H5亚型禽流感病毒单抗-生物素捕获ELISA的建立

为制备过敏性哮喘模型，腹腔注射抗原(卵蛋白，OA)致敏豚鼠，2周后使豚鼠吸入雾化卵蛋白激发哮喘发作，以正常豚鼠为空白对照组，比较血、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸细胞及BALF细胞总数及气道反应性，并进行病理学检查以确定动物造模是否能模拟哮喘的病理状态。结果表明卵蛋白激发后，豚鼠的血、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸细胞总数较对照组增高，吸入组胺后气道内压较对照组明显增高，病理学结果显示为嗜酸性炎性浸润。     

氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠肺一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠肺一氧化氮合酶(NOS)表达的影响.方法:40只Brown Norway大鼠随机分为对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)、氯胺酮3组(K3组),每组8只.A组用卵蛋白辅以百日咳杆菌菌苗及氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发.K1、K2、K3组大鼠以同样方法致敏,在激发前分别雾化吸入12.5、25.0、50.0 mg/ml的氯胺酮.C组注射和雾化吸入PBS.取肺组织提取RNA,以RT-PCR法分析NOS mRNA的表达,并作肺组织病理学检查.结果:A组肺组织切片显示为急性气道炎症性改变,与A组相比,K1、K2、K3组炎症状态明显减轻.iNOS mRNA的表达与C组比较,A组明显增强,并有显著性差异(P＜0.01),与A组比较,K1、K2、K3组iNOS mRNA表达明显减弱,有显著性差异(K1组P＜0.05,K2组、K3组P＜0.01).K1、K2、K3组间无明显差异.eNOS mRNA各组表达无显著性差异,nNOS在各组呈微弱表达.结论:氯胺酮雾化吸入可抑制卵蛋白所致的大鼠肺iNOS mRNA高表达,并改善肺部炎症,对肺损伤有保护作用.雾化吸入氯胺酮12.5 mg/ml已达到治疗效果.     

氯胺酮雾化吸入对于哮喘大鼠肺泡灌洗液及血清白细胞介素-13浓度的影响

目的:观察氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠肺泡灌洗液及血清白细胞介素-13(IL-13)的影响。方法:雄性无特殊病原体(SPF级)SD大鼠40只,随机分成对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、0.1g/L地塞米松组(D组)及25g/L、50g/L的氯胺酮预处理组(K1和K2组)。A组用鸡卵清蛋白(OVA)吸附氢氧化铝佐剂辅以灭活的百日咳杆菌菌苗注射致敏2次,第2次致敏1周后雾化吸入OVA激发,D组,K1组和K2组用同样的方法致敏,只是在每次激发前给于地塞米松或氯胺酮预处理。C组分别在相同时间注射和吸入生理盐水。所有的大鼠在最后1次激发后24h检测血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-13浓度(ELISA法)。结果:无论在血清或BALF中A组的IL-13浓度均显著高于C组(P<0.05);D组,K1组和K2组的两种IL-13的浓度均显著低于A组(P<0.01或P<0.05),各组分别与C组相应的值比较均没有统计学差异(P>0.05);3组相对应值之间没有显著差异(P>0.05)。结论:两种浓度的氯胺酮雾化吸入均可以降低哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-13的浓度,提示临床应用中不必追求较大剂量。     

麻黄雾化液对过敏性哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞的影响

目的观察麻黄雾化液吸入对过敏性哮喘大鼠肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞（EOS）含量的影响。方法以卵蛋白（OVA）致敏并吸入激发法制备大鼠哮喘模型,在激发前予麻黄液雾化吸入治疗,连续7天治疗后处死大鼠并收集BALF,光镜下行EOS计数。结果与正常对照组比较,模型组大鼠BALF中自细胞总数和EOS计数明显升高（P〈0．01）,麻黄液雾化吸入治疗后大鼠BALF中自细胞总数和EOS计数明显下降（P〈0．01）。结论麻黄液雾化吸入能够降低BALF中EOS含量,减轻哮喘动物模型气道炎性细胞的聚集,抑制炎症反应。     

氯胺酮对哮喘模型大鼠氧化应激的影响

目的:研究氯胺酮对哮喘大鼠氧化应激反应产物及相关蛋白表达.方法:采用鸡卵蛋白(OVA)辅以百日咳杆菌菌苗和氢氧化铝为佐剂注射致敏大鼠.雾化吸人OVA激发.51只大鼠随机分成对照组(C组)鸡卵蛋白组(A组),氯胺酮雾化吸人组(K组),氯胺酮腹腔注射组(V组).C组采用PBS替代OVA进行雾化吸入.A组在激发前给予PBS雾化吸入,K1、K2、K3组大鼠在激发前分别给予 12.5、25.0及50.0 mg/ml浓度的氯胺酮雾化吸入,V1、V2组在激发前分别给予 50 μg/kg 和100 μg/kg 的氯胺酮腹腔注射.取大鼠血清、肺组织.分别测定样本中抗氧化应激能力及氧化应激致炎症下游产物P38蛋白的激活.结果:氯胺酮处理组抗 OH·、O2·-能力所测得值均高于A组,其中 K1、K2、V1组与A组比较差异有显著性(P<0.01),K3、V2组与A组比较差异有显著性(P<0.05).氯胺酮处理组SOD活力明显高于A组,其中K1、K2、V1组与A组比较差异有显著性(P<0.01),K3、V2组与A组比较差异有显著性(JP<0.05),与C组相比,A组的抗氧化应激能力均降低(P<0.01).与C组相比,A组p38的激活程度(pp38/p38)增高(P<0.01).p38的激活程度在氯胺酮处理组均降低于A组,其中K1、K2、V1组与A组比较(P<0.01),K3、V2组与A组比较(P<0.05).结论:氯胺酮雾化吸入和腹腔注射可抑制卵蛋白所致的哮喘大鼠肺氧化应激反应的增高,并抑制p38蛋白的激活.雾化吸入氯胺酮 12.5 mg/ml和腹腔注射50.0 μg/kg已达到治疗效果.     

哮喘气道重塑小鼠模型的构建及病理学特征变化的探讨

目的 构建哮喘气道重塑小鼠模型并观察不同雾化吸入激发时间气道重塑病理学特征的变化.方法 采用卵蛋白(ovalbumin,OVA)腹腔致敏小鼠,1％ OVA雾化吸入激发小鼠,末次激发24 h后处死小鼠以构建致敏小鼠模型.模型组依据雾化吸入激发时间不同,分为2、4、6、8周和10周5组.收集支气管肺泡灌洗液(bronchoveolar lavage fluid,BALF)分类计数嗜酸性粒细胞总数,肺组织切片HE、PAS、Masson观察病理变化.结果 与正常组相比,各激发时长的模型组细胞总数和嗜酸性粒细胞总数均明显增高(P≤0.001),嗜酸性粒细胞浸润,杯状细胞化生均明显加重(P ＜0.001),但是气道基底膜仅在8周和10周组增厚明显(P≤0.036).结论 气道重塑开始于炎症早期,随着激发时间推移而逐渐加重,但各项气道重塑特征呈现的时间段不一致,气道重塑病理特征的形成需约8周的时间激发才能完整呈现.     

臭氧暴露对支气管哮喘大鼠肺功能及炎性细胞的影响

目的研究臭氧暴露对支气管哮喘大鼠肺功能及气道炎症的影响。方法采用随机数表法,将24只雄性SD大鼠分为3组,每组8只,分别为正常对照组、模型对照组、臭氧暴露组。模型对照组采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏,结合OVA持续雾化吸入复制经典哮喘模型;臭氧暴露组在支气管哮喘模型的基础上叠加臭氧暴露。观察记录各组大鼠一般情况,肺功能,支气管肺泡灌洗液(BALF)行瑞氏染色,显微镜下进行炎症细胞分类计数。结果肺功能检测显示与正常对照组相比,模型对照组和臭氧暴露组中心气道阻力(Rn)及气道高反应性(I)升高,差异有统计学意义(P0.05),提示两组均有气流受限及换气功能障碍;模型对照组BALF中炎性细胞总数高于正常对照组,臭氧暴露组高于模型对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论臭氧暴露导致支气管哮喘大鼠肺功能下降,同时导致支气管肺泡灌洗液中炎性细胞增多。     

氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠气道高反应性的影响

目的:观察氯胺酮雾化吸入对哮喘模型大鼠气道高反应性的影响.方法:40只Brown Norway大鼠随机分成对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)、氯胺酮3组(K3组),应用动物体描箱法测定大鼠的气道反应性,采用RT-PCR反应测定核因子-κB(NF-κB)的基因表达,采用免疫组化的方法观察NF-κB在支气管上皮的表达.结果:在乙酰胆碱(ACH)浓度为50、100、200 μg/kg时,K1、K2、K3组呼气阻力(Re)的增长率明显小于A组(P＜0.01);在ACH浓度为50、100、200 μg/kg时,K1、K2、K3组肺动态顺应性(Cldyn)的下降率明显小于A组(P＜0.01).大鼠肺NF-κB p65 mRNA的表达水平和支气管上皮NF-κB阳性细胞率A组显著高于C组(P＜0.05),治疗组K1、K2、K3明显低于A组(P＜0.05).结论:氯胺酮雾化吸入治疗可明显减轻哮喘模型大鼠气道高反应性.     

不同剂量致敏原对幼年大鼠哮喘的影响

目的利用卵清蛋白(OVA)致敏刚断乳的大鼠,建立幼年大鼠哮喘模型,探讨不同剂量的致敏原对幼年大鼠哮喘气道过敏性炎症的影响。方法用低、中、高剂量卵清蛋白致敏大鼠后再雾化吸入同一致敏原从而诱发大鼠哮喘发作,分别观察各组大鼠肺组织病理切片、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数、双抗体夹心酶联免疫吸附试验法检测BALF中OVA特异性IgE(OVA-IgE)和外周血白细胞介素(IL-4)的水平。结果低、中和高剂量组的大鼠较正常对照组均出现气道过敏的异常症状,但高剂量组有明显的腹式呼吸和呼吸短促,且高剂量组大鼠的肺组织病理显示气道炎症较低、中剂量组明显严重,3个致敏组的BALF中细胞总数较对照组均有不同程度增高,高剂量组增高显著(P<0.05)。高剂量组大鼠血清中IL-4和BALF中OVA-IgE较对照组和低、中剂量组均明显增高(P<0.05),中剂量组BALF中OVA-IgE较对照组增高显著(P<0.05)。结论幼年大鼠哮喘模型中的致敏原剂量的大小与哮喘气道过敏性炎症的程度有关,致敏原剂量越大,气道过敏性炎症越明显。     

麻黄水提物雾化吸入对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的观察麻黄水提物雾化吸入对哮喘小鼠气道炎症及白细胞介素-13(IL-13)、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)表达的影响。方法将24只雌性BALB/c小鼠随机分为3组:正常对照组、哮喘模型组、麻黄组,每组8只。除正常对照组用生理盐水外,哮喘模型组、麻黄组用卵蛋白腹腔注射致敏及滴鼻激发建立哮喘模型,麻黄组每次激发前1h予以麻黄水煎液雾化吸入30min,2次/天,连续7d。正常对照组、哮喘模型组用等量生理盐水代替麻黄水煎液雾化吸入,吸入方法和时间同麻黄组。小鼠末次激发24h后,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)和嗜酸性粒细胞(EOS),HE染色观察支气管及其周围组织病理改变,免疫组化法测定支气管肺组织中IL-13、Eotaxin的表达,ELISA法检测IL-13、Eotaxin的浓度。结果与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中WBC、EOS计数,支气管肺组织中IL-13、Eotaxin蛋白表达明显增高,差异均有统计学意义(P<0.01);与哮喘模型组比较,麻黄组小鼠以上各项指标均降低,支气管及其周围组织炎症细胞浸润减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论麻黄水提物雾化吸入能减轻哮喘小鼠气道炎症,抑制支气管肺组织中IL-13、Eotaxin蛋白的表达可能是其抗炎机制之一。     

Effects of aerosolized ketamine on the level of nitric oxide and nitric oxide synthetase in the lung tissue of rat with asthma

Objective： To explore the effects of aerosolized ketamine on the level of nitric oxide and nitric oxide synthetase in the lung tissue in rat asthma model. Methods： Forty SD rats were randomly assigned to five groups： control group （group N）, asthma model group （group A）, two pretreated groups of different concentrations of ketamine （group K1, K2） and dexamethasone group（group D） with eight rats in each group. The rats in group A were sensitized by injection of ovalbumin （OA） together with aluminum hydroxide and bordetella pertussis as adjuvants. Two weeks after the sensitization, aerosolized OA was used to cause asthma. The rats in group K1 and K2 were sensitized with OA as group A , and then exposed to aerosol of ketamine , with the concentration of 25 g/L and 50 g/L respectively. Before using aerosolized OA,the rats in group D were exposed to aerosol of 0.01% dexamethasone .The level of NO2^-/NO3^- in lung tissues, inducible nitric oxide synthetase（iNOS） and constitute nitric oxide synthetase（cNOS） was measured in all groups. Results： The level of NO2^-/NO3^- and the activity of iNOS in lung tissues in group A were signiticantly higher than those in the other groups. The iNOS activity and the level of NO2^-/NO3 ^- in lung tissues were highly positively correlated. Conclusion： NO can induce airway hyperreactivity that may worsen asthma. Aerosolized ketamine can decrease the iNOS expression and reduce the level of NO in the lung tissue in rat asthma model.     

氯胺酮对致敏原诱导哮喘模型大鼠的肺保护

目的观察氯胺酮对哮喘模型大鼠气道高反应性及炎症的影响。方法56只Brown Norway大鼠随机分成阴性对照组（A组）、哮喘模型组（B组）和不同浓度氯胺酮雾化吸入预处理组（C组、D组和E组）及不同剂量氯胺酮腹腔用药预处理组（F和G组）。采用卵蛋白（OVA）辅以百日咳杆菌菌苗和氢氧化铝为佐剂注射致敏大鼠。雾化吸入10mg／ml OVA激发。氯胺酮预处理组大鼠在激发前分别给予12．5mg／ml、25mg／ml或50mg／ml浓度的氯胺酮雾化吸入或50μg/kg,100μg／kg剂量的氯胺酮腹腔注射。A组采用磷酸盐缓冲液替代OVA进行雾化吸入。最后1次激发后24h,测定气道反应性。并取肺组织作诱导性一氧化氮合酶（iNOS）的基因和蛋白表达,一氧化氮（NO）生成量及病理组织学检测。结果（1）B组的呼气阻力（Re）增长百分率的剂量反应曲线向左上移位,而且PC100（Re增长达100％幅度时所需乙酰胆碱的激发剂量）,PC200及PC400值显著低于A组（分别为14．65±1．19vs32．28±1．43,15．17±1．19vs38．91±1．39及16．28±1．18vs56．53±1．38）差异有统计学意义（P〈0．01）。氯胺酮预处理组的Re剂量反应曲线向右下移位,而PC100,PC200及PC400值均明显高于B组（P〈0．05）。（2）B组可见明显的气道炎症性病理改变。氯胺酮治疗组炎症细胞浸润及上皮细胞损伤程度明显减轻,肺间质水肿改善。（3）B组iNOS基因表达与A组相比明显增强（1．00±0．07vs0．48±0．07,P〈0．01）。与B组相比,iNOS基因的表达在C组（0．65±0．07）,D组（0．58±0．09）,E组（0．56±1．00）及F组（0．66±0．06）均减低,差异有统计学意义（P〈0．05）。（4）与A组相比,B组iNOS蛋白表达（0．54±0．08）明显增强（P〈0．05）,而与B组相比,iNOS蛋白表达量在C组（0．20±0．03）,D组（0．18±0．03）及F组（0．21±0．04）均减低,差异有统计学意义（P〈0．05）。（5）B组肺组织NO产量[（0．39±0．04）μmol／g蛋白]显著高于A组（P〈0．01）。肺组织NO产量在C组[（0．19±0．03）μmol／g蛋白],D组[（0．17±0．03）μmol／g蛋白]及F组[0．16±0．04）μmol／g蛋白]明显低于B组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论氯胺酮明显抑制致敏原诱发的肺iNOS的高表达,降低NO的过度产生,从而减轻炎性损伤,抑制气道高反应性,对哮喘模型大鼠具有肺保护作用。     

胰岛素及胰岛素受体在大鼠变应性气道炎症中的作用

目的探讨1型糖尿病与支气管哮喘之间拮抗关系的可能机制以及胰岛素及其受体在气道变应性炎症中的作用。方法将64只雄性SD大鼠随机分为8组,每组8只A组哮喘组;D组糖尿病组;I组胰岛素组;AD组哮喘+糖尿病组;AI组哮喘+胰岛素组;DI组糖尿病+胰岛素组;ADI组哮喘+糖尿病+胰岛素组;C组对照组。通过腹腔注射链脲菌素溶液的方法复制大鼠1型糖尿病模型;皮下注射卵白蛋白,14d后超声雾化吸入卵白蛋白复制大鼠气道变应性炎症反应模型。检测外周血细胞分类、血糖及血清胰岛素水平;收集支气管肺泡灌洗液行细胞计数、分类;HE染色观察肺脏病理变化;用免疫组化方法观察肺脏胰岛素受体的分布;用半定量RT-PCR测定肺组织胰岛素受体mRNA表达。结果糖尿病组血糖显著高于非糖尿病组,A、AI、ADI组大鼠激发后出现以嗜酸性粒细胞及中性粒细胞细胞增高为主的气道炎症反应。AD组气道炎症反应介于有哮喘组与非哮喘组之间。ADI、AI组、A组胰岛素水平(分别为27mIU/L±8mIU/L;83mIU/L±12mIU/L;71mIU/L±12mIU/L),均高于其相应对照(DI、I、C组,分别为15mIU/L±4mIU/L;64mIU/L±9mIU/L;49mIU/L±14mIU/L)。免疫组化显示胰岛素受体广泛分布于肺组织内,A、AI、ADI组肺泡腔内、血管及支气管周围浸润染色阳性细胞明显增多。糖尿病组胰岛素受体mRNA表达显著高于非糖尿病组(0.2588±0.0809vs0.0896±0.0308,P=0.00)。结论低剂量胰岛素可明显增强大鼠气道变应性炎症反应。炎症状态下机体胰岛素分泌增多。气道变应性炎症反应时肺组织内浸润的炎症细胞表面及支气管壁分泌细胞胰岛素受体增多。     

Establishment of Allergic Airway Inflammation Model in Late—phase Response of Sprague—Dawley Rats

Objective To establish allergic airway inflammation model in late-phase airway reaction of Sprague-Dawley (SD) rats. Methods Thirty-six SD rats were randomly divided into three groups-, control group (Group Ⅰ) ,single challenge group (Group Ⅱ ),consecutive challenge group (Group Ⅲ). The rats in Group Ⅱ and Group Ⅲ were sensitized twice by injection of ovalbumin (OA) together with aluminum hydroxide and Bordetella pertussis as adjuvants, followed by challenge with aerosolized OA for 20 min once in Group Ⅱ or one time on each day for one week in, Group Ⅲ. The rats in Group Ⅰ received 0. 9% saline by injection and inhalation. Results Compared with group Ⅰ , there were positive symptoms observed in the group Ⅱ and group Ⅲ; the amount of total leucocytes and eosinophil percentage in brochoalveolar lavage fluid (BALF) significantly increased (P<0.05 or P<0. 01 respectively) in Group Ⅱ or Ⅲ ; histopathologic changes of lung showed acute allergic inflammation changes in Group Ⅱ: Disrupted epitheli     

哮喘大鼠模型肺组织平滑肌肌动蛋白-αmRNA的表达

目的　探讨平滑肌肌动蛋白 (SMA) -α m RNA的表达 ,以了解其在哮喘发病机制中的作用。方法　以卵蛋白雾化复制哮喘模型 ,在激发后 3d、1周及 2周用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测肺部α- SMA m RNA表达 ,同时用图象分析法测量大鼠气道形态学参数。结果　大鼠哮喘激发后 2周开始出现气道平滑肌肌层增厚 ,而α-SMA m RNA在哮喘激发 1周表达升高 ,2周后更加明显 ,α- SMA m RNA表达与气道平滑肌肌层增厚具有一定相关性。结论　哮喘气道重构中既有气道平滑肌的增生肥大 ,又可能有平滑肌表型改变     

椒枝软胶囊对哮喘大鼠血清IL-4表达的影响

目的:探讨椒枝软胶囊对哮喘大鼠血清IL-4水平的影响。方法:将48只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、强的松组和椒枝软胶囊低、中、高剂量组,每组8只。除空白对照组外,以卵蛋白氢氧化铝混悬液腹腔+多点皮下注射,卵蛋白雾化攻击制作哮喘大鼠模型,从第13天起空白对照组和模型组大鼠给予生理盐水10mL/kg灌胃,强的松组大鼠给予强的松溶液10mg/kg灌胃,椒枝软胶囊低、中、高剂量组分别给予椒枝软胶囊溶液315、787.5和1575mg/kg灌胃,共5天,末次给药后48h处死大鼠,留取血清,ELISA法测定各组大鼠血清IL-4水平。结果:强的松组、椒枝软胶囊高、中剂量组血清IL-4水平均低于哮喘模型组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);结论:椒枝软胶囊可能通过降低血清IL-4水平减轻哮喘气道炎症,进而减少气道黏液分泌。     

布地奈德对哮喘气道重塑大鼠骨桥蛋白和mRNA表达的影响

目的探讨布地奈德对气道重塑模型大鼠肺组织骨桥蛋白(OPN)表达的影响及其在哮喘气道重塑中的作用。方法大鼠于第1天和第8天腹腔注射卵清蛋白(OVA)/AI(OH)3,第15天起雾化吸入OVA激发,隔天1次,制备哮喘气道重塑幼年大鼠模型。布地奈德组在雾化吸入OVA前30 min,给予雾化布地奈德混悬液(2ml:1mg)。正常对照组以生理盐水代替OVA。运用彩色医学图像分析系统测量大鼠支气管壁总面积和平滑肌面积,计算平滑肌厚度(Wam)和支气管壁厚度(Wat),通过反转录-聚合酶链(RT-PCR)测定各组大鼠肺组织中OPN的mRNA,运用免疫组化法测定各组大鼠OPN蛋白的表达,并对Wat、Wam与OPN的蛋白和mRNA表达进行相关性分析。结果哮喘组Wat及Wam显著高于对照组,布地奈德组较哮喘组显著降低(P均<0.01)。免疫组化检测结果提示,布地奈德组OPN蛋白的表达高于正常对照组,但显著低于哮喘组,差异具有统计学意义(P均<0.01)。RT-PCR检测结果显示,哮喘组OPN mRNA表达均高于正常对照组,布地奈德组组较哮喘组显著减弱,差异具有统计学意义(P均<0.01)。肺组织中Wat、Wam与OPN的蛋白、mRNA表达均呈正相关。结论布地奈德能显著抑制哮喘大鼠OPN的表达,缓解气道重塑。     

哮喘气道重塑与氧化应激的实验研究

目的探讨大鼠支气管哮喘模型的慢性气道炎症、气道重塑特征以及与氧化应激的关系。方法以卵蛋白为过敏原致敏,反复多次激发以模拟临床反复发作过程,建立大鼠慢性哮喘模型。64只SD大鼠随机分为正常对照组和哮喘组,每组再进一步划分4、8、12、16周4个时间段。观察指标:①肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞计数与分类;②肺组织病理观察:进行支气管周围炎性细胞浸润及杯状细胞增殖评分,测定支气管壁的平滑肌面积、胶原沉积面积,及肺组织TGF-β1的积分光密度值(IOD值);③测定12周大鼠肺组织匀浆MDA含量、SOD活性及肺组织TGF-β1蛋白含量。结果①各时间段哮喘组的BALF细胞计数与正常对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。其中中性粒细胞百分比、黏液指数随时间推移呈增加趋势。②4周哮喘组即有气道管壁增厚、平滑肌增生、胶原沉积增多、管腔变小、TGF-β1的表达增多等气道重塑的特征,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.01),并随时间推移呈增加趋势,以16周哮喘组最明显。③与对照组比较,哮喘组的MDA含量、TGF-β1含量均明显升高(均P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01)。结论通过延长卵蛋白激发时间可以成功制备SD大鼠慢性哮喘气道重塑模型;哮喘气道重塑在早期即出现,中性粒细胞及氧化应激可能参与哮喘的气道重塑。     

慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞性炎症及气道高反应性的影响

目的探讨慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞的募集活化及气道反应性的影响。方法使用卵白蛋白腹腔注射后雾化吸入法制备Wistar大鼠哮喘模型,采用雾化吸入孢子悬液的方式模拟慢性烟曲霉暴露,并设置相应的生理盐水对照组。测定反映大鼠气道反应性的指标Penh值,ELISA法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞介素5（IL-5）、嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）浓度,肺组织切片HE染色观察气道炎症性病理改变,测定嗜酸粒细胞浸润程度。瑞士姬姆萨复合染色计数BALF中嗜酸粒细胞比例。结果烟曲霉可引起哮喘大鼠气道反应性升高及气道嗜酸粒细胞增多,加重哮喘大鼠气道过敏性炎症。烟曲霉暴露组中气道嗜酸性细胞增加与IL-5、Eotaxin水平升高相一致。但烟曲霉对生理盐水对照组大鼠的气道反应性、嗜酸粒细胞及IL-5、Eotaxin水平改变无显著作用。结论烟曲霉孢子雾化吸入可促进IL-5、Eotaxin的生成从而加重哮喘大鼠气道的嗜酸粒细胞性炎症,并可加重气道高反应性。