不同基因型慢性乙肝患者外周血Th细胞因子变化的研究

目的 探讨不同基因型的慢性乙型肝炎（乙肝）患者体内辅助性T细胞（help T cells，Th）功能差别。方法 检测29例不同基因型慢性乙肝患者外周血Th细胞因子（IL-2、IFN—γ、IL-4、IL-10）的表达，并作统计学分析。结果 慢性乙肝患者与正常对照组比较，外周血IL-2、IFN—γ、IL-4表达明显升高（P〈0．01或P〈0．05）。基因型C型组与D型组比较，丙氨酸氨基转移酶、IL-2、IFN—γ、Th1／Th2明显升高（P〈0．05或P〈0．01），IL-4明显降低（P〈0．05）。结论 慢性乙肝患者体内存在Th分化的不平衡，C型慢性乙肝患者体内Th1优势应答，肝脏炎症较重，治疗效果及预后较差。     

慢性心衰患者 Th1与 Th2型细胞及 Treg细胞的表达

目的探讨Th1、Th2型细胞及Treg细胞在慢性心衰发病中的作用机制。方法采用RT-PCR技术检测62例慢性心衰患者和42例正常人外周血单个核细胞中T—bet、GATA-3及Foxp3mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中Th1／Th2型细胞因子IFN-γ／IL-4水平。结果慢性心衰患者T-bet表达水平高于正常对照组,GATA-3及Foxp3表达水平低于正常对照组（均P〈0．05）。慢性心衰组患者血浆中IFN-γ水平及IFN-γ／IL-4高于对照组（均P〈0．01）。结论慢性心衰患者T-bet／GATA-3及IFN-γ／IL-4升高,Foxp3降低,提示Th1细胞亚群表达升高,Th2型细胞及CD4＋、CD25＋调节性T细胞减少,细胞免疫异常可能参与慢性心衰的发病机制。     

缺氧缺血性脑病患儿外周血调节性T细胞和辅助性T细胞17及其细胞因子水平的变化

目的探讨缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)及其细胞因子白细胞介素(IL)-10、IL-17、IL-23、转化生长因子-β(TGF-β)水平的变化。方法选取2012年1月至2014年1月在临颍县人民医院接受治疗的HIE患儿82例作为观察组,并选取40例健康新生儿作为对照组。抽取新生儿外周血,应用流式细胞仪检测全血中Treg和Th17的比例,采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-10、IL-17、IL-23和TGF-β水平。结果轻度HIE组患儿外周血Treg水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),中度HIE组和重度HIE组患儿外周血Treg水平显著低于对照组(P<0.05);轻度HIE组患儿外周血Th17水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),中度HIE组和重度HIE组患儿外周血Th17水平显著高于对照组(P<0.05)。轻度HIE组患儿血清IL-10、TGF-β、IL-17和IL-23水平与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05),中度HIE组和重度HIE组患儿血清IL-10和TGF-β水平显著低于对照组(P<0.05),而IL-17和IL-23水平则显著高于对照组(P<0.05)。结论 HIE患儿存在外周血Treg、Th17及其细胞因子表达的失衡,检测外周血Treg、Th17及其细胞因子水平对判断HIE病情进展、指导临床治疗有一定的临床意义。     

Treg细胞和Th17细胞在鼻咽癌中相关性的研究

目的:检测鼻咽癌患者外周血中Treg细胞与Th17细胞的比例以及相关细胞因子如IL-6、TGF-β1的变化.方法:选取我院鼻咽癌患者50例,另选取健康志愿者50例,鼻咽炎患者50例作为对照.采用流式细胞术检测外周血中Th17细胞和Treg细胞百分率,ELISA法检测血清中细胞因子TGF-β1、IL-6的水平,分析其相关性.结果:鼻咽癌外周血中Treg和Th17细胞占CD4+T细胞的比例均升高,与鼻咽炎组、正常对照组比较,均有显著性差异(P＜0.05);且Treg细胞与Th17细胞呈正相关(P＜0.05);鼻咽癌外周血中TGF-β1、IL-6的水平均明显高于鼻咽炎组、正常对照组,均有显著性差异(P＜0.05);鼻咽癌患者外周血Th17细胞、Treg细胞分别与血清中IL-6、TGF-β1水平呈正相关(P＜0.05).结论:鼻咽癌患者外周血中Treg、Th17细胞比例升高,且两者呈正相关;鼻咽癌患者患者血清中TGF-β1、IL-6水平升高,可能影响Treg与Th17细胞的平衡.     

反复自然流产患者IL-17、T-bet、GATA-3和FoxP3mRNA表达水平的检测

目的探讨反复自然流产患者辅助性T细胞17（Th17）免疫应答情况及其与Th1、Th2和Treg细胞相互之间的关系。方法实时荧光定量PCR（RealtimePCR）检测反复自然流产患者30例（观察组）及健康早孕体检者38例（对照组）外周血中的IL-17、T-bet、GATA-3和FoxP3mRNA表达水平。结果观察组IL-17mRNA、T-betmRNA表达水平较对照组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．0001）。而GATA-3mRNA、FoxP3mRNA表达水平显著低于对照组（P〈0．0001）：观察组Th1／Th2和Th17／Treg的比值均较对照组显著升高,差异有统计学意义（P〈0．0001）。结论Th17细胞参与了反复自然流产的免疫应答,Th1／Th2和Th17／Treg细胞之间的平衡在妊娠的维持中发挥重要作用。     

乙肝患者外周血Th17与Treg细胞的表达与临床意义

目的:探讨乙肝患者外周血Th17与Treg细胞的表达情况及与临床指标的相关性?方法:采集17例慢性乙肝患者(CHB组)?13例急性乙肝患者(AHB组)和14例健康者(对照组)外周血,流式细胞术分析Th17和Treg细胞的频率;酶联免疫吸附测定血清IL-17的水平,实时定量PCR法检测HBV DNA载量,速率法检测ALT水平?结果:AHB组?CHB组外周血Th17细胞频率和IL-17水平高于对照组(P < 0.05);CHB组外周血Treg细胞频率高于对照组(P < 0.01),而AHB组和对照组之间差异无统计学意义(P > 0.05);与对照组相比,AHB组外周血Th17/Treg比值显著增高而CHB组明显降低(P < 0.05);AHB组?CHB组外周血Th17细胞频率和Th17/Treg比值与ALT水平成正相关,Treg细胞频率与HBV DNA载量成正相关?结论:乙肝患者外周血存在Th17?Treg细胞表达异常和Th17/Treg相对失衡,并与ALT水平?HBV DNA载量具有一定的相关性,提示Th17和Treg细胞可能在乙型肝炎的发病机制中起着比较重要的作用?     

Th17细胞及相关细胞因子在原发性胆汁性肝硬化患者的表达

目的观察PBC患者外周血Th17/CD4＋T细胞相关细胞因子（IL-17、IL23、IL21、IL6、TGFβ）的表达,探讨Th17/CD4＋T细胞在PBC发病中的作用.方法收集26例PBC患者（PBC组）,20例HBV患者（HBV组）和20例健康人群（HC组）的外周血,采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定3组患者血清IL-17、IL-23、IL-21、IL-6、TGFβ的水平,比较3组间的表达情况.结果 PBC患者血清IL-17、IL-23、IL-21的表达明显高于HBV患者和健康对照组（P〈0.05）;PBC组IL-6、TGFβ表达明显高于健康对照组（P〈0.05）,而与HBV组比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 Th17/CD4＋T细胞及其分泌的特异细胞因子在PBC的免疫发病发挥着重要作用.     

胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的失衡研究

目的探讨胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子与相关细胞因子的检测及临床意义。方法选取2016年5月至2017年5月我院收治的30例胃癌患者、30例胃部良性疾病患者为研究对象,同时选取同期来我院体检的健康人群30例为对照组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术检查外周血Th17和Treg的特异性转录因子,酶联免疫吸附试验检测IL-17、IL-23、TGF-β和IL-10血清浓度。结果胃癌组患者外周血中FoxP3和RORγt的mRNA表达水平明显高于良性组与对照组(t=10.343,10.767,14.654,P0.05);胃癌组患者外周血IL-17、IL-23、TGF—β和IL-10血清浓度明显高于对照组(t=9.341,12.234,10.242,13.233,P0.05),而中晚期胃癌组患者各因子水平高于早期胃癌组(t=10.242,12.242,13.232,P0.05)。结论胃癌患者Th17与Treg细胞的含量明显高于胃部良性疾病以及健康人群。     

银屑病患者外周血Th17、Treg细胞检测及临床意义

目的:探讨银屑病患者外周血Th17细胞、Treg细胞检测及临床意义。方法:选取门诊、住院患者及健康体检者共96例。其中,银屑病患者34例,一般慢性皮肤病患者30例,健康对照组32例。采用流式细胞术检测3组患者外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值。结果:3组患者Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值,差异均有统计学意义(P<0.05)。通过两组t检验结果分析发现,银屑病患者Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值高于慢性皮肤病患者组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。银屑病组患者血清中IL-10及TGF-β水平较慢性皮肤病组及健康对照组患者均有下降(P<0.05)。银屑病组患者血清中IL-17、IL-22水平较慢性皮肤病组及健康对照组患者均有升高(P<0.05)。银屑病患者外周血Th17细胞、Treg细胞水平与IL-10、TGF-β水平呈负相关(P<0.05);银屑病患者外周血Th17细胞、Treg细胞水平与IL-17、IL-22呈正相关(P<0.05)。结论:银屑病患者外周血中Th17、Treg细胞二者表达水平升高,Th17/Treg比值升高,提示Th17、Treg细胞两者可能参与银屑病的发病,而阻断两者的产生途径可能成为治疗银屑病的新方法。     

慢性乙型肝炎患者外周血Treg/Th17检测及其意义

目的通过观察慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血Treg、Th17细胞及其相关细胞因子的变化,探讨淋巴细胞亚群Treg和Th17细胞在CHB发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测70例CHB患者(CHB组)和20例健康体检者(对照组)外周血中Treg(CD4+CD25highCD127lowT)和Th17(CD3+CD8-IL-17+T)细胞频数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-10、TGF-β1、IL-17及IL-23水平。结果 CHB组外周血中Treg、Th17细胞频数及其相关因子IL-23、IL-10、TGF-β1水平均明显高于对照组(P<0.05),但IL-17升高不明显(P>0.05)。CHB组Treg/Th17比率明显低于对照组(P<0.05),且轻中度CHB组Treg/Th17比率及TGF-β1水平明显低于重度CHB组(P<0.05)。结论 CHB患者外周血中存在Treg/Th17失衡;Treg/Th17失衡可能参与了CHB的发生发展。     

复方甘草酸苷对HSP病儿Treg和Th17细胞功能影响

目的探讨复方甘草酸苷对过敏性紫癜（HSP）病儿Treg和Th17细胞功能的影响。方法选取39例HSP病儿,随机分为复方甘草酸苷组20例和糖皮质激素组19例,以22例健康体检儿童作为对照组。治疗前后采集受检者外周静脉血,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血清白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）的含量。结果 HSP病儿急性期外周血IL-17水平较对照组显著增高（t=6.58,P〈0.01）,而血清IL-10、TGF-β水平与对照组比较差异无显著性（P〉0.05）;复方甘草酸苷组和糖皮质激素组用药后血清IL-17水平较治疗前均显著降低（t=9.27、9.41,P〈0.01）,前者降低幅度低于糖皮质激素组（t=3.06,P〈0.05）;糖皮质激素组治疗后血清IL-10、TGF-β水平较治疗前明显降低（t=3.80、3.64,P〈0.05）,而复方甘草酸苷组治疗前后差异无显著性（P〉0.05）。结论复方甘草酸苷可显著降低HSP病儿外周血Th17细胞功能,但对调节性T细胞功能无明显影响。     

Th17细胞在寻常型天疱疮发病中的作用

目的研究寻常型天疱疮（pemphigus vulgaris,PV）患者Th17细胞的数量和相关细胞因子水平。方法收集15例初次诊断未经治疗的PV患者以及配对的11例健康人,采用流式细胞术检测PV患者外周血Th17细胞在CD4＋T淋巴细胞中的百分比;用ELISA方法检测血浆中的IL-17、IL-6、IL-23和转化生长因子-β（transforming growthfactor-β,TGF-β）的水平。结果PV患者外周血中Th17细胞的百分率较正常对照明显增高;血浆中IL-17和IL-6水平升高,IL-23的水平降低,TGF-β的水平与对照组无差异。结论Th17细胞的增多以及相关细胞因子水平的改变与PV发病密切相关。     

不同类型HBV感染者外周血Treg/Th17细胞的变化及意义

目的:探讨不同类型HBV感染者外周血中CD4+Foxp3+Treg/Th17细胞的变化及意义。方法:分别采用流式细胞术、实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)法检测15例急性乙型肝炎(AHB)患者、40例慢性乙型肝炎(CHB)患者、40例无症状携带者(AsC)及30例健康对照者外周血外周血Treg/Th17细胞百分率、核转录因3(Foxp3)/(RORγt)mRNA的表达以及血浆转化生长因子-β1(TGF-β1)/白细胞介素17(IL-17)的水平。结果:AHB组患者CD4+Foxp3+Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3mRNA及TGF-β1水平与正常对照组相比无明显差异;而CD4+IL-17+/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA及IL-17水平与正常对照组相比明显升高,差异有统计学意义。CHB组患者CD4+Foxp3+Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3mRNA、TGF-β1水平及CD4+IL-17+/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平与正常对照组相比均明显升高,差异有统计学意义;与正常对照组相比,AsC组患者CD4+Foxp3+Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mRNA、TGF-β1水平及CD4+IL-17+/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平无明显差异。结论:在不同类型HBV感染者外周血中Treg/Th17细胞失衡,Treg/Th17细胞失衡可能与HBV感染的状态、结局有关。     

阿德福韦酯的临床疗效及其对CHB患者血清Th1／Th2型细胞因子的影响

目的观察阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎（CHB）近期临床疗效及其对CHB患者血清Th1／Th2型细胞因子的影响。方法采用自身对照、开放单一治疗的研究方法,选择40例明确诊断的CHB患者给予阿德福韦酯治疗,疗程48周,观察治疗前后症状、体征改善情况;检测肝功能（ALT、AST）、HBV—DNA、HBeAg和血清IL-4、IFN—γ的水平,并与同期健康体检者30例对照。结果40例CHB患者中,显效20例,有效17例,无效3例,总有效率92．5％;CHB组治疗后血清ALT、AST显著低于治疗前（P〈0．01）,HBV-DNA水平明显下降（P〈0．01）,HBeAg转阴率37．5％;CHB组治疗前血清IL-4水平明显高于健康对照组（P〈0．01）,IFN-γ水平明显低于健康对照组（P〈0．01）;治疗48周后CHB组IL-4水平明显下降（P〈0．01）,IFN-γ水平明显升高（P〈0．01）。结论阿德福韦酯治疗CHB近期临床疗效确切,患者依从性好,能纠正CHB患者Th1／Th2失衡状态,明显改善CHB患者肝功能和病毒学指标。     

恩替卡韦抗HBV治疗时患者体内免疫功能变化及其与HBeAg的关系

目的：探讨恩替卡韦抗HBV治疗时患者体内免疫功能的变化及其与HBeAg的关系。方法选择慢性乙型肝炎（CHB）患者30例,采用流式细胞术检测患者接受恩替卡韦治疗前、治疗48周时外周血中Treg、Th17细胞数目,采用双抗夹心ELISA法检测TGF-β、IL-17水平,并进行对比。结果①治疗48周时CHB患者外周血Treg、Th17细胞百分比、TGF-β、IL-17水平较治疗前明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。②e抗原转换/转阴组CHB患者外周血Treg、Th17细胞百分比、TGF-β、IL-17水平较e抗原未变化组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论恩替卡韦治疗CHB患者时可能导致外周血Treg、Th17细胞及相关因子表达减少,其减少的同时可能更有利于HBeAg的血清学转换。     

外周血Th1/Th2、Treg/Th17细胞因子对重症脓毒症病人近期预后的预测价值

目的探讨外周血Th1/Th2、Treg/Th17细胞因子对重症脓毒症病人近期预后的预测价值。方法将120例重症脓毒症病人作为观察组,另选取同期健康体检者103名作为对照组,均行外周血Th1/Th2细胞因子[γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4]、Treg/Th17细胞因子[转化生长因子β(TGF-β)、IL-17]水平检测并对比。所有病人均随访观察28 d,根据观察组病人存活情况将其分为死亡组与生存组,对比2组外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17、IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17水平,采用多因素logistic回归性分析法分析各细胞因子水平与重症脓毒症病人近期死亡的关系,另采用ROC曲线分析各指标对重症脓毒症病人近期死亡的预测价值。结果观察组外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平均高于对照组(P < 0.01),IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17均低于对照组(P < 0.01);病人28 d病死率为25.00%;死亡组外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平均高于存活组(P < 0.01),IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17均低于存活组(P < 0.01);年龄增大,APACHE-Ⅱ评分和SOFA评分高,血肌酐、IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平升高是影响病人近期死亡的危险因素,IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17比值降低是病人近期死亡的保护因素(P < 0.05~P < 0.01);外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平联合预测重症脓毒症病人住院28 d内死亡的灵敏度高于单独预测,AUC高于单独预测(P < 0.01);IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17联合预测重症脓毒症病人近期死亡的灵敏度高于单独预测,AUC高于单独预测(P < 0.01)。结论重症脓毒症病人外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-17水平均异常升高,IFN-γ/IL-4、TGF-β/IL-17均降低,且其水平变化情况与病人近期预后有关,均是病人住院28 d内死亡的影响因素,且均对病人28 d内死亡具有一定的预测价值,但各指标联合预测的价值更高。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17/Treg和Th1免疫失衡研究

目的：探讨Th17、Treg和Th1细胞免疫失衡在慢性乙型肝炎（CHB）发病中的作用。方法：采用荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Th17、Treg和Th1细胞的特异性转录因子RORC、Foxp3和T-bet的mRNA表达,ELISA分析CHB患者PBMCs培养上清液中白细胞介素（IL）-17、IL-21和血清IL-6、IL-1β的水平,PCR检测外周血HBV DNA;生化分析仪检测谷丙转氨酶（ALT）。结果：与正常对照组相比,CHB患者PBMCs中RORC mRNA、IL-17、IL-21水平明显升高（P〈0.01）;RORC mRNA与ALT呈正相关,与T-bet mRNA呈负相关;T-betmRNA与ALT呈负相关,外周血中IL-6、IL-1β水平也明显增高（P〈0.01）;Foxp3 mRNA与HBV DNA正相关。结论：Th17和Treg、Th1细胞免疫功能失衡与CHB病情密切相关。     

31例多发性硬化患者T淋巴细胞亚群及相关细胞因子 的检测

目的:探讨多发性硬化（MS）患者静脉血T淋巴细胞亚群及相关细胞因子的意义。方法:采用流式细胞术（FCM）检测31例MS患者治疗前（MS组）、泼尼松治疗4周后（泼尼松组）及20例健康者（正常组）外周血Th1（CD4+IFN-γ+）、Th2（CD4+IL-4+）、Th17（CD4+IL-17+）、Treg（CD4+FoxP3+）、Tc1（CD4-CD8+IFN-γ+）和Tc2（CD4-CD8+IL-4+）T淋巴细胞亚群变化;流式微球芯片捕获技术（CBA）检测血浆细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A、IL-4和IL-10的含量。结果:（1）FCM分析结果显示,与正常组比较,MS组Th1细胞和Th17细胞均明显升高（P＜0.05）;Treg细胞和Tc1细胞显著下降（P＜0.01）,Th17/Treg比例明显升高（P＜0.01）;与MS组比较,泼尼松组Tc1、Tc2和Treg细胞百分率均明显升高（P＜0.01）,而Th1和Th17细胞显著下降（P＜0.05）,Th17/Treg比值降低（P＜0.01）;（2）CBA法检测结果显示,与正常组比较,MS组IFN-γ和IL-17A含量升高（P＜0.05;P＜0.01）,IL-4和IL-10含量明显降低（P＜0.01）;与MS组比较,泼尼松组IL-17A含量明显降低（P＜0.01）,IL-4和IL-10均显著升高（P＜0.01）。结论:MS的发生可能主要与Th17上调和Treg下调有关,提示临床上针对MS靶向下调Th17和上调Treg,纠正Th17/ Treg比例失衡,具有潜在应用价值。