谷氨酰胺对脓毒症小鼠的保护作用

目的 探讨谷氨酰胺对脓毒症小鼠炎性反应及生存率的影响.方法 昆明小鼠45只,随机分为假手术组(CON)、手术组(CLP)、谷氨酰胺组(GLN),每组15只.采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症模型,术后即刻尾静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg(GLN组)或等体积0.9%氯化钠溶液(CON和CLP组).6 h后每组各取5只.收集血清,腹腔灌洗分离巨噬细胞.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清和巨噬细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-10水平;另外每组各取10只观察术后5 d生存率.结果 CLP和GLN组血清中TNF-α、IL-6、IL-10水平均显著高于CON组(P值分别＜0.05、0.01);GLN组血清TNF-α水平显著低于CLP组(P＜0.05),两组间血清IL-6、IL-10的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).GLN组巨噬细胞中TNF-a、IL-6水平均显著低于CLP组(P值分别＜0.01、0.05),3组问IL-10水平的差异无统计学意义(P＞0.05).GLN组小鼠的存活时间显著长于CLP组(P＜0.05).结论 谷氨酰胺可以抑制脓毒症小鼠的炎性反应,降低其病死率.     

参附注射液对腹腔感染脓毒症小鼠心肌能量代谢的保护作用研究

目的:观察腹腔感染脓毒症小鼠心肌能最代谢情况,用参附注射液进行干预治疗,探讨参附注射液对其能量代谢的保护作用.方法:采用肓肠结扎穿孔法(Cecal ligation and puncture,CLP)复制腹腔感染脓毒症动物模型.83只小鼠随机分为CLP组(感染组)、CLP加参附注射液治疗组(治疗组)和假CLP组(对照组).于造模后6h、12 h及24h分别采用电镜和形态计量学方法观察心肌线粒体形态、数量和膜磷脂定位;酶细胞化学法分析线粒体细胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase,CCO)和琥珀酸脱氢酶(Succinate dehydrogenase,SDH)活性,反相高效液相色谱法测定心肌组织ATP、ADP和AMP含量.结果:感染组小鼠心肌线粒体大最破坏,膜磷脂严重缺失、定位改变;CCO和SDH活性降低,ATP、ADP和AMP含量下降.各时间点治疗组上述各项指标均较感染组显著改善.结论:脓毒症小鼠心肌线粒体结构严重破坏、功能明显下降,参附注射液能有效保护脓毒症小鼠心肌线粒体结构和功能,改善心肌能量代谢.     

ZLN005通过上调PGC-1α表达诱导巨噬细胞的M2型分化减轻脓毒症引起的急性肺损伤

目的:在脓毒症诱导的急性肺损伤(ALI)中探究小分子化合物ZLN005的作用及相关机制.方法:利用盲肠结扎穿孔(CLP)术建立小鼠脓毒症诱导的急性肺损伤模型,并按处理方式的不同将小鼠分为四组,假手术(Sham)组,ZLN005组、CLP组及CLP+ZLN005组;应用RT-PCR、免疫荧光染色及Western blot实验检测各组小鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 共激活因子-1α(PGC-1α)的mRNA及蛋白表达水平;ELISA检测肺泡支气管灌洗液(BALF)中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的含量;HE染色观察各组小鼠肺组织病理组织学损伤;统计学方法分析CLP造模7d后各组小鼠的存活率;体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,转染靶向沉默PGC-1α 的siRNA,RT-PCR及Western blot检测转染效率;利用LPS诱导脓毒症ALI的体外细胞模型,并将RAW264.7细胞分为五组,对照组(NC),ZLN005组,LPS组,LPS+ZLN005+si-NC和LPS+ZLN005+si-PGC-1α;RT-PCR检测各组细胞中M1型巨噬细胞标记物iNOS与MHC-Ⅱ与M2型巨噬细胞标记物Arg1与CD206的mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞中AMPK-α的磷酸化水平(p-AMPK-α/AMPK-α)及线粒体生物发生中关键蛋白NRF1、NRF2和mtTFA的蛋白表达.结果:成功建立小鼠脓毒症诱导的急性肺损伤模型;其中,与Sham组比较,ZLN005组与CLP+ZLN005组肺组织中PGC-1α 的表达水平显著升高(P<0.05),CLP组中明显降低(P<0.05),但CLP+ZLN005组又较CLP组中PGC-1α的表达显著升高(P<0.05);各组小鼠的BALF、HE染色及术后7d的存活率结果显示,与CLP组和CLP+ZLN005组中BALF中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达与肺组织病理损伤水平较Sham组或ZLN005组明显升高(P<0.05),抑炎因子IL-10及术后7d的存活率却显著降低(P<0.05),而CLP+ZLN005组又较CLP组明显改善(P<0.05);在体外细胞实验中,与NC组相比,PGC-1α 蛋白表达在ZLN005组与LPS+ZLN005组明显升高(P<0.05),LPS组显著降低(P<0.05);转染si-PGC-1α 后RAW264.7巨噬细胞中PGC-1的表达被显著抑制(P<0.05);与NC组相比,LPS组、ZLN005+LPS+si-NC组与ZLN005+LPS+si-PGC-1α 组中M1型巨噬细胞标记物的mRNA表达水平明显升高(P<0.05),同时ZLN005+LPS+si-NC组的M2型巨噬细胞标记物的mRNA表达也显著升高(P<0.05),但AMPK-α 的磷酸化水平与线粒体生物发生中关键蛋白的表达均显著下降(P<0.05);而ZLN005+LPS+si-NC组又较LPS组与ZLN005+LPS+si-PGC-1α 中M1型标记物表达显著升高(P<0.05),但M2型标记物与AMPK-α 的磷酸化水平与线粒体生发蛋白的蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论:ZLN005能促进PGC-1α 的表达以促进M2巨噬细胞的极化来保护脓毒症引起的肺损伤,而其相关作用机制可能与ZLN005通过AMP K信号通路促进线粒体生物发生相关.     

清燥救肺汤及其分解剂对肺炎支原体感染小鼠免疫功能影响

目的:观察清燥救肺汤(QJD)及其分解剂对肺炎支原体(MP)感染小鼠IL-4、IFN-γ、相关免疫球蛋白及T细胞亚群表达水平的影响,探讨其对小鼠免疫功能的调节机制。方法:将60只SPF级BALB/c随机分成正常组(A组)、模型组(B组)、QJD全方组(C组)、分解剂I组(D组)、分解剂II组(E组)及阿奇霉素组(F组),每组10只,除正常组外,其余5组进行小鼠MP感染模型处理,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中IL-4、IFN-γ、IgM、IgG,肺泡灌洗液(BALF)中s IgA的含量;采用流式细胞术(FCM)检测小鼠脾脏灌洗液中CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+T细胞水平及CD_4~+/CD_8~+比值变化。结果:MP感染小鼠后,血清中IL-4、IFN-γ水平升高,药物干预后,各治疗组IL-4含量均有所下降,C组作用较D组、E组、F组明显;治疗后IFN-γ含量明显升高,且C组、E组较D组、F组作用效果更为明显(P0.01)。MP感染后,BALF中s IgA、血清中IgG水平较A组均有所升高,药物干预后s IgA、IgG水平均有所升高(P0.05),且C组作用效果更为明显(P0.01);而血清中IgM感染后有轻度升高,但差异无统计学意义。MP感染后,CD_3~+、CD_4~+含量降低,CD_4~+/CD_8~+比值下降,CD_8~+轻度升高;各治疗组CD_3~+、CD_4~+含量均升高,CD_4~+/CD_8~+比值升高,CD_8~+含量降低;其中C组调节作用明显,D组、F组下调CD_8~+作用更为明显,E组上调CD_4~+、CD_3~+作用明显(P0.05)。结论:QJD对MP感染小鼠的免疫功能具有调节作用。     

从p38MAPK途径探讨参附注射液对脓毒症大鼠心功能的影响

【目的】探讨参附注射液对脓毒症大鼠心功能的保护作用及其可能机制。【方法】选用SD雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组、模型组和参附注射液组。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症模型,36 h后取动脉血及左室心肌,检测血清中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1(IL-1)水平,观察心肌组织匀浆上清液磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)变化。【结果】于造模后36 h,模型组大鼠的左心室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(LVFS)情况较假手术组显著降低(P0.05);参附注射液组大鼠心功能情况较模型组显著升高(P0.05),血清中TNF-α和IL-1水平及心肌组织匀浆上清液p-p38/p38MAPK水平较模型组显著降低(P0.05);假手术组上述指标水平与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。【结论】参附注射液对脓毒症心肌损伤具有修复作用,其机制可能与抑制心肌p38MAPK磷酸化,从而减轻该通路的炎症因子释放有关。     

抗CD200抗体对脓毒症小鼠肝脏保护作用及其机制的研究

目的观察CD200在脓毒症小鼠肝脏的表达情况,并进一步探讨抗CD200抗体对脓毒症小鼠肝脏的保护作用及其可能的作用机制。方法构建脓毒症小鼠模型(CLP),将C57BL/6雄性小鼠分为假手术组、脓毒症组(CLP组),每组8只,观察各组小鼠肝脏组织CD200的表达水平;将C57BL/6雄性小鼠分为假手术组,脓毒症组(CLP组)、CLP+同型对照抗体治疗组(Isotype组)、CLP+抗CD200抗体治疗组(anti-CD200组),每组8只。检测各组小鼠外周血氨基转移酶水平、肝脏病理、腹腔灌洗液细菌负荷、外周血TNF-α、IL-6的水平、肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6的mRNA水平、肝脏组织核转录因子-κB(NF-κB)磷酸化水平。结果脓毒症组小鼠的肝脏CD200表达水平明显高于假手术组(P<0.05);anti-CD200组小鼠肝脏组织的坏死程度明显轻于脓毒症组(P<0.05),TNF-α、IL-6水平低于脓毒症组(P<0.05),腹腔灌洗液细菌菌落的水平低于脓毒症组(P<0.05),NF-κB的磷酸化低于脓毒症组(P<0.05)。结论抗CD200抗体可以对脓毒症小鼠肝脏产生保护作用,其可能的机制为抑制NF-κB的磷酸化、减少炎症因子的释放。     

脾多肽注射液对脓毒症患者血清炎症因子及免疫功能的影响

目的:研究了脾多肽注射液对脓毒症患者血清炎症因子及免疫功能的影响。方法:选取重症监护室进行治疗的脓毒症患者30例,按照随机数字法分为对照组和脾多肽组,各15例。对照组采用常规治疗方法,脾多肽组在对照组的基础上使用脾多肽注射液进行静脉滴注。比较两组患者治疗前后的急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)、白细胞计数(WBC)、心率以及相关脏器功能衰谒评分(SOFA)的变化。比较两组患者治疗前后血清炎症因子的变化,包括白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)。比较两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群的变化,包括CD_4~+、CD_8~+和CD_4~+/CD_8~+。结果:脾多肽组的住院时间显著低于对照组(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后对照组和脾多肽组的APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC和心率均显著降低(P<0.05)。治疗后,与对照组相比,脾多肽组的APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC和心率均显著较低(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后对照组和脾多肽组IL-6、TNF-α和CRP均显著较低(P<0.05),对照组和脾多肽组IL-10显著增高(P<0.05)。治疗后,脾多肽组IL-10、IL-6、TNF-α和CRP水平显著低于对照组(P<0.05),脾多肽组IL-10水平显著高于对照组(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后对照组和脾多肽组CD_4~+显著较高(P<0.05),对照组和脾多肽组CD_8~+和CD_4~+/CD_8~+的变化与治疗前相比,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,脾多肽组CD_4~+水平显著高于对照组(P<0.05),脾多肽组和对照组在CD_8~+和CD_4~+/CD_8~+相比,差异无统计学意义(P<0.05)。结论:脾多肽注射液辅助治疗脓毒症,能够改善临床症状,降低住院时间和促炎因子水平以及提高患者的免疫功能。     

参附注射液对脓毒症大鼠心肌组织Bcl-2、Bax表达的影响

目的研究参附注射对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,阐明参附注射液抗脓毒症心肌损伤的相关机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和参附组,每组8只。以盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法建立脓毒症大鼠动物模型,观察各组大鼠心肌酶谱变化;凋亡原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数,RT-PCR法检测心肌细胞Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组、参附组心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)均明显升高,差异有统计学意义[CK-MB:(4208.51±382.57)U/L、(3584.59±347.06)U/L比(2187.41±556.63)U/L,P0.05;CK:(3216.75±565.42)U/L、(1986.21±366.73)U/L比(1189.40±245.87)U/L,P0.05];与参附组比较,模型组心肌酶明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。三组均可见大鼠心肌细胞凋亡,与假手术组比较,模型组、参附组TUNEL平均光密度(MOD)升高,差异有统计学意义(0.24±0.11、0.18±0.09比0.09±0.05,P0.05);模型组升高最明显,与参附组比较差异有统计学意义(P0.05)。模型组、参附组大鼠心肌细胞Bcl-2 mRNA表达均较假手术组降低,差异有统计学意义[(3.83±0.07)×10~(-3)、(4.86±0.08)×10~(-3)比(5.75±0.09)×10~(-3),P0.05];参附组Bcl-2 mRNA表达高于模型组(P0.05)。模型组、参附组Bax mRNA表达均较假手术组升高[(7.12±0.08)×10~(-3)、(6.26±0.06)×10~(-3)比(4.61±0.05)×10~(-3),P0.05];参附组Bax mRNA表达低于模型组(P0.05)。结论参附注射液能减轻脓毒症大鼠的心肌损伤,其作用机制与上调Bcl-2 mRNA的表达,下调Bax mRNA表达,减少心肌细胞凋亡相关。     

参附注射液对脓毒症大鼠心肌氧化应激的影响

[目的]观察参附注射液对脓毒症大鼠心肌氧化应激的影响.[方法]采用盲肠结扎穿孔法制备腹腔感染脓毒症动物模型.80只SD大鼠随机分为假手术组(Sham),脓毒症组(CLP),参附注射液低、高剂量治疗组(LSF,HSF)共4组.记录手术后6、18 h各组的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、心脏收缩功能指标(LVDP)和左室最大收缩速率(+dP/dt)、心脏舒张功能指标(LVEDP)和左室最大收缩速率(-dp/dt))、心肌细胞凋亡发生率(AI)、心脏组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性.[结果]与Sham组比较,CLP组术后6h的HR有升高(P＜0.05),但术后18h的HR显著降低(P＜0.01);术后6h和18h的MAP、LVDP、+dP/dt、LVEDP、-dP/dt、SOD均显著下降(P＜0.01),AI、MDA有统计学意义或显著升高(P＜0.05或＜0.01).而与CLP组比较,LSF组术后6h的MAP和HR、HSF组术后6h的HR均差异统计学意义(P＞005),但HSF组术后6h的MAP及LSF组和HSF组术后18h的HR、MAP有统计学意义或显著升高(P＜0.05或＜0.01);LSF组和HSF组术后6h、18h的LVDP、+dP/dt.LVEDP、-dP/dt、SOD有统计学意义或显著升高(P＜0.05或＜0.01);LSF组和HSF组术后6h、18h的AI、MDA有统计学意义或显著降低(P＜0.05或＜0.01).[结论]参附注射液可不同程度地增高CLP大鼠的平均动脉压、改善其心功能、减少心肌细胞凋亡的发生和心肌组织MDA含量,增加SOD活性;且高剂量参附注射液则以上结果更明显.参附注射液有助于脓毒症大鼠心肌氧化应激异常的恢复,这些作用的强度与参附注射液的剂量成正比.     

芒柄花苷对小鼠脓毒症引起认知功能障碍的影响

目的:探讨芒柄花苷对小鼠脓毒症引起认知功能障碍的影响。方法:选取60只8周龄雄性C57BL/6小鼠，采用随机数字表法分为假手术组(C组)、脓毒症组(CLP组)、芒柄花苷(ON组)和芒柄花苷+脓毒症组(ON+CLP组),每组各15只。采用盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症模型。ON组与ON+CLP组在造模前进行芒柄花苷(30 mg/kg)灌胃，1次/d,连续7 d; C组与CLP组每日给予等剂量生理盐水。造模后比较各组小鼠7 d生存率；Morris水迷宫实验检测各组小鼠认知功能，比较各组小鼠海马组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果:与C组比较，CLP组小鼠生存率降低(P<0.05);与CLP组比较，ON+CLP组小鼠生存率增加(P<0.05)。与C组比较，CLP组小鼠逃避潜伏期延长，穿越平台次数减少，待在平台所在象限时间缩短(均P<0.05);与CLP组比较，ON+CLP组小鼠逃避潜伏期缩短，穿越平台次数增多，待在平台所在象限时间延长(均P<0.05)。与C组比较，CLP组小...     

参附注射液对脓毒症模型大鼠心脏血流动力学的影响

目的:观察参附注射液对脓毒症大鼠心脏血流动力学的影响。方法:采用肓肠结扎穿孔法制备腹腔感染脓毒症动物模型。80只SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、参附注射液低、高剂量组,每组20只。各实验组术后给予相应处理措施,观察术后6、18h各组的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、心脏收缩功能指标(LVDP和+dP/dt)、心脏舒张功能指标(LVEDP和-dP/dt)。结果:与假手术组比较,脓毒症组术后6h HR显著升高(P0.05),术后18h HR显著降低(P0.01);术后6h和18h MAP、LVDP、+dP/dt、LVEDP、-dP/dt均显著下降(P均0.01)。与脓毒症组比较,参附注射液低剂量组术后6h MAP、HR差异无统计学意义(P均0.05),术后18h MAP和HR显著升高(P0.05);参附注射液高剂量组术后6h HR显著降低(P0.05),术后18h HR和术后6、18h MAP均显著升高(P均0.01),参附注射液低、高剂量组术后6、18h的LVDP、+dP/dt、LVEDP、-dP/dt均显著升高(P0.05或0.01)。结论:参附注射液可升高脓毒症大鼠的平均动脉压,改善其心脏收缩和舒张功能;高剂量参附注射液作用更明显,并能改善心率。参附注射液能改善脓毒症大鼠心脏血流动力学的作用强度与剂量有关。     

参附注射液对家兔心肺复苏后心肌细胞凋亡基因caspase-3的影响

目的探讨参附注射液(SF)对家兔缺氧型心跳骤停-心肺复苏(CA-CPR)模型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响。方法普通家兔18只,采用随机数字表法随机分为SF组、对照组和生理盐水(NS)组,每组6只。除对照组外,制作缺氧型CA-CPR模型。SF组给予参附注射液2.1 m L/kg(生理盐水稀释至5 m L),对照组、NS组予生理盐水5 m L,分别在复苏后分3次每隔10 min缓慢注射。三组用药后采用RT-PCR法检测caspase-3m RNA表达。结果与对照组比较,SF组和NS组caspase-3 m RNA表达增加(P0.01);与NS组比较,SF组caspase-3 m RNA表达减少(P0.01)。结论 SF对CPR后心肌细胞凋亡基因caspase-3活性有抑制作用。     

miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用

【摘要】 目的 探讨miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用。 方法 取90只小鼠随机分成对照组（Control组）、脓毒症模型组（CLP组）和CLP+miR 140组，每组30只。盲肠结扎穿孔法（CLP法）建立小鼠脓毒症模型，尾静脉注射转染miR-140 agomir，记录30天生存率，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素2（IL-2）表达，流式细胞术检测血清CD4+T和CD8+T细胞百分率，提取腹膜巨噬细胞，流式细胞术分析PD L1阳性百分率，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-140和PD-L1基因表达，蛋白印迹（Western blot）检测PD-L1蛋白表达，荧光素酶报告实验检测miR-140和PD-L1靶向作用关系。 结果 与control组相比，CLP组在1 、7、14 d的TNF α、IL-2水平升高（P＜0.01），而TNF-α、IL-2水平呈时间依赖性降低（P＜0.05）；CLP组较control组小鼠生存率降低（P＜0.01），CD4+和CD8+细胞百分比升高（P＜0.01），巨噬细胞PD-L1阳性细胞率升高（P＜0.01），miR-140表达水平降低（P＜001），PD-L1基因和蛋白表达水平升高（P＜0.01）；与CLP组比较，CLP+miR-140组小鼠生存率升高（P＜0.01），CD4+和CD8+细胞百分比升高（P＜0.01），巨噬细胞PD-L1阳性细胞率下降（P＜0.01），miR-140表达水平升高（P＜0.01），PD-L1基因和蛋白表达水平降低（P＜0.01）；荧光素酶报告实验结果显示miR-140和PD-L1存在靶向作用关系。 结论 miR-140可靶向作用于PD-L1，从而改善小鼠脓毒症引起的免疫抑制。     

参附注射液对脓毒症患者心肌保护作用的临床观察

目的 观察参附注射液对脓毒症患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、心肌钙蛋白I（cTnI）及血浆N末端脑利钠肽前体（NT-ProBNP）水平的影响.方法 按随机原则将64例脓毒症患者分为参附组（34例）和对照组（30例）.对照组给予西医常规治疗,参附组在常规治疗的基础上加用参附注射液静脉滴注,50 ml/d,连用14d.两组于治疗前及治疗后1、3、7及14 d抽血检测TNF-α、IL-6、cTnI及NT-ProBNP水平.结果 与治疗前比较,参附组治疗3d后血TNF-α、IL-6、cTnI均明显下降（均P＜0.05）,治疗7d后血NT-ProBNP才有明显下降,治疗14d后变化更明显（均P＜0.05）;与对照组比较,参附组治疗3、7d后cTnI明显下降（均P＜0.05）,治疗7、14d后血TNF-α、IL-6、NT-ProBNP均明显下降（均P＜0.05）.结论 参附注射液可以抑制炎性因子TNF-α、IL-6的过量表达,降低血cTnI和NT-ProBNP水平,对脓毒症患者的心肌损伤具有保护作用.     

脓毒症早期恒定自然杀伤T细胞活化对预后的影响

目的 探讨脓毒症早期外周血恒定自然杀伤T (iNKT)细胞活化对炎症及病情的影响.方法 取健康雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,分别为假手术组、盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症模型组和CLP模型+CD1d阻断性抗体预处理组(抗-CD1d组).CLP术后24 h应用流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏、胸腺iNKT细胞水平,ELISA法后检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、干扰素γ(IFN-γ)和IL-4等细胞因子水平,分析iNKT细胞与细胞因子的相关性,检测外周血和腹腔灌洗液中的细菌菌落数.观察各组小鼠CLP后10 d生存率.选取脓毒症确诊患者及健康志愿者各20例,年龄18～70岁,检测脓毒症患者及健康志愿者外周血iNKT细胞比例及细胞因子水平,分析iNKT细胞与细胞因子及急性生理和慢性健康(APACHEⅡ)评分的相关性.结果 脓毒症模型组小鼠的iNKT细胞和TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-4水平均高于假手术组(P＜0.05,P＜0.01),外周血及腹腔中细菌菌落数高于假手术组(P＜0.01),术后7d内小鼠全部死亡;与脓毒症模型组小鼠相比,给予抗-CD1d抗体预处理后,抗-CD1d组小鼠外周血、脾脏、胸腺的iNKT细胞比例下降(P＜0.05,P＜0.01),外周血TNF-α、IL-6、IFN-y和IL-4水平及外周血和腹腔液中细菌菌落数减少(P＜0.05,P＜0.01),术后第10天时小鼠仍存活4只.脓毒症患者的iNKT细胞及细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-y和IL-4水平相比健康对照组增加(P＜0.05,P＜0.01),且iNKT细胞与IFN-γ、IL-4水平及APACHEⅡ评分呈正相关(P＜0.05).结论 脓毒症早期外周血iNKT细胞水平明显增加并与脓毒症病情严重程度及预后有一定关系,提示iNKT细胞可能在脓毒症炎症反应中起重要调节作用.     

黄芪注射液联合西药对单耐药肺结核患者抗炎、促炎因子及免疫调节作用研究

目的:探讨单耐药肺结核应用黄芪注射液联合西药治疗的临床效果。方法:选取2015年6月—2017年10月我院收治的94例单耐药肺结核患者,采取随机数字表法将这94例患者随机分成观察组(n=47)与对照组(n=47)。对照组采用9R-Lfx-Z-E化疗方案治疗,观察组在此基础上联合黄芪注射液治疗,所有患者均治疗9个月后观察疗效。比较两组临床疗效,治疗前后抗/促炎因子[白介素(IL)-10、干扰素(IFN)-γ、IL-17]水平、免疫功能指标[T淋巴细胞亚群(CD_4~+/CD_8~+比值)、CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞(CD_4~+CD_(25)~+Treg)]变化,不良反应发生情况。结果:观察组总有效率为89.4%(42/47),明显高于对照组[72.3%(34/47),P0.05]。观察组治疗3、6、9个月时的痰涂片转阴率分别为55.3%、70.2%、80.9%,均依次显著高于对照组(36.2%、48.9%、61.7%,P0.05);且观察组痰培养阴转时间较对照组显著缩短(P0.05)。与治疗前相比,两组治疗后血清IL-10浓度和外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平均显著减少(P0.05),血清IFN-γ、IL-17水平及外周血CD_4~+/CD_8~+比值均显著增加(P0.05);且观察组改善更显著(P0.05)。观察组不良反应率[19.1%(9/47)]较对照组[38.3%(18/47)]显著降低(P0.05)。结论:单耐药肺结核应用黄芪注射液联合西药治疗可有效解除患者症状,下调血中抗炎因子表达,诱导促炎因子分泌,正向调节体内细胞免疫功能,有助于结核分枝杆菌的迅速清除,减毒增效作用显著。     

枸杞多糖在小鼠脓毒症肝损伤中的保护作用及机制

目的 研究枸杞多糖对脓毒症小鼠模型致肝损伤的保护作用,并探讨枸杞多糖在脓毒症肝损伤中的相关机制。方法 将BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只,分别为Ⅰ组假手术(sham)组,Ⅱ组脓毒症急性肝损伤(CLP)组,Ⅲ组枸杞多糖组[400 mg/(kg·d)](LBP+CLP)组,Ⅳ组枸杞多糖预处理后假手术(LBP+sham)组。干预2周后采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症小鼠模型,观察24h后解剖小鼠肝脏组织及收集小鼠血液,分别检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)含量变化;观察肝脏组织的病理学变化及肝组织中Cleaved caspase-3、Bcl-2、TLR-4、NF-κB的蛋白表达水平。结果 给予LBP干预2周后,Ⅲ组小鼠血清中肝酶水平及炎性因子显著上升,肝脏组织病理损伤较模型组均明显改善。另外,Ⅲ组与Ⅱ组比较肝组织中抗凋亡蛋白Bcl-2明显上调,而Cleaved caspase-3、TLR-4、NF-κB等蛋白水平显著降低。Ⅳ组与Ⅰ组比较,差异无统计学意义。结论 枸杞多糖在脓毒症小鼠中能减轻炎性反应及肝脏受损,缓解细胞凋亡,其保护作用可能与TLR-4/NF-κB炎症通路有关。     

参附注射液对脓毒症患者心肌损伤的保护作用

目的观察参附注射液对脓毒症患者血肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）和脑尿钠肽（BNP）水平的影响。方法回顾性研究2010年12月～2011年12月48例成年脓毒症患者,采集患者的一般资料,使用参附注射液的患者分为SF组（n=30）,对照组（n=18）,SF组患者在常规ICU抗脓毒症集束化治疗基础上同时加用参附注射液100 mL,每日1次,对照组未使用参附注射液。比较两组患者24 h（T1）、48 h（T2）及72 h（T3）血cTnⅠ、BNP水平,入住ICU时及72 h后APACHEⅡ评分,ICU住院时间以及28 d病死率。结果 SF组患者T1、T2、T3时点的血cTn I和NT-proBNP水平低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;SF组患者T3时点的APACHEⅡ评分低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组患者的ICU入住时间和28 d病死率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论参附注射液可以降低脓毒症患者血cTn I和NT-proBNP水平,对脓毒症患者心肌损伤有保护作用。     

参附注射液对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨参附注射液对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立大鼠脓毒症模型。健康成年雄性SD大鼠72只,随机分为三组,每组24只:假手术组、脓毒症组、参附干预组。动物模型制备成功后,各组在腹腔注入参附注射液(10 mL/kg)或等量生理盐水后,于术后3 h、12 h和24 h检测肺组织匀浆标本超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、黄嘌呤氧化酶(XO)活力和丙二醛(MDA)含量。结果与脓毒症组比较,参附干预组大鼠肺组织SOD、GSH-Px活性显著升高(P0.01),而XO、MDA水平显著降低(P0.01)。结论参附注射液可通过减少肺氧自由基的产生,减轻肺损伤。     

高脂饮食下核因子κB调控自噬在小鼠溃疡性结肠炎中的作用及其机制

目的 观察核因子κB (NF-κB)调控自噬在高脂饮食下葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎中的作用及其机制。方法 将小鼠分为正常对照组（Control组）、高脂饮食组（HFD组）、DSS组、DSS+高脂饮食组（DSS+HFD组）,每组12只。采用体质量差值、疾病活动指数（DAI）和结肠组织病理学结果评估小鼠一般情况和结肠组织炎症程度,采用ELISA检测小鼠血清炎性细胞因子水平,采用实时PCR检测小鼠结肠组织中NF-κB和LC3 mRNA的表达情况。结果 DSS+HFD组体质量差值小于Control组和DSS组（均P <0.05）。DSS+HFD组DAI、结肠组织病理学评分大于Control组和DSS组（均P <0.05）。DSS+HFD组血清白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)以及结肠组织NF-κB mRNA水平高于Control组和DSS组（均P <0.05）。DSS+HFD组结肠组织LC3 mRNA水平低于Control组和DSS组（均P <0.05）。DSS+HFD组血清IL-10水平低于Control组（P <0.05...