西藏小型猪SLA-DQA基因外显子2 的PCR-RFLP多态性分析

目的 分析西藏小型猪SLA-DQA基因第2外显子不同酶切位点的基因型多态性以及等位基因的多态性,检验这些酶切位点上的基因频率是否达到Hardy-Weinberg 平衡态.方法 采用EcoRⅠ和AluⅠ两种限制性内切酶对西藏小型猪SLA-DQA 目的 基因的第1和第2内含子部分序列以及完整的外显子2进行 PCR-RFLP分析.结果 结果 表明,经EcoRⅠ酶切后,以纯合子BB基因型居多,BB、 AB、AA基因型频率分布为0.4500、0.3167和0.2333,其中B 为优势等位基因(0.6083); 经AluⅠ酶切后,MN基因型频率(0.5000)分别高于MM型(0.3000)和 NN型(0.2000),其中M为优势等位基因(0.5500).经卡方适合性检验验证, EcoRⅠ酶切位点c2值未达到显著水平(P >0.05),而AluⅠ酶切位点c2值则具有显著差异( P<0.05).综合双酶切结果 ,共出现7种组合带型,其中 BBMM组合带型出现的频率最高(0.3000),暂没有发现AANN以及 BBNN两种组合带型.结论 西藏小型猪SLA-DQA基因在AluⅠ酶切位点上没有达到Hardy-Weinberg 平衡态,在该位点的遗传选择压力较EcoRⅠ位点大.     

西藏小型猪SLA-DQA基因外显子2的PCR-RFLP多态性分析

目的分析西藏小型猪SLA-DQA基因第2外显子不同酶切位点的基因型多态性以及等位基因的多态性,检验这些酶切位点上的基因频率是否达到Hardy-Weiberg平衡态。方法采用EcoRⅠ和AluⅠ两种限制性内切酶对西藏小型猪SLA-DQA目的基因的第1和第2内含子部分序列以及完整的外显子2进行PCR-RFLP分析。结果经EcoRⅠ酶切后,以纯合子BB基因型居多,BB、AB、AA基因型频率分布为45.000%、31.667%和23.333%,其中B为优势等位基因（60.833%）;经AluⅠ酶切后,MN基因型频率（50.000%）分别高于MM型（30.000%）和NN型（20.000%）,     

滇南小耳猪生长激素基因多态性研究

目的 探讨滇南小耳猪生长激素基因多态性,为滇南小耳猪的选育提供分子标记辅助选择的依据.方法 采用PCR-RFLP方法对滇南小耳猪GH基因的Apa Ⅰ酶切位点多态性进行了分析.结果 检测到两种基因型AA和AB,AB型的频率高子AA型.没有检测到BB基因型个体.等位基因A的基因频率高于等位基因B,等位基因A在群体中占优势.结论 滇南小耳猪群生长激素基因具有较丰富的多态性.     

雌激素受体2基因多态性与青年胃腺癌的关联分析

目的探讨雌激素受体2基因（ESR2）多态性与盐城地区青年胃腺癌的关联。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,对盐城地区100例青年胃腺癌患者（胃腺癌组）和100名青年胃溃疡患者（对照组）ESR2第5外显子RsaⅠ酶切多态和第8外显子AluⅠ酶切多态进行分析。结果（1）ESR2第8外显子AluⅠ酶切多态分析表明,胃腺癌组A等位基因频率明显高于对照组（P〈0.05,OR=1.975）,胃腺癌组含等位基因A的Aa＋AA基因型频率也明显高于对照组（P〈0.05,OR=2.144）;（2）两组ESR2第5外显子RsaⅠ酶切多态基因型rr、Rr、RR频率和等位基因r、R频率的比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论ESR2第8外显子AluⅠ多态可能与盐城地区青年胃腺癌易感性有关,含等位基因A的Aa和AA基因型可能增加青年胃腺癌发病风险;而ESR2第5外显子RsaⅠ多态与盐城地区青年胃腺癌发病风险无关联。     

云南滇南小耳猪与广西巴马小型猪mtDNA D-Loop的初步研究

目的研究封闭群滇南小耳猪与广西巴马小型猪线粒体DNA（mtDNA）的多态性,探索小型猪遗传监测的方法。方法用18种限制性内切酶对23头滇南小耳猪和21头广西巴马小型猪mtDNA D-loop的PCR产物进行RFLP分析。结果滇南小耳猪和广西巴马小型猪的mtDNA D—loop在品种内和品种间均表现出相同的酶切图谱,未见多态性。结论滇南小耳猪与广西巴马小型猪mtDNA D—loop的遗传多样性贫乏,mtDNA PCR—RFLP技术在其遗传监测中不具应用价值。     

用12对微卫星引物对版纳小耳猪近交系的遗传学分析

目的　分析版纳小耳猪近交系种群的遗传变异及近交程度。方法　利用 12个微卫星基因座对版纳小耳猪近交系进行了遗传检测。结果　两个亚系以及各家系的聚类情况与小型猪系谱分布一致。且各家系基因纯合率均较高。结论　版纳小耳猪近交系不仅分化为若干个含有不同性状的家系 ,而且也达到了一个很高的近交程度。     

不同地理株旋毛虫细胞色素氧化酶Ⅰ基因多态性的PCR-单链构象多态性分析

目的:观察不同地理株旋毛虫细胞色素氧化酶Ⅰ(COX Ⅰ)基因片段的多态性.方法:根据旋毛虫mtD-NA COX Ⅰ设计引物,应用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对我国7个猪源旋毛虫(Trichinella spiralis,T1)地理株(河南、湖北、云南、西安、天津、黑龙江同江及哈尔滨株)与1个波兰猪源旋毛虫(T1,编号ISS3)地理株进行COX Ⅰ基因片段多态性进行分析.结果:我们7个猪源旋毛虫地理株与波兰地理株COX Ⅰ基因均扩增出约400 bp的片段,PCR扩增产物经SSCP检测发现有3种基因型(AA、AB和BB),波兰地理株为AA型,黑龙江同江、哈尔滨、西安、云南、湖北及河南株均为AB型,天津株为BB型,其中以AB基冈型频率最高(0.75),AA与BB基因型均为0.125;A和B等位基因频率均为0.5;旋毛虫不同地理株COX Ⅰ基因的多态性信息含量为0.375.为中度多态性.结论:8个不同地殚株猪源旋毛虫的COX Ⅰ基因为中度名杰件.     

基因探针在西双版纳小耳猪DNA指纹分析中的应用

目的: 以DNA指纹法检测西双版纳小耳猪的近交程度. 方法: 采用ECL核酸直接标记和检测试剂盒,以HRP标记JL-02和α-珠蛋白3′HVR多位点探针,对云南版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切图谱进行Southern杂交,以化学发光法进行检测,对两种探针所获得的DNA指纹图谱进行比较. 结果: JL-02探针杂交所获得的大于2 kb的谱带数在13～17条之间,JB亚系内805, 807家系和JS亚系内111, 121, 133, 151家系不同个体间的相似系数分别为0.92±0.04, 0.85±0.13, 0.86±0.02, 0.80±0.05, 0.84±0.09, 0.88±0.08,显著高于家系间的相似系数. 与其相对应的是,α-珠蛋白3′HVR探针杂交所获得的大于2 kb的谱带数在6～15条之间,HinfⅠ酶切产生的图带数低于HaeⅢ. JB亚系内805, 807家系和JS亚系内111, 121, 133, 151家系不同个体间的相似系数分别为0.94±0.09, 0.85±0.09, 0.84±1.70, 0.78±1.60, 0.85±0.42, 0.88±0.07,明显高于各家系间的相似系数. 结论: 两种探针均适用于西双版纳小耳猪的DNA指纹分析,且结果一致;家系内的相似系数显著高于家系间的相似系数;JB亚系内的805家系和JS亚系内的151家系不同个体间的相似系数最大,说明其近交程度较高,个体间差异较小,均一性较强.     

雌激素受体基因多态性与女孩性早熟关系的研究

目的 探讨雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)基因多态性与女孩性早熟的相关性.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,分别检测90例性早熟女孩(病例组)和70例健康体检者(对照组)ERα基因PvuⅡ和XbaⅠ酶切位点基因多态性及ERβ基因RsaⅠ和AluⅠ酶切位点基因多态性,并观察基因型对血清雌二醇(E2)的影响.结果 病例组ERα基因XbaⅠ、ERβ基因RsaⅠ基因型和等位基因频率分布与对照组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).等位基因X使女孩性早熟发病风险提高了2.26倍(95%CI:1.35~3.78);纯合子突变(XX)基因型、杂合子突变(Xx)基因型与野生型(xx)基因型相比,患性早熟的危险度分别为1.32倍(95%CI:0.46~3.81)和2.51倍(95%CI:1.27~4.97).等位基因R使女孩性早熟发病风险提高了3.12倍(95%CI:1.90~4.79);纯合子突变(RR)基因型、杂合子突变(Rr)基因型与野生型(rr)基因型相比,患性早熟的危险度分别为7.05倍(95%CI:2.78~7.88)和2.64倍(95%CI:1.09~6.42).E2增高组ERα基因XbaⅠ和ERβ基因AluⅠ基因型分布与E2正常组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05);ERα基因RsaⅠ及ERβ基因 Pvu Ⅱ基因型和等位基因频率分布在病例组与对照组、E2增高组与E2正常组相比,差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 ERα基因XbaⅠ位点和ERβ基因RsaⅠ多态性与女孩性早熟有关,突变基因增加了女孩性早熟的发病风险,Xx和RR基因型最易患病.     

滇南小耳猪心肺联合移植的体外循环管理

目的探讨滇南小耳猪同种原位心肺联合移植手术体外循环管理的有效方法.方法 2009年1月至2010年3月对14只实验用封闭群滇南小耳猪进行心肺联合移植的实验研究.改进心肺灌注液和灌注方法,采用浅低温和中度低温体外循环,应用常规超滤与改良超滤技术,行多指标监测和临床观察.结果体外循环过程平稳,供体心肺保护好,7例手术成功,6例成功复跳,获得短期存活,达到研究目的.结论合理选择供体心肺保护液,改进供体心腔减压方法,良好的体外循环管理,减轻再灌注损伤和积极保护心肺功能是成功进行小耳猪原位心肺联合移植手术的关键.     

版纳微型猪染色体显带研究

采用外周血淋巴细胞及肺成纤维细胞培养方法，以及Ｃ带、Ｇ带显带和银染技术，对云南版纳微型猪进行了染色体显带研究。测量了染色体的相对长度，着丝点指数及臂比。结果表明，Ａｇ－ＮＯＲｓ定位于７号和１０号染色体，版纳微型猪的Ｇ带带型与其它家猪相似，Ｃ带和Ａｇ－ＮＯＲｓ具有多态性。     

广州地区部分汉族人群骨密度与I型胶原α_1及α_2链基因多态性相关性

目的探讨I型胶原α1链(COL1A1)及α2链(COL1A2)基因型与广州地区部分汉族人群骨密度相互关系。方法选取成年个体628例[年龄20￣79岁,平均(53.4±15.9)岁],双能X线吸收法测定其全身、腰椎2￣4(L2￣4)、股骨颈、Ward氏三角和大转子区等部位的骨密度值,采用PCR-RFLP方法检测外周血白细胞基因组COL1A1及COL1A2基因型。结果628例受试对象中,未能观察到I型胶原α1链Sp1结合位点G→T突变,COL1A1基因型均为SS型;COL1A2基因型分别为EE型311例,占49.5%;Ee型252例,40.1%;ee型65例,10.4%。基因及基因型分布符合Hardy-weinberg平衡定律。不同基因型个体的骨密度值没有显著差异。结论在汉族人群中,不存在COLIA1Sp1结合位点的多态性,COLIA2EcoRI位点多态性与骨密度的关系不密切,尚不能作为筛查广州地区骨质疏松症高危人群的候选基因。     

ACE I/D基因多态性与高血压中医证型的相关性

目的：研究ACEI/D基因多态性与高血压中医证型的相关性。方法：采用多聚酶链聚合反应（PCR）方法对ACEI/D进行检测,住院原发性高血压（EH）患者337例,其中男145例,女192例,高血压中医证型与ACEI/D基因多态性相关分析用卡方（χ2）检验。结果：各证候组基因型和等位基因频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,基因型和等位基因分布频率男女组间比较,痰湿壅盛、阴虚阳亢、阴阳两虚组男女分布差异无显著性,而肝火亢盛组DD基因型频率女性高于男性,差异具有统计学意义（χ2=8.511,P=0.014）。男女分组比较,女性高血压证候组DD基因型频率肝火亢盛〉阴虚阳亢〉痰湿壅盛〉阴阳两虚,χ2检验显示差异具有显著性（χ2=12.892,P=0.045）。男性高血压证候各组基因型和等位基因I/D频率分布无显著性差异。结论：ACEI/D基因多态性对证候的影响存在性别差异,DD基因型与女性高血压中医证候相关。中医证候分型可能存在一定的分子遗传学基础,遗传体质与证候发展可能具有潜在的倾向性。     

云南白族民家支系18个常染色体STR位点的遗传多态性

  目的  调查云南白族民家支系2 323个健康无亲缘关系个体18个STR基因座的遗传多态性,计算群体遗传学参数,建立云南白族民家支系群体的遗传学基础数据,为司法鉴定工作中的亲子鉴定和个体识别提供可靠的科学依据。  方法  收集2323份云南白族民家支系人群无关个体样本,采用DNATyperTM19试剂盒,进行直接PCR复合扩增,用AB 3130XL自动遗传分析仪进行毛细管电泳分离,用GeneMapper ID-X 1.5软件对分离的STR进行分型。使用Modified-Powerstats软件统计等位基因频率,进行Hardy-Weinberg平衡（HWE）检验,计算匹配概率等法医学参数。使用Arlequin软件计算Fst和P值。使用Phylip软件计算Nei’s遗传距离。使用SPSS软件进行多维尺度（MDS）分析。应用Mega软件构建相邻连接（NJ）系统发育树。  结果  18个STR基因座中共观察到230个等位基因和1073种基因型。除D13S317基因座不符合Hardy-Weinberg平衡（P = 0.0008）外,其余基因座等位基因频率和基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05/18 = 0.0028）。18个STR基因座的累积个人识别能力（CDP）达0.999999999,累积非父排除概率（CPE）达0.99999994055。Fst值、Nei's遗传距离以及NJ系统发育树的结果均提示,白族民家支系与云南布朗族和云南佤族相距较远,而与大理白族和怒江白族相距较近。  结论  上述18个STR基因座在云南白族民家支系群体中具有高度多态性,可用于司法鉴定和群体遗传结构研究。     

PPARδ基因（A／G）多态与士兵耐力训练的相关研究

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体δ（peroxisome prdiferator-activated receptor, PPAR δ）基因第1内含子（A76077G）位点变异多态与解放军训练机能指标的相关性。方法对102名中国北方驻地新兵进行18周耐力训练,训练负荷为5000m长跑,每周进行3次。以心率为标准监控负荷强度,与通气无氧阈对应。运用跑台逐级递增负荷运动方法,对新兵最大摄氧量（maximal oxygen uptake,VO2max）相关指标、跑节省化（running economy,RE）相关指标以及心功能相关指标进行测定。采用聚合酶链反应一限制酶片段长度多型性分析（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphisms, PCR-RFLP）技术方法测定PPARδ基因第1内含子中（A76077G）位点变异多态。结果3种基因型的分布频率分别为AA：10人（0．10）、AG：36人（0．35）和GG：56人（0．55）,符合Hardy-Weinberg平衡。按基因型分组后,AA基因型人群训练前的VO2max相对值、50W下的心脏指数显著性高于AG基因型人群和GG基因型人群（P〈0．05）;AA基因型人群RE时心率变化率、100W下的心动周期的变化率极显著性高于AG基因型人群和GG基因型人群（P〈0．01）;测定的其他相关指标与基因型的差异均无统计学意义。结论①PPARδ基因第1内含子（A76077G）多态与初始VO2max相对值、50W下的心脏指数相关联。②RE时心率变化率、100W下的心动周期可作为军人有氧训练的敏感指标,PPARδ基因第1内含子（A76077G）AA基因型人群具有更高的敏感性。     

包头地区汉族健康人群维生素D受体基因Tru 9 I多态性分析

目的了解包头地区汉族健康人群维生素D受体基因单核苷酸多态性位点分布特点。方法抽取包头地区汉族健康人400例,采用PCR-RFLP方法,检测维生素D受体基因第Ⅷ内含子末端的Tru 9I基因多态性分布。结果 VDR基因Tru9I有三种等位基因,TT、Tt、tt三种基因型在本研究人群中分布频率分别为44%、38%、18%。T等位基因占63%,t等位基因占37%。基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0.05）,具有群体代表性。结论包头地区汉族健康人群VDR基因Tru9I多态性的分布与国内外相关研究的差异可能是存在种族差异,同时环境因素也可能会造成同一种族的基因频率发生微小的变化。     

内蒙古地区汉族血管紧张素转换酶基因多态性与原发性高血压的关系

目的：探讨血管紧张素转换酶基因多态性与内蒙古呼和浩特地区汉族人群高血压遗传易感相关性。方法：按WHO标准确诊的原发性高血压患者68例,正常对照67例,取外周血,提取DNA,应用PCR技术和琼脂糖电泳技术进行血管紧张素转换酶基因插入/缺失（I/D）分型,对普通PCR初检为DD型的样本附加插入特异PCR法核对校正。结果：正常对照组中,血管紧张素转换酶基因插入/缺失（I/D）多态DD、DI、II基因型频率分别为0.104、0.508、0.388,其中D和I等位基因频率分别为0.36和0.64;插入/缺失（I/D）多态分布符合Hardy-Weinberg定律,达到遗传平衡,具有群体代表性;高血压组与对照组比较,基因性频率差异无统计学意义（χ2=1.15,P〉0.05）,等位基因频率之间差异无统计学意义（χ2=0.17,P〉0.05）。结论：血管紧张素转换酶基因插入/缺失（I/D）多态性与内蒙古呼和浩特地区汉族人群原发性高血压的发病可能不相关。     

脂蛋白脂酶基因第6内含子PvuⅡ位点多态性与飞行员高脂血症的关系

目的探讨脂蛋白脂酶（LPL）基因第6内含子PvuⅡ位点多态性与飞行员高脂血症的关联性。方法采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法检测87例飞行员高脂血症患者和79例血脂正常飞行员LPL基因第6内含子PvuⅡ位点多态性,并与血脂水平的关联进行对照研究。结果飞行员高脂血症组和血脂正常组的三种基因型P＋P＋、P＋P-和P-P-及等位基因P＋和P-构成比差异有显著性（P〈0.01）,高脂血症组P＋P＋基因型和P＋等位基因明显高于正常血脂组。高脂血症组P＋P＋基因型者血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平明显高于P＋P-和P-P-基因型,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平则降低（P〈0.0 1）。结论LPL基因第6内含子PvuⅡ位点多态性与飞行员高脂血症相关。     

金属硫蛋白基因G-201A多态性在2型糖尿病及原发性高血压的分布差异性

［摘要］目的　探讨金属硫蛋白（metallotionein,MT）基因家族中的MT4基因 G-201A位点单核苷酸多态性（SNPs）在2型糖尿病及原发性高血压的分布差异性．方法　选取2型糖尿病患者324例,原发性高血压患者301例,正常对照者301例．应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测MT4基因 G-201A位点的基因多态性． 结果 （1）2型糖尿病324例、原发性高血压301例、正常对照者301例中MT4 G-201A基因型GG、GA、AA的频率分别为39.5%、46.6%、13.9%;42.2%、48.5%、9.3%;42.5%、51.5%、6.0%;基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）;（2）MT4 G-201A多态性:3组间基因型及等位基因（G和A）频率分布差异有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组和正常组比较分布差异无统计学意义（P＞0.05）;2型糖尿病组和正常组比较分布均差异有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组与2型糖尿病组比较,基因型及等位基因均差异无统计学意义（P＞0.05）;（3）男性MT4G-201A多态性:3组间基因型及等位基因频率分布差异有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组与2型糖尿病组比较,基因型及等位基因均无统计学意义;女性MT4 G-201A多态性:3组间基因型及等位基因频率分布,有统计学意义（P＜0.05）,2型糖尿病组和正常对照组比较分布均有统计学意义（P＜0.05）;原发性高血压组与2型糖尿病组比较,等位基因频率无统计学意义（P＞0.05）．结论 （1）MT基因G-210A多态性与2型糖尿病相关,与原发性高血压无相关性;（2）女性2型糖尿病MT基因G-210A多态性基因型分布与正常不同,但与高血压无异;男性则无此差异.