激动线粒体乙醛脱氢酶2可降低高糖诱导的A549细胞炎性小体生成

目的探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对高糖诱导的A549细胞炎性小体生成的影响。方法 25 mmol/L高糖完全培养基体外培养肺泡上皮A549细胞,实验分为4组:对照组,ALDH2激动剂20μmol/L Alda-1组,ALDH2阻断剂60μmol/L Daidzin组,20μmol/L Alda-1+60μmol/L Daidzin组。干预处理24 h后,四甲基噻唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测细胞增殖活力,二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)荧光染色检测细胞活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测ALDH2及炎性小体主要成员核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)蛋白的表达。结果与对照组相比,Alda-1特异性激动ALDH2后,细胞增殖活力无明显变化,细胞ROS水平和细胞迁移率均明显降低(P<0.05),ALDH2蛋白表达增加(P<0.05),炎性小体主要成员NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05);Daidzin特异性阻断ALDH2后,细胞增殖活力、细胞ROS水平、细胞迁移率、ALDH2蛋白和ASC蛋白表达无明显变化,NLRP3蛋白表达明显升高(P<0.05),caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与Alda-1组相比,Alda-1+Daidzin组细胞增殖活力及ROS水平无明显变化,细胞迁移率明显增高(P<0.05),ALDH2蛋白表达降低(P<0.05),NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显增高(P<0.05)。结论提高ALDH2在肺泡上皮A549细胞中的表达可减轻高糖诱导的细胞炎症反应,可能是通过降低细胞ROS水平、降低炎性小体的表达来实现。     

肺癌组织survivin mRNA的表达及其与预后的关系

目的:探讨生存素(survivin)mRNA在肺癌组织中的表达与临床病理及其预后的关系.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测41例肺癌患者、9例良性肺疾病患者手术标本中的survivin mRNA表达,并随访2年,将其表达及表达强度与临床病理特征进行相关分析.结果:肺癌患者手术标本癌组织中survivin mRNA表达的阳性率(70.7%)均高于癌旁正常组织(17.1%)和良性肺疾病患者组织survivn mRNA表达的阳性率(1/9)(P＜0.005);癌旁正常组织与良性肺疾病组织survivinmRNA表达的阳性率差异无显著性(P＞0.05);survivinmRNA在肺癌组织的表达及表达强度与年龄、性别、病理分型、病理分级、解剖部位分型及淋巴结和(或)不同肺叶及远处转移均无明显关系(P＞0.05),但与预后有明显关系(P=0.001 8).结论:肺癌组织检测survivin mRNA表达可以作为肺癌诊断的特异性分子标志物之一,且可独立作为预测肿瘤的预后.     

米诺环素抑制小鼠肺癌生长、转移及抗血管生成的研究

目的:观察米诺环素(MC)对小鼠肺癌生长和转移及肿瘤血管生成的影响.方法:用T739小鼠肺癌模型,分别腹腔注射(ip)MC、环磷酰胺(CTX)、生理盐水(NS)并分成3组,检测小鼠肺癌移植瘤体积达500mm3所需时间(肿瘤生长延迟时间)、瘤重、肺转移灶数,并用免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果:与NS组相比,MC组小鼠肺癌移植瘤的肺转移灶数和VEGF的表达均显著降低,肿瘤生长延迟(P＜0.01);MC与CTX合用作用更为显著(P＜0.01).结论:MC可抑制小鼠肺癌移植瘤的生长和转移,其作用机制与抑制VEGF的表达、抑制血管生成有关.     

凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察

目的：探讨凋亡：抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用，探讨其在抗癌方面的作用。方法：①实验于2002-08／2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组：空白对照组，脂质体10mg／L组（仅加空脂质体），NSODN 500nmol／L组（该3组均为对照组），survivin反义寡核苷酸500nmol／L组，bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组（分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸，48h后收取细胞进行以下检测）。②在脂质体介导下，以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1，于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数：（静止期／DNA合成前期）占整个细胞周期的百分比；增殖指数=（DNA复制期＋合成后期／有丝分裂期）占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后，用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数，锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。（3）计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果：①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后，出现生长抑制和细胞凋亡，细胞survivin mRNA明显下调，反义寡核苷酸500nmol／L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62．72％和67．43％。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用；联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64．9％，优于单独应用（单用bcl-2反义寡核苷酸为34．2％）（P〈0．01），两药相互作用指数为0．708。锥虫蓝拒染实验显示，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组细胞死亡率为62．1％，高于两药单用时的31．4％和41．4％。流式细胞仪检测凋亡显示，与各对照组相比，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡，凋亡率分别为43．6％和30．7％，两者联用凋亡率提高到58．6％（p〈0．01）。结论：①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达，并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。     

经纤支镜微波凝固治疗中央型肺癌的实验及临床研究

目的:研究微波治疗中央型肺癌的安全性和治疗效果.方法:家犬12只,用不同能量微波烧灼气管壁后观察犬的呼吸情况,1～8周分别处死,光镜和电镜观察家犬气管烧灼部位的病理变化和愈合过程.选择中央型肺癌患者90例,均有肺不张和呼吸困难,分为微波联合化疗组(治疗组)和单纯化疗组(对照组),观察患者症状的改善及胸片和胸部CT的变化,同时测定患者血液中自然杀伤细胞(NK细胞)的活性及淋巴细胞转化率.结果:微波凝固烧伤后所有犬呼吸均正常,随后1～8周气管受灼伤部位迅速修复.治疗组所有患者症状减轻,其中35例完全复张,8例部分复张,2例无效.同时血液中NK细胞活性增加(P＜0.01).对照组仅8例部分复张,NK细胞活性降低.结论:小于65 W15 s微波凝固治疗中央型肺癌是安全有效的,可显著减轻气道阻塞症状,并提高患者免疫力.     

热休克蛋白70及其在支气管哮喘中的研究进展

热休克蛋白为一类广泛存在于各种生物体的应激蛋白,其高度的保守性及“分子伴侣”功能已为人们所认识。热休克蛋白70为热休克蛋白家族在细胞内含量最多且最保守的一类。近年来,越来越多的研究表明热休克蛋白70在支气管哮喘的免疫及炎症中发挥重要作用,但确切机制尚未明了,仍待进一步的研究探索。     

血管内皮生长因子在肺癌中的研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是目前发现的最重要的血管刺激因子.在恶性肿瘤中,VEGF表达明显高于正常组织,并通过刺激肿瘤血管和淋巴管的生成进而促进肿瘤的生长、转移.因此,针对VEGF的靶向治疗一直是最近的研究热点.而对VEGF的自分泌机制以及上游调控...     

肝素、低分子肝素的抗肿瘤作用研究进展

肝素、低分子肝素是临床常用的一种抗凝药物.近年来研究发现,其还具有多种生物活性和临床用途,包括抗血管生成及抗肿瘤作用等.肝素、低分子肝素可通过改变肿瘤细胞的细胞和分子学环境而干预肿瘤的发展,例如,肝素、低分子肝素具有抗肿瘤细胞增殖作用,抑制血管内皮细胞增殖和抑制血管形成,通过抑制乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶等酶的活性及作...     

支气管镜介入技术在外周肺病变中的应用

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因,肺癌的治愈率很低,不仅因其自身攻击性,还因对肺癌筛查的忽视。随着肺部筛查手段的不断进展,肺外周病变的检出率逐渐提高,当前对外周肺病变进行诊断的最常用方法是经支气管行支气管镜检查或计算机断层扫描（computed tomography, CT）引导下经皮穿刺针吸/活检,然而对于外周肺病灶,支气管镜检查有较低的诊断率,经皮穿刺检查有较高的气胸发生率,因此,使用安全、微创的方法对外周肺病变进行组织确诊是临床工作者将面临的挑战。新型支气管镜介入诊断技术已逐渐用于临床,这些技术可有效提高外周肺病变的诊断率,缩短诊断时间,使患者获得及时有效的治疗。本文将现有的技术进行简要综述以帮助临床医生尝试应用这些微创技术。     

端粒、端粒酶与肿瘤关系研究进展

端粒是一种ＤＮＡ－蛋白质复合体,位于真核生物染色体末端,维持染色体的稳定,保证线性ＤＮＡ完整复制。端粒酶是一种特异的染色体末端转移酶,近年来研究发现,端粒酶活性及端粒的稳定与恶性肿瘤发生相关。恶性肿瘤是由破坏细胞正常生长调控的多种基因突变引起,是一个多步骤、多阶段的过程。近年研究发现,在大多数人体恶性肿瘤细胞中可检测到端粒酶活性,而在正常体细胞中一般端粒酶阴性（生殖细胞、造血干细胞等除外）。端粒酶与肿瘤之间的高度相关性使之成为目前肿瘤研究的新热点。端粒酶抑制及检测可能有潜在的临床治疗及诊断价值。本文就此作一综述。