应用GGE双标图分析丹参杂种一代品系的稳定性和适应性

目的:评估丹参杂种一代品系的稳定性和适应性。方法:采用GGE双标图模型,分析5个丹参杂种一代品系和2个生产对照种质开展一年多点试验数据,评价了参试材料单根重和有效成分含量的表现及稳定性,同时考察了4个试验点的区分力和代表性。结果:在北京海淀,H4的单根重和丹酚酸B适应性好,稳定性高;在北京密云,H4和H16的单根重和有效成分的适应性好,稳定性高;在陕西商洛,H24的单根重和有效成分适应性好,稳定性高;在河南方城,H24的丹酚酸B含量高,适应性好。通过分析环境的区分力和代表性可以确定丹参杂种一代的选育区及筛选区,北京海淀和河南方城分别作为选育高产、高丹酚酸B含量为目标和高脂溶性成分为目标的选育地点。品系需要在具有区分力的环境作进一步淘汰,在北京密云淘汰产量低的品系,在河南方城淘汰脂溶性成分含量低的品系;在陕西商洛淘汰脂溶性成分含量低的品系。结论:应用GGE双标图评价分析方法可以较好地分析丹参杂种一代品系的稳定性和适应性,可为确定筛选出优良品种、确定丹参选育试验地点和科学的建立丹参区域试验点提供科学参考。     

利用SSR分子标记鉴别柴胡栽培种质的方法学研究

目的：建立利用简单重复序列（SSR）分子标记鉴别柴胡栽培种质的方法,初步形成可鉴别选育品系的SSR特征谱带数据。方法：从实验室先前设计的柴胡SSR引物序列中选择了50对,以2个选育品系和4份其他柴胡栽培种质为材料,筛选扩增效果好、多态性高的引物对,优化聚合酶链反应（PCR）扩增、电泳等条件,分析获得的SSR谱带,依据遗传距离构建聚类树图。结果：筛选出9对多态性高的引物,明确了检测条件,获得了试验种质的SSR特征谱带数据,在遗传相似系数为0.73处可将所有样品分为4类：黑龙江产红柴胡和川红柴1号品系聚为一类,川北柴1号品系和中柴1号品种聚为一类,四川枫顺和荣县产柴胡种质各独自聚为一类。结论：本研究筛选出的引物对和建立的检测方法可供柴胡种质鉴别参考使用。     

药用植物次生代谢相关酶基因克隆方法综述

目的 综述药用植物次生代谢酶基因克隆可采用的方法策略,为其基因克隆提供参考。方法 查阅相关文献进行总结和归纳。结果 阐述了用于克隆药用植物次生代谢酶基因的功能克隆方法、表型克隆方法(DD-PCR、cDNA–AFLP、SSH)、转座子标签克隆方法及图位克隆方法。结论 适用于药用植物次生代谢相关酶基因克隆的技术方法有很多种,研究者可根据研究基础、目的和实验条件等进行选择。     

植物细胞色素P450在三萜皂苷生物合成中的功能研究进展

三萜皂苷是许多药用植物的药效成分,其生物合成通常可分为前体形成、骨架构建以及后修饰3个部分。后修饰过程是植物调控形成众多种类单体皂苷的重要过程,其机制至今尚未完全阐明。植物细胞色素P450是由少数几个超基因家族编码的,参与多种生物过程,包括三萜皂苷次生代谢的后修饰过程。目前,已在少数植物中克隆到了催化个别单体皂苷生物合成的P450基因,其功能研究取得了一定进展。将就此进行综述,为进一步开展相关研究提供借鉴。     

柴胡ISSR—PCR反应体系的建立与优化

目的建立适于柴胡ISSR分析的PCR反应体系；筛选适宜引物，并确定最佳退火温度。方法CTAB法提取叶片DNA，通过单因子实验分别找出合适的ISSR-PCR反应条件，利用梯度PCR确定引物最佳退火温度。结果适于柴胡ISSR分析的PCR反应体系为25μl总体积中含有1×Taq酶缓冲液，2．0mmol／L MgCl2，各0．15mmol／L的dNTPs，0．3μmol／L引物，1．5U Taq酶（上海生工），20ng模板DNA，2％去离子甲酰胺。在100条引物中筛选出30条扩增条带清晰且条带数目较多的引物，最佳退火温度为49．9～63．6℃（因引物不同而异）。结论建立了柴胡ISSR—PCR反应体系，筛选出30条引物并确定了最佳退火温度，为应用ISSR技术鉴定柴胡种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础。     

北柴胡花药愈伤组织高效再生体系的建立

以花粉发育处于单核期的北柴胡花药为外植体诱导出愈伤组织,愈伤组织经多次继代培养后,置于20种含不同植物激素的分化培养基上诱导分化。分别在培养21,49 d后,统计每种培养基中分化出苗数,同时观察再生植株生长状况,从中筛选出分化率高,分化速度快,且植株生长状态良好的分化培养基。结果共在19种培养基均可分化出苗,分化率在3%~60%,大部分低于20%。在MS+KT 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+植物凝胶5 g·L^-1培养基上分化率最高,为60%,其次为MS+ ZT 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+植物凝胶5 g·L^-1,为58%。另外,针对在分化培养基中未能生根的再生芽,进行了生根培养基筛选。结果显示再生芽在生根培养基MS+蔗糖30 g·L^-1 +植物凝胶5 g·L^-1和1/2 MS+ NAA 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1 +植物凝胶5 g·L^-1中均可生根,生根率均为100%。由此建立了北柴胡花药愈伤组织高效稳定的再生体系。     

不同因子对药用植物毛状根产量和次生代谢产物积累影响的研究进展

以根为药用部位的药材占中药材种类的30%左右。毛状根培养体系是药用植物生产次生代谢产物的新途径、新方法。影响毛状根生长及其次生代谢物形成的因素有很多,如：物理因素、化学因素、前体物的添加、诱导子等。通过优化毛状根培养条件及培养基配比,可提高毛状根和次生代谢产物产量。本文就药用植物毛状根诱导形成及大规模生产中的根产量和次生代谢产物积累的影响因素与作用机理做一综述,为相关研究和应用提供参考。     

植物皂苷生物合成中UGT功能研究进展

植物皂苷(Saponins)是广泛存在于绝大多数植物体中不可或缺的一类次生代谢产物。其中多种植物皂苷具有重要的药理活性。尽管皂苷的生物合成途径还未彻底解析,但近年来,皂苷生物合成途径研究,尤其是合成途径下游多基因家族编码酶催化的反应,取得了很大进展。目前,已在个别植物中克隆到了催化个别单体皂苷生物合成的UGT基因,其功能研究取得了一定进展。本文就皂苷合成途径下游催化皂苷元糖基化的糖基转移酶基因克隆和功能研究做一综述,为加快皂苷生物合成途径的解析提供借鉴。     

桔梗种子质量分级标准研究

目的:确定桔梗种子的质量分级标准。方法:对不同产地53个批次的桔梗种子样本进行分选,测定净度、含水量、千粒重、发芽率、生活力等指标,通过SPSS软件对以上数据进行逐步聚类分析,确定桔梗种子质量分级标准。结果:桔梗种子被分为3个等级,其中一级和二级种子为合格的种子。结论:建立了桔梗种子的分级质量标准,为桔梗种子选育提供参考依据。     

药用植物次生代谢相关酶基因克隆方法综述

目的综述药用植物次生代谢酶基因克隆可采用的方法策略,为其基因克隆提供参考。方法查阅相关文献进行总结和归纳。结果阐述了用于克隆药用植物次生代谢酶基因的功能克隆方法、表型克隆方法（DD—PCR、cDNA—AFLP、SSH）、转座子标签克隆方法及图位克隆方法。结论适用于药用植物次生代谢相关酶基因克隆的技术方法有很多种,研究者可根据研究基础、目的和实验条件等进行选择。