健康宣教在选择性囊胚培养-单囊胚移植中应用的效果观察

目的探讨健康宣教在选择性囊胚培养-单囊胚移植中的应用效果。方法对行体外受精胚胎移植和卵胞浆内单精子注射助孕的1 412对不孕夫妇进行健康宣教,观察宣教后患者对选择性囊胚培养-单囊胚移植的接受情况及累积临床妊娠结局。结果宣教后,有1 085例患者接受单囊胚移植（76.84%）,拒绝接受单囊胚移植327例（23.16%）。接受组与拒绝组的累积妊娠率分别为75.08%、80.47%,两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;接受组累积多胎妊娠率为2.62%,明显低于拒绝组的37.66%（P〈0.01）。结论健康宣教有助于不孕症患者选择接受单囊胚移植,从而降低多胎妊娠率。     

雌激素快速诱导小鼠囊胚细胞中钙离子增加在囊胚着床中的作用

目的 观察雌激素快速诱导小鼠囊胚细胞中钙离子增加在囊胚着床中的作用。方法 获取小鼠囊胚,将其分为空白组、耦联牛血清白蛋白的大分子雌激素组（E2-BSA组）和钙离子螯合剂预处理再给予E2-BSA组（BAPTA+E2-BSA组）,采用免疫细胞化学染色结合共聚焦显微镜观察,囊胚与子宫内膜上皮细胞体外共培养和异体胚胎移植技术研究雌激素快速诱导的小鼠囊胚细胞中钙离子增加对囊胚细胞整合素的表达和定位以及对囊胚黏附和植入的影响。 结果 共聚焦显微镜观察结果显示E2-BSA可引起囊胚细胞整合素αv、β3的聚集,而BAPTA可阻断雌激素所引起的整合素的聚集和迁移。体外黏附实验结果显示,空白对照组和BAPTA+E2-BSA组的囊胚黏附率分别为35.5% 和26.7%,低于E2-BSA组的囊胚黏附率（65.6%,\P\P<0.05)。结论 雌激素诱导的小鼠囊胚细胞内钙离子的快速增加可引起整合素聚集,并在囊胚的黏附和植入过程中发挥重要作用。     

囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用探讨

目的探讨囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用价值.方法对2002年10月～2003年12月在湘雅医院生殖医学中心接受囊胚培养并行囊胚期冷冻胚胎移植的病例进行分析,了解囊胚期与卵裂期冷冻胚胎解冻后的胚胎成活率、植入率及妊娠率.结果冷冻囊胚解冻后胚胎数、胚胎成活率、植入率和妊娠率与卵裂期冷冻胚胎无显著差别(P＞0.05),囊胚解冻后经15 h过夜培养,42枚中有22枚成活,其中8枚Ⅰ,Ⅱ级继续发育或囊胚腔扩张,3例获得妊娠,妊娠率为37.5%.结论囊胚期冷冻胚胎移植同样能达到卵裂期冷冻胚胎移植的临床效果,同时增加解冻与移植间隔时间可更好地选择冻融囊胚移植,对提高妊娠率可能有一定意义.     

人类囊胚期胚胎培养-移植的研究现状

传统的体外受精-胚胎移植选择卵裂期胚胎进行移植,然而,多胎率高、成功率低始终困惑着生殖医学者,囊胚移植更符合生理过程,胚胎与子宫内膜更为同步性,因而可获得更高的胚胎种植率及临床妊娠率,且减少胚胎的移植数量,降低了多胎妊娠发生率,具有广泛的应用前景。     

卵裂期无可移植胚胎患者行囊胚培养后早期囊胚的最佳移植策略

分析卵裂期无可移植胚胎的患者，在第5天新鲜移植Gardner I期，Ⅱ期囊胚的临床结局，探讨最佳的移植策略。     

冻融周期囊胚移植的临床价值

目的：探讨冻融囊胚移植、冻融卵裂期胚胎复苏后行囊胚移植的临床价值。方法回顾性分析2012年9月至2013年8月在该院生殖医学中心接受冻融胚胎移植治疗患者共518个周期的临床资料,按移植冻融胚胎类型分为3组。A组：冻融囊胚移植,共129个周期;B组：卵裂期胚胎复苏后行囊胚培养后移植,共123个周期;C组（对照）：冻融卵裂胚移植,共266个周期。比较各组的临床结局及 A、B两组间新鲜周期胚胎和冻融周期的囊胚形成率和取消率。结果 A、B组的生化妊娠率、临床妊娠率和胚胎种植率（70．5％、61．2％、42．3％;67．5％、58．2％、40．2％）显著高于 C组（53．0％、42．5％、23．1％）（P＜0．05）;3组间流产率、异位妊娠率、多胎妊娠率差异无统计学意义（P＞0．05）。新鲜周期第3天优质胚胎与冻融胚胎复苏后的囊胚形成率（62．5％vs．57．7％）差异无统计学意义（P＞0．05）,均显著高于新鲜周期第3天非优质胚胎的囊胚形成率（20．3％）（P＜0．05）。结论冻融周期行囊胚移植可以获得较满意的临床结局;冻融卵裂期胚胎行囊胚培养后可获得较高的囊胚形成率和临床结局。     

玻璃化冷冻囊胚复苏移植与新鲜囊胚移植的临床结局比较

目的:比较新鲜囊胚移植周期与玻璃化冷冻囊胚复苏移植周期的临床结局?方法:回顾性分析2009~2011年本院生殖中心完成的874例囊胚移植周期,其中新鲜囊胚移植周期(A组)280例,冻融囊胚复苏移植周期(B组)594例,比较两组临床妊娠率?种植率?妊娠结局及新生儿情况等各项指标?结果:①A组平均移植胚胎数显著高于B组,分别为(1.88 ± 0.47)和(1.70 ± 0.53)个;临床妊娠率及种植率A组(43.93%?24.96%)显著低于B组(55.39%?40.51%,P < 0.05);②A组和B组的流产率?早产率?单胎率?多胎率分别为13.82%?32.46%?70.16%?29.84%和16.72%?33.84%?71.86%?28.14%,孕龄分别为(265.49 ± 14.45)d?(264.43 ± 16.08)d均无统计学差异(P > 0.05)?两组中仅B组见1例异位妊娠,而A组无异位妊娠;③A组和B组巨大儿?生长受限及新生儿出生缺陷发生率分别为6.00%?19.66%?1.70%和9.40%?17.82%?0.90%,两组间无统计学差异?结论:玻璃化冷冻囊胚复苏移植显著提高了囊胚移植的种植率及妊娠率,且并没有增加新生儿出生缺陷?流产率?早产率,也没有增加巨大儿和新生儿生长受限的出生比率?因此,玻璃化冻融囊胚移植技术是安全有效的,值得在临床上应用推广?     

囊胚培养的利与弊

囊胚培养是目前体外受精技术发展的新趋势,是胚胎的进一步筛选。囊胚移植时期是子宫内膜容受较适宜时期,可以获得较卵裂期胚胎更高的临床种植率,控制囊胚移植的数目有利于降低多胎妊娠率。另一方面,囊胚培养对胚胎实验室培养环境要求更高,同时有体外继续培养的风险,包括无可移植胚胎、基因风险等。该文通过分析囊胚培养的利与弊,探讨选择性单囊胚移植策略的可行性。     

囊胚期小鼠胚胎体外培养条件的研究

目的探讨体外不同培养条件对小鼠囊胚生长发育的影响。方法将妊娠d4小鼠囊胚分别培养在无血清培养液（组Ⅰ）、有血清培养液（组Ⅱ）和与无血清小鼠子宫内膜上皮细胞的共培养体系（组Ⅲ）中，观察囊胚的脱带率和扩展生长情况。结果组Ⅰ中的囊胚几乎不能脱带、生长，组Ⅱ和组Ⅲ的培养体系可以支持胚胎细胞的生长增殖。培养24h后，组Ⅲ囊胚的脱带率和扩展生长率明显高于组Ⅱ（P〈0.01），且组Ⅲ囊胚出现类似于“植入”的侵入行为。结论囊胚的孵出和生长发育有赖于外界培养条件，而囊胚与子宫内膜上皮细胞的共同培养，更接近体内发育环境，有利于囊胚的生长发育。     

鼠囊胚在饲养层上的生长行为

目的 比较自然孵化法、去透明带法、免疫外科法去滋养层三种方法对胚胎贴壁率、平均贴壁时间及内细胞团(ICM)克隆形成率的影响。观察鼠囊胚在小鼠原代胎儿成纤维细胞饲养层上的生长行为。方法 超排卵获得囊胚，随机分成A、B、C3组。A组：自然孵化法；B组：去透明带法；C组：免疫外科法去滋养层，分离获得ICM。观察鼠囊胚及ICN在饲养层上的生长行为。结果 3组胚胎贴壁率、ICM克隆形成率、平均贴壁时间分别为A组：83％、83％、36～48h；B组：82％、82％、24～36h；C组：71％、71％、24～36h。滋养层细胞与ICM同时增殖，但滋养层细胞扩展范围小，不形成一层半透明膜状结构。ICM在第4天时能够充分增殖且未分化，垂直隆起生长，呈典型的卵圆柱状结构。结论 三种方法对胚胎贴壁率、ICM克隆形成率无显著差异，去透明带法、免疫外科法使胚胎平均贴壁时间短于自然孵化法。     

围植入期胚泡丢失的检测

采用玫瑰花结抑制试验，对３３名欲妊娠正常妇女排卵后２～７天的血清进行了早孕因子（ＥＰＦ）活性的测定。结果：３３例血清中１６例测出ＥＰＦ活性，随访发现１２例妊娠（其中１例妇女妊娠５５天时胚胎丢失）；４例（１５．５％）妇女围植入期胚泡丢失。     

囊胚培养和移植的临床应用

目的 :探讨囊胚培养及移植的结局以及囊胚质量对其影响。 方法 :选择 5 7例因输卵管及男性因素受体精 -胚胎移植治疗 ,且以促进性腺激素反应良好者 ,常规取卵、受精后采用G1/G2序贯培养 ,5D或 6D(天 )选择 3期以上胚胎移植。观察囊胚的植入率、临床妊娠以及囊胚分期对其影响。 结果 :( 1)平均取卵 14 84个 ,受精卵 10 3 3个 ,受精率 69 6% ;5D及 6D平均形成囊胚 3 40个 ,每受精卵的囊胚形成率为 3 2 9%。 5 1例有一个或以上可移植囊胚 ,平均移植胚胎 2 3 1个 ,获临床妊娠 2 4例 ,囊胚植入率为 3 1 2 % ,临床妊娠率为 47 1%。 ( 2 )按囊胚质量分期分组 ,移植至少一个扩展期囊胚组 3 0例 ( 5 8 8% ) ,植入率及临床妊娠率分别为 40 %及 60 % ;无扩展期囊胚组 2 1例 ,植入率及临床妊娠率分别为 18 8%及 2 8 6%。经统计学分析 ,两组植入率差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,临床妊娠率差异有显著性 (P <0 0 5 )。 结论 :采用序贯培养法进行囊胚培养移植切实可行 ,囊胚的质量对移植结局有影响。     

随机对比两种不同囊胚分级系统

更详细的囊胚分级系统有助于选择出有潜在最高种植率的囊胚。     

玻璃化冷冻囊胚复苏移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的妊娠结局比较

目的比较玻璃化冷冻囊胚复苏后移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的临床妊娠结局。方法回顾性分析2013年1月至2014年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心行玻璃化冷冻复苏后移植囊胚的不孕症患者134例(134个周期)的妊娠情况,其中卵裂期胚胎培养至囊胚冷冻复苏后移植者79个周期(A组),卵裂期胚胎冷冻复苏后继续培养至囊胚再移植者55个周期(B组)。比较2组患者临床妊娠率、着床率及早期流产率。结果 A组79个周期,复苏囊胚数151个,存活囊胚数133个,复苏率88.08%(133/151);获得可移植囊胚72个周期,妊娠周期46个,妊娠率为63.89%(46/72),着床率51.56%(66/128),早期流产率为15.21%(7/46)。B组55个周期227个胚胎,复苏存活170个胚胎,复苏率74.89%(170/227);其中45个周期共形成可移植囊胚93个,囊胚形成率为54.70%(93/170);获得妊娠周期23个,妊娠率为51.11%(23/45),着床率为36.56%(34/93),早期流产率13.04%(3/23)。A组囊胚复苏率高于B组卵裂期胚胎复苏率(P<0.05),且A组着床率显著高于B组(P<0.05),但2组临床妊娠率、流产率、异位妊娠率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻囊胚复苏移植能获得较高的着床率和妊娠率,囊胚可能是玻璃化冷冻胚胎的较好阶段。     

盐酸异丙嗪对小鼠胚泡植入的影响

目的 :研究盐酸异丙嗪对小鼠胚植入的影响。方法 :取孕 3～ 7d小鼠 ,每天上午 10时腹腔注射盐酸异丙嗪溶液 ;另取孕 4d小鼠 ,于上午 10时子宫角注入盐酸异丙嗪溶液 ,对照组同时用同法注射生理盐水 0 .2ml。于孕 8d检查胚胎植入数 ,同时 ,取子宫观察内膜的组织学及免疫组织化学变化。结果 :腹腔 2mg药物注射组抗植入率达 10 0 % ,腹腔 1mg药物组的抗植入率为 75 % ,子宫角药物注入组抗植入率达 75 % ,均明显少于对照组。组织学及免疫组化结果表明 ,盐酸异丙嗪可引起蜕膜细胞退化、解体 ,使蜕膜细胞不能正常形成纤维粘连蛋白 (FN)和层粘连蛋白 (LN)。结论 :盐酸异丙嗪对小鼠有明显的抗植入作用     

卵裂期胚胎、囊胚的玻璃化冷冻解冻的妊娠结果分析

目的 比较卵裂期胚胎、囊胚行玻璃化冷冻解冻后的妊娠结果.方法 回顾性分析2010年6月～2010年9月在该院生殖中心行玻璃化冷冻解冻患者共185周期的妊娠情况;其中卵裂期胚胎冷冻解冻后移植者127周期,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养后移植者42周期,囊胚冻融后移植16周期.结果 玻璃化冷冻解冻患者共185周期,移植176周期,获得妊娠75周期,妊娠率42.61%;卵裂期胚胎冻融后移植者,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养者,囊胚冻融移植者复苏率分别为96.76%(299/309)、95.83%(161/168)、94.12%(32/34),着床率分别为22.37%(66/295)、23.44%(15/64)、50%(14/28).妊娠率分别为40.94%(52/127)、33.33%(11/33)、75%(12/16).卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养的患者共42人,其中有9人未形成可移植囊胚而取消移植.其他两组解冻后没有取消移植的例数.结论 3组的玻璃化冻融复苏率无统计学差异.囊胚冷冻解冻能获得较高的着床率和妊娠率.     

立体着床模型--小鼠囊胚与子宫内膜的共培养

目的:建立小鼠囊胚体外着床的三维模型,为着床机制的研究提供重要工具.方法:将小鼠囊胚与其自身子宫内膜分别共培养在空气、含500,750和950 mL/L O2的混合气体与组织培养液的气液界面上,比较不同O2浓度下小鼠囊胚的贴附率,确定体外共培养的最佳O2浓度;同时将确认有囊胚贴附的子宫内膜取出作HE染色.结果:不同O2浓度下,囊胚的贴附率分别为64.75%,47.86%,42.37%和30.97%,x2检验提示其差异有显著性(x2=28.145,P=0.000);且随着混合气体中O2浓度的逐渐升高,囊胚贴附率呈逐渐降低趋势.因此50 mL/L CO2 950 mL/L空气对囊胚与子宫内膜的共培养是最有利的;同时,囊胚贴附子宫内膜后并无扩展行为而是直接侵入子宫内膜.结论:50 mL/L CO2 950 mL/L空气最有利于囊胚与子宫内膜的共培养;且囊胚贴附子宫内膜后不发生外延生长,而是直接侵入子宫内膜.本实验成功地建立了小鼠囊胚体外着床的三维模型.