乙肝病毒相关性肝病毒物代谢酶基因多态性研究

目的:探讨谷胱甘肽硫转移酶(GST)Ml、Tl及N-乙酰化转移酶1(NAT1)基因多态与肝炎肝硬化、乙肝相关性肝癌的易感性.方法:采用多重PCR和PCR-RFLP技术,检测60例肝细胞肝癌(病例组),66例肝炎肝硬化(肝硬化组)和73例乙肝标志物阴性的健康人(对照组)GSTM1、GSTT1和NAT1基因多态性.结果:GSTM1空白基因型在对照组中的频率显著低于肝癌组(x2=7.16,P＜0.01),GSTT1空白基因型、NAT1快代谢型在三组研究对象间的频率差异均无显著性;GSTM1空白/GSTT1空白/NAT1快代谢联合基因型在肝癌组中的频率显著高于对照组(x2=15.98,v=7,P＜0.05),具该联合基因型且HBV阳性的个体患肝癌的危险性升高了2.5倍(OR=2.49,95%CI=1.12-5.53).结论:GSTM1空白基因型与肝癌的发生有关,GSTM1空白/GSTT1空白/NAT1快代谢联合基因型且HBV阳性的个体患肝癌的危险性显著升高.     

乙肝病毒感染者血清抗核抗体检测分析

目的 分析乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中抗核抗体(ANA)检测结果及临床意义.方法 采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA、AMA、SMA、LSP等自身抗体,免疫印迹法检测ANA谱.结果 189例中ANA阳性82例(43%),慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝后肝硬化(LC)、原发性肝癌(HCC)组检出率分别为42.2%、38.3%、66.6%,3组均明显高于正常对照组(16.7%),HCC组阳性率显著高于CHB组和LC组(P<0.01).CHB、LC和HCC组ANA以低滴度(1:100)为主,分别为73.3%、69.4%、68.7%.结论 HBV感染者出现的自身抗体以ANA为主,HCC组阳性率最高.其滴度的高低与肝细胞损伤未见明显相关性.     

GSTM1基因多态性和烟酒习惯与原发性肝癌易感性的关系

目的:探讨Ⅱ相代谢酶谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)基因多态性和烟酒习惯及其相互作用与原发性肝癌易感性的关系.方法:采用病例-对照研究和多重PCR技术对广西地区105例肝癌患者及151例健康对照的GSTM1基因型进行检测,并调查研究对象的烟酒习惯.结果:GSTM1缺失基因型频率在病例组与对照组中分别为64.76%和50.99%(P<0.05);GSTM1缺失基因型的个体中,有吸烟、饮酒习惯者患肝癌的危险性明显升高, OR分别为3.13 (95% CI: 1.48～6.61)和4.27(95%CI:1.82～10.02).结论:GSTM1是肝癌的遗传易感因素,GSTM1基因多态和烟酒习惯在肝癌的发生中存在协同作用.     

中国西部、北部地区410例汉族病例乙型肝炎病毒基因型与肝病转归的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型与肝病转归的关系.方法 随机选取中国西部、北部地区汉族HBV感染者DNA含量104以上者410例,煮沸法提取HBV基因组模板,PCR扩增S区基因,应用自动测序仪测定目的基因序列,进行基因分型,应用SPSS10.0软件统计分析.结果 C型占91.95%,B型占6.83%,B、C混合型占0.24%,D型占0.98%.疾病进展研究分4种情形对基因型C、基因型B进行单因素方差分析:慢性病毒携带者(ASC),慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB),肝硬化(liver cirrhosis,LC),原发性肝细胞性肝癌(primary hepatocellular carcinoma,HCC).统计显示,感染基因型C后CHB更易发展为LC和(或)HCC,有统计学意义,但两基因型之间LC发展为HCC差别无统计学意义.LC vs.(CHB+HCC)统计显示:两组在基因型方面虽无统计学差异,但从Means Plots可以看出感染基因型C向肝硬化或肝细胞癌方向发展的趋势更明显.结论 中国西部、北部汉族HBV感染者中以感染基因型C为主,且感染基因型C较基因型B更容易发展为严重的肝病.     

白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义

目的:探讨白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义。方法:酶联免疫法检测30例慢性乙型肝炎无症状携带者(ASC)、40例慢性乙型肝炎活动期(CHB)患者、45例慢性乙型肝炎后肝硬化(LC)患者、30例原发性肝癌(HCC)患者、25例健康对照者外周血清中IL-22水平。分析IL-22与肿瘤标志物AFP的相关性。结果:CHB组、LC组、HCC组外周血IL-22水平均高于对照组(P=0.010、0.003、0.000)。外周血清IL-22水平与AFP之间无相关性。结论:IL-22可能在肝脏慢性纤维化、肝癌发生方面可能起一定作用。     

HBV C基因启动子变异及基因型与肝硬化及原发性肝癌的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎病毒C基因启动子(CP)和前C区基因变异及HBV基因型与肝硬化及原发性肝癌(HCC)的关系.方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测44例慢性乙型肝炎(CH),39例活动性肝硬化(LC),34例HCC患者血清HBV S基因序列,确定其基因型,测定HBV CP和前C区序列,确定其变异状况.结果 HCC、LC患者CP双变异(nt 1762A→T和1764G→A)发生率(82.4%、71.8%)显著高于CH患者(45.5%)(P＜0.01、P＜0.01);HCC、LC患者C基因型检出率(70.6%、69.2%)显著高于CH患者(43.2%)(P值均＜0.05).结论 乙型肝炎病毒CP双变异、C基因型与HCC、LC密切相关.     

乙型肝炎病毒基因分型与临床病情的关系

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因型与乙型肝炎疾病谱及临床研究的相关性。方法用S基因PCR产物直接测序的基因型分型方法对南京地区94例HBV感染者中44例慢性乙型肝炎(CHB)患者、33例慢性重型乙型肝炎(CSH)和肝硬化(LC)患者、17例肝细胞癌患者(HCC)血清标本进行病毒基因分型,同时对不同基因型患者的ALT、TBIL、血清HBVDNA水平进行了比较。结果94份血清标本中,基因型以B型和C型为主,分别为44例(42.6%)和54例(57.4%),未发现其它型和混合型;CHB组和HCC组病毒基因型分布差异显著,CHB患者中B型多于C型,而HCC患者中C型多于B型;C型和B型患者性别和HBVDNA含量差异不显著,而年龄、ALT和TBIL的差异显著,C型患者都高于B型患者。结论南京地区流行的HBV主要基因型是B和C;C型感染引起较重的肝脏损伤,同时C型与较严重的肝病有关。HBV基因型是影响临床表现的重要因素之一。     

133例乙型肝炎病毒X基因测序结果分析

目的：对乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清标本的HBV X基因进行测序,以了解其突变情况。方法从广州市番禺区133例HBV感染者的血清标本中提取HBV DNA,以PCR方法扩增HBV X基因,再进行测序,根据患者不同病程将其分为乙肝携带组(ASC组)36例、慢性肝炎组(CHB组)40例、肝硬化组(LC组)34例和肝癌组(HCC组)23例,并对结果进行综合比较分析。结果人均碱基突变数ASC组为(5.17±0.86)、CHB组为(5.05±0.80)、LC组为(3.43±0.59),HCC组为(2.05±0.44),ASC组、CHB组和LC组比较差异均无统计学意义(P>0.05),而HCC组均低于ASC组、CHB组、LC组,差异均有统计学意义(P<0.05);HBV X基因突变检出率排前4位的位点是：A1762T联合G1764A双变异为85例(63.91%),T1719G联合G1721A同时变异为77例(57.89%),T1544A为62例(46.62%),T1753C为45例(33.83%)。前4位突变检出率均在LC组中最高(P<0.05)。结论对HBV X基因的高突变位点进行检测为肝硬化及肝癌的发病机制提供线索,对尽早预防和预测肝硬化及肝癌具有重要意义。     

儿童传染性单核细胞增多症患者GST基因遗传多态性的研究

目的 探讨谷胱甘肽S-转移酶T1(GSTT1)和M1(GSTM1)基因多态性与儿童传染性单核细胞增多症(IM)发病风险的关系.方法 采用病例-对照研究方法对52例IM患儿和60名健康儿童进行多重PCR技术检测GSTT1和GSTM1基因多态性.分析不同基因型与儿童IM发病的关系.结果 IM组和对照组GSTT1纯合缺失基因型[GSTT1(-/-)]的分布频率分别为59.62%和43.33%,组间比较差异有显著性(X2=-7.231,P<0.05);携带GSTT1(-/-)基因型儿童发生IM的风险是携带GSTT1非纯合缺失基因型[GSTT1(+/+)或(+/-)]儿童的1.931倍[比值比(OR)=1.931,95%可信区间(CI):1.038～2.894].GSTM1纯合缺失基因型[GSTM1(-/-)]的分布频率在IM组和对照组间差异无显著性(P>0.05).基因型联合分析显示:携带GSTT1(-/-)与GSTM1(-/-)联合基因型的儿童,其IM的发病风险显著增加(OR=2.691,95%CI:0.902～6.127).结论 GSTT1纯合缺失基因型可能是儿童IM发生的重要危险内因之一.     

乙型肝炎表面抗原定量与原发性肝癌的相关性研究

目的：比较慢性乙型肝炎( CHB)与HBV相关性原发性肝癌患者中乙肝表面抗原( HBsAg)和HBV DNA载量情况。方法采用化学发光法检测403例CHB及肝细胞肝癌( HCC)患者血清乙型肝炎病毒标志物滴度,采用荧光定量PCR技术检测患者血清HBV DNA载量。403例患者按照临床诊断分为CHB组(209例)和HCC组(194例)。结果 CHB组：血清HBsAg 滴度≥250 IU/mL者占89．00%;HBV DNA≥1000 copies /mL者占88．40%。 HCC组：血清HBsAg滴度≥250 IU/mL者占79．90%;HBV DNA≥1000 copies /mL 者占67．70%。两组HBsAg≥250 IU/mL患者的比例差异、HBV DNA≥1000 copies/mL 患者的比例差异均有统计学意义(P<0．05)。结论与CHB相比,HBV相关性原发性肝癌患者HBsAg、HBV DNA载量较低。     

Cyclooxygenase-2 promoter polymorphism -899G/C is associated with hepatitis B-related liver cancer in a Chinese population of Gansu province

Background  Hepatitis B virus infection is closely related to hepatocellular carcinoma (HCC). Cyclooxygenase-2 (COX-2) is overexpressed in HCC and considered to play a role in hepatic carcinogenesis. In this study, we analyzed the polymorphism of COX-2 promoter -899G/C in healthy controls, chronic hepatitis B (CHB) patients, liver cirrhosis patients, and hepatocellular carcinoma (HCC) patients, to investigate the relationship between COX-2 -899G/C polymorphism and the risk for hepatitis B-related liver cancer in a Chinese population from Gansu province.

Methods  Patients were divided into four groups: 300 patients with CHB, 300 patients with liver cirrhosis, 300 patients with HCC, and 300 healthy controls. The polymorphism of COX-2 -899G/C was detected by PCR-TaqMan probes. The results were analyzed by SPSS 17.0.

Results  The COX-2 -899G/C genotypes were GG, GC, and CC. Frequencies in CHB were 87.00%, 12.67%, 0.33%; in liver cirrhosis were 85.33%, 14.00%, 0.67%; in HCC were 77.00%, 21.67%, 1.33%; and in healthy controls were 90.67%, 9.00%, 0.33%, respectively. COX-2 -899C carriers may have an increased risk for hepatitis B-related liver cancer. Compared with the frequency of GG genotype, there were significant differences in the frequency of GC genotype between HCC and healthy control groups (OR=2.835, 95%CI: 1.751–4.589); HCC and CHB groups (OR=1.933, 95%CI: 1.248–2.994); and HCC and liver cirrhosis groups (OR=1.175, 95%CI: 1.119–2.628). Stratification analyses showed that COX-2 -899C allele carriers with a drinking history are more susceptible to develop HCC.

Conclusion  COX-2 -899C genotype may increase the susceptibility of individuals to hepatitis B-related liver cancer in Gansu province, China.

     

不良结局家族聚集性乙肝感染者HBV基因分型

目的 探讨不良结局家族聚集性乙肝感染者HBV基因分型情况。方法 A组选择15个家系中54份HBV感染者血清,其中HBV携带者（ASC）30例,慢性乙型肝炎（CHB）7例,肝硬化（LC）13例,肝细胞癌（HCC）4例。B组选择非家族聚集性乙肝感染者60份血清,其中HBV携带者（ASC）36例,慢性乙型肝炎（CHB）10例,肝硬化（LC）9例,肝细胞癌（HCC）5例;应用HBV基因型特异性引物进行聚合酶链反应,经琼脂糖凝胶电泳分析其基因型并进行HBVDNA定量检测。结果 114份血清标本中109份HBVDNA阳性,A组有5份血清HBVDNA检测失败,余49份血清标本中,HBV基因型为C型46例,B/C混合型3例,未检测到其他基因型。B组60份血清标本中,HBV基因型为C型44例,B/C混合型5例,B型11例。两组相比在不同临床类型分布方面均无显著差异。但在肝硬化及肝细胞癌患者中,C型所占比例高,分别为80%和100%。结论 不良结局家族聚集性乙肝感染者,以C型为主,基因型与乙肝病情发展有一定关系。     

乙肝病毒基因分型及其临床意义

目的:探讨南通地区乙肝病毒(HBV)基因型分布状况及其临床相关性。方法:选择南通地区HBV-DNA阳性者200例,其中乙肝表面抗原携带者(ASC)28例,慢性乙型肝炎(CHB)89例,重型肝炎(FHF)26例,肝硬化(LH)30例,肝细胞癌(HCC)27例,采用多对型特异性引物巢式PCR法检测HBV基因型。结果:200例中B型51例(25.5%),C型141例(70.5%),BC混合型8例(4.0%);C基因型在FHF组、LC组、HCC组中的比例显著高于ASC组(P<0.05)。B型、C型、BC混合型HBeAg阳性率分别为49.0%、53.2%和37.5%,无统计学意义(P>0.05)。C型和BC混合型HBV-DNA载量显著高于B型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:南通地区HBV基因型以B、C型为主,C型为优势基因型,并与重型肝炎、肝硬化、肝癌的发生及血清HBV-DNA高载量相关。     

四川省自贡市159例慢性HBV感染者的HBV基因型分布及其与疾病进展关联研究

目的 了解四川省自贡市慢性HBV感染者的HBV基因型分布情况,并探讨其与慢性乙肝患者病情进展的关系。方法 收集2015年9月—2018年6月159例经本院确诊的慢性HBV感染者,且HBV-DNA水平含量在 10³ IU/mL以上,根据疾病诊断将慢性HBV感染者分为三组：慢性乙型肝炎组（CHB）、乙肝相关性肝硬化组（LC）、乙肝相关性肝癌组（HCC）。采用多通道实时荧光探针PCR法检测乙肝病毒的3种基因型（B、C、D型）,同时检测HBV-DNA及HBV的五项标记物。采用SPSS17.0软件对数据进行统计分析。结果 本文研究显示B基因型115例（72.3%）,C基因型43例（27.0%）,B/C混合型1例（0.6%）,D基因型0例;B基因型的HBV-DNA水平高于C基因型（P<0.05）;慢性HBV感染患者中,男、女组均以B基因型为主,B基因型和C基因型分布在年龄、性别、HBeAg阳性率方面比较差异无统计学意义（P>0.05）;乙肝相关性肝癌组（HCC）的C基因型比例明显高于CHB组和LC组（P<0.05）。结论 自贡市HBV主要流行B基因型,其次是C基因型;B基因型和C基因型的慢性HBV感染患者进展为肝硬化或肝癌可能存在一定的差异。     

T3098C and T53C Mutations of HBV Genotype C Is Associated with HBV Infection Progress1

Objective To analyze the association between mutation(s) in preS region of HBV and hepatitis B disease progress in Chinese patients with genotype C chronic HBV infection. Methods Ninety-three patients with chronic genotype C HBV infection, including 24 asymptomatic carriers (ASC), 26 patients with chronic hepatitis B (CHB), 22 patients with liver cirrhosis (LC) and 21 HCC patients were investigated. Levels of HBV DNA, HBeAg, alanine aminotransferase (ALT), asparate transaminase (AST) were measured. HBV preS region was analyzed by PCR direct sequencing. Results The prevalence of lareS T3098C and T53C mutations of genotype C HBV was significantly higher in LC and HCC patients than ASC and CHB patients. The rate of T3098C mutation in ASC, CHB, LC, and HCC patients were 0.00% (0/24), 3.85% (1/26), 9.09% (2/22),and 30.77% (8/22), respectively (P=-0.0015), while the rate of T53C mutation was 12.50% (3/24), 3.85% (1/26), 40.91% (9/22),and 42.31% (11/26), respectively (P=0.0012). Conclusion The frequency of genotype C HBV preS T3098C and T53Cmutations is associated with hepatitis B infection progression.     

miR-224在早期肝细胞癌诊断中的价值

目的 确定miR-224检测早期肝细胞癌(HCC)的临床价值。 方法 分两批次总共收集335个样本,包括早期肝癌(HCC)、肝硬化(LC)、慢性肝炎(CHB)和健康对照(HC),分别计算miR-224单独检测或与AFP联合检测在早期肝癌诊断中的AUC (包括敏感性和特异性)。 结果 与LC、CHB、HC相比,早期肝癌患者血清中的miR-224显著增加。此外,早期肝癌患者手术后血清miR-224显著减少,而且血清miR-224浓度与肝癌组织浓度呈正相关。ROC分析表明,早期肝癌对比健康对照组中血清miR-224的AUC为0.880(95%CI:0.838～0.923;敏感性为86.5%,特异性为76.7%),高于甲胎蛋白(AUC=0.700,95%CI:0.633～0.767;灵敏度为71.9%,特异性为63.7%),P＜0.01。此外,在鉴别肝癌与LC或CHB,或是两者(LC和/或CHB)同时存在时,血清miR-224具有比AFP更好的表现。相比任一标志物单独检测,当miR-224和AFP两者同时使用时,诊断准确性显著增加。 结论 血清miR-224相对AFP在检测早期肝癌时更有价值;其与肿瘤组织中表达水平呈正相关,从而反映HCC的发生和发展阶段。      

重庆地区乙肝病毒基因型分布及其临床意义

目的 调研重庆地区乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型构成,探讨HBV基因型与乙型肝炎疾病进程的相关性.方法 用SSP-PCR法对360例HBV DNA阳性患者HBV基因分型,采用多因素Logistic回归分析HBV基因型与疾病表型的相关性.结果 本回顾性研究人群中,HBV-B型占45.6%,HBV-C型占53.9%,分型失败0.5%.随着疾病从慢性乙型肝炎到肝硬化、原发性肝细胞癌的进展,C型HBV所占比例显著上升(χ2=23.368,P<0.001).Logistic回归分析显示HBV基因型是HBV感染者罹患肝癌的独立风险因素(OR=3.2,P=0.01).B、C基因型患者的HBV DNA水平和HBeAg阳性率无显著差异(P>0.05).结论 重庆地区HBV基因型以B、C型为主,C型HBV更易导致严重的肝病,HBV基因型是影响疾病进程的重要因素.     

慢性乙肝病毒感染各阶段患者外周血单个核细胞中IL-22mRNA的表达水平及其临床意义

目的: 分析慢性乙型病毒性肝炎(CHB)、慢加急性/亚急性重型肝炎(重型肝炎)、乙肝肝硬化和乙型肝炎病毒(HBV)相关性原发性肝癌(HCC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素22(IL-22)mRNA的表达水平及其可能的临床意义。方法: 收集20名健康对照者(健康对照组)、33例CHB中度患者(CHB中度组)、21例CHB重度患者(CHB重度组)、16例重型肝炎患者(重型肝炎组)、16例乙肝肝硬化患者(肝硬化组)和40例HCC患者(HCC组)的临床资料。RT-PCR半定量分析各组研究对象PBMCs中IL-22mRNA表达水平;Pearson相关分析法分析IL-22mRNA表达水平与临床重要检测指标的相关性。结果: CHB中度、CHB重度和肝硬化组患者PBMCs中IL-22mRNA表达水平均高于健康对照组(P<0.001);重型肝炎组患者PBMCs中IL-22mRNA表达水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P=0.830);HCC组患者PBMCs中IL-22mRNA表达水平明显低于健康对照组(P<0.001)。CHB重度组患者和重型肝炎组患者PBMCs中IL-22mRNA表达水平与总胆红素(TB)水平呈明显负相关关系(r=-0.383,P=0.043;r=-0.619,P=0.028);HCC组患者PBMCs中IL-22mRNA表达水平与血清甲胎蛋白(AFP)水平呈明显正相关关系(r=0.664,P=0.000)。结论: 慢性乙肝重症化过程中,患者PBMCs中IL-22mRNA表达水平低下提示肝细胞再生障碍,且IL-22mRNA表达水平与TB一样能够反映患者病情严重程度。IL-22可能对HCC的发生发展起促进作用。     

型特异性引物PCR技术在HBV基因分型中的应用

目的 应用乙型肝炎病毒（HBV）型特异性引物PCR的基因分型方法，了解武汉地区HBV基因型的分布及其临床意义。方法 选择298例HBV感染者，分成表面抗原携带者（ASC）、急性肝炎（AH）、慢性肝炎（CH）、重型肝炎（SH）、肝硬化（LC）和原发性肝癌（HCC）6组，用多对型特异性引物PCR方法检测HBV的基因型；并对4份血清HBVDNA进行序列分析。结果多对型特异性引物PCR法可简便、快速、准确地鉴定HBV基因型；298份HBVDNA阳性的血清标本中，B基因型197例（66．1％），BC混合型68例（22．8%），C基因型33例（11．1％）；B基因型在ASC、AH、CH、SH和HCC组患者中均占绝对优势，分别为63．6％、71．9％、68．7％、89．5％和65．9%，C基因型在各组患者中的分布差异无显著性意义，BC混合基因型在各组患者中的分布存在差异，更多见于肝硬化患者；各基因型在ALT水平、HBeAg阳性率及HBV DNA水平上差异无显著性意义（均P〉0．05）。结论 多对型特异性引物PCR扩增法能快速准确地进行HBV基因分型检测，可用于大规模的流行病学调查；武汉地区HBV感染者中，优势基因型为B型，其次为BC混合型和c型，BC混合型更多见于肝硬化患者。     

宁夏回族乙肝病毒基因型分布研究

目的 研究宁夏回族乙肝病毒(HBV)基因型分布情况.方法 选择宁夏回族HBVDNA阳性慢性乙肝病人共120例,其中病毒携带者(ASC)17例,慢性肝炎(CH)34例,肝硬化(LC)58例,肝细胞癌(HCC)11例,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测HBV基因型.结果 120例患者中B型12例(10%),C型101例(84.2%),D型5例(4.2%),C、D混合型2例(1.6%).结论 宁夏回族乙肝病毒基因型分布为C型、B型和D型,基因型C为优势基因型并与严重肝病发生有关.