结核分枝杆菌特异性蛋白片段Rv3388和6种特异抗原在结核抗体检测中的应用价值

目的 对结核分枝杆菌( MTB) PE家族的所有成员的结构进行分析,预测其抗原表位,截取Rv3388蛋白的优势抗原片段,对重组Rv3388蛋白及其它6种MTB特异性抗原进行评估,探讨不同结核特异性抗原与血清抗体的反应模式,评价血清学检测在结核病诊断中的价值. 方法 利用基因合成技术重叠延伸PCR扩增Rv3388蛋白637~731位的编码基因片段, 原核表达并纯化重组蛋白pET32a/Rv3388637-731 ,将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法对该抗血清进行免疫原性分析. 同时对这7种MTB特异性蛋白的特异性及敏感性进行评价. 结果 重组蛋白pET32a/Rv3388637-731在大肠杆菌中的表达量占全菌蛋白的80%,ELISA显示有较强的免疫原性. 7 种 MTB特异性抗原具有不同的反应模式,单个抗原检测敏感性较差. 结论 对MTB PE家族的蛋白结构分析,表达并纯化重组蛋白pET32a/ Rv3388637-731 ,7种蛋白在血清抗体检测中具有抗原互补性,不同抗原与机体反应存在不同反应模式,提高结核抗体检测敏感性应多种抗原联合检测.     

产前筛查中位数和体重修正结果的临床意义

目的 探索合肥妇幼保健院产前筛查实验室中位数修正和体重修正结果.方法 在合肥市妇幼保健院参加产前筛查且孕周为14～20+6周的孕妇.选择甲胎蛋白、游离人绒毛膜促性腺激素作为血清标志物,采用时间分辨技术,统计中位数和体重中位数并分析结果.结果 2T-Risk软件计算阳性率为2.76%,换用中位数后筛查阳性率为5.03%,...     

荧光定量PCR法和巢式PCR法检测新生儿脐血人巨细胞病毒DNA的比较

目的 比较荧光定量PCR法和巢式PCR法在检测新生儿人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染中的灵敏度,为HCMV先天性感染的快速特异性检测提供实验依据.方法 随机收集36例脐血标本,分离单核细胞,提取总DNA,进行巢式PCR和荧光定量PCR检测.结果 巢式PCR法检测HCMV糖蛋白(gB) DNA的阳性率为22.2%(7/...     

葛根素对烫伤大鼠心肌损害的保护作用

目的探讨葛根素对烫伤大鼠心肌损害的保护作用及机制.方法采用制作30% TBSA Ⅲ度烫伤大鼠模型,随机分为复苏组(40只),治疗组(40只),另取8只作为伤前对照.于烫伤后1、3、6、12、24 h各取静脉血,测心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,另取大鼠心脏作形态学检查.结果复苏组及治疗组cTnT及TNF-α的含量高于对照组,治疗组低于复苏组(P<0.05).电镜显示,伤后24 h,治疗组心肌组织损伤程度较复苏组减轻.结论葛根素对大鼠烧伤后心肌损害有一定的保护作用.     

己烯雌酚对肿瘤生长,转移的影响及机制探讨

目的：研究己烯雌酚（ＤＥＳ）对实验性肿瘤转移的影响。方法：利用自发性Ｌｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）及实验性Ｂ１６黑色素瘤（Ｂ１６Ｍ）转移模型研究ＤＥＳ对肿瘤生长、转移的影响。结果：发现预先用ＤＥＳ处理的小鼠对其移植的ＬＬＣ生长和自发性肺转移均有抑制作用，且ＤＥＳ剂量与肿瘤的生长、转移呈直线负相关（ｒ〉０．８０，Ｐ〈０．０１）；Ｂ１６Ｍ实验性肺转移也明显减少；小鼠接种ＬＬＣ后给予ＤＥＳ对ＬＬＣ也有抑制作用     

用ELISA检测不育者抗精子抗体

血清、精浆或宫颈液中存在的抗精子抗体(ASA)可导致不育。本文测定了不育者血清中的ASA,并对ELISA及Kibrick两种检测法进行了比较,现将结果报告如下.     

T7噬菌体展示文库筛选肺癌早期检测分子标志群

目的从肺癌T7噬菌体展示文库筛选出能用于肺癌早期检测的分子标志群。方法亲和筛选肺癌T7噬菌体展示文库,对纯化后的富集肺癌相关肽的文库进一步行两轮ELISA检测,PCR扩增阳性噬菌体插入片段,测序后经过NCBI上的BLAST序列比对。结果筛选出13个有意义噬菌体,测序结果显示1个为未知功能的新基因,其余的均已确定与癌症相关;且13个基因中包含有三组相同的基因。结论从T7噬菌体构建的肺癌cDNA文库中筛选出的一组阳性噬菌体表达的抗原,可能是潜在的肺癌诊断分子标志群。     

IL-15对HaCaT细胞增殖的影响及机制研究

目的观察白介素-15(IL-15)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖的影响及其可能机制。方法培养HaCaT细胞,不同剂量IL-15刺激不同时间后,MTT法分析IL-15对HaCaT细胞增殖的影响。Western blot分析IL-15在HaCaT细胞中激活的信号通路:丝裂原蛋白活化激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)和磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)。在IL-15刺激HaCaT细胞前1h,分别加入MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT信号传导特异性抑制剂(PD98059和LY294002)以阻断IL-15激活的相关信号通路,分析阻断剂对IL-15调控HaCaT细胞增殖的影响。结果 MTT分析结果显示:IL-15显著促进HaCaT细胞增殖,且具有时间及剂量依赖性;信号通路分析揭示IL-15能够增加pERK1/2及pAKT的水平;使用阻断剂的研究显示IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径发挥其促进增殖作用。结论 IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT信号途径促进HaCaT细胞增殖。