天芪平颤颗粒对帕金森病大鼠异动症行为学及信号转导蛋白表达的影响

目的：研究天芪平颤颗粒对帕金森病（PD）大鼠异动症行为学及信号转导蛋白DARPP-32、ERK磷酸化表达的影响。方法：通过6-羟基多巴（6-OHDA）立体定向至大鼠前脑内侧束建立帕金森病模型,共25只,随机分为5组,每组5只。PD组：腹腔注射0．2％维生素C液;西药组：腹腔注射左旋多巴甲酯29d;中药小剂量组、中剂量组、大剂量组：给予左旋多巴甲酯基础上分别加用不同剂量天芪平颤颗粒;另设假手术组为对照组（n=5）。评估不同剂量天芪平颤颗粒对PD模型大鼠运动并发症的行为学影响,并用免疫组织化学方法检测大鼠纹状体区磷酸化的DARPP-32和ERK表达情况。结果：天芪平颤颗粒能减少左旋多巴制剂产生的剂峰旋转次数。免疫组化显示,与PD组大鼠比较,西药组磷酸化DARPP-32（Thr75）明显降低,中剂量组和大剂量组均未出现明显的降低（P〉0．05）。与PD组磷酸化ERK1／2比较,左旋多巴长期治疗后,磷酸化ERKl／2表达升高,中剂量组和大剂量组表达量均未出现明显上升（P〉0．05）。结论：天芪平颤颗粒可以减少PD大鼠剂峰异动行为,可能通过DARPP-32（Thr75）及ERKl／2磷酸化,达到调节胞内异常信号转导的功能。     

首乌方对左旋多巴诱发异动症模型大鼠脑内氨基酸类神经递质水平的影响

目的观察中药首乌方(shou wu fang,SWF)对左旋多巴诱发异动症(levodopa-induced dyskinesias,LID)模型大鼠行为学指标及其脑内氨基酸类神经递质的影响,探讨首乌方干预异动症的作用机制。方法采用6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)脑内立体定位注射造成偏侧帕金森病(parkinson’s disease,PD)大鼠模型,成模动物灌胃投予左旋多巴(levodopa,L-DOPA)或L-DOPA+不同剂量SWF,分为L-DOPA组、L-DOPA+SWF低剂量组、LID+SWF高剂量组,另设假手术组。所有动物连续给药22 d,给药期间对大鼠进行异常不自主运动(abnormal involuntary movement,AIM)评分。第22天采用微透析技术对清醒大鼠纹状体细胞外液进行取样,并采用高效液相-荧光法检测样本中谷氨酸(glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)水平动态变化。结果大鼠给服LDOPA后,逐渐出现AIM,至给药结束,与假手术组相比,L-DOPA组AIM评分显著升高(P0.01);与L-DOPA组相比,L-DOPA+SWF高剂量组AIM评分显著降低(P0.05)。第22天,与假手术组相比,各给药组大鼠纹状体细胞外液Glu、GABA水平升高,其中L-DOPA组Glu、GABA水平表现出统计学差异(P0.05);与L-DOPA组相比,L-DOPA+SWF高剂量组Glu水平明显降低(P0.05)。给药后60 min,L-DOPA+首乌方各剂量组Glu、GABA水平均显著低于L-DOPA组(P0.05,P0.01)。结论 SWF能够减轻L-DOPA引起的副反应,改善LID大鼠行为学症状,其作用机制或与其改善LID大鼠脑内异常的氨基酸类神经递质水平有关。     

左旋多巴诱发异动症大鼠模型的制作及其行为学研究

目的 探讨左旋多巴(L-dopa)诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,以及多巴胺受体激动剂与拮抗剂对异动症大鼠不自主运动的影响.方法 6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)立体定向注射制备偏侧PD大鼠模型并给予L-dopa+苄丝肼治疗21 d,对其异常不自主运动(AIM)进行录像并评分,观察肢体运动功能及旋转行为改变情况.对出现异动症的大鼠给予多巴胺受体激动剂和拮抗剂并观察其行为学改变.结果 PD大鼠在接受L-dopa慢性治疗后出现不自主运动,第3天评分:(31.13±0.32)分,肢体运动功能在接受治疗过程中同时改善.D2受体激动剂可诱发大鼠不自主运动(48.24±1.27)分,D2受体拮抗剂可减轻L-dopa诱发的大鼠不自主运动(41.93±2.27)分,但同时拮抗L-dopa运动功能改善效应.结论 慢性脉冲式L-do-pa治疗PD大鼠可以诱发大鼠AIM,与人类L-dopa诱导的异动症(LID)具有相似的特点,可作为研究异动症的动物模型.     

药物干预对帕金森病大鼠行为的影响

目的通过建立大鼠帕金森病(PD)异动症(LID)模型,观察大鼠在药物干预前后的行为改变。方法选取内侧前脑束(MFB)注射6-OHDA建立单侧毁损PD鼠模型,给予左旋多巴(L-dopa 20 mg.kg-1.d-1)及生理盐水(NS,2 ml)干预满1个月,并设正常对照。观察大鼠的行为并每周1次阿朴吗啡诱发旋转行为,每2两次异常不自主运动(AIM)评分。结果MFB注射点造模成功率为75%,PD大鼠的行为改变有一定的规律性,其旋转速度存在先升后降的现象;AIM评分显示异动症发生率为72%。结论选择MFB注射点造模成功率高;PD大鼠行为变化有规律性;LID的发生与波动用药、损伤程度密切相关。     

左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症模型的建立和评价

目的探讨左旋多巴诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,并从行为学角度对模型进行评价.方法6-羟多巴立体定向注射至SD大鼠(n=25)前脑内侧束,并于3周后腹腔注射阿朴吗啡(每千克体质量0.5 mg),10 min后开始计数旋转频率(共30 min),若旋转频率＞7次/分,即PD大鼠模型建立成功.采用左旋多巴甲酯(每千克体质量25 mg)腹腔注射,治疗21d,2次/天,观察大鼠异常不自主运动(AIM)的情况.结果成功模型的PD大鼠共10只,经左旋多巴治疗后,其中8只大鼠出现了AIM,包括刻板动作和对侧旋转行为,且程度各不相同;AIM积分随治疗时间的延长,呈现逐渐升高的趋势.结论左旋多巴治疗诱发的PD大鼠AIM与PD患者左旋多巴诱发异动症在某些方面相似,为深入研究异动症的机制奠定了基础.     

纹状体区神经肽表达的改变与左旋多巴诱发异动症的关系

目的 研究左旋多巴诱发异动症(LID)模型大鼠纹状体区特异性神经肽基因表达的变化,探讨LID时纹状体神经元的可塑性变化.方法 分别以SCH23390(D1受体拮抗剂)和氟哌啶醇(D2受体拮抗剂)治疗LID大鼠,观察LID大鼠的行为学改变,并用逆转录聚合酶链反应技术检测其纹状体区前脑啡肽原(PPE)及前强啡肽原(Pdyn)基因的表达情况.结果 LID大鼠经SCH23390治疗后,异常不自主运动(AIM)明显减少,其纹状体区Pdyn mRNA表达量较LID组显著减少,PPE mRNA表达量无明显变化.经氟哌啶醇治疗后LID大鼠AIM无明显改变,其纹状体区PDynmRNA和PPE mRNA表达量与LID组相比较均无明显变化.结论 大鼠纹状体黑质神经元下游靶基因Pdyn的表达异常与LID的形成有关,直接通路活动的异常增高和基底节环路功能异常参与了大鼠LID的形成.     

左旋多巴诱发帕金森病大鼠异动症模型的建立和评价

目的探讨左旋多巴诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,并从行为学角度对模型进行评价。方法6-羟多巴立体定向注射至SD大鼠(n=25)前脑内侧束,并于3周后腹腔注射阿朴吗啡(每千克体质量0.5 mg),10 m in后开始计数旋转频率(共30 m in),若旋转频率>7次/分,即PD大鼠模型建立成功。采用左旋多巴甲酯(每千克体质量25 mg)腹腔注射,治疗21 d,2次/天,观察大鼠异常不自主运动(AIM)的情况。结果成功模型的PD大鼠共10只,经左旋多巴治疗后,其中8只大鼠出现了AIM,包括刻板动作和对侧旋转行为,且程度各不相同;AIM积分随治疗时间的延长,呈现逐渐升高的趋势。结论左旋多巴治疗诱发的PD大鼠AIM与PD患者左旋多巴诱发异动症在某些方面相似,为深入研究异动症的机制奠定了基础。     

AMPA受体分布对帕金森病及异动症发生的影响

目的观察α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸(AMPA)受体各亚型在帕金森病(PD)及异动症[左旋多巴诱发异动症(LID)]大鼠模型纹状体中亚细胞分布的变化。方法应用6-羟基多巴(6-OHDA)制备PD大鼠模型,向PD大鼠腹腔注射左旋多巴建立LID大鼠模型。引入受体蛋白质交联方法,通过Western blotting检测大鼠纹状体神经元AMPA受体各亚型在细胞表面和细胞内池不同部位含量变化。结果在PD大鼠纹状体中,AMPA受体各亚型均未发生亚细胞分布改变;慢性左旋多巴刺激诱导大鼠LID对其纹状体AMPA总蛋白以及在细胞表面和细胞内池的分布无明显影响。结论 AMPA受体分布变化对PD或LID的发生无明显影响。     

脑深部电刺激对异动症大鼠纹状体DARPP-32及其磷酸化蛋白表达的影响

目的 探讨丘脑底核高频电刺激对帕金森病异动症大鼠纹状体区多巴胺和cAMP调节的磷蛋白(DARPP-32)及其磷酸化蛋白表达的影响.方法 制备帕金森病异动症大鼠模型,经丘脑底核高频电刺激(刺激组)后,测定大鼠损伤侧及损伤对侧纹状体区DARPP-32及其磷酸化蛋白的表达.另设假刺激组和假手术组为对照.结果 异动症大鼠纹状体区DARPP-32总蛋白的表达在三组之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05).刺激组大鼠损伤侧纹状体区Phosphor-Thr34-DARPP-32蛋白表达明显低于假刺激组和假手术组(P<0.05);刺激组大鼠损伤侧纹状体区Phosphor-Thr75-DARPP-32蛋白表达明显高于假刺激组和假手术组(P<0.05).结论 DARPP-32及其磷酸化蛋白的表达变化在帕金森病异动症的发病中有重要作用.     

G蛋白偶联受体激酶6参与天芪平颤颗粒预防帕金森病异动症的发生

目的：研究天芪平颤颗粒对左旋多巴诱发的异动症大鼠行为学及G蛋白偶联受体激酶6（Gprotein—coupled receptor kinase6,GRK6）表达的影响。方法：通过6-羟基多巴（6-hydroxydopa,6-OHDA）立体定向注射至大鼠前脑内侧束的方法成功建立帕金森病（Parkinson disease,PD）模型。25只模型大鼠随机分为5组,每组各5只。PD组：腹腔注射0．2％维生素C溶液;左旋多巴组：腹腔注射左旋多巴甲酯和苄丝肼;小、中、大剂量天芪平颤颗粒组：在给予左旋多巴甲酯和苄丝肼基础上分别加用相应剂量的天芪平颤颗粒。另设假手术组（n=5）为对照。连续给药29d后,评估不同剂量天芪平颤颗粒对PD模型大鼠行为学的影响,并用免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测大鼠纹状体区GRK6蛋白的表达情况。结果：左旋多巴等长期使用后,PD模型大鼠出现异常不自主运动（abnormal involuntarv movement,AIM）,且AIM评分随治疗时间的延长逐渐增加;损伤侧纹状体区GRK6蛋白表达减少。天芪平颤颗粒能改善PD模型大鼠的AIM评分,增加GRK6蛋白的表达。免疫组织化学法结果显示,高、中剂量天芪平颤颗粒组的GRK6蛋白的表达较左旋多巴组增加（P〈0．05）;蛋白质印迹法结果显示,中剂量天芪平颤颗粒组的GRK6蛋白的表达较左旋多巴组增加（P〈0．01）。结论：天芪平颤颗粒可能通过增加纹状体区GRK6的表达,改善PD模型大鼠的AIM评分,减少PD大鼠异动症的发生。     

Effect of Antisense FosB and CREB on the Expression of Prodynorphin Gene in Rats with Levodopa-induced Dyskinesias

The effects of antisense FosB and CREB intra-striatum injection on the expression of prodynorphin (PDyn) gene in striatal neurons of Levodopa-induced dyskinesias (LID) rats with Parkinson disease (PD) were explored. PD model in rats was established by 6-OHDA microinjection stereotaxically. The rats were treated with chronic intermittent Levodopa celiac injection for 28 days to get the LED rats. Antisense FosB and cAMP response element-binding protein (CREB) were injected into striatum of all rats respectively. In situ hybridization was used to measure the changes in the expression of PDyn mRNA in striatum and behavior changes were observed. The results showed after administration of antisense FosB, abnormal involuntary movement (AIM) was decreased and the expression of PDyn mRNA in striatum was increased in LID rats as compared with sense FosB group (P<0.01, respectively). As compared with the control group, the expression of PDyn mRNA in striatum was decreased by antisense CREB-treated LID group (P<0.01) and compared with sense CREB treated LID group, antisense CREB-treated LID group showed no changes in AIM scores and the expressions of PDyn mRNA (both P>0.05). In conclusion, FosB protein, which replaced the CREG, could regulate the expression of PDyn mRNA and play critical role in the pathogenesis of LID.     

帕金森病异动症发病的相关因素分析

目的  探讨帕金森病异动症（LID）发生的相关因素。方法  应用统一帕金森病（PD）评分量表（UPDRS）第2、3部分和第4-A部分,Hoehn-Yahr分期评分共随访410例PD患者,将UPDRS量表第IV-A部分32项≥1分的患者纳入LID组,并与非LID组的年龄、性别、发病年龄、主要临床亚型、病程、使用多巴制剂的疗程及当前的治疗情况等因素进行统计分析。结果  410例帕金森病患者中的396例患者坚持规律服药2个月以上,并且其中的105例患者出现异动症,LID组与非LID组在性别、年龄、发病年龄、病程、使用左旋多巴疗程、剂量、Hoehn-Yahr分期及统一帕金森病评分量表第3部分评分之间差异有统计学意义。异动症相关的多因素Logistic回归分析显示,性别、年龄、发病年龄、病程及使用左旋多巴的日剂量是LID发生的独立危险因素。结论  女性患者,年龄及发病年龄较轻,病程较长以及使用左旋多巴日剂量较大的帕金森病患者易发生异动症。

     

左旋多巴诱发异动症6-羟基多巴帕金森病大鼠模型的建立及行为学评价

目的应用左旋多巴（L-DOPA）建立帕金森病（PD）大鼠异动症模型,对其行为学进行评价。方法对25只SD大鼠右内侧前脑束注射6-羟基多巴（6-OHDA）建立PD大鼠模型,两周后行阿朴吗啡（1mg/kg）皮下注射,将成功PD大鼠模型随机分成两组,分别予生理盐水（NS）45mg/kg和L-DOPA（25mg/kg＋6.25mg/kg苄丝肼）腹腔注射,2次/d,共治疗21d,在治疗第2、9、11、18、21d进行前肢功能测定、异常不自主运动（AIM）评分和旋转反应时间测定。结果 20只建模成功的PD大鼠模型中,10只给以生理盐水（NS）治疗,另10只给以L-DOPA治疗。NS组治疗前后前肢跨步数无明显差异（P〉0.05）,治疗期间始终未出现AIM;L-DOPA治疗组后前肢跨步数较治疗前显著增加（P〈0.01）,8只出现不同程度的AIM表现,并随治疗时间的延长,AIM评分逐渐升高,第21dAIM总分较第2d增加（P〈0.05）,旋转反应时间随治疗时间的延长而缩短,第18、21d和第2d相比,显著缩短（P〈0.05）。结论 L-DOPA诱发6-OHDA的PD大鼠AIM与PD患者服用美多巴出现的异动症某些方面相似,为研究异动症提供了理想的模型。     

帕金森病异动症的影响因素及其相关机制的研究

通过长期服用左旋多巴恢复脑内多巴胺水平,一直以来都是帕金森病（Parkinson’s disease,PD）的金标 准疗法。补充左旋多巴改善了PD 运动症状,但长期用药对PD 异动症（levodopa-induced dyskinesias,LID）的影 响仍然是一个争议很大且临床亟待解决的问题。目前研究对左旋多巴导致LID 危险因素分析不尽相同,很多因 素都是相互影响的。该文将综述LID 的发生率及影响因素,从而在诊治过程中尽量避免并干预危险因素,及早 预防和减少LID 的发生。     

滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学及纹状体多巴胺D2受体活性的影响

目的：观察滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学和多巴胺D2受体活性的影响。方法：采用6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）注射于大鼠脑右侧黑质造成偏侧帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）模型,进一步对PD大鼠予以左旋多巴/苄丝肼制作异动症（levodopa-induced dyskinesias,LID）模型。实验设立正常对照组、模型组、中药干预组、中止给药对照组和中止给药＋中药干预组,观察中药对LID大鼠异常不自主运动（abnormal involuntary movement,AIM）评分的影响,测定大鼠纹状体多巴胺D2受体的最大结合容量（maximum binding capacity,Bmax）和平衡解离常数（equilibrium dissociation constant,KD）,来评价中药对LID大鼠多巴胺D2受体亲和力的影响。结果：与模型组和中止给药对照组比较,中药干预组可明显减少异动症大鼠的AIM积分（P〈0.01）;纹状体多巴胺D2受体亲和力检查示,中药可使Bmax显著上调（P〈0.05,P〈0.01）,KD值下降（P〈0.01）,多巴胺D2受体亲和力显著提高。结论：滋补肝肾、通络解毒中药可以有效缓解异动症症状,明显改善纹状体多巴胺D2受体活性。     

脑深部电刺激对异动症大鼠纹状体DARPP-32及其磷酸化蛋白表达的影响

目的 探讨丘脑底核高频电刺激对帕金森病异动症大鼠纹状体区多巴胺和cAMP调节的磷蛋白（DARPP-32）及其磷酸化蛋白表达的影响。方法 制备帕金森病异动症大鼠模型,经丘脑底核高频电刺激（刺激组）后,测定大鼠损伤侧及损伤对侧纹状体区DARPP-32及其磷酸化蛋白的表达。另设假刺激组和假手术组为对照。结果 异动症大鼠纹状体区DARPP-32总蛋白的表达在三组之间比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。刺激组大鼠损伤侧纹状体区Phosphor-Thr34-DARPP-32蛋白表达明显低于假刺激组和假手术组（P<0.05）;刺激组大鼠损伤侧纹状体区Phosphor-Thr75-DARPP-32蛋白表达明显高于假刺激组和假手术组（P<0.05）。结论 DARPP-32及其磷酸化蛋白的表达变化在帕金森病异动症的发病中有重要作用。     

健脾柔肝息风汤对抽动障碍模型大鼠脑组织神经元中DARPP-32、TH含量的干预作用

目的 研究健脾柔肝息风汤对抽动障碍(TD)模型大鼠皮质-纹状体-丘脑-皮质回路中多巴胺和环磷酸腺苷调节的磷蛋白(DARPP-32)、酪氨酸羟化酶(TH)含量的影响及其作用机制.方法 将40只SD大鼠随机分为空白组(10只),造模组(30只),造模成功后,将造模组随机分为模型组、氟哌啶醇组和健脾柔肝息风汤组,每组10只,...     

Effect of Levodopa Chronic Administration on Behavioral Changes and Fos Expression in Basal Ganglia in Rat Model of PD

Atpresent ,levodopatherapyisthemosteffec tivemedicationknownforthetreatmentofParkinsondisease (PD )witha pronouncedsymptomaticim provement However ,long termtreatmentoftenre sultsinthedevelopmentofseverecomplicationssuchasdyskinesiasandmotorfluctuations Pulsatilead ministrationoflevodopaandgradualreductioninsur vivingdopaminergicterminalstobufferdopaminere leasehavebeenattributedascausesofmotorfluctua tions Dyskinesiaswerethoughtrelatedtoimbalancebetweendirectoutput pathwayandindirectoutputpa…