人原发性肝癌胰岛素样生长因子2基因的印迹状态

目的研究人原发性肝癌中胰岛素样生长因子2(insulin like growth factor Ⅱ,IGF2)基因印迹状态,为进一步研究肝癌发生机理提供线索。方法用限制性片段长度多态性检测IGF2基因杂合状态,用逆转录-酶联聚合反应半定量检测IGF2基因在肝癌及癌旁组织中的表达,分析IGF2印迹状态、表达量与人原发性肝癌的关系。结果55．6％(10／18)的肝癌组织存在IGF2基因印迹的重新获得,与之相对的远癌组织有60％(6／10)也发生了IGF2基因印迹的重新获得。50％(9／18)的癌组织IGF2基因过度表达,但表达量与基因印迹的改变没有显著相关性。结论IGF2基因印迹的重新获得可能参与了肝癌的发生。     

TRAIL受体在子宫内膜癌细胞株的表达

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织的表达特征。方法:采用RT-PCR技术,检测20例正常子宫内膜、20例子宫内膜癌及癌旁组织中TRAIL受体DR4、DR5和假受体DcR1、DcR2阳性表达情况。结果:TRAIL受体DR4、DR5的mRNA在人正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织中均表达,诱骗受体DcR1的mRNA在子宫内膜各组织中的表达率不同,但差异无统计学意义(P>0.05),而诱骗受体DcR2的mRNA在子宫内膜癌组织中的表达率明显低于正常子宫内膜组织和癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.005),癌旁组织细胞中DcR2表达和正常子宫内膜组织相近(P>0.05)。结论:TRAIL诱骗受体DcR1、DcR2在子宫内膜癌中的低表达可能与其发病机制有关,可能对防止子宫内膜癌变具有一定作用。     

一种L-选择素配体合成酶在子宫内膜癌和正常子宫内膜中的差异表达

目的:检测L-选择素配体合成的关键酶,N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶(N-acetyl-glucosamine-6-O-sulfotransferase),在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中的表达.方法:采用RT-PCR技术检测16例子宫内膜癌(研究组)和16例正常子宫内膜(对照组)组织中N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶的表达.结果:正常子宫内膜有N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶的表达;其表达的半定量值,癌组织为0.87 0.08,正常组织为0.45±0.11,癌旁组织为0.49±0.12,癌组织中明显高于正常子宫内膜,两组差异有显著性(P＜0.001);癌组织中明显高于癌旁组织,两组差异有显著性(P＜0.001).结论:L-选择素配体合成酶-N-乙酰氨基葡萄糖-6-磺基转移酶,在子宫内膜癌中的高表达,可能与肿瘤的发生、发展和转移密切相关.     

雌孕激素受体ER、PR表达与子宫内膜癌病灶生长的相关性研究

目的:探讨雌孕激素受体ER、PR表达与子宫内膜癌病灶生长的相关性。方法:收集接受治疗的子宫内膜癌患者80例,取子宫内膜癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测其中ER、PR阳性表达情况,采用荧光定量PCR测定其中增殖、凋亡基因mRNA表达量。结果:肿瘤组织中ER、PR阳性表达量均显著低于癌旁组织(P<0.01);ER阳性组、PR阳性组肿瘤组织中增殖基因KCC1、RRM2、SRPX2、Snail mRNA的表达量分别低于ER阴性组、PR阴性组;抗凋亡基因Wip-1、Bcl-2mRNA的表达量分别低于ER阴性组、PR阴性组,促凋亡基因Bid、Bax、Fas mRNA的表达量分别高于ER阴性组、PR阴性组(P<0.01)。结论:子宫内膜雌孕激素受体ER、PR阳性表达者,肿瘤增殖活性较低、凋亡活性较高,恶性程度低于ER、PR阴性表达者。     

子宫内膜癌组织Syk基因的表达及其甲基化分析

目的 探讨脾酪氨酸激酶(Syk)基因在子宫内膜癌组织表达及该基因启动子甲基化与子宫内膜癌发生、发展的关系.方法 采用逆转录-聚合酶链反应检测52例子宫内膜癌组织及其癌周正常组织中Syk基因的表达,同时采用巢式双重甲基化特异性PCR(MSP)方法检测该基因启动子甲基化情况.结果 Syk基因在子宫内膜癌中的表达显著低于相应的癌周正常组织(P=0.000);子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因表达率显著低于无淋巴结转移组(χ2=8.32,P<0.01).Syk基因启动子甲基化发生率在子宫内膜癌组织中明显高于相应的癌周正常组织(P=0.000);子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因启动子甲基化发生率显著高于无淋巴结转移组(χ2=8.15,P<0.01);发生甲基化的肿瘤组织中,均无Syk mRNA的表达.结论 Syk基因启动子甲基化可能是导致Syk基因失活的原因之一,Syk基因启动子甲基化可能与子宫内膜癌发生发展有关.     

子宫内膜癌中SFRP1基因启动子甲基化及其mRNA表达

目的研究子宫内膜癌中SFRP1基因启动子甲基化及其对SFRP1 mRNA表达的影响。方法应用甲基化特异性PCR技术检测36例子宫内膜癌组织和对应癌旁组织中SFRP1基因启动子甲基化状态,RT-PCR方法检测上述样本的mRNA表达水平,并对结果进行统计学分析。结果子宫内膜癌组织中SFRP1基因启动子甲基化的阳性率为47.2%,癌旁组织中为11.1%,两者比较差异有统计学意义(P=0.001)。14例存在启动子甲基化和5例无启动子甲基化的子宫内膜癌组织中缺乏SFRP1 mRNA表达或表达较癌旁组织明显下降。结论SFRP1基因启动子甲基化在子宫内膜癌中常见,部分成为其表达下降的原因。     

环氧化酶-2在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的:检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在子宫内膜癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:利用半定量RT-PCR法检测52例子宫内膜癌组织及23例正常子宫内膜组织中COX-2的表达。结果:(1)COX-2在正常子宫内膜组织中均不表达,在子宫内膜癌组织中的表达阳性率为65.4%。(2)COX-2表达量与肿瘤的分化程度有关,分化程度越低,表达量越高,高分化子宫内膜癌与低分化子宫内膜癌间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:COX-2在子宫内膜癌中的表达高于正常组织,且与肿瘤的分化程度有关,提示COX-2与子宫内膜癌的形成有关,且可作为判断分化程度的指标。     

CD44基因内含子9mRNA在子宫内膜癌中的表达及意义

目的:探讨子宫内膜癌组织中CD44基因内含子9mRNA的表达情况及临床意义。方法:采用RT-PCR法检测31例子宫内膜癌组织,10例子宫内膜不典型增生组织,10例正常子宫内膜组织中CD44基因内含子9mRNA的表达情况。结果:正常子宫内膜组织中无CD44内含子9mRNA的表达,子宫内膜癌与子宫内膜不典型增生组织中有CD44内含子9mRNA表达;二者表达率分别为83.87％和70.00％,差异无显著性(P>0.05),相对含量分别为85.26±5.40和79.74±4.23,差异有显著性(P<0.05);在子宫内膜癌中CD44内含子9mRNA的表达情况与其临床病理特征无关(P>0.05)。结论:CD44基因内含子9表达与子宫内膜癌的早期发生有关。     

葡萄胎发病新基因F10在不同肿瘤组织的表达

目的研究葡萄胎差异表达新基因F10在不同组织的表达情况及其与恶性肿瘤之间的关系。方法采用原位杂交方法检测不同肿瘤组织和正常组织的F10基因mRNA表达。结果F10基因在卵巢腺癌、子宫内膜癌、乳腺癌、肝癌、胃癌等腺癌中阳性表达,不同腺癌之间阳性表达差异无显著性(P>0.05)。子宫内膜、宫颈上皮等正常组织、肝癌癌旁组织中F10基因阴性表达。结论葡萄胎差异表达新基因F10不仅与滋养细胞肿瘤密切相关,可能还在某些腺癌发生发展中起重要作用。     

PTOV1在I型子宫内膜癌表达的临床病理意义及分子机制研究

目的 探讨前列腺肿瘤过表达基因1(PTOV1)在I型子宫内膜癌组织中检测的意义及表达调控的分子机制。方法收集本院住院治疗的46例I型子宫内膜癌患者手术切除肿瘤组织及癌旁组织,免疫组化法检测组织中PTOV1蛋白的表达,比较瘤组织与癌旁组织的差异,亚硫酸氢盐测序法检测PTOV1启动子甲基化状态,比较瘤组织与癌旁组织的差异,统计分析PTOV1蛋白表达与I型子宫内膜癌患者临床参数的关系,PTOV1启动子甲基化与蛋白表达的关系及其与患者临床参数的关系。结果PTOV1在I型子宫内膜癌组织中高表达且启动子低甲基化;PTOV1高表达与I型子宫内膜癌患者年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移无关,与浸润深度呈正相关;PTOV1启动子低甲基化与I型子宫内膜癌组织中PTOV1表达呈正相关。结论PTOV1与I型子宫内膜癌浸润密切相关,其高表达的机制可能为启动子发生低甲基化。     

人原发性肝癌胰岛素样生长因子2和H19基因印迹研究

目的 研究人原发性肝癌中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor Ⅱ,IGF2)和H19基因的印迹状态,为进一步研究印迹调控机制打下基础.方法 采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)筛选IGF2和H19基因杂合标本,并用逆转录PCR-RFLP检测杂合标本IGF2和H19基因的印迹状态.结论 正常人肝组织中,IGF2呈双等位基因表达,H19呈单等位基因表达;47.1%(8/17)的肝癌标本中检测到IGF2基因的印迹获得,45.5%(5/10)的肝癌标本中检测到H19基因的印迹丢失;IGF2和H19的印迹改变没有相关性.结论 IGF2和H19的印迹异常与肝癌有关,成人肝组织中IGF2与H19的印迹调控可能相对独立.     

人附睾蛋白4在子宫内膜癌患者血清及组织中的表达及临床意义

目的：探讨人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)在子宫内膜癌患者血清及组织中的表达及临床意义。方法：ELISA法检测子宫内膜癌组40例、子宫良性疾病组42例及正常对照组40例血清HE4水平,免疫组织化学检测上述子宫内膜癌、配对的癌旁组织及子宫良性疾病组组织中HE4的表达。结果：子宫内膜癌组血清HE4水平较子宫良性疾病组及正常对照组明显升高(P＜0.01),子宫内膜癌组术后血清HE4水平较术前明显下降(P＜0.01),子宫内膜癌组织HE4表达分别高于配对的癌旁组织及子宫良性疾病内膜组织(P＜0.01),子宫内膜癌患者血清及组织HE4表达阳性率在不同的临床分期、肿瘤的分化程度、病灶范围、肌层浸润深度及淋巴结转移与否比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：子宫内膜癌患者血清及组织中HE4表达水平升高,而且其表达水平与肿瘤临床分期、分化程度、病灶大小、浸润程度及有无淋巴结转移有关,HE4可能作为子宫内膜癌辅助诊断、病情评估及预后判断的生化指标之一。     

人肝癌中IGF-2表达与基因印迹异常调控的关系

目的研究人肝癌（ＨＣＣ）中ＩＧＦ－２表达特性及与其“基因印迹”状态变化的关系。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）结合ＰＣＲ、ＲＰＡ等方法对１７例ＨＣＣ和６例ＨＣＣ细胞系进行了ＩＧＦ－２基因表达,启动子特异性等位基因的表达和ＩＧＦ－２“基因印迹”状态变化的研究。结果ＨＣＣ中ＩＧＦ－２表达为多样性（低表达,近似正常表达和过度表达）和胚胎性（启动子Ｐ３、Ｐ４重新活化和表达）;１例ＨＣＣ中ＩＧＦ－２双等位基因表达来自于Ｐ３“基因印迹”的丢失。结论在ＩＧＦ－２过度表达的ＨＣＣ中存在功能性的ＩＧＦ－２启动子特异性的“基因印迹”丢失现象。ＩＧＦ－２异常表达与其启动子调控失序有关。     

胃癌组织中肝素酶mRNA的原位表达与胃癌转移的关系

目的:探讨肝素酶(HPA)mRNA表达与胃癌转移的关系。方法:采用原位杂交技术检测36例胃腺癌组 织、相应癌旁组织及111例正常胃组织HPA mRNA的表达。结果:正常胃组织、癌旁和胃癌组织HPA mRNA阳性表达率分别为9.1％、33.3％和72.2％,3者间差异均有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移组的癌及癌旁组织中HPA mRNA阳性表达率分别为88.9％,40.7％。无淋巴结转移组癌及癌旁组织中阳性表达率分别为22.2％,11.1％,2组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:HPA mRNA高表达可作为判断胃癌转移的有益指标。     

胰岛素样生长因子受体-1在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的研究胰岛素样生长因子（insulin like growth factor,IGF）在子宫内膜癌组织中的表达情况,并探讨IGF系统与子宫内膜癌发生之间的关系。方法选择子宫内膜癌患者30例和因良性疾病切除子宫的患者20例作为对照,选用Western Blot方法检测子宫内膜癌组织中胰岛素样生长因子受体-1（insulin like growth factor receptor-1,IGF-1R）的水平。结果发现子宫内膜癌组织中IGF-1R的表达明显高于正常子宫内膜组织,且与分期密切相关。结论IGF-1R在子宫内膜癌的发生发展中起着重要作用,其受体阻断剂的应用可能是一个有前景的治疗方法。     

ADAM19在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的:研究adamalysin19 (ADAM19)在子宫内膜癌中的表达以及相关的临床特征、病理特点. 方法:应用免疫组织化学的方法检测51例子宫内膜癌、33例正常子宫内膜中ADAM19蛋白的表达情况,并分析与临床特征及病理学特点的关系.结果:ADAM19蛋白在子宫内膜癌中的表达明显高于正常子宫内膜组织,两者比较差异有统计学意义(P＜0.001);病理类型为腺鳞癌、鳞状细胞癌、浆液性乳头状腺癌、透明细胞癌、未分化癌等类型者ADAM19的表达明显高于子宫内膜样癌及腺棘癌(P＝0.042);组织学低分化、无分化者的表达明显高于中高分化者(P＝0.028);有肌层浸润者ADAM19的表达有高于无肌层侵润者的趋势(P＝0.065);但临床资料显示ADAM19的表达与临床分期、淋巴结转移无明显相关性(P＝0.328及P＝0.529).结论:子宫内膜癌组织中ADAM19蛋白呈过表达,ADAM19与子宫内膜癌的病程进展及预后相关,有可能成为一新的临床观察指标.     

子宫内膜腺癌组织中miRNA的差异表达

目的 探讨miRNA在子宫内膜腺癌及其癌旁组织中的表达差异.方法 收集子宫内膜腺癌患者癌灶和癌旁内膜组织,分别采用Trizol一步法提取总RNA,利用含有miRNA探针的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析.结果 子宫内膜腺癌与癌旁组织中111个miRNA表达存在显著差异,其中腺癌组织中68个miRNA表达上调,43个表达下调.结论 miRNA可能参与子宫内膜腺癌的发生发展过程,这为进一步揭示子宫内膜腺癌发生的分子机制提供了依据.     

端粒重复序列扩增法检测胃癌组织中端粒酶活性研究

目的：研究胃癌组织,癌旁及远端正常胃组织中的端粒酶活性,探讨其作为胃癌肿瘤标记物的可能性。方法：采用ＴＲＡＰ－ＥＬＩＳＡ法检测了５１例胃癌组织,癌旁及远端正常胃组织的端粒酶活笥表达。结果：５１例胃癌组织中端粒酶阳性表达４８例（９４．１％）,癌旁组织为１７例（３３．３％）,远端正常胃组织未检测出端粒酶活性。结论：端粒酶是特异较强的恶性肿瘤其因标志,有可能成为胃癌早期诊断和治疗的理想标记物。     

骨桥蛋白和基质金属蛋白酶-2在子宫内膜癌的表达

目的探讨骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在子宫内膜癌中的表达及其与子宫内膜癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学法检测28例正常子宫内膜、28例不典型增生子宫内膜和68例子宫内膜癌中OPN和MMP-2的表达。结果 OPN在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌组织中的表达逐渐增强,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01);MMP-2在子宫内膜癌组织中的表达高于正常子宫内膜和不典型增生内膜(P<0.01),而MMP-2在正常子宫内膜和不典型增生内膜中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。OPN和MMP-2的表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润、组织分化及淋巴结转移有关(P<0.01),但与病理类型无关(P>0.05)。OPN与MMP-2在子宫内膜癌中的表达呈显著正相关(r=0.634,P<0.01)。结论 OPN和MMP-2在子宫内膜癌中高表达可能与子宫内膜癌的发生、发展、浸润和转移有关。