复宫宁诱导异位子宫内膜细胞凋亡的超微病理学研究

目的;从超微病理水平探讨中药制剂复宫宁治疗子宫内膜异位症的作用机理,观察其是否能诱导异位子宫内膜细胞发生凋亡。方法：用手术移植法复制子宫内膜异位症的大白鼠模型,将其分组灌胃给药4周后,再通过透射电子显微镜观察异位子宫内膜细胞是否有凋亡出现。结果：①肉眼观察,用药组的移植物体积明显小于对照组（P＜0．05）,其异位病灶生长受抑制。②电镜下观察各用药组的异位子宫内膜细胞可见凋亡特有的形态学变化。③复宫宁组血清E2值显著低于对照组（P＜0．05）。结论：复宫宁能诱导异位子宫内膜细胞凋亡。     

复宫宁治疗大鼠子宫内膜异位症的实验研究

目的:探讨复方复宫宁对子宫内膜异位症大鼠异位内膜的抑制作用。方法:采用放免法检测血清E2水平,采用HE染色和透射电镜技术观察复宫宁对异位内膜细胞形态结构的影响。结果:复宫宁组中,异位内膜体积显著缩小(P<0.01),E2水平明显下降(P<0.05);异位内膜腺上皮层明显变薄,腺体减少;细胞呈矮柱状甚至扁平状排列松散,并见较多凋亡现象和间质纤维化,而在位内膜不受影响。结论:复宫宁对大鼠子宫内膜异位症有明显的抑制作用,其作用机制可能与其调节E2水平、诱导细胞凋亡有关。     

子宫内膜异位症术后应用异位宁与丹那唑的临床观察

目的观察子宫内膜异位症术后应用异位宁与丹那唑的疗效及副反应。方法选择Ⅲ期子宫内膜异位症术后患者60例，随机分为3组。异位宁组于术后第7天口服异位宁2次／d，200ml／次；丹那唑组于术后第7天口服，2～3次／d，200mg／次，疗程均为6个月，随访6～30个月。对照组术后两种药均不用。结果异位宁、丹那唑组复发率分别为4．0％和4．5％低于未用药纽的30．7％（P〈0．05），异位宁与丹那唑纽复发率无显著性差异（P〉0．05），异位宁副反应率8％明显低于丹那唑组22．7％（P〈0．05）。结论异位宁于预防子宫内膜异位症术后复发与丹那唑的疗效相似，但副反应少，易于广泛应用。     

祛瘀解毒法治疗瘀毒型子宫内膜异位症的机理探讨

目的探讨祛瘀解毒法治疗子宫内膜异位症的机理。方法临床研究：60例患者随机分治疗组（用祛瘀解毒方治疗）和对照组（为丹那唑治疗）,观察治疗3个月前后症状、体征、妊娠率及白细胞介素-1（IL-1）、IL-6及血清抗子宫内膜抗体（EMAb）的变化。实验研究：60只大鼠分为治疗组（用祛瘀解毒方）、对照组（用丹那唑）与空白组,建立大鼠子宫内膜异位症模型,观察异位内膜腺上皮、在位内膜腺上皮及子宫肌层组织学评分。结果临床研究表明：治疗后痛经积分治疗组和对照组分别为2．40±1．85和3．47±2．03;月经不调积分分别为1．67±2．04和3．73±1．72（P〈0．05）,两组妊娠率分别为63．2％和23．5％（P〈0．05）。中药与丹那唑治疗后均显著降低IL-1、IL-6含量和EMAb的阳性率。实验研究表明中药与丹那唑均可增加异位内膜腺上皮、在位内膜腺上皮及子宫肌层组织学评分,说明可促进异位病灶细胞的Bax的表达;但中药对在位内膜及肌层组织无此作用。结论祛瘀解毒法可有效改善子宫内膜异位症血瘀蕴毒症候,其作用机理与调节机体免疫状态,促进异位病灶细胞凋亡有关。提示祛瘀解毒方是治疗血瘀蕴毒型子宫内膜异位症的有效方药。     

小柴胡汤对大鼠子宫内膜异位症COX-2表达的影响

目的探讨小柴胡汤治疗大鼠子宫内膜异位症的作用机制。方法建立大鼠内异症动物模型,将成模鼠随机分为对照组、小柴胡汤组、丹那唑组及联合用药组(小柴胡汤 丹那唑),分别给药进行治疗。采用免疫组化方法,观察分析各用药组在位、异位内膜环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果小柴胡汤组和联合用药组大鼠异位内膜COX-2的表达水平明显低于其在位内膜,丹那唑组和对照组则正好相反,异位内膜COX-2的表达明显高于在位内膜。结论小柴胡汤治疗大鼠子宫内膜异位症的作用机制可能是通过下调异位内膜COX-2的表达,从而减少前列腺素的产生而实现的。     

祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠bax及bcl-2细胞凋亡因子表达的影响

目的:观察祛异康对子宫内膜异位症大鼠在位内膜与异位内膜凋亡因子bax及bcl-2表达的影响,探讨祛异康治疗子宫内膜异位症的机制。方法:采用手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为空白对照组、模型组、祛异康高、中、低剂量组、丹那唑组。造模成功各组给药4周,免疫组化方法检测大鼠异位子宫内膜组织凋亡因子bax及bcl-2表达。结果:模型组大鼠异位子宫内膜组织bax与空白组及各治疗组比较,表达降低(P0.05);bcl-2表达升高(P0.05);祛异康中、高剂量组与丹那唑组bax、bcl-2阳性表达比较无显著差异(P0.05)。结论:祛异康能明显抑制模型大鼠异位内膜的生长,其治疗机理可能是通过提升bax及降低bcl-2在异位内膜组织中的表达而实现的。     

桂附胶囊治疗子宫内膜异位症实验研究

目的探讨桂附胶囊对实验性子宫内膜异位症大鼠激素及相关因素的影响.方法以子宫内膜自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型.随机分为桂附胶囊组及丹那唑组.放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P);免疫组化法测定雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子(VEGF)、NK细胞.结果桂附胶囊能够降低子宫内膜异位症大鼠外周血中E2、P水平(P＜0.01);降低异位内膜ER、PR的含量(P＜0.05);提高NK细胞活性(P＜0.05);并可抑制血管内皮生长因子(VEGF)的生成.桂附胶囊的实验效果与对照药丹那唑相近.结论桂附胶囊能够通过调节内异症大鼠的内分泌而抑制异位内膜的血管形成,从而抑制异位内膜的生长;同时增加NK细胞的活性,以加强对异位内膜组织的清除作用.     

蠲痛饮对子宫内膜异位症大鼠ICAM-1的影响

目的 探讨蠲痛饮对子宫内膜异位症(EMS)大鼠血清、腹腔液、异位内膜细胞间粘附因子(ICAM-1)的影响来阐述蠲痛饮的作用机理.方法 采用自体子宫内膜移植法建立EMS大鼠模型,将60只大鼠随机分为蠲痛饮高、中、低剂量组、丹那唑组、模型组、空白组等6组,给药实验组分别给予蠲痛饮高、中、低剂量和丹那唑灌胃,模型组及空白组给予生理盐水灌胃,观察蠲痛饮高、中、低剂量和丹那唑对EMS大鼠ICAM-1的影响.结果 丹那唑组和不同剂量蠲痛饮对大鼠异位组织体积大小和腹腔液ICAM-1的影响,与模型组比较有显著性差异( P＜0.05).丹那唑和蠲痛饮高、中剂量降低EMS大鼠异位病灶ICAM-1的水平,与模型组比较有显著性差异( P＜0.05).结论 蠲痛饮可通过降低EMS大鼠腹腔液及异位内膜ICAM-1的水平,抑制异位组织的粘附而抑制异位子宫内膜的发展,从而达到治疗子宫内膜异位症的目的.     

祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠血清FSH、LH、E2、P的影响

目的观察祛异康对子宫内膜异位症模型FSH、LH、E2、P的影响,探讨其治疗子宫内膜异位症的作用机理。方法采用手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为对照组、模型组、祛异康组、丹那唑组。造模成功各组给药4 W,放射免疫法检测血清FSH、LH、E2、Pα的含量。结果与模型组比较祛异康组、丹那唑组具有明显降低异位症大鼠血清中E2的含量(P<0.05);升高LH、P水平(P<0.05)。结论祛异康能明显抑制异位症模型大鼠异位内膜的生长,增加妊娠率,其治疗机理可能是通过抑制内异症大鼠血清E2的异常分泌,提高LH、P含量而起到抑制异位内膜的生长,恢复内分泌功能,减轻患者临床症状,达到治疗內异症的目的 。     

祛异康对子宫内膜异位症大鼠模型CD44表达的影响

目的观察祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠在位异位内膜CD44的表达情况,探讨其治疗子宫内膜异位症的机理及量效关系。方法将60只健康雌性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、祛异康小中大剂量组、丹那唑组,采用手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,造模成功后用药4 W,用免疫组化方法检测其CD44的表达情况。结果模型组异位内膜中CD44呈高表达;丹那唑组、祛异康大、中剂量组能降低异位内膜组织CD44的表达,与模型组比较均有显著性差异(P0.05);祛异康中剂量组与丹那唑组比较对降低CD44的表达无显著性差异(P0.05)。结论细胞粘附分子CD44的异常表达可能参与了EMT的发病过程;祛异康能明显抑制EMT模型大鼠异位内膜在盆腹腔的种植、生长,其治疗机理可能是通过降低CD44在异位内膜组织中的表达而实现的,以中剂量给药为好。     

柴胡龙牡汤对小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的影响及其机制的实验研究

目的：柴胡龙牡汤由张仲景《伤寒论》中柴胡加龙骨牡蛎汤加减而成。临床用于治疗非小细胞肺癌安全有效,在改善症状、稳定病灶、提高生活质量及延长生存期等方面均显示了一定的作用。其体外实验研究也已证实该方具有诱导人肺腺癌细胞凋亡及下调VEGF表达的作用。本实验旨在探析柴胡龙牡汤的体内抗肿瘤作用机理。方法：通过透射电镜下观察超微结构的变化,判断柴胡龙牡汤是否可诱导细胞凋亡,通过检测与凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的变化,以及瘤组织中肿瘤坏死因子（TNFα）的变化,探讨柴胡龙牡汤诱导Lewis肺癌细胞凋亡的分子作用机制。结果：1中药组镜下可见肿瘤细胞以凋亡变化为主;化疗组、综合组电镜下均可见到坏死细胞和典型凋亡细胞及凋亡小体。2模型组、化疗组TNFα表达呈阴性,染色结果均为（-）;TNFα在中药组和综合组中均有表达,但二者相比较无显著性差异（P﹥0.05）,阳性细胞数均在30%左右,TNFα染色结果为（＋＋）。3中药组、化疗组和综合组,都可不同程度的降低Bcl-2蛋白的表达,并使Bax及Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2/Bax的比值降低,与模型组相比有显著、极显著性差异（P﹤0.05,P﹤0.01）。结论：1柴胡龙牡汤可诱导Lewis肺癌细胞凋亡,对顺铂化疗具有协同增效作用;2柴胡龙牡汤可诱导TNFα产生,下调Bcl-2蛋白的表达,明显增加Bax及Caspase-3的表达,从而使Bcl-2/Bax的比值降低,最终导致细胞凋亡。     

腹水膏穴位贴敷对小鼠艾氏腹水癌的疗效影响

观察腹水膏穴位贴敷对小鼠艾氏腹水癌的疗效 ,并从细胞因子角度探讨其治疗机理。采用艾氏腹水癌瘤株用NIH小鼠接种 ,随机分正常空白对照组 (正空组 )、模型对照组 (模对组 )、局部贴敷组 (局贴组 )、穴位贴敷组 (穴贴组 ) 4组进行观察研究。结果 ,与模对组相比 ,腹水膏局贴或穴贴均可显著延长荷瘤小鼠生存期 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,显著抑制恶性腹水增长速度 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,穴位贴敷优于局部贴敷 (P <0 0 5 ) ;腹水膏可下调外周血sIL 2R水平 (P <0 0 5 ) ,显著提高外周血TNF杀伤活性 (P <0 0 0 1)。艾氏腹水癌小鼠存在细胞因子网络的调节失衡 ,腹水膏治疗艾氏腹水癌疗效确切 ,其机理可能为下调外周血sIL 2R水平 ,提高外周血TNF杀伤活性 ,促进细胞免疫功能。     

冬凌草甲素对HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的:探讨冬凌草甲素对白血病HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制.方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL-60细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡,TRAP-PCR-ELISA及FCM法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及P53蛋白表达水平的变化.结果:8 umol/L以上的冬凌草甲素对HL-60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,并呈现出明显的量-效与时-效关系.药物作用48小时后细胞的凋亡率达高峰,在Hoechst染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的凋亡改变.在细胞凋亡过程中,端粒酶活性下降,同时P53蛋白的表达水平显著升高.结论:冬凌草甲素对HL-60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,升高P53蛋白的表达水平及降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一;这为冬凌草甲素进一步应用于临床治疗急性白血病提供了有力的试验依据.     

六棱菊总黄酮对溃疡性结肠炎的作用及其机制

目的:研究六棱菊总黄酮(LAF)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型的作用及其可能的分子生物学机制。方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)塑造UC大鼠模型,并予以不同剂量的LAF进行干预,用HE染色病理学检侧LAF对UC的疗效,用FCM检测LAF对大鼠UC模型结肠黏膜上皮细胞的凋亡率,用DNA琼脂糖电泳检测结肠黏膜细胞凋亡的生化特征,用western blot检测结肠黏膜细胞Bcl-2、Bax、Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达情况。结果:LAF对UC大鼠模型有着显著的疗效,经不同浓度的LAF作用结肠黏膜细胞后,与模型组比较,细胞凋亡数目减少,组间有统计学意义(P<0.05),琼脂糖电泳DNA典型的梯形条带消失,伴随Bcl-2蛋白表达上调,Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达下调(P<0.05),Bax蛋白表达无明显变化(P>0.05),而Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05)。结论:LAF对UC大鼠模型有着显著的疗效,其机制可能通过线粒体凋亡途径抑制凋亡相关。     

针刺对铝中毒SD痴呆大鼠脑组织内细胞凋亡及Bcl-2影响的实验研究

目的:从细胞凋亡及凋亡相关基因的蛋白表达方面探讨针刺治疗老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)的作用机理。方法:采用AlCl3中毒法制成SD大鼠老年性痴呆模型,连续针刺治疗20d。通过空白组、模型组、西药组及针刺组之间的对照,观察针刺该组穴位对大鼠"Y"型电迷宫行为学改变,应用TUNLE法和免疫组化法对所设各组SD大鼠脑组织细胞凋亡的数目及Bcl-2免疫阳性细胞进行观察。结果:治疗后,Bcl-2免疫阳性细胞数西药组、针刺组与模型组有显著性差异(均P0.05),西药组、针刺组多于模型组;细胞凋亡数目西药组、针刺组与模型组有显著性差异(均P0.05),西药组、针刺组少于模型组。结论:铝中毒法复制AD大鼠可行。针刺可减少老年性痴呆大鼠DNA双键断裂(TUNLE阳性),提高海马皮层Bcl-2的含量。     

清毒饮和养正片诱导L7212小鼠白血病细胞凋亡及其对Bcl-2、P53基因表达的影响

目的:探讨清毒饮和养正片抗白血病的作用机理。方法;采用L7212白血病小鼠模型,用原位末端标记法（TUNEL）观察清毒饮、养正片和化疗对其白血病细胞凋亡的影响。结果:清毒饮、养正片、化疗各组都可见较多白血病细胞凋亡。其中清毒饮组优于养正片组,合用化疗则更明显,凋亡指数均大于模型对照组（P<0.01）,证明清毒饮、养正片能诱导L7212白血病细胞凋亡,且以清毒饮较明显,并可提高化疗的促凋亡作用。用免疫组化法检测模型小鼠骨髓有核细胞中Bcl-2、P53基因的表达,其Bcl-2表达明显增高,予清毒饮、养正片处理后,Bcl-2有所下降,以清毒饮组较养正片组明显,合用化疗后下降更明显（P<0.05）;P53表达在L7212白血病细胞稍减低,经清毒饮、养正片、化疗处理后,表达阳性率及其强度均有所升高,但统计学处理差异无显著性意义（P>0.05）。结论:清毒饮、养正片确能下调Bcl-2表达,而对P53作用不够明显。     

盆炎汤对感染解脲脲原体小鼠生殖细胞凋亡的影响

目的:利用小鼠生殖道感染支原体的模型,研究盆炎汤对小鼠生殖细胞凋亡的影响。方法:昆明雌小鼠63只,随机分7组,采用注射外源性雌激素、阴道接种血清8型Uu菌株的方法建立模型。西药采用阿奇霉素、中药用朱南孙教授的经验方盆炎汤。结果:1)白介素-1β模型组与正常组相比较有统计学意义(P<0.05),其余各组之间相比较无统计学意义(P>0.05);白介素-6各组间相比较无统计学意义(P>0.05);2)子宫组织细胞凋亡率各组之间无统计学意义(P>0.05);阴道组织细胞凋亡各组与模型组相比较均有统计学意义(P<0.05);但各干预组之间无统计学意义(P>0.05)。结论:盆炎汤对Uu的生长有一定的抑制作用;盆炎汤可以减轻支原体对机体的病理损伤,抑制炎症因子的产生及生殖细胞的凋亡。     

中西医结合治疗轻、中度充血性心力衰竭的临床研究

目的：观察中药联合卡托普利和倍他乐克治疗轻、中度充血性心力衰竭的疗效。方法：将１５０例患者随机分为３组，Ａ组单用中药治疗，Ｂ组单用西药卡托普利加倍他乐克，Ｃ组中西药联合应用；３组均在用药后３周和３个月分别观察心功能各项指示。结果：（１）心功能总有效率Ａ组为７２％，Ｂ组为８６％，Ｃ组为９４％。（２）超声心动图左室舒张末期内径Ｃ组较Ａ、Ｂ两组明显缩小（Ｐ〈０．０５）。（３）射血分数Ｃ线比Ａ、Ｂ两组有显     

连豆清脉方水提液干预ANGⅡ诱导内皮细胞凋亡及Bax/Bcl-2,caspase9/XIAP mRNA表达的实验研究

目的观察连豆清脉方水提液对ANGⅡ诱导内皮细胞凋亡干预及Bax/Bcl-2、caspase9/XIAP mRNA表达的影响。方法体外培养大鼠动脉内皮细胞株(RAOEC),连豆清脉方水提液干预ANGⅡ诱导RAOEC凋亡,采用流式细胞仪检测ANGⅡ诱导凋亡及线粒体膜电位改变,RT-PCR荧光相对定量检测Bax/Bcl-2及caspase9/XIAP mRNA表达水平变化,组间差异统计性分析采用Students T-test。结果 ANGⅡ诱导模型组内皮细胞诱导10 h后线粒体膜电位为(0.580±0.137),24 h凋亡率为30.4%±5.2%,连豆清脉方(500μg)组内皮细胞线粒体膜电位(4.361±1.251),24 h凋亡率为13.5%±3.8%,连豆清脉方能够部分抑制ANGⅡ诱导内皮细胞作用,差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR荧光相对定量显示ANGⅡ组Bax和caspase9 mRNA水平显著升高(P<0.05),连豆清脉方干预组下调促凋亡蛋白Bax和caspase 9表达,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P<0.05)。结论连豆清脉方脉方能够稳定线粒体膜电位,通过干预Bax、Bcl-2和caspase 9 mRNA表达,抑制ANGⅡ诱导的内皮细胞凋亡。     

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??OBJECTIVE To investigate the protection of hepatocyte growth factor (HGF) on CML cell line K562 from apoptosis induced by etoposide (VP-16) and its molecular mechanism. METHODS Quantitative and qualitative analyses on cell morphological change of apoptosis were performed through acridine orange (AO) staining and HE staining, and fluorescent flow cytometry.The test analyzes membrane on the surface of the PS evagination and integrity of cell membrane surface and mitochondrial membrane potential changes were performed through Annexin V-FITC/PI double dyeing and JC-1 cell dyeing tests, and apoptotic factors such as Bcl-2, Bax, Caspase-3 and Caspase-9 were measured by SYBR Green (Takara) qRT-PCR. RESULTS The HE and AO staining revealed that apoptotic rates in HGF+VP-16 groups were significantly lower than those in VP-16 groups (P<0.05,P<0.05), HGF can inhibit the apoptosis of cells induced by VP-16; FCM (Annexin V-FITC/ PI and JC-1) tests showed that cells apoptotic rates in HGF+VP-16 groups were significantly lower than those in VP-16 groups (P<0.05,P<0.001), indicating that HGF has the anti-apoptosis function. Apoptosis related gene mRNA expression tests found that the Bcl-2 mRNA expression in HGF+VP group was obviously higher than that in the VP-16 group (P<0.001), while Bax mRNA, Caspase-3 mRNA, and Caspase-9 mRNA expressions were significantly lower than those in the VP-16 group (P<0.05, P<0.001, P<0.001),suggesting that HGF possesses antiapoptotic effect through inhibiting apoptosis gene expression and promoting the antiapoptotic gene expression simultaneously. CONCLUSION HGF can significantly protect K562 cells from apoptosis induced by VP-16 through the HGF/c-Met way to regulate PI3K/AKT pathway.