聚合酶链反应检测泌尿系结核患者尿中结核杆菌

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对３４例泌尿系结核病人的２４小时尿液标本进行结核杆菌染色体中３３６－ｂｐ重复序列ＤＮＡ片段的扩增检测，阳性率为９４．１％。ＰＣＲ检测２４小时尿样中结核杆菌比尿沉淀物涂片法找抗酸杆菌（阳性率５６％）及结核杆菌快速培养法Ｂａｃｔｅｃ培养结核杆菌（阳性率７０．６％）更敏感。我们还用ＰＣＲ、涂片法、Ｂａｃｔｅｃ培养法检测了１０例非泌尿系结核者中结核杆菌，阳性结果分别为０、０、３     

PCR检测肺结核病人外周血中结核分枝杆菌

为了解ＰＣＲ检测外周血中结核分枝杆菌ＤＮＡ对肺结核诊断的价值，采用ＰＣＲ检测了１９０例可疑肺结核病人外周血中结核分枝杆菌ＤＮＡ，并用涂片镜检和培养法检测了这些病人痰中结核分枝杆菌。结果肺结核病人外周血ＰＣＲ阳性率（４４％）明显低于培养法（８０．０％），与涂片法相当（４６．８％）；非肺结核病人外周血ＰＣＲ阳性率为１６．２％（５／３）。ＰＣＲ检测外周血结核分枝杆菌ＤＮＡ诊断肺结核的应用价值有限，对急性     

支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌检测的方法比较

目的：用刷片、集菌、培养、聚合酶链反应等四种方法检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中结核分枝杆菌，对其结果进行比较。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法对４６例肺结核患者及３２例非结核病患者的标本进行检测，并与刷片、集菌、培养法比较。结果：ＰＣＲ的敏感性显著高于刷片、集菌、培养法。结论：支气管肺泡灌洗液ＰＣＲ结果阳性，可作为早期诊断结核病的重要指标。     

精液结核菌基因PCR检测诊断附睾结核

目的：探索诊断附睾结核既简便、灵敏度高、特异性又好地方法。方法：精液ＴＢ－ＰＣＲ、尿沉淀物ＴＢ－ＰＣＲ和精液结核菌培养。结果：诊断附睾结核，精液ＴＢ－ＰＣＲ较尿沉淀物ＴＢ－ＰＣＲ和精液结核菌培养的阳性检出率显著提高（Ｐ〈０．０１）。结论：ＰＣＲ检测精液结核菌基因对诊断早期单纯附睾结核疾病有重要临床意义。     

肺结核、肺癌患者外周血结核分枝杆菌及其L型的检测方法

目的：建立检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型的简便方法,并对其临床应用进行评价。方法：将红细胞裂解后离心检测,建立ＰＣＲ法、直接培养法、溶血离心培养法、溶血离心涂片法和滴片法。结果：１３例肺结核和２５例肺癌患者中,肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌ＰＣＲ检测的阳性数为８例中３例和１１例中３例;结核分枝杆菌及其Ｌ型直接培养法总阳性率为１７．６５％,溶血离心涂片法、溶血离心培养法、滴片法的总阳性率分别为９．５２％、４１．１８％和５８．８２％;肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌以Ｌ型为主,表现为抗酸或非抗酸。结论：肺结核和肺癌患者外周血存在结核分枝杆菌及其Ｌ型,并以Ｌ型为主;溶血离心培养法和滴片法结合免疫酶染色可常规用于检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型。     

PCR早期诊断结核性胸膜炎的临床价值

目的探讨ＰＣＲ—ＴＢ－ＤＮＡ在结核性胸膜炎早期诊断的临床价值。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对４８例结胸胸水进行结核菌ＤＮＡ检测，同时检测胸水结核菌、结核抗体及皮肤ＰＰＨ试验，并设２６例非结核性胸水作对照组，进行上述指标测定。结果４８例结核性胸水涂片抗酸染色、皮肤ＰＰＤ试验、结核抗体和ＰＣＲ检测阳性率分别为８．３３％、２０．８３％、８１．２５Ｍ和６８．７５％，后二者显著高于前二者（Ｐ均＜０．０１），而且，ＰＣＲ阳性结果出现早于结核抗体。结论ＰＣＲ对结胸胸水有早期病原学诊断价值。     

结核抗体与结核菌DNA联合检测对结核性膜炎的诊断价值

为观察胸水结核抗体与结构菌ＤＮＡ联合检测在结核性胸膜炎中的诊断价值，本文对１３４例不同时进行结核菌涂片，培养、结核菌ＤＮＡ扩增（ＰＣＲ法）及结核抗体（ＥＬＳＩＡ法）的检测。结果显示：７５例结核性胸水中，４项检查的阳性率依次为６．７％、１３．３％、６６．７％，８８．０％。经统计学处理，后２项显著高于前２项。结核抗体与结核菌ＤＮＡ同时阳性４８例，阳性吻合率６４．０％，５９例非结核性胸水中，涂片、培养均     

SRID和PCR法诊断结核病的比较研究

以多聚酶链反应技术（ＰＣＲ）和单向免疫扩散法（ＳＲＩＤ）对１８９例肺内结核病和１１２例肺外结核病患者进行结核杆菌ＤＮＡ检测和活动性结核标记物（ＡＴＭ）检测，结果表明：ＰＣＲ法和ＳＲＩＤ法在诊断结核病方面，二者均具有较高敏感性，阳性率分别为８８．９％和９０．５％．，而假阳性率ＰＣＲ法明显高于ＳＲＩＤ法。提示：检测ＡＴＭ诊断结核病，具有较大实用性。     

PCR反向膜杂交技术检测临床标本中结核分枝杆菌

目的 探讨结核分枝杆菌（TB）PCR反向膜杂交技术的临床应用价值。方法 采用该技术对本院300例确诊结核的或高度怀疑为结核分枝杆菌感染的病人标本、60例非结核住院病人标本进行检测,同时用培养镜检法、常规PCR法作对照试验。结果 PCR反向膜杂交法检出TB菌176例、阳性率（58．7％）,比培养镜检法47例（15．7％）、常规PCR法156例（52．0％）检出率高,而对60例证实无结核分枝杆菌的标本、几种方法检测均为阴性。结论 该技术能快速、敏感和高度特异地检测临床标本中的TB菌。     

五种方法联合检测同时阳性对菌阴肺结核诊断价值的研究

目的：探讨痰聚合酶链反应（ＰＣＲ）ＴＢ－ＤＮＡ、血清中结核分支杆菌胞壁糖脂免疫球蛋白 Ｃ（ＬＡＭＩｇＧ）、卡介苗 免疫球蛋白 Ｇ（ＰＰＤ ＩｇＧ）及结核特异循环免疫复合物（ＳＣＩＣ）检测与结核菌素（ＰＰＤ ０．１ｕ）皮试,联合检测共同阳性 对菌阴肺结核的诊断价值。方法：病材取自初治菌阴肺结核３１例,健康对照组５３例,非结核肺疾病３０例,初治 菌阴肺结核５４例。采用同步检测方法。血清免疫学检测用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）观察各组共同阳性率的变 化,对结果进行分析评价。结果：健康对照组２、３、４、５联阳性率均为０,特异性为１００％;初治菌阳组２、３、４、５联同 时阳性率分别为６７．７％,５８．１％,３２．３％,０％;初治菌阴组２、３、４．５联共同阳性率分别为４５．９％,１８．９％,２．７％, ０％;非结核肺疾病组２、３、４、５联合同时阳性率分别为２１．７％,１３．０％,０％,０％。结论：五种方法联合对健康组２、 ３、４、５联同时阳性检测特异性可达１００％,初治菌阴组阳性检出率２联可达４５．９％,比任何单项方法检出率要高, 由于原五种方法联合检测特异性有所下降,因此该方法更适用于初治菌阴肺结核的诊断,值得推广。     

快速检测结核分枝杆菌γpoB基因突变的研究

目的 :应用PCR SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分枝杆菌γpoB基因突变 ,评价此方法用于结核分枝杆菌利福平 (RFP)耐药性的意义。方法 :以结核分枝杆菌H37Rv为对照、5 0例耐RFP(单耐和多耐 )结核分枝杆菌临床分离株、12例RFP敏感菌株、35例耐RFP肺结核患者痰标本 ,采用PCR SSCP检测痰标本和菌株中结核杆菌γpoB基因突变。结果 :5 0例耐RFP菌株中有 45例PCR SSCP条带与结核分枝杆菌H37Rv条带有明显差别 ,与药敏试验结果做对比 ,PCR SSCP检测敏感性为 90 % ,特异性为 10 0 % ;12例敏感菌株与H37Rv条带一致 ,35份肺结核病人痰标本 ,2 1份痰PCR扩增阳性 ,15份SSCP图谱与H37Rv图谱有差别 ,而用PCR SSCP 2 8份图谱与H37Rv有差别 ,阳性率为 80 %。结论 :PCR SSCP检测结核分枝杆菌γpoB基因突变快速、简便、易行 ,有望用于结核分枝杆菌RFP耐药性的快速测定 ,并将成为直接检测临床标本中结核分枝杆菌耐RFP快速方法     

Taqman荧光探针技术检测结核分枝杆菌

目的：比较Taqman荧光探针技术与常规PCR电泳技术检测结核分枝杆菌的灵敏度及特异性，评价Taqman荧光探针技术（Taqman技术）检测临床标本中结菌的应用价值。方法：应用细菌培养法，常规PCR电泳技术与Taqman技术检测300份临床结核病患者痰标本及50份非结核呼吸系统疾病患者痰标本。结果：细菌培养法检测结核阳性率为112/300；常规PCR电泳技术检测结核菌阳性率为169/300，特异性96%；Taqman荧光探针技术检测结核菌阳性率为141/300，特异性100％。结论：Taqman荧光探针技术是一种全新的PCR分子杂交模式，集PCR扩增、荧光探针杂交、荧光检测一体化，在单一管内完成，简便、快速、防污染、敏感性高、特异性强，是结核病辅助诊断的有效方法。     

BACTECMGIT960培养及分子菌种鉴定技术在脊柱结构诊断中的应用

目的 探讨BACTECMGIT960系统，分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用价值。方法 对31例脊柱结核标本分别应用BACTECMGIT960及罗氏培养基培养，对所得分离株行IS986扩增及16SrRNAPCR-SSCP分析进行菌种鉴定，并与常规方法对照。结果 BACTECMGIT960系统，罗氏培养法分支杆菌培养阳性率分别为83.87%,61.29%，两者平均报告时间分别为11.3d,26.7d；分子菌种鉴定结果与常规方法一致。结论 BACTECMGIT960系统是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法，快速培养与分子菌种鉴定联合应用可能是目前结核病临床细菌学诊断的较佳策略。     

肺结核患者外周血中结核杆菌DNA检测的意义

用ＰＣＲ技术对肺强核患者外周血１０８例和痰９６例中结核杆菌ＤＮＡ进行检测，结果患者外周血和痰中结核杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７７．７８％和５７．２９％；其中５２例患者外周血和痰标本配对同时检测总阳性率达９２．３％，提示外周血结核杆菌ＤＮＡ检测可提高肺结核诊断敏感性和阳性检出率，可作为肺结核诊断有用的指标。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值。方法对181例临床确诊的结核性脑膜炎患者、可疑结核性脑膜炎患者和非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本采用涂片、实时荧光定量PCR 2种方法进行检测,对其结果进行对比分析。结果 181例脑脊液标本中,脑脊液涂片检测阳性率为2.21%(4/181),PCR检测阳性率为12.15%(22/181);脑脊液涂片、PCR法检测51例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为5.88%(3/51)和25.49%(13/51);检测80例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.25%(1/80)和11.25%(9/80),2种方法的阳性检测率比较差异有统计学意义(χ2=10.654,P<0.05)。50例非结核性脑膜炎患者脑脊液标本涂片及PCR检测均为阴性。结论实时荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌具有较高的临床价值,可作为临床结核病检测诊断的有效方法之一。     

膜-反向斑点杂交技术检测肺结核患者肺组织和肺泡灌洗液中的结核杆菌

目的探讨膜-反向斑点杂交技术（RDB）在病理石蜡组织和肺泡灌洗液检测结核杆菌的临床应用价值。方法以97例病理石蜡组织、97例肺泡灌洗液为研究对象,分别以膜-反向斑点杂交、实时荧光PCR（RT—PCR）、抗酸染色三种方法检测结核杆菌,对三种方法进行方法学评价。结果结核组病理石蜡组织、肺泡灌洗液三种方法检测的总阳性率分别为：抗酸染色为32．8％,RT—PCR阳性率为82．8％,RDB阳性率为89．9％,两两比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,对照组三种方法检测结果均为阴性;三种结核杆菌的检测方法的方法学评价,RDB灵敏度（90．6％）、约登指数（0．91）、符合率（93．9％）、阴性预测值（85．0％）均较好。结论膜-反向斑点杂交技术在病理石蜡组织和肺泡灌洗液结核杆菌的检测上有很高的临床应用价值,值得临床推广应用。     

应用PCR方法扩增IS6110保守片段快速鉴定结核分支杆菌

目的：了解PCR方法快速鉴定结核分支杆菌的可靠性，探索快速诊断结核病的实验方法。方法：应用PCR方法扩增149株结核分支杆菌临床分离株的IS6110保守片段，并与结核分支杆菌H37Rv标准株进行比较。结果：149株临床分离株中，140株可以扩增出与结核分支杆菌H37Rv标准株相同的123bp DNA片段(敏感性达93．9％)，而阴性对照均不能扩增出该片段。结论：应用PCR方法扩增IS6110保守片段来鉴定结核分支杆菌，结果准确可靠，且具有方便和快速等优点，有较大的临床应用价值。     

实时荧光定量PCR 法在检测血浆结核杆菌DNA 的应用

目的:探讨实时荧光定量PCR 法在检测血浆结核杆菌DNA 的应用及价值.方法:以我院确诊为结核病且未经治疗的患者392 例作为实验组,同时选取健康体检人群100 例作为对照组.分别对两组患者取静脉血,并对其血浆中结核分枝杆菌DNA 采用实时荧光定量PCR 法进行检测,同时对实验组患者进行痰涂片检查.结果:对照组患者实时荧光定量PCR 法检测全为阴性;实验组患者采用痰涂片检查,结果显示有80 例为阴性,其实时荧光定量PCR 法检测结果显示,痰涂片阳性的患者全为阳性,其阴性患者中有24 例为阳性,在对阳性患者抗痨治疗后有12 例患者转为阴性.实验组患者MTB DNA 为1.76×109 copies/mL.结论:本实验表明结核患者血浆中存在MTB DNA,采用实时荧光定量PCR 法可有效的对痰涂片阴性以及无痰患者进行诊断,有较好的利益价值.     

聚合酶链反应在结核病诊断上的应用研究

本文运用ＰＣＲ检测技术，对５５例正常人，３５例非结核性肺部疾病患者，１４６例肺结核病人作对照，用抗酸染色法以及分枝杆菌培养法作对比分析，检测结果为ＰＣＲ检测法阳性率明显高于涂片和培养法，特异性为９７．８％，敏感世为８０％。由于其方法简单，检测速度快，灵敏度高，为结核病的诊断和鉴别诊断提供可靠的依据。