不同产地百合药材化学成分与气候因子的相关性研究

目的：研究百合药材化学成分含量与产地气候因子的相关性，为卷丹和百合区划提供参考依据。方法：通过主成分分析、相关分析等方法研究百合产地气候因子特征及主要化学成分与气候因子间的相关性。结果：百合和卷丹产地气候因子存在一定差异，百合受不同产地环境影响较大；卷丹、百合总多糖含量与最高气温、平均气温、平均最低气温、平均最高气温均呈现正相关，与年平均降水量、平均相对湿度呈负相关；卷丹浸出物含量与最高气温、平均气温、平均最低气温、平均最高气温呈现负相关，而百合浸出物呈正相关；卷丹、百合王百合苷含量与降水量及相关因子具有一定相关性。结论：温度、水分是百合药材品质形成的关键生态气候因子，高温气候环境有利于百合总多糖的积累。     

21个产地七叶一枝花中皂苷类成分的评价

目的对21个产地七叶一枝花Paris Polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara中的皂苷类成分进行评价。方法 HPLC法测定偏诺皂苷{偏诺皂苷-3-O-β-D-glu(1→3)[α-L-rha(1→2)]-β-D-glu(PGGR)、重楼皂苷Ⅵ、Ⅶ、H}和薯蓣皂苷(纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)的含有量,SPSS 22.0软件进行主成分分析和聚类分析。结果偏诺皂苷为七叶一枝花皂苷的主要种类。PGGR、重楼皂苷Ⅰ、Ⅴ、Ⅶ、H为该药材主要有效成分;7个产地的综合得分大于0,依次为巴中青川盐津通江南川崇州洪雅。21批样品分为4类,与聚类分析结果相似。结论四川巴中、青川、崇州、洪雅、通江,云南盐津,重庆南川适宜栽培七叶一枝花,可保证皂苷类成分的稳定性。     

太白贝母生产数值区划研究

本文在太白贝母的应用历史及现状调查的基础上，对其生态习性进行了文献调研和实地考察，以太白贝母分布区55个样点为分析基点，选取≥10℃积温、年平均气温、1月平均气温、1月最低气温、7月平均气温、7月最高气温、相对湿度、年均日照时间、年降水量、土壤类型等影响太白贝母生长发育的关键生态因子，再应用《中药材产地适宜性分析地理信息系统》（TCMGIS-II）对太白贝母（Fritillaria taipaiensis P. Y. Li）在全国的生态适宜区进行分析。研究结果表明，适宜产地主要分布于陕西、湖北、甘肃、重庆、四川、云南等省区。研究结果有助于太白贝母GAP规范化种植基地选择及川贝母资源的可持续利用。     

太白贝母生产数值区划研究

本文在太白贝母的应用历史及现状调查的基础上,对其生态习性进行了文献调研和实地考察,以太白贝母分布区55个样点为分析基点,选取≥10℃积温、年平均气温、1月平均气温、1月最低气温、7月平均气温、7月最高气温、相对湿度、年均日照时间、年降水量、土壤类型等影响太白贝母生长发育的关键生态因子,再应用<中药材产地适宜性分析地理信息系统>(TCMGIS-Ⅱ)对太白贝母(Fritillaria taipaiensis P.Y.Li)在全国的生态适宜区进行分析.研究结果表明,适宜产地主要分布于陕西、湖北、甘肃、重庆、四川、云南等省区.研究结果有助于太白贝母GAP规范化种植基地选择及川贝母资源的可持续利用.     

HPLC测定贵州不同产地的七叶一枝花中9种甾体皂苷的含量

目的:通过比较贵州不同产地七叶一枝花中的主要活性成分甾体皂苷的种类和含量,为进一步探讨贵州地区作为七叶一枝花药材种植基地提供参考依据.方法:采用HPLC-UV测定来源于贵州省8个不同产地的七叶一枝花中9种甾体皂苷重楼皂苷Ⅶ,偏诺皂苷-3-O-α-L-rha(1→2)[α-L-rha(1→4)] -β-D-glc (PGRR),重楼皂苷H,重楼皂苷Ⅵ,重楼皂苷Ⅱ,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷,重楼皂苷Ⅰ及重楼皂苷V的含量.结果:重楼皂苷Ⅶ,PGRR,重楼皂苷H,重楼皂苷Ⅵ及纤细薯蓣皂苷5个甾体皂苷均可检测到,这可为增加鉴别重楼药材提供依据;独山产地的七叶一枝花中甾体皂苷含量最高(9.62％),其次为铜仁产地(6.39％),含量最低的为遵义产地的药材(0.99％).结论:贵州不同产地的皂苷种类和含量差别很大,适宜作为种植基地的为独山地区.     

离体培养滇重楼根茎中甾体皂苷类化学成分的研究

该研究采用LC-MS与HPLC技术对离体培养条件下3种不同产地滇重楼根茎中甾体皂苷类化学成分进行定性、定量分析,探究在离体培养条件下滇重楼根茎中能否合成包含2020年版《中国药典》中质量控制指标性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ和Ⅶ在内的甾体皂苷类化学成分。从3种不同产地云龙长新(S1)、大理凤仪(S2)和洱源牛街(S3)离体培养滇重楼根茎中鉴定出滇重楼皂苷A、D、E,原重楼皂苷Ⅱ,重楼皂苷G、H,重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷,薯蓣次皂苷A,Tg, isomer of Th, saponin Th, reclinatoside, proto-paris D,pseudoproto-dioscin, 23-O-glc-(23S,25R)-spirost-5-en-3β,23α-diol-3-O-rha-(1→2)-[ara(1→4)]-glc或27-O-glc-(23S,25R)-spirost-5-en-3β,27α-diol-3-O-rha-(1→2)-[ara(1→4)]-glc共20个甾体皂苷类化学成分。其中,从离体培养S1滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.109 1%、0.165 2%、0.051 03%,总量为0.325 3%;从离体培养S2滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.192 2%、0.074 23%,总量为0.266 5%;从离体培养S3滇重楼根茎中检测到重楼皂苷Ⅱ、Ⅶ,质量分数分别为0.207 7%、0.186 9%,总量为0.394 6%。上述结果表明在离体培养条件下滇重楼根茎中可以合成包含2020年版《中国药典》中质量控制指标性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ在内的甾体皂苷类化学成分,但总量尚未达到2020年版《中国药典》不得少于0.60%的规定。因此,该研究滇重楼离体培养方案可行,但离体培养条件还需进一步改善。     

基于四季六气探讨天津市过敏性鼻炎滞后发病与气象因素相关性的研究

目的:从四季六气角度分析过敏性鼻炎滞后发病与气象因素的相关性,为防治过敏性鼻炎提供一定的依据。方法:收集天津市2006至2013年过敏性鼻炎病例及气象资料,通过Nonparametric Correlations分析筛选与过敏性鼻炎四季六气滞后发病相关的气象因素。结果:过敏性鼻炎滞后1月2月发病与秋季平均气压、四季平均风力呈负相关,与秋季最低气温、平均气温,夏季平均气温、平均降水量呈正相关;六气滞后1月发病与三之气平均气温、平均降水量呈正相关;与六气平均风力均呈负相关。四季滞后2月发病与全年平均风力、夏季平均气压、秋季平均相对湿度呈负相关;与夏季最低气温、最高气温、平均气温、平均降水量呈正相关;六气滞后2月发病与初之气、二之气、四之气、五之气、六之气平均风力呈负相关;与三之气平均降水量、六之气日照时数及日照百分数均呈正相关。结论:天津市过敏性鼻炎滞后发病时间主要集中在7～11月,以8、9月高发,与平均风力呈负相关。     

刺五加根茎活性成分与生态因子的相关性

目的：确定影响刺五加根茎品质的生态因子，为刺五加野生抚育和栽培提供依据。方法：采用高效液相色谱法测定我国东北三省10个产地30个种群根茎中刺五加苷B、刺五加苷E、绿原酸、异秦皮啶含量，应用偏最小二乘回归分析法对所得数据与温度、地形、光照、水分等7个生态因子进行相关性分析。结果：影响刺五加苷B的含量最大生态因子是纬度、年降水量、年平均气温、日照时数和七月最高气温；各种生态因子对刺五加苷E的含量影响差异不大；影响绿原酸的含量最大生态因子是日照时数、七月最高气温、坡度；影响异嗪皮啶含量最大的生态因子为坡度、七月最高气温、年平均气温、纬度和年降水量。综合各生态因子的作用，对野生刺五加根茎品质的影响较大的生态因子为日照时数、坡度、七月最高气温。     

刺五加根茎活性成分与生态因子的相关性

目的：确定影响刺五加根茎品质的生态因子，为刺五加野生抚育和栽培提供依据。方法：采用高效液相色谱法测定我国东北三省10个产地30个种群根茎中刺五加苷B、刺五加苷E、绿原酸、异秦皮啶含量，应用偏最小二乘回归分析法对所得数据与温度、地形、光照、水分等7个生态因子进行相关性分析。结果：影响刺五加苷B的含量最大生态因子是纬度、年降水量、年平均气温、日照时数和七月最高气温；各种生态因子对刺五加苷E的含量影响差异不大；影响绿原酸的含量最大生态因子是日照时数、七月最高气温、坡度；影响异嗪皮啶含量最大的生态因子为坡度、七月最高气温、年平均气温、纬度和年降水量。综合各生态因子的作用，对野生刺五加根茎品质的影响较大的生态因子为日照时数、坡度、七月最高气温。     

4种重楼不同部位4种重楼皂苷含量的分析

目的:研究评价不同品种重楼的不同组织部位的药用价值。方法:分别提取华重楼、七叶一枝花、球药隔重楼和狭叶重楼的地下根茎、地上茎、叶、种子、果皮和外种皮的重楼皂苷,采用HPLC检测其重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量。结果:4种重楼的地下根茎中重楼皂苷总含量均高于地上部分,其中,七叶一枝花的地下根茎的重楼皂苷总含量最高,为26.34 mg·g~(-1);对于地上不同组织部位而言,七叶一枝花果皮的重楼皂苷Ⅰ含量、种子的重楼皂苷Ⅵ含量、外种皮的重楼皂苷Ⅶ含量分别为10.18,0.84,8.61 mg·g~(-1);球药隔重楼种子的重楼皂苷Ⅱ含量最高,为1.1 mg·g~(-1)。结论:七叶一枝花地下根茎以及整株材料的重楼皂苷总含量最高,可作为后期人工栽培的优良品种;重楼地上茎、果皮和外种皮中的重楼皂苷Ⅰ含量与其地下根茎的含量具正相关性,可通过检测重楼地上部分的重楼皂苷Ⅰ含量初步评价其地下根茎的药用价值。     

椪柑柠檬苦素-UDP-葡萄糖基转移酶基因的克隆、分析及表达

目的克隆中药橘核主要来源品种椪柑Citrus reticulata的柠檬苦素-UDP-葡萄糖基转移酶(limonoid-UDP-glucosyl transferase gene,LGT)基因,并进行生物信息学及表达分析为橘核有效成分合成及调控机制研究提供基础。方法克隆获得LGT序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建LGT与相关物种LGT的系统进化树,利用RT-PCR分析橘皮、橘肉以及橘核中LGT基因表达量,并进行分析和比较。结果测序所得椪柑LGT序列全长为1 530 bp,具有1 509 bp的完整开放阅读框,编码502个氨基酸。并对其蛋白二级、三级结构进行了分析和预测。基因表达分析结果发现椪柑LGT基因在橘核中表达量最低,其次为橘皮,表达量最高为橘肉。结论成功克隆、分析并表达了椪柑LGT基因,为橘核中柠檬苦素类物质合成及调控机制研究提供基础。     

不同比例甘草配伍祖师麻抗大鼠佐剂性关节炎的实验研究

目的 观察不同比例甘草配伍祖师麻对大鼠佐剂性关节炎（AA）模型的治疗作用,筛选两者配伍比例,探讨其配伍意义。方法 采用足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备AA模型,将140只模型大鼠随机分成14组：模型组,雷公藤多苷片组,祖师麻低、中、高剂量组,甘草低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：1）低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：2）低、中、高剂量组,另取10只正常大鼠为对照组,给药组大鼠造模前2 d开始ig给药,连续给药31 d,观察各组大鼠体质量变化,计算足肿胀度、关节炎指数（AI）,采用ELISA法检测大鼠血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平,观察大鼠膝关节组织病理变化,通过免疫组化法测定大鼠膝关节滑膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）、巨噬细胞游走抑制因子（MIF）的表达。结果 与模型组比较,祖师麻组、祖师麻甘草配伍组能够明显抑制AA大鼠体质量减轻的趋势,对抗AA大鼠足肿胀度及AI的增加,降低异常升高的血清TNF-α、IL-1β水平,改善关节病理组织变化,减少滑膜组织VEGF、MIF的表达,其中以祖师麻-甘草（3：2）配伍组效果最优。结论 祖师麻甘草配伍后,对AA大鼠各项指标改善作用显著,作用优于单用祖师麻,其最佳配伍比例为祖师麻-甘草（3：2）。调节血清炎症细胞因子TNF-α、IL-1β及滑膜组织VEGF、MIF的表达,可能是祖师麻甘草配伍治疗类风湿性关节炎机制之一。     

夏天无HPLC指纹图谱及多指标含量测定研究

目的建立夏天无HPLC指纹图谱及多指标成分测定方法,为夏天无药材质量标准提升提供科学依据。方法采用HPLC法,Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(三乙胺调pH 6.0)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;进样量10μL;检测波长280 nm;建立15批夏天无药材的指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)进行评价,聚类分析和主成分分析将15批药材分为2类,同时测定原阿片碱、黄藤素、荷包牡丹碱和延胡索乙素4种成分的含量。结果建立了夏天无药材的HPLC指纹图谱,共标定了10个共有峰;原阿片碱、黄藤素、荷包牡丹碱和延胡索乙素线性关系良好,r均大于0.999 9,平均回收率分别为97.12%、100.09%、98.53%、99.71%。结论 HPLC指纹图谱结合多指标成分测定可为夏天无药材质量评价提供参考。     

肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量测定

目的:建立肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量方法.方法:采用紫外分光光度法,以去氢二异丁香酚为对照品,测定波长275 nm.结果:去氢二异丁香酚质量浓度在1.5～9.0 mg·L-1与吸光度呈良好线性关系,r=0.999 8,平均回收率97.6％(n=6),RSD 1.2％.结论:建立的方法简便、快速、重复性好.     

瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱

目的：建立瓜蒌皮药材的 HPLC 指纹图谱。方法：采用 Agilent TC-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.2%冰乙酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长 260 nm,流速 0.8 mL·min^-1,柱温 25℃,进样20 μL。结果：建立了瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱,方法学考察结果良好,确立了13个共有峰,其中5个共有峰得到确认,10批瓜蒌皮样品指纹图谱的相似度均>0.9。结论：该方法稳定性、重复性好,建立的指纹图谱可为瓜蒌皮的质量评价提供依据。     

酸碱药对甘草-马钱子配伍汤液沉积相态释放特性研究

目的 探讨甘草-马钱子配伍汤液沉积相态的释放行为,为甘草-马钱子配伍减毒提供科学参考。方法 建立沉积相态释放测定HPLC法,通过体外释放实验,追踪沉积相态在蒸馏水、人工胃液、人工肠液等不同介质中主成分的释放行为,并对其释放结果进行拟合研究分析。结果 甘草酸、马钱子碱以及士的宁在人工肠液中的释放量较大,且马钱子碱>甘草酸>士的宁。马钱子碱和甘草酸均与一级动力学模型拟合结果最佳,士的宁与Higuchi模型拟合结果最佳。结论 甘草-马钱子沉积相态主要毒效成分呈现出难溶性骨架材料缓释制剂的释放特性,毒(效)成分士的宁可能以沉积共聚体形式存在,在体释放呈缓释行为而减毒;同时,甘草酸的释放对减毒增效起到协同作用。     

内生真菌链格孢菌醋酸乙酯提取物对大肠杆菌抑菌机制的研究

目的研究分离自药用植物白毛蛇Humata tyermanni的内生真菌链格孢菌发酵产物醋酸乙酯提取物(B06e)对大肠杆菌的抑菌机制。方法采用倍比稀释法测定了B06e对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC);测定了B06e作用前后大肠杆菌培养液电导率、核酸和蛋白质的变化;结合流式细胞仪、扫描电子显微镜、凝胶阻滞实验、圆二色谱和荧光实时定量PCR的分析方法研究了B06e对大肠杆菌细胞膜结构、形态、DNA的影响。结果 B06e对大肠杆菌的MIC为25μg/m L,3×MIC处理组的电导率是对照组的1.01倍;3×MIC处理组的β-半乳糖苷酶活性是对照组的11.6倍;流式细胞仪分析表明3×MIC处理组被碘化丙啶(PI)染色的阳性细胞比是对照组的286.5倍;扫描电子显微镜结果显示,B06e处理后菌体表面变得粗糙,细胞膜大量塌陷;以上结果说明B06e能增大细胞膜的通透性,破坏细胞膜的完整性。凝胶阻滞、圆二色谱的结果表明,B06e能够以嵌插的方式与DNA结合,但不能降解DNA;实时定量PCR结果表明,经B06e处理后rec A和rec N基因的表达量分别是对照组的2.9和3.7倍,说明B06e能破坏DNA的结构,迫使大肠杆菌启动了SOS修复。结论 B06e通过破坏大肠杆菌细胞膜完整性和DNA的结构,使得细菌代谢紊乱,最终导致细菌丧失了生长繁殖的能力。     

洋金花与木本曼陀罗叶绿体基因组特征与系统进化分析

目的 以洋金花Datura metel和木本曼陀罗Brugmansia arborea为材料,分析其叶绿体基因组结构和特征,基于叶绿体组数据探讨洋金花和木本曼陀罗及茄科其他物种的系统发育关系。方法 利用华大MGISEQ-2000PE150测序平台,双末端测序策略对基因组DNA建库测序,用NOVOPlasty组装叶绿体基因组,采用最大似然法(maximum likelihood,ML)构建系统进化树。结果 洋金花和木本曼陀罗的叶绿体基因组全长为155934bp和155939bp,分别包含131和130个基因,GC值32.3%,具有典型的四分区域结构,包括1个大单拷贝区(large single copy,LSC)、1对反向重复区(inverted repeats,IR)和1个小单拷贝区(small single copy,SSC),各区域序列长度分别为86354、86278、25609、25720、18362、18221bp。系统发育分析表明,洋金花与曼陀罗属的曼陀罗构成1单系分支,具有100%支持率,而木本曼陀罗属与曼陀罗属构成单系分支,具有100%支持率。结论 结果支持洋金花隶属于曼陀罗属,与曼陀罗亲缘关系较近,木本的木曼陀罗属从曼陀罗属分出,独立为一个属。洋金花和木本曼陀罗叶绿体基因组信息为后期分子鉴定和群体遗传研究奠定基础。     

基于NMR代谢组学技术的白芍与赤芍化学成分比较研究

目的比较白芍与赤芍的化学组成差异,为其质量控制提供研究依据。方法采用1H-NMR代谢组学技术对白芍与赤芍进行分析,通过多元统计方法找出其化学差异成分,并分析差异成分之间的相关性。结果白芍与赤芍核磁共振指纹图谱中共指认出了代谢物32种,多元统计分析显示白芍与赤芍可明显区分,白芍中精氨酸、苏氨酸、乙酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸、柠檬酸、丁二酸、乳酸、芍药内酯苷、6-O-没食子酰白芍苷、1,2,3,4,6-五没食子酰基葡萄糖以及没食子酸的量较高,而赤芍中丙氨酸、α-葡萄糖、蔗糖、芍药苷、儿茶素、β-谷甾醇、脂肪酸以及丹皮酚的量较高。此外,二者差异成分之间的相关系数也存在较大差异。结论本研究从整体化学组成上比较了白芍与赤芍的差异,不仅为白芍、赤芍质量标准研究提供了一种新思路,而且为其功效与化学成分的相关性研究提供依据。     

基于HPLC-Q-TOF-MS技术的甘草化学成分分析

目的 采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-Q TOF-MS)对甘草Glycyrrhiza uralensis 50%甲醇提取物中的化学成分进行分析鉴定。方法 Diamonsil II C18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相HPLC梯度洗脱法分离各主要成分;电喷雾电离源经正、负离子模式对色谱流出物进行检测,四级杆飞行时间串联质谱法对各主要色谱峰进行归属;选择甲酸钠溶液为内标矫正。结果 通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,从甘草50%甲醇提取物中共鉴定出40个化学成分,包括28个黄酮类、11个三萜皂苷类和1个香豆素类化合物。结论 利用液质联用技术鉴定甘草中的化合物并提供结构信息,为快速分析甘草药材的物质基础提供可行方法。