儿童过敏性鼻炎治疗前后外周血CD4+CD25+CD127lo/-Treg细胞与炎症因子变化分析

目的 探讨儿童过敏性鼻炎（AR）治疗前后外周血CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg及白细胞介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、人转化生长因子β1（TGF-β1）的水平变化及临床意义。方法 将厦门长庚医院收治的108例AR患儿作为AR组,根据疾病严重程度分为轻度、中重度组,另采用单纯随机抽样法选取年龄、性别匹配的80例健康儿童作为对照组,检测两组对象入院时CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg、IL-2、TNF-α、TGF-β1水平;AR患者均给予对症治疗,检测治疗前、治疗1个月、治疗6个月CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg、IL-2、TNF-α、TGF-β1水平,采用Pearson相关分析疾病严重程度与外周血CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg的相关性及两者与IL-2、TNF-α、TGF-β1相关性。结果 AR患者CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg、IL-2、TGF-β1水平分别为（6.264±0.135）%、（50.16±11.67）ng/L、（14.21±5.34）ng/L,均低于对照组;TNF-α为（1.82±0.62）ng/L,高于对照组的（0.34±0.19）ng/L,差异均有统计学意义（P<0.05）。轻度AR患者CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg、IL-2、TGF-β1水平分别为（6.305±0.137）%、（59.34±13.05）ng/L、（16.97±4.69）ng/L,均高于中重度AR组患者,TNF-α水平为（1.64±0.57）ng/L,低于中重度AR组患者的（1.93±0.65）ng/L,差异均有统计学意义（P<0.05）。AR组治疗后第1、6个月CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg、IL-2、TGF-β1水平高于治疗前,TNF-α水平低于治疗前,差异均有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关分析显示：外周血CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg、TNF-α与疾病严重程度呈正相关关系（r=0.681、0.581,P<0.05）,IL-2、TGF-β1与疾病严重程度呈负相关关系（r=-0.613、-0.579,P<0.05）;外周血CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg与IL-2、TGF-β1呈负相关性（r=-0.675、-0.691,P<0.05）,与TNF-α呈正相关关系（r=0.618,P<0.05）。结论 AR患者存在CD4⁺CD25⁺CD127^lo/-Treg及IL-2、TGF-β1下降,TNF-α上升,且与病情程度有关,治疗后均明显改善。     

Breg Tfh Tfr细胞在免疫性血小板减少症患者中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）、滤泡辅助性T细胞（Tfh）、滤泡调节性T细胞（Tfr）在免疫性血小板减少症（ITP）中的作用和临床意义。方法 选择2017年10月至2019年10月安徽医科大学第一附属医院收治的初次诊断的30例ITP患者为ITP组,同期选择健康对照组25例,应用流式细胞术（FCM）检测外周血Breg、Tfh、Tfr细胞的表达水平并统计分析。结果 ITP组患者外周血CD19⁺B细胞中Breg[（1.93±1.21）%]、IL-10⁺Breg[（28.64±10.31）%]水平低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;外周血CD4⁺T细胞中Tfh细胞比例高于健康对照组[（12.18±5.26）% vs（6.21±1.78）%],Tfr细胞比例[（1.64±1.01）%]、Tfr/Tfh比值（0.21±0.13）低于健康对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 Breg细胞降低,IL-10分泌减少,Tfr/Tfh比值失衡,在ITP发病过程中可能起到重要的作用。     

恶性血液病患者异基因造血干细胞移植后骨髓T淋巴细胞亚群重建的动态观察

目的 研究恶性血液病患者经异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后骨髓免疫重建中T淋巴细胞的重建规律及其与外周血中T淋巴细胞重建的差异。方法 本研究采用前瞻性研究设计。收集2015年9月至2017年1月在我院血液科行allo-HSCT的41例恶性血液病患者的骨髓及外周血标本,收集同期7名健康供者的骨髓及外周血标本作为对照样本。用流式细胞术分析移植前和移植后15、30、60、90、180 d时的T淋巴细胞亚群分布,包括CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺ T淋巴细胞、辅助性T细胞（Th）1、Th2,并用Luminex技术检测Th1相关细胞因子白细胞介素2受体（IL-2R）、白细胞介素18（IL-18）水平。结果 恶性血液病患者在移植后15 d和30 d时骨髓中CD4⁺T淋巴细胞比例均低于对照组（P均<0.05）,至移植后180 d仍未见回升;CD8⁺ T淋巴细胞比例在移植后早期（15、30 d）低于对照组（P均<0.01）,60 d时恢复至正常水平;骨髓中CD4⁺和CD8⁺ T淋巴细胞比例整体水平均低于外周血中水平（P=0.001、0.002）。恶性血液病患者在移植后15、30、60、90、180 d时骨髓中Th1比例均高于对照组（P均<0.05）,且整体水平高于外周血中水平（P=0.006）;骨髓中Th2比例在移植后90 d内均无明显变化,在180 d时高于对照组（P=0.034）,但整体水平与外周血中水平无明显差异（P>0.05）。骨髓中CD4⁺/ CD8⁺ T淋巴细胞比值在移植后逐渐下降,至移植后180 d时低于对照组（P=0.040）;而骨髓中Th1/Th2比值在移植后90 d内各时间节点（15、30、60、90 d）均高于对照组（P均<0.01）,180 d时与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。恶性血液病患者骨髓和外周血中IL-2R水平在移植后15、30、60、90 d均高于对照组（P均<0.05）;IL-18水平在移植后15、30、60 d高于对照组（P均<0.05）,但移植后90 d时仅外周血中水平与对照组差异有统计学意义（P=0.021）;骨髓与外周血中IL-2R和IL-18整体水平均无明显差异（P均>0.05）。结论 恶性血液病患者allo-HSCT后,骨髓中各T淋巴细胞亚群的重建规律不同,且与外周血中有所差异。     

巨噬细胞在心肌梗死后成纤维细胞激活中的作用

巨噬细胞在心肌梗死后的炎症和纤维化过程中发挥重要的调控作用。巨噬细胞根据有无CC类趋化因子受体2(CCR2)表达分为CCR2＋巨噬细胞和CCR2－巨噬细胞。CCR2－巨噬细胞通过Ly6C的表达水平分为促炎的Ly6C^hiCCR2^hiCX3CR1^lo巨噬细胞和抑炎的Ly6C^loCCR2^loCX3CR1^hi巨噬细胞。心肌梗死后的早期阶段和急性炎症期Ly6C^hi巨噬细胞产生炎症细胞因子,Ly6C^lo巨噬细胞在梗死后的后期被招募,分泌抗炎细胞因子和生长因子。巨噬细胞通过旁分泌白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α等炎症因子直接激活成纤维细胞,或促进转化生长因子-β表达间接发挥成纤维细胞的激活作用。本文对心肌梗死后心肌中巨噬细胞来源及其在成纤维细胞激活中的作用作一综述。     

胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌患者局部组织中浸润淋巴细胞的影响

目的 探讨胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌组织微环境中浸润淋巴细胞的影响。方法 自2012年1月~2014年1月,前瞻性收集笔者医院收治的接受新辅助化疗的乳腺癌患者80例,将患者随机分为研究组和对照组,所有患者均行新辅助化疗,研究组在新辅助化疗期间给予胸腺五肽,化疗结束后进行手术切除肿瘤组织,留取乳腺癌组织标本,观察乳腺癌组织中和外周血中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞比例、外周血中IL-6、IL-10、TGF-β1水平。结果 与对照组比较,研究组患者乳腺癌组织中CD4⁺T细胞显著降低（21.47%±3.29% vs 23.88%±3.43%,P=0.002）;CD8⁺T细胞显著增高（30.36%±4.38% vs 28.43%±4.16%,P=0.047）;CD4⁺/CD8⁺T细胞显著降低（0.71±0.14 vs 0.84±0.18,P=0.001）。两组患者治疗前外周血CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞、IL-6、IL-10、TGF-β1等比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,研究组患者术后外周血CD4⁺T细胞水平显著增加（27.67%±4.24% vs 25.09%±3.68%,P=0.005）;CD4⁺/CD8⁺T显著增加（0.83±0.14 vs 0.75±0.18,P=0.029）;IL-6水平显著增高（12.39±2.87 vs 9.24±3.38ng/L,P=0.000）;IL-10水平显著降低（8.49±2.59 vs 12.59±3.65ng/L,P=0.006）;TGF-β1水平显著降低（12.47±3.88 vs 17.76±4.12ng/ml,P=0.000）。两组患者住院时间、切口感染、手术部位出血、复发率和病死率等比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论 胸腺五肽联合新辅助化疗可能有助于改善乳腺癌组织微环境中免疫状态和全身免疫功能。     

树突状细胞、Treg细胞在SLE伴血小板计数减少患者外周血中的表达

目的 探讨树突状细胞（DC）及CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺调节性T细胞（Treg）在系统性红斑狼疮（SLE）伴中重度血小板计数减少患者外周血中的表达及临床意义。方法 选取SLE伴中、重度血小板计数减少患者32例,SLE伴血小板计数正常患者28例,正常健康人30例,应用流式细胞术检测各组外周血中髓系DC（mDC）、浆细胞样DC（pDC）治疗前后比率变化及与Treg细胞的相关性,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测外周血IL-12、IFN-α、TGF-β水平。结果 SLE伴血小板计数减少组外周血pDC比率显著低于SLE伴血小板计数正常组患者（P<0.05）。SLE伴血小板计数减少组激素治疗后pDC比率较治疗前减少,Treg细胞比率较治疗前增加,pDC与Treg细胞呈负相关（r=-0.537, P<0.05）。SLE伴血小板计数减少组患者外周血DC表面协同刺激分子CD86表达的MFI明显高于SLE伴血小板计数正常组及健康对照组。SLE患者外周血IL-12、IFN-α水平与健康对照组比较显著升高,TGF-β水平显著降低（P<0.05）。结论 pDC可能参与了SLE伴中重度血小板计数减少的免疫发病机制,并与Treg细胞有一定的相关性。     

分化型甲状腺癌术后131I清除残余甲状腺组织的疗效及其影响因素分析

目的 探讨分化型甲状腺癌（DTC）患者术后¹³¹I清除残余甲状腺组织（简称“清甲”）的疗效及¹³¹I清甲治疗效果的影响因素。方法 收集2013年3月至2015年1月安徽省立医院行¹³¹I 清甲治疗的DTC术后患者41例,其中乳头状癌37例、滤泡状癌4例,¹³¹I清甲治疗剂量为1 110～5 550 MBq。观察¹³¹I清甲成功率;采用logistic回归分析¹³¹I清甲治疗效果的影响因素。结果 41例DTC术后患者中,¹³¹I清甲成功率为60.98%（25/41）。单因素分析显示残余甲状腺质量（χ²=8.431,P=0.006）、24 h摄¹³¹I率（χ²=7.663,P=0.015）和¹³¹I剂量（χ²=12.751,P=0.001）是影响¹³¹I疗效的因素。多因素logistic回归分析表明残余甲状腺质量（Wald=4.326,P=0.018）和¹³¹I剂量（Wald=12.320,P=0.000）是影响¹³¹I清甲治疗效果的独立因素。结论 DTC患者术后¹³¹I清甲治疗的成功率较高,残余甲状腺质量和¹³¹I剂量是影响¹³¹I清甲治疗效果的主要因素。     

异基因造血干细胞移植后小鼠共刺激分子表达与急性移植物抗宿主病的关系

目的 探究异基因造血干细胞移植后小鼠共刺激分子表达及其与急性移植物抗宿主病（aGVHD）发病的关系。方法 供体为5只C57BL/6J（H2KD^-H2KB⁺）雄性小鼠,受体为30只CB6F1（H2KD⁺H2KB⁺）雌性小鼠。将受体小鼠随机分为单纯照射组、骨髓移植组和aGVHD组,每组10只。单纯照射组：受体小鼠接受γ射线照射后不注射任何细胞;骨髓移植组：受体小鼠接受γ射线照射后注射5×10⁶个供体来源去T淋巴细胞的骨髓有核细胞;aGVHD组：受体小鼠接受γ射线照射后,同时注射5×10⁶个供体来源去T淋巴细胞的骨髓有核细胞和3×10⁷个供体来源脾细胞。采用log-rank生存曲线分析各组小鼠移植后生存情况。分别在移植后7、14、21、28 d采用流式细胞术检测骨髓移植组和aGVHD组小鼠外周血CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞表面共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）、程序性死亡蛋白1（PD-1）、可诱导共刺激分子（ICOS）和CD28的表达情况,以及移植后21 d两组小鼠脾组织CD4⁺T淋巴细胞内白细胞介素（IL）-17、γ干扰素、IL-4的表达情况,并在移植后21 d采用3,3''-二氨基联苯胺（DAB）染色检测两组小鼠结肠组织共刺激分子配体的表达情况。结果 单纯照射组受体小鼠均在γ射线照射后19 d内死亡;骨髓移植组小鼠在γ射线照射后均未出现aGVHD症状,30 d内均存活;aGVHD组小鼠在γ射线照射后出现aGVHD症状的时间为14（11~18）d,生存时间为22（13~30）d。随着时间的推移,aGVHD组小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞表面CTLA-4、PD-1表达在移植后均呈下降趋势,ICOS、CD28表达均呈上升趋势。在移植后28 d时aGVHD组小鼠外周血CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞表面CTLA-4、PD-1表达均低于骨髓移植组,ICOS、CD28表达均高于骨髓移植组,差异均有统计学意义（P均<0.05）。DAB染色结果示,骨髓移植组结肠组织CD80、ICOS配体（ICOSL）、PD-1配体（PD-L1）表达均为阴性,aGVHD组结肠组织CD80、ICOSL、PD-L1阳性表达率分别为40%、80%、80%。与骨髓移植组比较,aGVHD组小鼠脾组织CD4⁺T淋巴细胞内IL-17、γ干扰素表达均增加,IL-4表达减少,差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 异基因造血干细胞移植小鼠发生aGVHD后,共刺激分子CTLA-4表达随时间推移逐渐降低。CTLA-4、ICOS、PD-1均可能通过调节辅助性T细胞（Th）1、Th2、Th17等T淋巴细胞亚群分布参与aGVHD的发生、发展。     

IL-35 Th17/Treg失衡在系统性红斑狼疮中的表达与意义

目的 分析系统性红斑狼疮（SLE）患者血清白细胞介素-35（IL-35）水平、外周血辅助性T细胞17（Th17）和调节性T细胞（Treg）的变化,探讨IL-35及Th17/Treg失衡在SLE发展中的作用。方法 选取2019年1月至4月在南京鼓楼医院就诊的54例新发SLE患者为研究对象,根据SLE疾病活动度（SLEDAI）分为轻度活动组,26例;中度活动组,10例;重度活动组,18例。另外选择同时期体检中心健康体检者30例作为对照组。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测4组研究对象血清IL-35水平,流式细胞术检测外周血Th17与Treg细胞占T细胞的比例,比较4组血清IL-35及外周血Treg、Th17、Th17/Treg表达水平,并采用Pearson相关性分析IL-35与Treg、Th17、Th17/Treg和SLEDAI的相关性。结果 SLE组患者Th17细胞百分比、Th17/Treg比值均高于对照组,IL-35水平、Treg细胞百分比均低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。重度活动组Th17细胞百分比高于中度活动组,中度活动组高于轻度活动组,差异均有统计学意义（P<0.05）;3组SLE患者Treg细胞百分比比较,差异无统计学意义（P>0.05）;中度活动组IL-35水平低于轻度活动组,而Th17/Treg高于轻度活动组,差异均有统计学意义（P<0.05）,重度活动组与中度活动组IL-35、Th17/Treg表达比较,差异无统计学意义（P>0.05）。Pearson相关性分析显示,SLE患者IL-35水平与Treg呈显著正相关（r=0.373,P=0.006）,与Th17、Th17/Treg和SLEDAI呈负相关（r=-0.563,-0.480,-0.686,P<0.001）。SLE患者经过短暂治疗后IL-35与Treg表达较治疗前升高,Th17与Th17/Treg的表达较治疗前降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 SLE患者体内血清IL-35水平降低,并与SLE患者病情活动相关;低表达的IL-35可能参与了Th17/Treg的失衡,促进SLE的形成。     

微柱凝胶法直接抗人球蛋白实验阳性强度的影响因素研究

目的 探讨患者直接抗球蛋白试验（direct antiglobulin test，DAT）阳性强度的关键影响因素，对临床DAT阳性患者在抗生素用药或红细胞输血时提供指导。方法 回顾性分析首都医科大学附属北京世纪坛医院2015年1月至2020年12月27 382例次行DAT检测的患者资料，对患者性别、年龄、临床诊断、抗生素使用、红细胞输注、DAT阳性强度等进行统计分析。结果 共有27 382人次患者进行了DAT检测，DAT阳性患者5 745人次（20.98%）。将不同DAT强度患者按男、女分组后做Mann-Whitney U检验，结果显示，男性DAT⁺强度高于女性，组间差异有统计学意义（U=2 764 704.5，P<0.001）。将DAT阳性患者按年龄分为3组（<18岁组、18~60岁组和>60岁组）后做Kruskal-Wallis检验。结果显示，不同年龄组间DAT阳性强度差异有统计学意义（H=200.4，P<0.001），<18岁组和>60岁组DAT 阳性强度高于18~60岁组。不同临床诊断之间分析结果显示DAT阳性强度差异有统计学意义（H=70.82，P<0.001）。Mann-Whitney U检验结果显示，使用抗生素和未使用抗生素组患者的DAT阳性强度分布不同，使用抗生素组患者DAT阳性强度更高（U=1 853 921.5，P<0.001）。红细胞输注组患者DAT阳性强度更高（U=3 315 953.5，P<0.001），但多次红细胞输注并未引起DAT阳性强度变化（U=108 911.5，P=0.68）。结论 在DAT阳性患者中，患者的性别、年龄、临床诊断、抗生素的应用、红细胞输注等均影响其DAT阳性强度，多次红细胞输注未见引起DAT⁺强度变化，临床上对DAT阳性强度较高的患者应谨慎使用抗生素及进行红细胞输注。     

甲状腺相关性眼病患者外周血CD4+、CD8+T细胞百分比及细胞表面程序性死亡蛋白1表达的改变及其意义

目的 观察甲状腺相关性眼病(TAO)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+、CD8+T细胞百分比及细胞表面程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达水平,探索这两者变化在TAO发病机制及疾病诊断中的意义.方法 收集21例TAO患者、21例Graves病(GD)无眼病患者及20例健康对照者资料,采用流式细胞术检测所有受试者PBMC中CD4+、CD8+T细胞百分比及其表面PD-1的表达率,比较组间差异,分析其与患者病程、甲状腺功能、甲状腺相关抗体及TAO疾病活动性和严重程度之间的关系.结果 (1) TAO患者PBMC中CD4+、CD8+T细胞百分比分别为(35.9±14.5)％、(22.2±8.4)％,GD患者分别为(33.1±13.0)％、(18.6±9.2)％,均高于健康对照者[(17.4±7.4)％、(7.7±4.8)％,P＜0.01].(2) TAO及GD患者PBMC中CD4+T细胞表面PD-1表达率分别为(8.3±6.4)％、(28.0±26.6)％,均低于健康对照者[(52.2±28.6)％,P＜0.01.P＜0.05],且TAO患者低于GD患者(P＜0.05);TAO患者PBMC中CD8+T细胞表面PD-1表达率低于健康对照者r(12.7±13.4)％vs(38.2±24.2)％,P＜0.01].(3) TAO患者PBMC中CD8+T细胞百分比与病程呈正相关(r=0.478,P＜0.05).(4) TAO患者活动期组与非活动期组、轻度组与中重度组间CD4+、CD8+T细胞百分比及其表面PD-1表达率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 TAO患者PBMC中CD4+、CD8+T细胞百分比及细胞表面PD-1表达存在异常,可能参与TAO的自身免疫过程.     

支气管哮喘患者外周血CD3+T细胞趋化因子受体表达的研究

目的 探讨支气管哮喘患者外周血CD3⁺T细胞趋化因子受体表达情况。方法 选取2017年1月—2017年12月山东省立第三医院就诊的40例支气管哮喘患者及同期该院体检的27例健康志愿者，采用流式细胞仪检测所有受试者外周血CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上趋化因子受体CXCR1、CXCR2、CXCR3、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR8的表达。比较轻、中度支气管哮喘患者、重度支气管哮喘患者及健康志愿者，以及不同剂量糖皮质激素使用者趋化因子受体表达的差异。结果 轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1、CCR7阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CXCR1阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8⁺T细胞上CCR7阳性表达率低于对照组（P <0.05）。轻、中度支气管哮喘组、重度支气管哮喘组、对照组受试者CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。重度支气管哮喘组CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1、CXCR2阳性表达率低于轻、中度支气管哮喘组和对照组（P <0.05）。3组吸入不同剂量糖皮质激素患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1的阳性表达率差异有统计学意义（P <0.05）。每天吸入>800 μg/g布地奈德组的患者CD3⁺CD8⁺和CD3⁺CD8^-T细胞上CXCR1阳性表达率低于每天吸入< 400 μg/g布地奈德组的患者（P <0.05）。结论 重度支气管哮喘组患者外周血CD3⁺T细胞部分趋化因子表达减少，轻、中度哮喘患者Th1和Th2相关的趋化因子受体参与免疫应答，而重度支气管哮喘患者Th1/Th2应答下降。     

系统性红斑狼疮患者妊娠期外周血中滤泡辅助性T淋巴细胞的变化及其意义

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者妊娠期外周血中滤泡辅助性T淋巴细胞（Tfh）的变化,并阐明Tfh细胞在妊娠期SLE患者中的免疫作用。 方法 选取来自山东省青岛市市立医院和青岛市妇女儿童医院就诊的SLE患者,分为SLE妊娠组32例和SLE未妊娠组30例,以健康妊娠组（健康妊娠妇女）30例和健康未妊娠组（健康未妊娠妇女）25例为对照,SLE妊娠组32例患者（随访丢失2例）根据妊娠期间和终止妊娠后3个月内病情变化分为SLE妊娠预后不良组（8例）和SLE妊娠临床稳定组（22例）,收集各组受试者临床资料和实验室检查指标。采用流式细胞术检测各组受试者外周血中CD4+诱导性T细胞共刺激因子（ICOS）+趋化因子C-X-C-基元受体5（CXCR5）+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞百分率（Tfh细胞百分率）,采用Spearman相关分析检验SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率与患者实验室检查指标的相关性,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组受试者外周血中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素21（IL-21）和干扰素γ（IFN-γ）水平。 结果 与健康妊娠组比较,SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率明显升高（P<0.01）,健康未妊娠组受试者外周血中Tfh细胞百分率明显降低（P<0.05）;与SLE未妊娠组比较,SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率明显升高（P<0.05）。随访中,与SLE妊娠临床稳定组比较,SLE妊娠预后不良组患者外周血中Tfh细胞百分率明显升高（P<0.05）。SLE妊娠组患者外周血中Tfh细胞百分率与抗心磷脂抗体（ACA）-IgG和抗β2糖蛋白Ⅰ（β2GPⅠ）抗体滴度均呈正相关关系（r=0.743 1,P<0.05;r=0.830 7,P<0.01）。与健康妊娠组比较,SLE妊娠组患者外周血中IL-6和IL-21水平明显升高（P<0.05）;与SLE未妊娠组比较,SLE妊娠组患者外周血中IL-21水平明显升高（P<0.05）。 结论 SLE患者妊娠早期外周血中Tfh细胞百分率升高可能与SLE患者妊娠预后不良有关。     

DCs及其膜糖蛋白在慢性淋巴细胞性甲状腺炎中的临床研究

目的 就甲状腺组织树突状细胞（DCs）数量及患者外周血DCs细胞膜糖蛋白变化在慢性淋巴细胞性甲状腺炎（HT）患者病理过程中的意义进行分析研究。方法 研究选取确诊HT患者113例,为观察组,同时选取同期健康体检者120例作为对照组;收集患者手术中的甲状腺组织以及外周血进行DCs计数以及DCs膜糖蛋白Galectin-9表达情况进行分析讨论。结果 本研究中观察组受试对象113例,对照组120例受试对象基本情况可比性良好。观察组患者分型参照Woolner''s分类法,包含L-型（lymphoid type）39例,O-型（oxyphilic type）37例, P-型（pronounced type）37例。L-型HT患者DCs细胞计数为（6.54±1.37）×10⁶/L,O-型HT患者DCs细胞计数为（9.55±1.08）×10⁶/L,P-型HT患者DCs细胞计数为（3.59±1.33）×10⁶/L,全部HT患者的平均DCs细胞计数为（7.27±1.35）×10⁶/L;均高于对照组的水平（1.12±0.34）×10⁶/L,差异均有统计学意义（P<0.05）。使用流式细胞仪检测DCs中Galectin-9蛋白表达比例水平,结果提示L-型HT患者DCs中Galectin-9蛋白表达比例为24.66%,O-型HT患者DCs中Galectin-9蛋白表达比例为21.29%,P-型患者为20.54%,全部患者的平均DCs中Galectin-9蛋白表达比例则为24.32%;均高于对照组的7.20%。同时,DCs膜表面糖蛋白Galectin-9表达的Western blot法检测结果也提示观察组显著高于对照组。结论 在HT病理过程中存在者DCs细胞的参与,故可见几种常见类型患者DCs细胞计数均高于健康对照组;同时健康人DCs中Galectin-9蛋白量表达高于HT患者水平,可能与HT患者存在过度免疫有关。     

人乳牙牙髓干细胞对干燥综合征患者CD4+T细胞的免疫抑制效应

目的 探讨在体外人乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth, SHED)及其联合IL-6抗体对干燥综合征患者(Sjgren syndrome, SS)外周血活化的CD4⁺T细胞的免疫抑制效应。方法 培养并鉴定SHED;流式细胞术检测健康者和SS患者外周血CD4⁺T细胞中Th1、Th2、Th17、Treg及Tfh的比例;将健康者和SS患者PBMC各自单独培养或与SHED共培养,ELISA法检测培养上清液中IL-6浓度,在各组中添加或不添加IL-6抗体,72h后流式细胞术检测CD4⁺T细胞增殖情况。结果 SS患者外周血CD4⁺T细胞中Th17及Tfh比例较健康者升高(P<0.05);健康者与SS患者共培养组的Th17比例显著降低(P<0.001),SS患者共培养组的Treg比例有所升高(P<0.05);在SS患者共培养组中添加IL-6抗体,可显著降低CD4⁺T细胞中Th2的比例(P<0.05)。结论 SHED可抑制SS患者CD4⁺T细胞的增殖,降低SS患者CD4⁺T细胞中Th17的比例且增加Treg的比例;IL-6抗体可降低与SHED共培养的SS患者PBMC中CD4⁺T细胞Th2亚型比例。     

Expression of costimulatory molecules B7/CD28 in systemic lupus erythematosus

Summary The expression of the constimulatory molecules B7/CD28 in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of the patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and its relation to the pathogenesis of SLE were studied. The expression of the costimulatory molecules in PBMC in 30 patients with active SLE and 20 cases of healthy controls was detected by using the techniques of immunofluorescence and flow cytometer. The result showed that the expression percentage of CD28', CD4' CD28 in T cells of PBMC from the patients with SLE decreased significantly as compared with that in healthy control group, while the expression percentage of CD80⁺, CD19⁺ CD80⁺ in B cells was significantly increased than that in healthy control group (P<0.01). It suggested that the abnormal expression of costimulatory molecules B7/CD28 played a role in the pathogenesis of SLE. HU Shaoxian, female, born in 1962, Associate Professor This project was supported by a grant from Hubei Provincial Natural Sciences Foundation of China (No. 2000j053).     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25high Treg上PD-1分子的表达分析

目的：检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者外周血CD4＋CD25highTreg及其程序性死亡受体-1（programmed death-1,PD-1）分子的表达,探讨Treg和PD-1表达在SLE中的意义。方法：流式细胞仪检测SLE患者组、正常对照组外周血CD4＋T细胞中的CD4＋CD25highTreg和CD4＋CD25lowT细胞的比例,及其PD-1分子的表达率。结果：CD4＋CD25highTreg在SLE患者组外周血中CD4＋T细胞的比例（0.63±0.31）%与正常对照组（2.07±0.74）%相比明显降低（P〈0.05）,该亚群细胞上PD-1＋的百分率（24.99±18.65）%与对照组（6.97±1.92）%相比显著增高（P〈0.05）;CD4＋CD25lowT细胞的百分率（13.40±8.47）%及其PD-1＋的百分率（2.70±3.06）%与正常对照组（20.16±11.89）%和（0.43±0.36）%相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：外周血CD4＋CD25highTreg数量下降及其PD-1分子表达上调可能在SLE中有重要意义。     

不同亚型的滤泡辅助性T淋巴细胞在类风湿关节炎中的临床意义

目的：检测类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）患者外周血中滤泡辅助性T（T follicular helper, Tfh）淋巴细胞亚型以及效应型滤泡辅助性T（T follicular helper effector memory, Tfhem）细胞的表达,并探讨二者作为活动性RA患者血液标志物的价值。方法： 流式细胞术分别检测41例RA患者和32例健康受试者的外周血中Tfh（CD3+CD4+CXCR5+CD45RA-）细胞亚型 Tfh1（CXCR3+CCR6-Tfh）、Tfh2（CXCR3-CCR6-Tfh）、Tfh17（CXCR3-CCR6+Tfh）和Tfhem （CD4+CXCR5+CCR7lowPD-1high）的水平。收集入组RA患者的临床资料及实验室指标,分析上述细胞亚型表达水平与RA疾病活动和实验室指标的相关性,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent, ELISA）检测相关血清细胞因子。结果： RA患者外周血中Tfhem细胞的表达率明显高于正常对照组（12.8%±5.7% vs. 8.7%±2.0%, P=0.001）。Tfhem细胞表达水平与RA患者疾病活动指数（disease activity score in 28 joints, DAS28）及红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate, ESR）存在显著相关性（r(DAS28)=0.205, r(ESR)=0.141,P<0.05）,与抗角蛋白抗体（anti-keratin antibody,AKA）、抗核周因子（anti-perinuclear factor, APF）及IgM型类风湿因子（immunoglobulin M rheumatoid factors,IgM-RF）、IgA、IgM及IgG等临床指标则无明显相关性。Tfh2表达水平在RA组显著高于正常对照组（3.002%±0.408% vs. 1.730%± 0.160%, P=0.013）。Tfh2-high组RA患者的IgA［（3.045±0.261）g/L vs.（3.963±0.815） g/L,P=0.172］、IgG［（13.800±0.862）g/L vs.（16.980±0.224） g/L,P=0.161］和IgM［（1.135±0.083）g/L vs.（1.731±0.380） g/L,P=0.140］高于Tfh2 low组,但差异尚无统计学意义（P>0.05）。与Tfh低表达组相比,Tfh2高表达组血清中IL-4［（2.322±0.214）ng/L vs. （3.994±0.751） ng/L, P=0.056］和IL 10［（1.898±0.105） ng/L vs. （3.125±0.880） ng/L, P=0.140］升高,差异无统计学意义（P>0.05）。结论： Tfhem细胞的表达与RA患者病情活动有关,可能在RA的发病过程中有预警作用,并可能成为将来治疗RA的靶细胞;Tfh2及其相关细胞因子在RA患者中明显增加,可能参与了RA的发生和发展。     

系统性红斑狼疮病人外周血浆细胞样树突状细胞中Toll样受体7的表达及其意义

目的:检测系统性红斑狼疮（SLE）病人外周血中浆细胞样树突状细胞（pDC）中Toll样受体7（TLR7）的表达,探讨其意义。方法:选取SLE病人52例（SLE组）和正常健康人28名（对照组）,利用流式细胞术检测外周血TLR7+的pDC细胞在各组中的比例。结果:SLE病人外周血单核细胞（PBMC）中pDC相对计数显著低于对照组（P<0.01）,SLE组和正常对照组髓样树突状细胞水平差异无统计学意义（P>0.05）。感染组SLE病人外周血pDC水平显著低于非感染组（P<0.01）,初发组SLE病人外周血髓样树突状细胞水平低于复发组（P<0.05）,pDC水平与外周血CRP呈负相关关系（P<0.05）。SLE病人外周血PBMC内pDC中TLR7+细胞的比例显著高于对照组（P<0.01）。血液系统受累组pDC内TLR7+细胞比例高于无血液系统受累组（P<0.05）。TLR7+pDC细胞比例在抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性组及阴性组之间差异均无统计学意义（P>0.05）;TLR7+pDC细胞比例和蛋白尿分级呈显著正相关关系（P<0.01）。结论:SLE病人外周血TLR7+的pDC细胞比例显著升高,且与临床病情活动性有一定的相关性。