海马注射β淀粉样蛋白1-40对大鼠脑铁含量及膜铁转运蛋白表达的影响

目的通过检测阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马铁含量和膜铁转运蛋白(Fpn)的变化,探讨AD时脑铁升高的机制。方法雄性(290±10)g SD大鼠随机分为3组,模型组经海马内注射β淀粉样蛋白(Aβ)1-40,假手术组注射生理盐水,另取正常对照组不作任何处理。于第1、2、3和4周取各组大鼠脑组织,分离海马,经石墨炉原子吸收分光光谱法测定海马铁含量,DAB增强的Perls’铁染色观察海马铁分布,RT-PCR检测FpnmRNA表达,Western blot和免疫组织化学染色检测Fpn蛋白表达。结果注射Aβ1-40后,模型组除第1周无明显改变外,随着时间延长,海马铁含量逐渐升高,均明显高于正常对照组(P<0.01),铁染色明显增强,各区均出现大量铁沉积颗粒;模型组海马Fpn mRNA和蛋白水平表达均随着时间延长逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论海马内注射Aβ1-40可引起大鼠海马Fpn表达减少,Fpn表达减少可能是AD时脑铁升高的原因。     

不同载铁状态下HL-60细胞转铁蛋白受体和铁蛋白mRNA的表达

目的:探讨不同载铁情况下HL-60细胞中转铁蛋白受体(TfR)mRNA和铁蛋白(Fn)mRNA的表达情况.方法:取HL-60细胞分5组培养.FeCl3-20组和FeCl3-40组培养液中加入FeCl3,终浓度分别为20 μmol/L,40 μmol/L;DFO-50和DFO-100组培养液中分别加入去铁胺(DFO)50 μmol/L,100 μmol/L;对照组用单纯培养液,不加FeCl3或DFO.分别于细胞培养12 h、24 h和48 h收集细胞,采用RT-PCR半定量法测定TfR mRNA和Fn mRNA的相对表达量.结果:与对照组比较,DFO-50和DFO-100组TfR mRNA表达量随培养时间的延长而升高,Fn mRNA表达量变化不大(P＞0.05).FeCl3-20和FeCl3-40组TfR mRNA的表达随培养时间的延长,先增高后降低,Fn mRNA的表达则逐渐降低.结论:TfR 和Fn 不同程度地参与了HL-60细胞铁代谢过程.     

腺苷A2a受体激动剂对脓毒症急性肾损伤中内质网应激的调节作用

目的:通过建立慢性间歇性低氧(CIH)大鼠模型，探讨CIH暴露对肝脏铁代谢的影响及可能的机制。方法:将20只SD大鼠随机分为常氧对照组(对照组)和模型组(CIH组),将模型组大鼠置于动物间歇性低氧舱内，前1.5min向舱内充入100%氮气使氧气浓度降至5%,后1.5min充入100%氧气使氧气浓度升至21%,每一循环3min, 8h/d, 35d;常氧对照组大鼠置于相同舱内，充入正常空气。HE染色观察肝脏损伤情况，比色法检测血清铁和总铁结合力(TIBC);普鲁士蓝染色观察肝脏铁含量；Western blot检测肝脏二价金属转运蛋白[DMT1(+ire)、DMT1(-ire)]、膜铁转运蛋白(FPN1)、转铁蛋白受体1(TfR1)、铁蛋白(FTL)、p-STAT3、STAT3蛋白表达；Q-PCR检测肝脏铁调素(hepcidin)、DMT1(+ire)、DMT1(-ire)、FPN1、TfR1、白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达。结果:与对照组相比，模型组大鼠肝脏细胞结构紊乱，出现脂肪空泡、细胞核萎缩；与对照组相比，模型组大鼠TfR1和DMT1(+ire)mRNA及蛋白表达显著上升(P...     

甲状腺功能亢进对大鼠肝脾铁含量及血红素加氧酶1表达的影响

目的 通过检测甲状腺功能亢进(简称甲亢)时大鼠肝、睥组织铁含量和血红素加氧酶1(HO-1)的表达,探讨甲亢对大鼠机体铁代谢的影响.方法 将18只雌性SD大鼠分为甲亢4周组、甲亢8周组和对照组,每组6只.甲亢组灌胃给药优甲乐,对照组灌胃生理盐水.造模结束分别取各组大鼠肝、脾脏,用二氨基联苯胺增强的Perl's铁染色法检测肝、脾组织铁含量,用逆转录PCR技术检测大鼠肝、脾组织HO-1 mRNA的表达;利用Western blot和免疫组织化学染色法对大鼠肝、脾脏HG1表达进行分析.结果 甲亢模型4周、8周组大鼠的肝、脾组织铁染色均明显强于对照组,且甲亢8周组强于甲亢4组(P＜0.01);甲亢4周、8周组大鼠的肝、脾脏的HO-1 mRNA、蛋白表达均高于对照组,且甲亢8周组明显高于4周组,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 甲亢可引起肝、脾组织铁含量增加,HO-1表达增强.     

睡眠剥夺对大鼠肝脏铁代谢的影响

目的 探讨睡眠剥夺对大鼠肝脏铁代谢的影响及相关分子机理.方法 20只雄性SD大鼠（180±10 g）随机分为对照组（CG）和睡眠剥夺组（SDG）.CG大鼠正常饲养,SDG大鼠采用改良多平台睡眠剥夺法建立模型.睡眠剥夺5d后,采用比色法检测血清、肝组织铁离子浓度,实时荧光定量PCR检测肝组织铁调素基因HAMP及IL-6、IL-1 mRNA表达水平,Western-Blot检测肝组织铁蛋白、磷酸化STAT3蛋白表达.结果 与CG组相比,SDG大鼠血清铁离子降低（P＜0.05）,而肝脏内的铁离子浓度升高（P＜0.01）;SDG大鼠肝组织HAMP、IL-6和IL-1 mRNA表达量分别升高1.1、3.2和1.7倍（P值均小于0.01）;SDG大鼠肝脏组织铁蛋白和pSTAT3蛋白表达显著高于对照组（P＜0.01）.结论 睡眠剥夺可能通过IL-6-hepcidin轴导致大鼠机体铁代谢紊乱.     

铁调节蛋白在慢性病贫血大鼠肝脏铁代谢紊乱中的作用

目的：探讨一氧化氮（NO）、铁调节蛋白（IRP）在慢性病盆血（ACD）大鼠肝组织铁代谢紊乱中的调节作用。方法：在传统佐剂性关节炎大鼠模型基础上，通过追加注射福氏佐剂两次，增加其免疫反应，从而诱发建立贫血大鼠模型。对贫血模型组和正常对照组大鼠肝脏铁含量、铁蛋白、NO、IRP－2mRNA水平及IRP结合活性进行检测。结果：佐剂性关节炎大鼠经追加福氏佐剂，肝伯、铁蛋白水平升高（P＜0．05），与ACD铁代谢改变特征一致；ACD大鼠肝组织IRP结合活性较正常对照组升高，IRP－2mRNA表达下调，NO水平与IRP结合活性呈正相关。结论：NO、IRP在ACD大鼠肝脏铁代谢紊乱中起重要作用。     

甲状腺功能亢进对大鼠红细胞系列指标及血清铁的影响

目的：研究甲状腺功能亢进（简称甲亢）对大鼠红细胞系列指标及血清铁的影响。方法SD雌性大鼠分为甲亢模型组和对照组,优甲乐灌胃制造甲亢模型,对照组灌服生理盐水。分别在灌胃给药后的第1～8周采血,采用放射免疫法测定大鼠血清三碘甲状腺原氨酸（T3）、四碘甲状腺原氨酸（T4）及促甲状腺激素（TSH）含量;使用全自动血细胞分析仪测定大鼠红细胞系列指标;比色法测定血清铁含量和总铁结合力。结果甲亢模型组大鼠血清T3、T4含量增高,而TSH含量下降。甲亢模型组大鼠红细胞计数（RBC）在第2～8周均明显高于对照组（P＜0．05）;红细胞压积（HCT）在第1～8周均明显高于对照组（P＜0．01）;平均红细胞体积（MCV）在第2～8周均明显低于对照组（P＜0．05）;平均细胞血红蛋白浓度（MCHC）在第1～8周均明显低于对照组（P＜0．01）;红细胞体积分布宽度标准差（RDW‐SD）和红细胞体积分布宽度变异系数（RDW‐CV）在第1～2周均高于对照组（P＜0．01）;血清铁含量和总铁结合力在第4～8周均高于对照组（P＜0．01）。结论本实验甲亢模型鼠虽未出现明显的贫血表现,但红细胞有明显的低色素性改变,血清铁含量和血清铁结合力均升高,提示有铁利用障碍。     

miR-137通过调控血红素铁输出蛋白FLVCR、BCRP对大鼠I/R损伤的保护作用

探讨大鼠脑缺血/再灌注（I/R）后血红素铁输出蛋白猫白血病病毒C亚组受体(FLVCR)、乳腺癌抗性蛋白(BCRP)的表达变化及miR-137对其表达的调控作用。方法 选取SD大鼠60只,随机分为假手术（SO）组、模型（MCAO/R）组、miR-137模拟物（Mimic）组、miR-137模拟对照（Mimic对照）组、miR-137抑制物（Inhibitor）组、miR-137抑制对照（Inhibitor对照）组,每组10只。采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,分别于再灌注后12、24 h取材。通过qRT-PCR测定大鼠脑组织FLVCR、BCRP及miR-137的mRNA表达,免疫组化检测FLVCR、BCRP蛋白的表达水平。结果MCAO/R组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P＜0.01),Mimic组评分显著下降（P＜0.01）,Inhibitor组评分显著升高（P＜0.05）。MCAO/R组miR-137 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）,与Mimic对照组同时间比较,Mimic组miR-137 mRNA表达水平显著升高（P＜0.01）,且24 h升高更显著（P＜0.05）;与Inhibitor对照组同时间比较,Inhibitor组miR-137 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）,且24 h降低更显著（P＜0.05）。与SO组比较,MCAO/R组FLVCR mRNA及蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05);与Mimic对照组比较,Mimic组FLVCR mRNA及蛋白表达水平在12 h显著升高（P＜0.05),24 h最高(P＜0.05);与Inhibitor对照组比较,Inhibitor组FLVCR mRNA及蛋白表达水平降低（P＜0.01）,在24 h降低更明显（P＜0.05）。与SO组比较,MCAO/R组BCRP mRNA及蛋白表达水平显著降低（P＜0.05);与Mimic对照组比较,Mimic组BCRP mRNA及蛋白表达水平在12 h显著升高（P＜0.01）,24 h最高（P＜0.05）;与Inhibitor对照组比较,Inhibitor组BCRP mRNA及蛋白表达水平显著降低（P＜0.01)。结论 miR-137过表达可能促进FLVCR和BCRP的表达以保护大鼠脑缺血再灌注损伤     

依布硒林减轻DMT1诱导的铁死亡在实验性大鼠蛛网膜下腔出血中的研究

目的 观察大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后二价金属离子转运体(divalent metal transportor 1,DMT1)的表达变化及铁死亡情况,探讨依布硒林可能通过抑制DMT1的表达减轻铁死亡,从而对SAH后早期脑损伤起保护作用.方法 血管内穿刺法构建SD大鼠SAH模型,免疫荧光检测脑皮质中DMT1、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)表达定位,Western blot检测脑皮质中SAH后72 h内各时间点及侧脑室注射依布硒林后DMT1、GPX4的表达变化,检测细胞内铁沉积情况、铁含量、脂质过氧化物产物丙二醛(malonaldehyde,MDA)等铁死亡指标,以及大鼠脑水肿和神经功能学评分变化.结果 免疫荧光检测结果显示DMT1、GPX4表达于大鼠脑皮质神经元胞质内.Western blot检测结果显示,与假手术组相比,DMT1表达先升高,24 h降低后再次升高,48、72 h仍增高(P＜0.01);而SAH后GPX4的表达降低,24 h显著降低(P＜0.01),随后48、72 h继续降低(P＜0.01).与SAH组、溶剂组相比,依布硒林2 mg/kg组中DMT1降低(P＜0.01);依布硒林4 mg/kg干预后DMT1表达降低显著(P＜0.01),GPX4表达增高显著(P＜0.01).与SAH组、溶剂组相比,依布硒林4 mg/kg组中细胞内铁沉积减少,铁含量、MDA减少(P＜0.01);GSH含量、GPX4活性增加(P＜0.01).神经功能学评分、脑水肿得到改善(P＜0.01).结论 依布硒林可能通过抑制DMT1的表达减少铁向胞内转运继而减轻铁死亡,从而对SAH后早期脑损伤起保护作用.     

脑泰方对血红蛋白诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及机制

目的探讨脑泰方对体外血红蛋白(Hb)诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及其机制。方法原代培养新生SD大鼠皮质神经元,采用Hb诱导神经元模拟建立脑出血后神经元损伤细胞模型;实验设正常组、模型组、空白血清对照组、去铁胺组和10%脑泰方含药血清组。采用CCK8法检测各组细胞活力;采用Calcein-AM染色法检测各组细胞内铁含量;采用免疫荧光与高内涵细胞成像分析技术(HCA)检测各组神经元转铁蛋白(Tf)及其受体(TfR)、二价金属离子转运体(DMT-1)蛋白表达情况;采用酶联免疫吸附法检测各组上清液中脂质活性氧自由基(lipid-ROS)含量;采用real-time PCR法检测各组Tf、TfR和DMT-1 mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组神经元细胞活力明显降低(P0.01),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平显著升高(P0.01),Tf、TfR及DMT1蛋白及mRNA表达水平明显上调(P0.01)。与模型组比较,去铁胺组和10%脑泰方含药血清组细胞活力显著提高(P0.01或P0.05),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平明显降低(P0.01),Tf、TfR及DMT-1蛋白及其mRNA表达显著下调(P0.01或P0.05),去铁胺组和10%脑泰方含药血清组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论脑泰方可通过调节Hb诱导的大鼠皮质神经元细胞铁代谢,减轻神经元铁超载及lipid-ROS累积,从而提高神经元细胞活力;其作用与铁死亡抑制剂去铁胺一致,提示脑泰方可能通过抑制脑出血后神经元铁死亡而发挥神经保护作用。     

全反式维甲酸诱导K562细胞分化过程中线粒体铁蛋白表达的研究

目的 研究K562白血病细胞在全反式维甲酸(ATRA)诱导分化过程中线粒体铁蛋白(MtF)、运铁蛋白受体1(TfR1)和铁蛋白(Fn)mRNA表达水平的变化情况,探讨MtF在白血病细胞增殖和铁代谢方面的作用.方法 K562细胞加入ATRA(终浓度1 μmol/L)中诱导培养,分别于第1、3、5 d收集细胞,分别进行:①瑞士染色观察各时间点的细胞形态;流式细胞学检测细胞表面分化抗原CD13的表达;②Trizol法提取各时间点细胞的RNA,通过半定量RT-PCR方法 检测各时点MtF、TfR1和Fn基因的表达水平.同时设未用ATRA诱导培养的K562细胞为对照组.结果 1 μmol/L的ATRA可诱导K562细胞向粒系细胞分化,诱导培养第5 d,细胞表面CD13的表达水平增加,诱导分化率为21.2%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).诱导分化前K562细胞即有MtF mRNA表达,但随细胞诱导时间的延长,MtF和TfR1 mRNA表达呈下降趋势,诱导分化第5 d的表达水平分别为诱导分化前的86.5%和79.2%;而Fn mRNA的表达呈上调趋势,诱导分化第5 d表达水平为诱导分化前的1.21倍.结论 ATRA诱导K562细胞向粒系细胞分化过程中,MtF和TfR1 mRNA表达下调,而Fn mRNA表达上调,这种协调变化有助于降低细胞通过TfR1介导的铁摄取,从而抑制或影响细胞增殖潜能.     

基于Nrf2通路研究通腑养髓方调控Wilson病模型TX小鼠神经细胞铁死亡的机制

目的 基于核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2- related factor,Nrf2)信号通路观察通腑养髓方对Wilson病(Wilsons disease, WD)模型TX小鼠神经细胞铁死亡的干预效应,并探讨通腑养髓方对WD神经细胞损伤的保护机制。方法 以DL小鼠为正常对照,将TX小鼠随机分为模型组和通腑养髓方组,通腑养髓方组以通腑养髓方中药灌胃治疗30 d,模型组和对照组小鼠以生理盐水灌胃,末次灌胃后取各组小鼠脑组织。采用电感耦合等离子体质谱法检测小鼠脑组织铜、铁微量元素含量,免疫荧光染色技术检测小鼠脑组织转铁蛋白受体（transferrin receptor, TfR）表达水平,比色法检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性和丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量,透射电子显微镜观察小鼠脑组织细胞线粒体形态变化,Fluoro-Jade B（FJB）染色观察小鼠神经细胞损伤程度,Western blot法检测小鼠脑组织铁死亡及Nrf2信号通路相关蛋白［Nrf2,铁蛋白重链（ferritin heavy chain,FTH1）、血红素加氧酶1（heme oxygenase 1,HO1）、醌氧化还原酶1（NADPH quinone oxidoreductase 1,NQO1）］表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组小鼠脑内铜、铁含量,TfR表达水平,MDA含量显著升高（P<0.05）,SOD活性显著下降（P＜0.05）;与模型组比较,通腑养髓方组小鼠脑内铁含量,TfR表达水平,MDA含量显著降低（P＜0.05）,SOD活性显著升高（P＜0.05）。模型组小鼠脑组织线粒体膜皱缩,嵴数量减少或消失,空泡产生;通腑养髓方组小鼠脑组织线粒体结构损伤程度明显减轻。与正常对照组比较,模型组小鼠神经细胞损伤程度显著增加（P<0.05）;与模型组比较,通腑养髓方组神经细胞损伤程度显著减少（P<0.05）。模型组小鼠脑内谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）表达水平较正常对照组显著降低（P< 0.05）,通腑养髓方组脑内GPX4表达水平较模型组显著升高（P<0.05）。模型组小鼠脑内Nrf2、FTH1、HO1、NQO1表达水平较正常对照组显著降低（P<0.05）,通腑养髓方组脑内Nrf2、FTH1、HO1、NQO1表达水平较模型组显著增加（P<0.05）。结论 通腑养髓方通过上调TX小鼠神经细胞GPX4等铁死亡相关蛋白及Nrf2、FTH1、HO1、NQO1等Nrf2通路相关蛋白的表达水平,减轻铜蓄积所致的氧化应激,抑制神经细胞铁死亡,从而起到保护神经细胞的作用。     

卡托普利抗大鼠肺纤维化的作用及机制

目的探讨卡托普利对肺纤维化的治疗作用及可能的机制。方法将64只雄性SD大鼠随机分为对照组、博莱霉素模型组、卡托普利治疗组、地塞米松组治疗组,每组16只。采用HE染色、Masson染色行肺泡炎、肺纤维化程度分级,分别测定各组大鼠血浆AngⅡ、转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA含量以及羟脯氨酸、超氧化物歧化酶、丙二醛含量,并作各组间的对比分析。结果（1）第14天时：与对照组比较,其他3组大鼠肺泡炎评分、HYP含量、AngⅡ含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显升高（P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著降低（均P〈0.01）,仅模型组肺纤维化评分显著高于对照组（P〈0.01）;与模型组比较,卡托普利组及地塞米松组肺泡炎、肺纤维化评分及HYP含量、AngⅡ含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显降低（P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著升高（均P〈0.01）;地塞米松组显著高于卡托普利组（P〈0.01）,卡托普利组AngⅡ含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显低于地塞米松组（P〈0.05或0.01）。（2）第28天时：与对照组比较,其他3组大鼠肺泡炎及肺纤维化评分、HYP含量及TGF-β1 mRNA表达水平均显著升高（均P〈0.01）,模型组和地塞米松组AngⅡ含量显著升高（均P〈0.01）,仅模型组SOD含量显著降低、MDA含量显著升高（均P〈0.01）;与模型组比较,卡托普利组及地塞米松组肺泡炎及肺纤维化评分、HYP含量、MDA含量及TGF-β1 mRNA表达水平均明显低于模型组（均P〈0.05或0.01）,SOD含量均显著升高（均P〈0.01）,卡托普利组AngⅡ含量显著降低（P〈0.01）,地塞米松组AngⅡ含量显著升高（P〈0.01）;卡托普利组TGF-β1 mRNA表达水平明显低于地塞米松组（P〈0.05）。结论卡托普利可能是通过抑制AngⅡ的生成、减少TGF-β1 mRNA的表达以及纠正氧化／抗氧化失衡而博莱霉素诱导的大鼠     

ET-1受体在肺动脉高压形成中的作用

目的：检测内皮素－1(ET-1)及其受体在肺动脉高压大鼠肺组织中的表达，以探讨左向右分流肺动脉高压的发病机理。方法：选择雄性Wistar大鼠34只，随机分为实验Ⅰ组（n=15）、Ⅱ组（n=9）、对照组（n=10）。实验组大鼠用套管法建立右侧颈部左向右分流模型；术后4周，实验Ⅱ组大鼠给予BQ123〔cyclopropane (Trp-Asp-Pro-Val-Leu)〕,连用12周；术后16周测取大鼠肺动脉收缩压；留取肺组织,以放射免疫法测定肺组织中ET-1含量；RT-PCR法检测肺组织中PPET-1mRNA、ETA及ETB受体mRNA的表达。结果：①与实验Ⅱ组及对照组相比，实验Ⅰ组大鼠肺动脉压及肺组织ET 1含量明显升高（P＜0.05,P＜0.001,P＜0.01,P＜0.001），PPET-1 mRNA和ETA 受体mRNA的表达明显增强（P＜0.05, P＜0.001）,ETB受体mRNA的表达明显降低(P＜0.01, P＜0.001);②与对照组相比，实验Ⅱ组大鼠肺组织PPET-1mRNA增强(P＜0.05)，ETB受体mRNA的表达下降(P＜0.05)。结论：不同类型的ET-1受体在左向右分流肺动脉压变化中的作用不同。     

电针“委中”穴对腰多裂肌损伤大鼠铁代谢的调节

目的观察多时间点大鼠多裂肌损伤后铁代谢相关蛋白的变化规律,探讨不同干预时间条件下电针"委中"穴对多裂肌损伤性腰痛的治疗作用。方法 SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、电针组,每组30只,各组再分为1 d、2 d、3 d、5 d、7 d 5个亚组,每个亚组6只。采用注射0.5%布比卡因(bupivacaine, BPVC)的方法造模,电针组电针双侧"委中"穴(1次/d),正常组、模型组不进行电针干预。分别于治疗的1 d、2 d、3 d、5 d、7 d取材。采用HE染色观察造模前后多裂肌形态变化;采用生化法检测多裂肌组织总铁含量变化;采用Western blot法检测铁蛋白重链(ferritin heavy chain1, FTH1)含量;采用Real-time PCR法检测多裂肌膜蛋白转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1, Tfr1)、二价金属转运蛋白1(divalent metal transporter 1, DMT1)mRNA的表达。结果 HE染色结果显示,模型组相较于正常组可见肌纤维断裂、坏死并伴有炎性细胞浸润;与同时间点模型组相比,电针组受损肌纤维可见明显改善。生化法检测结果显示,与同时间点正常组相比,模型组、电针组总铁含量升高(P<0.01);Western blot、Real-time PCR检测结果提示模型组FTH1蛋白表达低于正常组(P<0.05或P<0.01),而Tfr1与DMT1 mRNA表达均高于正常组(P<0.05或P<0.01);与同时间点模型组相比,电针1 d、2 d、3 d、5 d组FTH1蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),而电针2 d、3 d、5 d、7 d组Tfr1 m RNA和电针1 d、2 d、3 d、5 d组DMT1 mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01);各模型组间比较发现,模型2 d组FTH1蛋白表达最低(P<0.05),而模型2 d、3 d组Tfr1 mRNA表达较高(P<0.05),模型3 d组DMT1 mRNA表达最高(P<0.05);各电针组比较结果显示,FTH1蛋白在电针2 d组最高(P<0.05),电针3 d、5 d、7 d组Tfr1 mRNA表达较低(P<0.05),电针3 d组DMT1 mRNA表达较高(P<0.05)。结论在BPVC致多裂肌损伤模型中,局部受损多裂肌发生铁代谢紊乱,且在急性损伤期较典型。电针"委中"穴能促进损伤多裂肌的修复,其机制可能与调节多裂肌铁代谢、减轻组织过氧化损伤相关,并且在电针持续干预3 d后显著促进对铁代谢紊乱水平的调节。     

肥胖对小鼠肝脏铁代谢调控分子Hepcidin、Lipocalin-2和Ferroportin-1表达的影响

目的：通过建立高脂饮食诱导的肥胖动物模型,观察肥胖对小鼠肝脏中铁代谢相关调控分子铁调素（hepcidin）、脂质运载蛋白-2（lipocalin-2,LCN2）和膜铁输出蛋白-1（ferroportin-1,FPN1） mRNA及蛋白表达的变化,初步探讨肥胖影响肝脏铁代谢相关分子表达调控的机制。方法将4～6周龄C57BL／6J小鼠随机分为正常对照组和膳食诱导的肥胖模型组,每组10只,对照组给予正常饲料喂养,肥胖组给予高脂饲料喂养,实验饲喂周期为15周。建模成功后取小鼠肝脏,采用实时荧光定量PCR法检测小鼠肝脏中铁代谢相关调控分子hepcidin、LCN2和FPN1 mRNA的表达,并应用Western Blot法检测小鼠肝脏LCN2和FPN1蛋白的表达。结果与对照组小鼠比较,肥胖模型组小鼠肝脏hepcidin mRNA表达水平显著升高,差异具有统计学意义（ P ＜0.05）,而LCN2和FPN1 mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义（ P ＞0.05）。结论肥胖可以显著上调小鼠肝脏hepcidin的表达,而对肝脏铁代谢相关调控分子LCN2和FPN1的表达并无显著影响。故还不能够认为肥胖可以影响肝脏铁代谢调控分子lipocalin-2和ferroportin-1的表达,进而导致细胞摄取及释放铁的能力发生障碍,使得机体对铁的需求不能满足要求,出现铁代谢功能紊乱,导致肥胖性铁缺乏的发生,而是通过上调肝脏hepcidin表达直接或间接影响其他铁代谢相关调控分子或者存在更为复杂的调控机制,这仍需我们进一步的实验研究及探索。这也为进一步研究肥胖对肝脏铁代谢相关调控分子表达的影响及引起铁缺乏的机制提供了理论和实验基础。     

钙通道激动剂BayK8644对急性肺损伤大鼠PAR－1表达的影响

目的：探讨内毒素所致急性肺损伤后大鼠蛋白酶激活受体－1（ PAR－1）的动态表达及钙通道激动剂BayK8644的干预作用。方法将80只大鼠随机分为10组（ n＝8）,即正常组、内毒素所致肺损伤0.5 h、1 h、2h和4h组和激动剂干扰后对照组,肺损伤0.5h、1h、2h和4h组。用内毒素制备大鼠急性肺损伤模型。免疫组化方法测定各时间点大鼠肺组织PAR－1蛋白的表达;RT－PCR检测PAR－1 mRNA的表达。结果正常组大鼠可见少量PAR－1 mRNA表达,模型组大鼠内毒素所致肺损伤后PAR－1 mRNA表达随损伤时间的延长而增加（P＜0.01）。经钙通道激动剂BayK8644干预后,内毒素所致肺损伤各时间组内PAR－1 mRNA的表达均有不同程度的下降（P＜0.05）,但PAR－1 mRNA的表达在钙通道激动剂BayK8644干预组内仍随着损伤时间的延长而增加（ P＜0.05）。结论在内毒素致肺损伤的4 h内,早期有针对性地使用钙通道激动剂BayK8644可增加钙离子内流,有一定的肺保护作用。     

三七皂苷Rg1对慢性应激大鼠脑组织神经颗粒素表达的影响

［摘要］目的　探讨三七皂苷Rg1对慢性应激模型大鼠皮层、海马神经颗粒素（neurogranin,Ng）表达的影响．方法　成年雄性SD大鼠36只,随机分为对照组（CON）、模型组（CUS）和治疗组（CUS-G）,采用慢性不可预见性应激方法建立慢性应激动物模型,运用Morris水迷宫实验对大鼠进行学习记忆力测试,QPCR、Western blot分别检测皮层、海马Ng mRNA及Ng蛋白含量．结果　水迷宫实验显示慢性应激后动物学习记忆能力显著降低,而治疗组大鼠逃避潜伏期明显降低（P＜0.0 5）;应激6周后,慢性应激大鼠皮层、海马Ng mRNA水平皆与模型大鼠有差异（P＜0.05、P＜0.01）,治疗组大鼠皮层、海马Ng mRNA水平皆与模型大鼠有差异（P＜0.01、P＜0.05）;慢性应激大鼠皮层、海马Ng含量水平与模型大鼠有差异（P＜0.05、P＜0.01）,治疗大鼠皮层、海马Ng含量亦与模型大鼠有差异（P＜0.01、P＜0.05）．结论　慢性不可预见性应激导致大鼠皮层、海马Ng mRNA水平、NG 蛋白含量显著下降,造成大鼠学习记忆功能减退,三七皂苷Rg1可上调Ng mRNA水平、NG蛋白含量表达,且对慢性应激所致外显行为有积极调节作用．     

金钗石斛多糖通过下调CYP2E1表达改善非酒精性脂肪肝病大鼠症状

目的 建立非酒精性脂肪肝病（NAFLD）大鼠模型,观察金钗石斛多糖对肝细胞色素P4502E1蛋白及mRNA表达的影响。方法 选用SPF级,雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、多烯磷脂酰胆碱组、金钗石斛多糖低、中和高剂量组6组,每组10只。高脂高糖饮食构建非酒精性脂肪肝病大鼠模型,给予相应治疗6周后,观察大鼠一般情况,提取肝脏检测肝脏病理学、肝组织CYP2E1蛋白和mRNA表达,收集血液检测天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活力。 结果 模型组出现一定的脂肪样变性,部分肝细胞有炎性因子浸润;与模型组相比,各治疗组均有改善。与正常组相比,模型组肝指数、AST、ALT、TG、TC、CYP2E1蛋白及mRNA明显升高,CAT和SOD明显降低（各P＜0.05）;与模型组相比,金钗石斛多糖三个剂量组和多烯磷脂酰胆碱组AST、ALT、TG、TC、CYP2E1蛋白及mRNA均明显降低（P＜0.05）,CAT和SOD明显升高（P＜0.05）,且金钗石斛多糖高剂量组TG和TC明显低于多烯磷脂酰胆碱组（P＜0.05）,金钗石斛多糖三个剂量组CYP2E1蛋白及mRNA明显低于多烯磷脂酰胆碱组（P＜0.05）。结论 金钗石斛多糖可明显降低NAFLD大鼠肝脏中CYP2E1蛋白及mRNA表达,进而改善肝功能和血脂水平,提高CAT和SOD活力,最终有效缓解NAFLD大鼠症状。     

体外循环对机体铁稳态的影响及与心肌损伤的关系

目的：探讨体外循环(cardio pulmonary bypass,CPB)对机体铁稳态的影响及与心肌损伤的关系。方法：选取6例因心 脏手术进行CPB的患者,对其CPB前(T0)"CPB 30 min(T1)、CPB结束时（T2)和结束后1 h(T3)的红细胞数(red blood cell, RBC)、血红蛋白（hemoglobin,Hb)、铁蛋白(ferritin,Fer)等指标进行检測构建大鼠心肌缺血再灌注模型,取假手术组以及缺血 30 min分别再灌注& J、* J、4 J后各组大鼠的心肌组织PC法检测心肌组织中铁稳态调节激素（-./01出3)、膜铁转 运蛋白1(ferroportinl,Fpn1)和转铁蛋白受体1 (transferrin receptor l,TfR1)的mRNA水平变化。Western blot方法检测上述3种 基因的蛋白水平变化。HE染色方法检测心肌组织的炎症状态。结果：随着CPB进行,RBC、Hb逐渐下降,Fer逐步升高。在模拟 体外循环过程的大鼠心肌缺血再灌注模型中,与假手术组相比,缺血30 min再灌注2 h、3 h、4 h组心肌中Hepcidin的mRNA 和蛋白水平明显降低,但Fpn1和TfR1的mRNA和蛋白水平均有不同程度的增加。并且随着再灌注时间的推移,增加幅度逐渐 减小。并且,与假 比,缺血再灌注对大鼠的心肌组织造成了一定程度的炎症损伤。结论：心肌缺血 过影响心肌组织中铁代谢相关基因Hepoidin、Fpn1和TfR1的mRNA和蛋白表达水平从而影响血清铁状态,对心肌造成炎症损伤。