N-乙酰半胱氨酸对梗阻性黄疸大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对梗阻性黄疸大鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法:30只雄性Wistar大鼠随机平均分为3组:假手术组(SO),胆总管结扎组(BDL),胆总管结扎+N-乙酰半胱氨酸组(BDL+NAC)即治疗组。BDL+NAC组大鼠胆总管结扎术后第1天开始,每天腹腔给予NAC(150 mg/kg,腹腔注射,每天1次),而SO、BDL组大鼠每只每天腹腔给予同等剂量生理盐水。在术后第7天检测血浆总胆红素(TBIL)和门静脉血的内毒素水平;比色法测定回肠末端肠道组织匀浆的髓过氧化物酶(MPO)的活性水平;光镜下观察肠道的黏膜厚度和绒毛密度;免疫组化法测定末端回肠组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。结果:BDL组大鼠较SO组血浆TBIL和门静脉血内毒素水平明显升高(P<0.05);肠道黏膜厚度和绒毛密度降低(P<0.05);末端回肠组织MPO活性水平升高(P<0.05);同时末端回肠组织MMP-9表达水平升高(P<0.05)。与BDL组大鼠相比,BDL+NAC组大鼠门静脉血内毒素水平明显降低(P<0.05);肠道黏膜厚度和绒毛密度增加(P<0.05);末端回肠组织MPO活性水平降低(P<0.05);同时末端回肠组织MMP-9表达水平降低(P<0.05)。结论:NAC能够有效减轻肠道黏膜的损伤,改善梗阻性黄疸大鼠肠道屏障功能,降低门静脉内毒素水平。     

铃蟾肽对梗阻性黄疸肠道的保护作用

目的:研究肠调节肽铃蟾肽(BBS)对梗阻性黄疸大鼠肠道的保护作用。方法:40只雄性Wistar大鼠随机平均分为4组:对照组(C),假手术组(SO),胆总管结扎组(BDL),胆总管结扎+铃蟾肽组(BDL+BBS),BDL+BBS组大鼠胆总管结扎术后第1天开始,每天皮下给予BBS(10μg/kg,皮下注射,每天3次),而C、SO、BDL组大鼠每只每天皮下给予生理盐水。在术后第10天检测血浆总胆红素(TBIL)和门静脉血的内毒素水平;测定回肠末端肠道组织匀浆的脂质过氧化水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力;观察肠道的黏膜厚度和绒毛密度。结果:BDL组大鼠血浆TBIL和门静脉血内毒素水平明显升高(P<0.05);回肠末端脂质过氧化水平升高(P<0.05),而SOD活力降低(P<0.05);肠道黏膜厚度和绒毛密度降低(P<0.05)。与BDL组大鼠相比,BDL+BBS组大鼠门静脉血内毒素水平明显降低(P<0.05);肠道脂质过氧化水平降低(P<0.05),同时超氧化物歧化酶的活力增加(P<0.05);肠道黏膜厚度和绒毛密度增加(P<0.05)。结论:BBS能够降低梗阻性黄疸大鼠肠道的氧化应激状态、减轻肠道黏膜的损伤和门静脉内毒素水平。     

加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠TLR4 mRNA表达的影响

目的探讨加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠TLR4 mRNA表达的影响。方法制作急性阻塞性黄疸大鼠模型,分为7、14、21d3个时段,每个时段分为胆总管结扎＋加味大柴胡汤组（BDL＋MMDB）、胆总管结扎＋生理盐水组（BDL＋NS）、假手术＋生理盐水组（SO＋NS）3个组,每组6只大鼠。在不同时相点,检测内毒素、肝功能及用RT-PCR检测TLR4 mRNA的表达情况。结果胆总管结扎后7、14、21d门静脉血浆内毒素的含量逐渐增加;TLR4 mRNA表达上调;TB增加。加味大柴胡汤治疗7、14、21d后门静脉血浆内毒素的含量下降,TLR4 mRNA表达逐渐下调;TB降低,肝功能损伤减轻。结论加味大柴胡汤可以通过下调TLR4 mRNA表达来降低血浆内毒素水平,从而减轻肝脏损害。     

整合素α4β7的表达对重症胰腺炎大鼠肠道免疫功能的调节作用

目的探讨淋巴细胞归巢受体整合素α4β7的表达与重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）大鼠肠道黏膜免疫功能的关系，分析SAP大鼠肠道黏膜免疫功能改变的可能机制。方法制备大鼠SAP模型，随机分为胰腺炎组和假手术组。分别于造模后24、48和72h取标本检测：鲎试剂法检测大鼠门静脉血内毒素水平、免疫组化方法检测并计数小肠黏膜固有层内CD3、CD4、CD8阳性T淋巴细胞百分数，流式细胞仪检测外用血中淋巴细胞归巢受体α4β7阳性淋巴细胞数的变化。结果SAP组大鼠各时段门静脉血内毒素水平显著升高，回肠末段黏膜固有层CD3^＋,CD4^＋淋巴细胞百分数明显减少，CD4^＋／CD8^＋淋巴细胞比值降低；SAP组24、48和72h大鼠外周血中α4β7阳性淋巴细胞数量显著降低。结论SAP大鼠早期即发生肠黏膜免疫功能明显下降。可能与SAP时大鼠外用血中α4β7阳性淋巴细胞数所占比例降低相关。     

白藜芦醇对梗阻性黄疸大鼠肠道黏膜的保护作用

目的:探讨白藜芦醇对梗阻性黄疸大鼠肠道黏膜的保护作用.方法:30只健康雄性SD大鼠随机分成SO+NS组、BDL+NS组和BDL+Res组,每组10只.BDL+NS组和BDL+Res组均结扎胆总管建立梗阻性黄疸大鼠模型,SO+NS组不结扎胆总管.BDL+Res组给予白藜芦醇(100 mg/kg)灌胃,SO+NS组和BDL+NS组以生理盐水(10.0 mL/kg)灌胃,1次/d.4周后取材,应用比色法检测回肠组织的MDA含量和SOD活性,HE染色法观察回肠组织的病理学改变,测定大鼠回肠黏膜厚度和绒毛长度.结果:BDL+NS组的肠黏膜明显变薄,绒毛萎缩变矮,其黏膜厚度和绒毛长度与SO+NS组和BDL+Res组比较差异有统计学意义(P<0.01);BDL+Res组的回肠组织病理性损伤明显减轻,其黏膜厚度和绒毛长度介于SO+NS组和BDL+NS组之间,与SO+NS组和BDL+NS组比较差异有统计学意义(P<0.01);BDL+NS组肠黏膜组织MDA含量明显高于SO+NS组,而SOD活性低于SO+NS组,与SO+NS组相比差异有统计学意义(P<0.01);给予Res治疗4周后大鼠肠道黏膜组织的MDA含量明显低于BDL+NS组(P<0.01),而SOD活性高于BDL+NS组(P<0.01).结论:白藜芦醇可减轻肠黏膜的损伤程度,使肠黏膜厚度和绒毛长度得到修复,对梗阻性黄疸大鼠肠道黏膜有一定保护作用.     

甘氨酸对梗阻性黄疸大鼠肠道屏障的保护作用

目的:观察甘氨酸(Gly)对梗阻性黄疸大鼠肠道屏障的影响。方法：选择成年雌性Wistar大鼠60只，随机均分为3组：假手术组（A）、胆总管结扎组(B)和胆总管结扎＋甘氨酸组(C)。手术结扎胆总管复制梗阻性黄疸模型。甘氨酸用药方法为术前5 d及术后自由饮用含5％甘氨酸的水溶液，术后第21天处死大鼠，检测血清胆红素水平和肠道匀浆组织NO含量，并观察肠道形态学变化和黏膜厚度、绒毛高度。结果：与假手术组（A）比较，胆总管结扎组（B）血清胆红素水平、肠组织中NO含量均明显增高（P<0.01）, 肠绒毛高度、黏膜厚度均明显 降低（P<0.01）,肠道组织结构损害较重。胆总管结扎＋甘氨酸组(C)肠组织中NO水平较胆总 管结扎组(B)明显降低（P<0.01），肠道组织结构损害较轻。虽然胆总管结扎＋甘氨酸组(C)胆红素水平较假手术组（A）增高（P<0.01），但是肠组织中NO水平、肠绒毛高度、黏膜厚 度均无显著变化（P>0.05）。结论：梗阻性黄疸时，NO水平增高，肠道屏障功能受到严重 破坏，甘氨酸能降低内毒素的生物学效应，减少NO的产生，有助于梗阻性黄疸时的肠道屏障功能保护。     

核因子-κB活化在梗阻性黄疸大鼠肠黏膜屏障功能损害中的作用

目的：探讨NF-КB的活化在梗阻性黄疸大鼠肠黏膜屏障功能损害中的作用。方法：30只体重为230g～260g雄性Wistar大鼠随机分三组：假手术组（sham operation，SH组）（n=10）、梗阻性黄疸组（obstructivejaundice，OJ组）（n=10）、四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂治疗组（OJ＋PDTC组）（n=10）。建立梗阻性黄疸的动物模型，术后3周分批行下腔静脉采血后处死，取胰腺和回肠末段组织。检测血浆内毒素、D-乳酸、TNF—α、IL-6及细菌易位的变化情况，观察各组大鼠回肠黏膜的形态学变化，免疫组织化学S-P法检测回肠黏膜NF．KB的活化。结果：OJ组细菌易位、血浆内毒素、D-乳酸、TNF-α、IL-6浓度比SH组明显升高，差异有统计学意义（P〈O．05）。OJ＋PDTC组细菌易位、血浆内毒素和D-乳酸浓度比OJ组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。SH组回肠黏膜少见NF-КB活化的细胞。而OJ组出现大量核内NF-КB活化，比SH组明显增多，差异有统计学意义（P〈0．05）。OJ＋PDTC组NF-КB活化细胞明显少于OJ组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：NF-КB活化在梗阻性黄疸时肠道黏膜屏障功能损伤中可能起重要调控作用。     

能全素对梗阻性黄疸大鼠肠黏膜免疫功能的研究

目的研究梗阻性黄疸（obstructive jaundice,OJ）幼鼠肠黏膜细胞免疫功能的变化和能全素（Nutrison）喂养对实验鼠肠黏膜免疫功能的保护作用。方法将普通级雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、假手术组、OJ组、OJ＋能全素（OJ＋N）组,每组10只。流式细胞术检测大鼠肠黏膜CD4^＋、CD8^＋淋巴细胞,并计算CD4^＋／CD8^＋的比值。结果OJ组大鼠肠黏膜CD4^＋淋巴细胞百分数与对照组、假手术组和OJ＋N组比较差异有统计学意义（P〈0．05）,OJ＋N组CD4^＋／CD8^＋比值较OJ组显著升高,OJ组CD4^＋／CD8^＋比值明显低于对照组和假手术组（P均〈0．05）。结论OJ显著降低大鼠肠黏膜CD4^＋淋巴细胞百分数,OJ＋N组与OJ组比较,CD4^＋淋巴细胞百分比显著增加。OJ组肠黏膜CD4^＋／CD8^＋比值较对照组和假手术组及OJ＋N组显著降低,肠内营养对肠黏膜免疫功能有保护作用,为临床上应用肠内营养改善梗阻性黄疸患者的肠黏膜局部免疫功能提供了初步的佐证。     

生长激素对阻塞性黄疸大鼠肠黏膜的保护作用及机制

目的 研究生长激素(GH)对阻塞性黄疸大鼠肠黏膜的保护作用和机制。方法 将大鼠随机分为假手术组、胆总管结扎组和胆总管结扎 生长激素组3组。两周后测定3组大鼠门静脉和体静脉血液的内毒素水平；对肠系膜淋巴结(MLNs)和肝脏进行细菌培养；用RT-PCR测定肠粘膜胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA的表达水平；取末端回肠组织观察肠黏膜病理变化。结果 胆总管结扎两周后大鼠发生内毒素和细菌移位，肠黏膜正常结构受损。使用GH后肠黏膜IGF-1 mRNA表达水平增高，上述病变显著减轻。结论 阻塞性黄疸使大鼠肠黏膜屏障功能受损，使用GH可上调IGF-1 mRNA的表达，对阻黄大鼠肠黏膜起保护作用。     

MFG-E8减轻梗阻性黄疸大鼠肠道细胞凋亡和黏膜通透性损害

目的：观察梗阻性黄疸大鼠血浆乳脂球上皮生长因子-8(milk fat globule-EGF factorⅧ,MFG-E8)水平,小肠组织MFG-E8蛋白表达情况;明确补充MFG-E8能否减轻梗阻性黄疸大鼠肠道细胞凋亡和肠黏膜通透性损害。方法：大鼠梗阻性黄疸模型通过手术结扎胆总管（common bile duct ligation,BDL）建立,32只雄性成年SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、梗阻性黄疸组（BDL组）、MFG-E8治疗组（MFG-E8组）、治疗对照组（Vehicle组）。MFG-E8组和Vehicle组于BDL后第1、3、5天腹腔内注射rmMFG-E8(20μg/kg)或等体积的生理盐水;建模后第7天收集血及组织标本,Western blot检测血浆MFG-E8水平和肠道MFG-E8蛋白表达;原位末端转移酶标记（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL）法染色观察肠道细胞凋亡情况,Western blot检测肠道Cleaved Caspase-3水平;异硫氰酸荧光素标记葡聚糖（fluorescein isothiocyan...     

梗阻性黄疸大鼠血浆NO与ET改变及其意义

目的 探讨大鼠梗阻性黄疸时血浆ＮＯ和ＥＴ的改变及其意义。方法 胆总管结扎法建立梗阻性黄疸模型,用放射免疫分析法和比色法测定血浆ＮＯ和ＥＴ的水平,生理记录仪测定心率（ＨＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、心输出量（ＣＯ）。结果 胆总管结扎组（ＢＤＬ组）大鼠血浆ＮＯ含量明显增高,ＥＴ含量下降,平均动脉压（ＭＡＰ）下降,心率（ＨＲ）减慢,心输出量（ＣＯ）增加,与ＳＯ组、Ｎ组相比,ＳＯ组与Ｎ组之间差异不明显。结论     

阻塞性黄疸大鼠肝功能和病理形态学研究

目的:探讨胆管阻塞对大鼠肝脏功能和病理形态学的影响.方法:60只健康雄性SD大鼠随机分为6组:胆总管结扎组(BDL,n=50)和假手术组(n=10,仅游离胆总管不予结扎).BDL组据结扎持续时间又分为BDL3、BDL7、BDL14、BDL28和BDL42组(每组10只),分别于术后第3、7、14、28、42日测定血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)、谷丙转氨酶 (ALT)等肝功能指标,并观察肝脏组织病理形态.假手术组于术后7 d行上述检测.结果:与假手术组相比,BDL组大鼠肝脏功能指标明显改变,血清TBIL、DBIL、TBA值在阻塞早期(BDL3 或BDL7 组)为最高,后呈下降趋势,至实验末期(BDL42组)时仍高于对照组;ALT等酶学指标也有类似变化.BDL组大鼠的主要病理形态学改变为肝内小胆管增生和肝纤维化.结论:大鼠肝脏功能阻塞早期即发生明显的损害,机体可产生一定的代偿以改善肝功能,但持续存在的胆管阻塞最终导致肝纤维化.大鼠阻塞性黄疸期内病理形态学的改变显示其肝功能测定值并不能反映其肝脏组织的实际损害程度.     

乌司他丁对梗阻性黄疸肠粘膜屏障功能影响的实验研究

目的 探讨梗阻性黄疸对肠粘膜屏障功能的影响及乌司他丁(UTI)的保护作用.方法 取雄性SD大鼠72只,随机均分为假手术组(A组)、梗阻性黄疸组(B组)、UTI干预组(C组),每组又分术后3、5、7、10 d4个时相.采用胆总管结扎法建立梗阻性黄疸模型.C组从术后第1天始每天腹腔注射UTI 40 000IU/kg,A组和B组用等量生理盐水作对照.检测各时相肝功能,血浆内毒素,取肠系膜淋巴结、肝、脾组织行细菌培养,光镜观察末端回肠粘膜形态改变,并用病理图像分析系统测量肠绒毛高度及粘膜厚度.结果 各时相肝功能指标、血浆内毒素B组较A组升高(P＜0.01);C组较B组降低(P＜0.01);血浆内毒素C组较A组术后3 d时相差异无统计学意义(P＞0.05).细菌移位率B组较A组升高(P＜0.01);C组较B组降低(P＜0.05);C组与A组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).B组术后第3天即见肠粘膜受损改变,随时间推移进行性加重;C组较B组肠粘膜损害明显减轻.B组各时相小肠绒毛高度、粘膜厚度均低于A组(P＜0.01);C组则较B组升高(P＜0.01或P＜0.05);C组较A组术后3 d时相差异无统计学意义(P＞0.05).结论 梗阻性黄疸早期即可导致肠粘膜屏障功能受损,且随时间延长进行性加重;UTI对梗阻性黄疸时受损的肠粘膜屏障功能具有保护作用,对早期病变效果更好.     

异甘草酸镁对梗阻性黄疸肝损伤的保护机制研究

目的 探讨异甘草酸镁对梗阻性黄疸大鼠肝脏损伤的保护作用及机制.方法 雄性SD大鼠30只随机分成3组:假手术+生理盐水组( SO+NS)、胆总管结扎+生理盐水组(BDL+NS)和胆总管结扎+异甘草酸镁治疗组( BDL+MgIG),每组30只.SO+NS组和BDL+NS组以生理盐水腹腔注射,BDL+MglG组以异甘草酸镁腹腔注射,于14d处死大鼠,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和直接胆红素(D-Bil),RT-PCR检测TNF-α mRNA的表达,免疫组织化学检测NF-κB/p65蛋白表达.结果 BDL+NS 组血清ALT、AST和D-Bil指标明显升高.相对于BDL+NS组,BDL+MgIG组血清ALT和AST明显减轻,D-Bil指标变化不明显;TNF-α mRNA和NF-κB/p65表达在梗阻性黄疸组相对于假手术组明显增强.结论 异甘草酸镁可以有效降低梗阻性黄疸血清转氨酶水平,对TNF-α活性升高有明显的降低作用,对肝功能有明显的保护作用.     

TGF-β1在梗阻性黄疸大鼠胆总管中的表达

目的:探讨TGF -β1在梗阻性黄疸大鼠胆总管中的表达.方法:监测对照组(假手术组)、梗阻性黄疸大鼠1天、7天、15天、23天、30天共计5个时间点取大鼠梗阻段胆管壁的炎症水肿程度及转化生长因子β1(TGF-β1)在胆道损伤后不同时期的表达强度.结果:胆总管完全梗阻的情况下,随着时间的增加,胆管壁炎症水肿程度在术后初期逐渐增加,23天达到高峰,后逐渐下降.胆管壁的TGF -β1表达量在30天内逐渐增加.结论:胆道损伤后,7天内胆道炎性水肿程度迅速增加,如不行手术干预,胆道狭窄程度会逐渐加重,直至23天后才有所缓解,但随着瘢痕的增生胆管壁会逐渐加厚,导致胆道壁永久性狭窄.     

部分门静脉动脉化对梗阻性黄疸大鼠肝门部胆管的影响

目的探讨部分门静脉动脉化重建胆管血流后对梗阻性黄疸大鼠肝门部胆管、肝功能及胆管上皮的影响。方法40只大鼠随机分为对照组（A）、梗阻性黄疸5d行胆管再通组（B）、梗阻性黄疸5d行胆管再通＋肝动脉结扎组（C）、梗阻性黄疸5d行胆管再通＋部分门静脉动脉化组fD）,每组10只。分别于术后1周应用HE染色观察胆管病理学改变,检测血清ALP、GGT变化,TUNEL染色观察胆管上皮细胞凋亡及坏死情况。结果A组大鼠肝门部胆管病理学检查未见异常改变;B组大鼠肝门部胆管病理学检查见少量急慢性炎症细胞浸润,少部分胆管上皮细胞脱失;C组大鼠肝门部胆管可见大量急慢性炎症细胞浸润,胆管上皮细胞多量胞质空泡化改变,大量胆管上皮脱失,可见胆管壁坏死,胆管上皮细胞凋亡指数显著升高;D组大鼠肝门部胆管可见少量炎症细胞浸润,散在数个胆管上皮细胞空泡化,少部分上皮脱失,凋亡指数与B组比较无统计学差异。结论梗阻性黄疸情况下行肝动脉结扎会导致肝门部胆管严重的缺血缺氧改变,甚至胆管壁坏死,部分门静脉动脉化明显减轻肝总动脉结扎对梗阻性黄疸大鼠肝门部胆管的损害。     

结扎阻塞性黄疸大鼠肝动脉对肝细胞凋亡影响

目的 通过比较阻塞性黄疸大鼠行胆肠内引流时,切断肝固有动脉与不切断肝固有动脉动物模型的血清胆红素、肝脏病理形态学改变,以及肝细胞凋亡率改变,初步探讨阻塞性黄疸大鼠行胆肠内引流时结扎或切断肝固有动脉的安全性和可行性及其机制.方法48只雄性SD大鼠,随机分为A、B、C、D4组.结扎大鼠胆总管,建立阻塞性黄疸模型,7d后行胆...