咳喘宁口服液对支气管哮喘大鼠PI3K信号转导途径的影响

目的观察咳喘宁口服液对呼吸道合胞病毒诱发支气管哮喘(以下简称“哮喘”)大鼠CD4+、CD8+T细胞内磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-110α表达的影响,探讨其防治病毒诱发哮喘的机理。方法将SD大鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、模型组、地塞米松＋沙丁胺醇组(阳性药组)和咳喘宁组。建立卵白蛋白哮喘大鼠模型,并以呼吸道合胞病毒激发哮喘。采用磁珠结合法分离CD4+、CD8+T细胞,使用流式细胞仪检测T细胞内PI3K-110α的表达水平。结果模型组大鼠CD4+、CD8+T细胞百分率及CD4+、CD8+T细胞内PI3K-110α的表达水平显著高于PBS对照组、阳性药组及咳喘宁组,差异有统计学意义(均P＜0.01)。经Pearson相关分析,各组大鼠CD4+、CD8+T细胞百分率与CD4+、CD8+T细胞内表达的PI3K-110α的表达水平无明显相关性。结论 CD4+、CD8+T细胞参与了哮喘免疫平衡调节,其表达的PI3K在病毒诱发哮喘模型中明显增高。咳喘宁口服液能抑制CD4+、CD8+T细胞内PI3K的表达,可能是其治疗哮喘的免疫机制之一。     

肾气丸对衰老大鼠小肠CD4+T细胞、CD8+T 细胞的影响

目的 实验研究肾气丸对D-半乳糖致衰大鼠小肠黏膜内CD4+T细胞、CD8+T 细胞的影响,探讨肾气丸延缓衰老作用.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分成4组,实验组(高、低剂量组)和模型组用D-半乳糖颈部皮下注射,实验组同时灌服肾气丸,对照组、模型组给予等量的生理盐水灌胃,持续42 d,分别取十二指肠、空肠、回肠,用免疫组化SP法显示黏膜内CD4+T细胞、CD8+T 细胞,分别对黏膜上皮和固有层内的阳性细胞计数.结果 模型组与对照组比较,上皮和固有层内CD4+T细胞有显著差异(P＜0.05);高剂量组或低剂量组与对照组比较,上皮和固有层内CD4+T细胞也有显著差异(P＜0.05);CD8+T 细胞在模型组和实验组与对照组比较,均无明显差异(P＞0.05).结论 肾气丸能改善衰老大鼠小肠黏膜内免疫细胞功能状态.     

肾虚质大鼠IL-2水平变化对CD4~+T细胞和CD8~+T细胞的影响

目的:观察肾虚质大鼠IL-2水平的变化对CD4+T细胞和CD8+T细胞的影响。方法:采用"猫吓鼠"的方法造成肾虚质孕鼠,将肾虚质孕鼠所产雄性子鼠16只随机分为模型组及药物组,每组8只,随机选取正常组孕鼠所产雄性子鼠8只作为空白组,模型组和药物组的16只子代鼠于每日定时进行恐吓,空白组不予恐吓,持续1个月;同时药物组给予桂附地黄丸混悬液,空白组和模型组给予等量生理盐水。采用ELISA法检测大鼠血清IL-2含量的变化,运用流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+百分率的变化。结果:与空白组相比,模型组IL-2的含量降低(P<0.05),CD4+百分率下降(P<0.05),CD8+百分率升高(P>0.05);与模型组比,药物组IL-2的含量、CD4+百分率升高,CD8+百分率降低,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:肾虚质大鼠IL-2的水平与T细胞免疫功能具有相关性。     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

长期艾烟干预对Wistar大鼠外周血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+Treg的影响

目的:探讨长期艾烟干预对细胞免疫的影响.方法:32只Wistar大鼠随机分为空白组、低浓度组、中浓度组和高浓度组,每组8只.除空白组外,其余各组每日在相应浓度的艾烟环境中暴露20 min,6个月后用流式细胞仪检测各组大鼠外周血中的T淋巴细胞亚群及CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)占CD4+细胞的比例.结果:与空白组相比,艾烟干预各组CD3+CD4+、CD3+ CD8+T细胞比例及CD3+ CD4+/CD3+ CD8+比值差异无统计学意义(P＞0.05),但CD4+ CD25+ Treg占CD4+细胞的比例均显著降低(P＜0.05),各项指标在艾烟干预备组间均差异无统计学意义(P＞0.05).结论:长期艾烟干预对CD3+ CD4+、CD3+ CD8+T细胞及CD3+CD4+/CD3+ CD8+无影响,但可下调大鼠外周血中CD4+ CD25+ Treg在CD4+T细胞中的比例,艾烟预处理可能通过该途径发挥对机体的免疫调节作用.     

升降散对脓毒症小鼠CD4~+、CD8~+T细胞的影响

目的观察升降散对脓毒症小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞的影响。方法雄性Balb/c小鼠84只,按随机数字表法分为正常组、假手术组、脓毒症组、升降散组,各组又分为6 h、12 h和24 h 3个时间点亚组。除正常组外,其余各组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症小鼠模型。各组在造模前72 h开始灌胃给药或0.9%Na Cl溶液,术后按各个时间点采用流式细胞仪方法检测小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞占淋巴细胞百分比。结果与脓毒症组相比,升降散组可显著上调CLP后6 h及12 h的CD4+水平,下调CLP后6 h及12 h的CD8+水平,差异均有统计学意义(P0.05)。结论升降散可以纠正脓毒症初期小鼠的细胞免疫功能紊乱,具有免疫调节作用。     

犀角地黄汤对免疫性血小板减少症模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞及Th17细胞的影响

目的探讨犀角地黄汤对免疫性血小板减少症(ITP)模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞(Treg)、Th17细胞及相关细胞因子的影响。方法将48只大鼠随机分为正常组、模型组、醋酸泼尼松组及犀角地黄汤低、中、高剂量组,每组8只。除正常组外,其余组均采用腹腔注射兔抗大鼠血小板血清(APS)建立ITP模型,于造模开始后第7天开始,各给药组灌胃给予相应剂量药物,连续14 d。采用血细胞计数仪检测造模前、灌胃前、灌胃结束后各组大鼠外周血中血小板数目;灌胃结束后,采用流式细胞术检测各组大鼠Treg、Th17细胞比例,采用实时荧光定量PCR法检测淋巴细胞Foxp3 mRNA相对表达量,采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、IL-35水平。结果灌胃结束后,与模型组比较,犀角地黄汤各剂量组大鼠血小板数目明显上升(P均0.05),外周血淋巴细胞中Treg所占比例、Foxp3 mRNA相对表达量及IL-35水平均明显上升(P均0.05),而Th17细胞所占比例及IL-17水平均明显下降(P均0.05),且具有剂量依赖性;犀角地黄汤高剂量组各指标与醋酸泼尼松组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论犀角地黄汤可能通过上调ITP大鼠外周血中Treg细胞表达,下调Th17细胞表达,维持Treg/Th17平衡,进而调节相关细胞因子IL-17、IL-35的表达发挥抗血小板减少作用。     

结肠癌患者化疗/热化疗前后CD4~+CD25~+T细胞和CTL细胞的变化及临床意义

目的探讨结肠癌患者化疗/热化疗前后CD4+CD25+T细胞和CTL的变化及临床意义。方法选取68例结肠癌患者,分为化疗组34例和热化疗组34例,患者治疗前后采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞中CD4+CD25+T细胞的表达,同时检测患者CTL细胞的功能,对比观察2组患者的检测结果,分析和探讨结肠癌患者化疗/热化疗前后CD4+CD25+T细胞和CTL的变化及临床意义。结果化疗组患者治疗前后CD4+CD25+T细胞水平分别为(19±9)%和(19±3)%,无显著性差异(P0.05);热化疗组患者治疗前后分别为(20±7)%和(15±8)%,有显著性差异(P0.05);热化疗组患者治疗后的CD4+CD25+T细胞水平明显低于化疗组(P0.05)。CTL细胞杀伤活性化疗组患者治疗前后分别为(10.4±2.2)%和(15.1±4.4)%,热化疗组患者治疗前后分别为(10.9±2.7)%和(17.5±3.8)%,2组比较治疗前后比较均有显著性差异(P均0.05);热化疗组患者治疗后的CTL细胞杀伤活性显著优于化疗组(P0.05)。结论热化疗可明显改善结肠癌患者的免疫抑制状态,增强患者CTL细胞的杀伤活性,可提高患者的临床治疗效果,改善预后,值得临床推广应用。     

肺部感染患者CD4~+CD25~+调节性T细胞及免疫球蛋白改变的临床观察

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在肺部感染患者免疫机制中的作用。方法:20例肺部感染患者(肺部感染组),用流式细胞仪检测血CD4+、CD4+CD25+,计算CD4+CD25+/CD4+比值,同时测定免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量并与30例健康人(健康对照组)比较。结果:肺部感染组CD4+CD25+调节T细胞数量及比例均显著高于健康对照组(P<0.01),肺部感染组IgA含量显著少于健康对照组(P<0.05)。结论:CD4+CD25+调节T细胞数量及比例升高,可能与肺部感染患者免疫功能紊乱有关。     

天灸血清对过敏性哮喘大鼠肺脏和脾脏中CD4~+、CD8~+的影响

目的:通过观察天灸血清对过敏性哮喘大鼠肺支气管和脾脏中CD4+、CD8+T淋巴细胞数量的变化及其比值的影响,探讨天灸血清是否具有与天灸疗法相类似的抗哮喘作用。方法:将天灸后制备出的大鼠血清,经尾静脉注射于哮喘模型大鼠体内,连续注射5次,于末次注射12h后处死,观测5组大鼠肺支气管和脾脏中CD4+、CD8+T淋巴细胞数量的变化并计算其比值。结果:与模型组和空白血清组相比,天灸血清组肺支气管和脾脏CD4+/CD8+的比值降低(P0.05),且与天灸组无统计学差别。结论:天灸血清可降低哮喘大鼠肺支气管和脾脏CD4+/CD8+的比值,具有与天灸疗法相类似的抗哮喘作用。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与妊娠期高血压病子痫前期发生关系的探讨

目的:观察具有免疫抑制作用的CD4+CD25+T细胞的数量以及相关因素雌激素与妊娠期高血压病子痫前期发生的关系。方法:流式细胞技术分析,测定CD4+CD25+T细胞的数量,放射免疫测定血清雌激素。结果:妊娠期高血压病子痫前期患者,其CD4+CD25+T细胞的数量减少,且血雌三醇水平有不同程度的降低。结论:①CD4+CD25+T细胞数量的改变在妊娠期高血压病的发病机制中起重要的作用。②雌激素能帮助维持免疫耐受。     

艾滋病中医脏腑气虚证候与CD4~+及CD8~+ T淋巴细胞相关性研究

目的观察艾滋病中医脏腑气虚证候与CD4+、CD8+T淋巴细胞相关性。方法通过对艾滋病中医脏腑气虚证候患者免疫学指标的观察,初步探讨艾滋病肺气亏虚证、脾气亏虚证、肾气亏虚证与CD4+、CD8+T淋巴细胞的内在相关。结果 153例患者中,肺气虚证患者48例,脾气虚证患者70例,肾气虚证患者35例;CD4+和CD8+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+T比值比较:肺气虚证与脾气虚证、肾气虚证比较有统计学意义(P0.05),脾气虚证与肾气虚证比较则无统计学意义(P0.05)。结论艾滋病肺气虚证患者较脾气虚证、肾气虚证患者CD4+、CD8+T淋巴细胞下降更明显,CD4+/CD8+比例失调更显著,其免疫损伤和破坏更严重,更易发生机会性感染,病情亦相对较重。     

新疆1 023例HIV/AIDS患者舌象与CD4计数相关性研究

目的：应用流行病学方法分析新疆艾滋病高发区HIV/AIDS 患者的舌象及其与CD4+T 淋巴细胞计数的相关性。方法：采用分层随机整群抽样的方法,对1 023 例新疆6 地区HIV/AIDS 患者进行舌象分析和CD4 淋巴细胞检测,探讨其相关性。结果：CD4+T 淋巴细胞计数较高的舌象以舌淡红、苔薄白为主,CD4+T 淋巴细胞计数较低的患者舌象淡白舌、剥苔较多。结论：CD4+T 淋巴细胞计数较低的艾滋病患者以虚证偏多。     

2型糖尿病及大血管病变患者 CD4＋CD28-T细胞、CD4＋CD25＋T细胞亚群的变化及意义

目的：观察外周血CD4＋CD28-T细胞、CD4＋CD25＋T细胞亚群在2型糖尿病患者及大血管病变患者的变化,探讨其在2型糖尿病及大血管病变发病中的作用。方法：应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪,检测36例初诊2型糖尿病（单纯DM组）患者和28例糖尿病并大血管病变患者、20例健康对照者的外周血T细胞亚群变化。结果：DM并大血管病变组、单纯DM 组 CD4＋CD28-T 细胞明显高于健康对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而 CD4＋CD25＋T 细胞明显低于健康对照组（P〈0.05）;DM并大血管病变组CD4＋CD28-T细胞高于单纯DM组（P〈0.05）,CD4＋CD25＋T细胞低于单纯DM组。结论：机体细胞免疫异常在2型糖尿病及大血管病变的发生、发展中发挥着一定的作用。     

CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在儿童特发性血小板减少性紫癜患者中的表达及意义

目的探讨儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达及意义。方法用流式细胞术检测27例ITP患儿和21例健康儿童外周血T淋巴细胞亚群的比例,以及CD4+T淋巴细胞表面CD25、FasL和Fas的表达率。结果ITP患儿CD3、CD4、CD4/CD8比值与对照组比较显著降低,CD4+CD25+调节性T细胞明显减少,CD4+CD25-细胞无明显改变,CD4+FasL+增多,CD4+Fas+减少。结论儿童ITP患者CD4+CD25+调节性T细胞显著减少,破坏自身免疫耐受,在ITP的发病中起重要作用。     

内异消癥汤对子宫内膜异位症大鼠CD_4~+及CD_8~+ T细胞表达的影响

目的探讨内异消癥汤对子宫内膜异位症模型大鼠CD4+、CD8+T细胞表达的影响。方法将47只大鼠随机分为对照组,模型组和内异消癥汤高、低剂量组,除对照组外均采用大鼠子宫组织自体移植手术制作子宫内膜异位症模型,灌胃给药4周后用免疫组化方法检测大鼠子宫内膜异位移植物局部CD4+、CD8+T细胞表达。结果与模型组相比,低剂量组CD4+表达显著降低(P<0.05),高、低剂量组CD8+的表达强度降低更显著(P<0.01);高、低剂量组的CD4+/CD8+比值较模型组增高,低剂量组比值增高尤为明显;高、低剂量组之间CD4+、CD8+表达比较无显著差异(P>0.05)。结论内异消癥汤能改善大鼠子宫内膜异位移植物局部组织免疫学变化,降低CD4+及CD8+表达,并有提高CD4+/CD8+比值的趋势,可能通过此途径达到治疗效果。     

针灸及其血清对荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖的影响

目的:观察针灸治疗对H_(22)荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞(CD4~+CD25~+regulatory T cells)体外增殖的影响和针灸血清刺激下的CD4~+CD25~+Treg细胞的体外增殖变化,探讨针灸及其血清对荷瘤小鼠免疫调节细胞的干预作用。方法:48只小鼠随机分为电针治疗组、艾灸治疗组、肿瘤对照组、正常对照组。采用H_(22)肿瘤细胞移植性实体瘤模型,电针和艾灸"大椎"治疗后,磁珠分离CD4~+CD25~+Treg细胞,氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法观察不同组小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力和针灸血清对CD4~+CD25~+ Treg细胞体外增殖的影响。结果:肿瘤对照组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平比正常对照组明显增高(P<0.05);电针治疗组和艾灸治疗组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平与肿瘤对照组比较均明显降低(P<0.01)。电针治疗组和艾灸治疗组1:1、1:8稀释度血清刺激正常小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖,较正常对照、肿瘤对照组血清显著增高(P<0.05),各组1:16、1:32稀释度血清对Treg细胞作用的差别无统计学意义(P>0.05)。结论:针灸治疗能下调荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力。不同浓度针灸血清体外刺激CD4~+CD25~+Treg细胞增殖表现出不一致的效应。     

rhG-CSF对化疗后骨髓抑制患者T淋巴细胞组成的影响

目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对化疗后骨髓抑制患者T淋巴细胞组成的影响。方法:化疗后出现Ⅱ°骨髓抑制的患者,给予皮下注射rhG-CSF150g,连续3d,用药前及用药后第3天用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞组成的变化。结果:流式细胞术分析发现,用药前CD4+T淋巴细胞占外周血CD3+T淋巴细胞比例为(52.96±8.45)%,用药后为(54.15±7.55)%,差异无统计学意义(P>0.05);用药前CD8+T淋巴细胞占外周血CD3+T淋巴细胞比例为(36.96±9.62)%,用药后为(34.56±8.32)%,差异无统计学意义(P>0.05);用药前CD4+CD25+T淋巴细胞占外周血CD4+T淋巴细胞比例为(4.56±1.32)%,用药后为(6.94±1.72)%,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:rhG-CSF对化疗后骨髓抑制患者CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞在CD3+T淋巴细胞中的百分比无明显影响;但增加了CD4+CD25+T淋巴细胞在CD4+T淋巴细胞中的百分比。     

高效抗逆转录病毒治疗联合健脾益肾方对无症状期艾滋病患者中医症候积分及 CD4+ T 细胞数量的影响

目的观察高效抗逆转录病毒治疗(HAART)联合健脾益肾方对艾滋病患者无症状期中医症候积分及CD4^+T淋巴细胞数量的影响。方法本研究纳入艾滋病无症状期患者60例,使用随机数字表法分为对照组与治疗组,每组30例。对照组予HAART治疗,治疗组予HAART联合健脾益肾方中药内服治疗,疗程12个月。纳入患者在疗程开始前、疗程结束后进行中医症候总积分及CD4^+T淋巴细胞数量测定,判定两组临床疗效。结果与本组治疗前比较,治疗组治疗后中医症候积分降低,两组CD4^+T淋巴细胞数增加(P<0.01,P<0.05)。与对照组比较,治疗组治疗后中医症候积分降低,CD4^+T淋巴细胞数增加(P<0.01)。同时治疗组中医症候治疗总有效率[100.0%(30/30)]高于对照组[46.7%(14/30),χ2=25.577,P=0.000]。结论HAART联合健脾益肾方中药治疗可改善艾滋病无症状期患者的临床症状、提升CD4^+T淋巴细胞数量,对艾滋病无症状期的维持或许具有积极的临床作用。