]i and suppressed the transients induced by electrical stimulation and caffeine in rat ventricular myocytes.     

低渗作用对人成骨样细胞MG63功能的影响

目的 本试验通过研究低渗透压的静牵张作用对成骨样细胞MG63的增殖能力、碱性磷酸酶活性以及[Ca2 ]i的影响,探讨该应力形式下成骨样细胞MG63的力学响应特征.方法 用不同渗透压的低渗透液,对成骨样细胞MG63分别进行2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h持续牵张作用后,用MTT法检测细胞增殖情况,用ALP试剂盒检测ALP活性的变化,用钙试剂盒检测[Ca2 ]i含量波动情况.结果 随着作用时间的延长,成骨样细胞MG63在277 mmol/L和240 mmol/L低渗透液的持续性膨胀作用下,其细胞增殖能力增强,[Ca2 ]i、ALP活性缓慢增高;而细胞在163 mmol/L低渗液作用下,细胞增殖受到抑制,8 h时出现[Ca2 ]i急剧升高,ALP活性明显高于其对照组.结论 低渗膨胀对MG63的增殖分化、ALP活性以及Ca2 -ATPase都有一定的影响作用,且Ca2 内流与ALP活性之间存在一定的相关性.     

冬虫夏草,淫羊藿对大鼠细胞免疫功能的调节

采用MTT比色法检测了中药冬虫夏草及淫羊藿对大鼠脾淋巴细胞转化、IL-2的产生及IL-2受体表达的作用,结果发现,中药冬虫夏草及淫羊藿在体内、体外均能明显地增强大鼠的细胞免疫作用。     

用Fura-2双波长荧光法测定低剂量电离辐射对小鼠脾细胞游离钙的影响

目的：探讨低剂量电离辐射免疫增强效应的机理。方法：采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ 双波长荧光测定法研究了低剂量电离辐射全身照射后小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子浓度（〔Ｃａ２＋ 〕ｉ）对次佳浓度Ｃｏｎ Ａ（５ ｍ ｇ／Ｌ）反应性的变化。结果：静息状态下的小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子浓度为９５．０±１４．０ ｎｍ ｏｌ／Ｌ,ＣｏｎＡ 可使小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子浓度增加６９．４±７．６ ｎｍ ｏｌ／Ｌ,上升至峰值时间为７９．２ ｓ。７５、１００ 和２００ ｍ Ｇｙ 全身照射后２４ ｈ,Ｃｏｎ Ａ 诱导的小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子动员明显高于假照射组（Ｐ＜ ０．０１）。结论：低剂量电离辐射的免疫兴奋效应与其增强淋巴细胞内〔Ｃａ２＋ 〕ｉ动员等信息传递过程有关     

钙超载大肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变

目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞内是否存在钙离子（Ｃａ＾２＋）稳态调节异常。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）与正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）静息态的胞浆与核内游离Ｃａ＾２＋水平（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ,〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）,以及在多各药物刺激下Ｃａ＾２＋稳态调节的差异。结果 两种Ｖ