艰难梭菌分离培养与病原学分子特征研究

目的：建立艰难梭菌分离培养与鉴定的表型诊断技术,并对分离获得的艰难梭菌进行分子学特征研究。方法采集杭州某医院ICU住院患者肛拭标本,接种厌氧血琼脂平皿,置厌氧培养箱,可疑菌株采用厌氧菌鉴定试剂条鉴定;用VIDAS荧光酶联免疫技术检测A/B毒素;用PCR技术检测艰难梭菌毒素基因和核糖体分型。结果28例 ICU 患者检出艰难梭菌9株,检出率为32.14%。9株艰难梭菌中, A/B 毒素表型阳性7株（77.78%）,毒素基因检测均阳性。9株艰难梭菌可分为3种核糖型,其中R3型为优势株,占77.78%。结论杭州市ICU患者检出艰难梭菌的比例较高,均携带A/B毒素基因,且存在优势型别。     

人工关节置换术患者术后医院感染危险因素分析

目的 了解接受人工关节置换术患者术后医院感染的发生率,分析引起术后医院感染的相关危险因素,以降低医院感染率。方法 采用多中心前瞻性调查方法,监测2013年4-12月全省26所医院收治的1 156例实施人工关节置换术患者相关临床资料,分析性别、年龄、手术部位、术前住院时间、手术持续时间、麻醉方式、手术出血量、ASA评分、抗菌药物预防使用持续时间等因素对发生术后医院感染的影响。结果 术后发生医院感染患者58例,感染率为5.02%,感染部位居首位的是下呼吸道感染占37.93%,其次手术部位感染占10.34%;年龄>80岁的患者发生术后医院感染的风险是<80岁患者的2.25倍(P=0.08),有基础疾病的患者发生术后医院感染的风险是无基础疾病的2.07倍(P=0.031),手术持续时间>3h可使术后医院感染的风险增加4.42倍(P<0.001)。结论 人工关节置换术患者术后医院感染发生率较高,尤其以下呼吸道感染为主,年龄大、有基础疾病、术前住院时间长、术中手术出血量大、手术持续时间长可明显增加术后医院感染发生率。     

肺炎克雷伯菌肺炎对大鼠胸腺细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨肺炎克雷伯菌肺炎对大鼠胸腺细胞凋亡的影响及可能的作用机制.方法 48只Sprague-Dawley大鼠随机(随机数字法)分为对照组和感染组,每组24只.采用气管穿刺注入感染法制作大鼠肺炎克雷伯菌肺炎模型.分别于接种后的第2,4,6天分批处死动物,分别采用TUNEL法检测大鼠胸腺细胞凋亡及免疫组化法检测凋亡相关基因Cleaved Caspase-3、Bcl-2和Fas的表达.结果 与同时间点对照组相比,感染组胸腺细胞凋亡增加,凋亡指数和胸腺细胞Cleaved Caspase-3和Fas表达水平升高,Bcl-2表达水平下降.感染组随着接种时间的延长凋亡指数和胸腺细胞Cleaved Caspase-3表达水平持续增加,胸腺细胞Fas表达水平在第4天达到高峰,胸腺细胞Bcl-2表达水平持续下降,而对照组上述各指标无明显动态变化.结论 肺炎克雷伯菌肺炎可诱导胸腺细胞凋亡增加,其机制可能与Bcl-2表达减少和Fas表达增多有关.不同凋亡调控途径在肺炎不同时期对凋亡的影响亦有所不同,Fas的作用在肺炎第4天后开始减弱而Bel-2的作用继续增强.

Abstract：

Objective To study the effects of pneumonia caused by Klebsiella pneumoniae on apoptosis of thymocytes in rats and its possible mechanism. Methods A total of 48 Sprague Dawley rats were randomly (random number) divided into 2 groups, namely the control group (n =24) and the infection group ( n = 24). The pneumonia models of rats were made with 0.3 mL Klebsiella pneumoniae suspension administered intratracheally per animal. On the 2nd, 4th, and 6th day after intratracheal instillation of bacteria, 1/ 3 of the rats in each group were sacrificed and TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUN EL) method was used to assess the apoptosis of thymocytes. The expressions of cleaved Caspase-3, Bcl-2 and Fas in thympcytes of rats were detected with immunohistochemical staining. Results On each interval, apoptosis index of thymocytes, and the expressions of Cleaved Caspase-3 and Fas in the infection group were all higher than those in the control group (P < 0.01) , while the expressions of Bcl-2 lower than those in the control group (P<0.01). As more time consumed, the apoptotic index of thymocytes and the expressions of cleaved Caspase-3 in the infection group increased significantly (P<0.05). The expressions of Bcl-2 declined gradually (P < 0.05), but the expressions of Fas reached their peak 4th day after infection. There were no significant dynamic changes in all above mentioned variables in control group. Conclusions Pneumonia caused by Klebsiella Pneumoniae can lead to the increase in thymocyte apoptosis in rats. The mechanism may be associated with the decreased expression of Bcl-2 and the increased expression of Fas in thymocytes of rats with pneumonia caused by Klebsiella pneumoniae. The different apoptosis regulation pathways have different effects on different phase of pneumonia, that the effects of Fas decrease 4th day after pneumonia, while the effects of Bcl-2 increase further.     

胸腺肽α1对严重脓毒症患者的免疫调理作用

目的 评价胸腺肽α1对严重脓毒症患者的免疫调理作用 方法 44例患者随机分成治疗组与对照组,对照组常规治疗加安慰剂,治疗组常规治疗加胸腺肽α1(迈普欣),疗程为10 d。结果 治疗组治疗后的CD14 单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)水平明显升高,而CRP、APACHEⅡ评分及器官功能障碍的数量显著下降,28 d死亡率亦显著下降。结论 胸腺肽α1可提高严重脓毒症患者免疫力,改善患者的预后。     

中药配方颗粒与中药饮片治疗感冒临床疗效差异性的Meta分析

[目的] 比较中药配方颗粒和中药饮片治疗感冒的临床疗效差异。[方法]通过检索中国知网(China National Knowledge Infrastructure Database,CNKI)、维普中文科技期刊数据库、万方数据、PubMed和Embase数据库,纳入中药配方颗粒和中药饮片治疗感冒的临床对照研究,检索年限均从建库至2021年5月10日,系统评价两者治疗各种类型感冒的临床疗效以及退热时间、咽痛缓解时间的差异性。[结果] 对纳入研究的50个临床随机对照试验(random control trials,RCT)进行统计分析,共涉及病例数6 093例。结果显示,中药配方颗粒与中药饮片治疗感冒有效率差异无统计学意义[相对危险度(relative risk,RR)=1.03,95%置信区间(confidence interval,CI)(1.00,1.07),P＞0.05]。亚组分析提示,两者治疗风寒感冒[RR=0.97,95%CI(0.93,1.01),P＞0.05]、风热感冒[RR=1.04,95%CI(1.00,1.08),P＞0.05]、阴虚感冒[RR=1.02,95%CI(0.99,1.05),P＞0.05]的有效率差异无统计学意义。症状分析提示,中药配方颗粒与中药饮片治疗感冒退热时间的差异无统计学意义[标准化差值(standardized mean difference,SMD)=-0.06,95%CI(-0.42,0.30),P＞0.05];饮片治疗感冒咽痛时间短于配方颗粒[SMD=-0.66,95%CI(-1.09,0.23),P＜0.001]。[结论] 中药配方颗粒与中药饮片治疗感冒疗效相当,分别治疗风寒感冒、风热感冒、阴虚感冒的疗效差异均无统计学意义;退热时间差异均无统计学意义;饮片缓解感冒咽痛时间稍优于配方颗粒。     

端粒酶与Ki-67及p53在大肠癌和大肠腺瘤病变中的关系

目的：探讨端粒酶与Ki-67、p53在大肠癌和腺瘤的表达及发生、发展机理。方法：用组织芯片原位杂交的方法在分子学水平对细胞的端粒酶进行检测,同时用免疫组织化学法对Ki-67,p53进行检测。结果：72例大肠癌端粒酶表达的阳性率为77．78％,Ki-67阳性率88．89％,p53阳性率63．89％;36例大肠腺瘤端粒酶表达阳性率8．3％,p53阳性率22．22％,Ki-67阳性率13．89％。端粒酶和Ki－67、p53的阳性表达在大肠癌和大肠腺瘤之间的差异有显著性（P〈0．05）。结论：端粒酶和K-i67、P53在大肠细胞癌变过程中有一定的协同作用。     

血管生成素1增强骨髓间充质干细胞缺血环境下生存能力的研究

目的 研究血管生成素1（Ang1）对骨髓间充质干细胞（MSCs）在缺血清状态下的保护作用,探索一种改善MSCs生存能力的方法.方法 建立体外缺血清的凋亡模型,应用四甲基偶氮唑盐检测MSCs的生存能力,双苯并咪唑染色评估MSCs的凋亡,蛋白质印迹分析（Western-blot）检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）细胞生存通路的表达.结果 MSCs在缺血清处理24h后.生存能力降至（72.7±5.8）%,Ang1能够明显改善MSCs的生存能力,并呈剂量依赖性,在50μg/L时达到了高峰,生存能力提高至（92.3±1.5）%（P〈0.01）;Ang1能够降低MSCs的凋亡率,从（24.9±3.9）%降至（11.0±2.4）%（P〈0.01）;缺血清明显降低了MSCs的Akt磷酸化水平,但Ang1能够明显增加MSCs的Akt活化;应用P13K,Akt通路阻滞剂Wortman-nin后,Ang1的保护作用消失,MSCs的生存能力从（92.3±1.5）%降至（73.9±4.7）%（P〈0.01）,凋亡率从（11.0±2.4）%回升至（26.5±2.6）%（P〈0.01）. 结论 Ang1能够改善MSCs的生存能力.作用机制可能与激活P13K/Akt生存通路有关.     

黄芪对肺炎克雷伯菌肺炎大鼠胸腺细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：探讨黄芪注射液对肺炎克雷伯杆菌肺炎大鼠胸腺细胞凋亡及相关基因Caspase-3、Bcl-2表达的影响。方法：将大鼠随机分为正常对照组、模型组、黄芪高剂量组、黄芪中剂量组和黄芪低剂量组。采用气管穿刺注入感染法制作大鼠肺炎克雷伯杆菌肺炎模型。分别采用原位标记法（TUNEL）及免疫组织化学方法检测各组大鼠的胸腺细胞凋亡及凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2表达。结果：与正常对照组比较,模型组和黄芪治疗各组胸腺细胞凋亡增加,凋亡相关基因Caspase-3表达增强,Bcl-2表达减弱（P均〈0.05）;与模型组比较,黄芪高剂量组胸腺细胞凋亡减轻,Caspase-3表达减弱,Bcl-2表达增强（P均〈0.05）。结论：黄芪注射液能抑制肺炎克雷伯杆菌肺炎大鼠胸腺细胞凋亡,其抗凋亡机制可能与上调Bcl-2基因表达相关。     

医院感染现患率调查分析

目的 了解医院感染现状及特点、病原体检出及抗菌药物使用,为临床预防医院感染提供依据.方法 采用病历查阅和床边访视相结合的方法,调查2011年11月29日0:00-24:00时所有住院患者(包括当日出院、转科及死亡的患者,不包括当日新入院的患者)发生医院感染的情况.结果 实查1118例,发生医院感染113例、118例次,医院感染现患率为10.11％、例次感染率为10.55％;医院感染部位分布前3位分别为下呼吸道、上呼吸道及血液,分别占60.02％、8.47％及6.78％;抗菌药物使用率为35.24％;医院感染患者微生物标本送检率为84.07％;阳性检出率24.21％;高龄、中心动静脉插管、使用呼吸机和外周静脉给药是发生医院感染的危险因素.结论 医院感染现患率偏高,应进一步加强医院感染监测,控制相关危险因素,降低医院感染发生率.     

环境清洁措施对ICU高频接触物体表面多重耐药菌检出的影响

摘要 目的 <\b> 研究环境清洁措施对降低ICU高频接触物体表面多重耐药菌检出的影响。方法 <\b>　采用对照研究的方法,对比规范保洁工具清洗消毒流程前后ICU环境高频接触物体表面多重耐药菌检出情况的变化。结果 <\b> 环境清洁措施采用前后,ICU环境高频接触物体表面菌落计数结果有显著差异。ICU环境高频接触物体表面菌落计数从干预前的48 cfu/cm2下降到干预后的4 cfu/cm2,P<0.001。高频接触物体表面ATP发光值从干预前的450 RLU降低到干预后的93 RLU,P<0.001,合格率从37.9%提高到73.3%,P<0.01。与干预前相比,干预后环境高频接触物体表面的MRSA,产ESBLs肠杆菌和VRE的检出率明显减少,多重耐药菌平均检出率从18.7%±2.6%降低到6.3%±3.9%,P=0.005。结论 <\b> 加强环境清洁措施可有效降低ICU环境高频接触物体表面细菌数量和多重耐药菌的检出率。