低场核磁共振及成像技术分析白芍炮制过程中水分变化规律

该文采用低场核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)及成像(nuclear magnetic resonance imaging,MRI)技术对白芍炮制过程中的水分状态和含量进行研究,考察白芍药材水煮、干燥过程中驰豫时间(transverse relaxation time,T_2)和MRI图像的变化。结果显示白芍鲜品中主要是自由水,煮制过程中,结合水的含量下降而自由水的含量增加,煮制过程结束时,白芍药材中自由水的含量达到90%以上。干燥过程中,T_2向左移动,水分流动性降低。MRI图像显示白芍炮制过程中水分的增加和减少均是由外而内的过程,干燥结束时,剩余水主要存在于白芍内层。水分的变化对药材炮制后的品质和外观均有影响,低场核磁及成像技术为白芍药材炮制过程中水分的变化提供了直观的参考依据,研究结果为根类药材的炮制方法的优化及饮片评价提供直观的参考方法和技术支撑。     

核磁共振氢谱法对3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇的定性和定量分析

目的 建立测定达肝素钠、依诺肝素钠、那屈肝素钙3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇含量的定量核磁共振氢谱法(quantitative proton nuclear magnetic resonance, qHNMR)。方法 采用Bruker AVANCE NEO 600 MHz核磁共振波谱仪,采集3种低相对分子质量肝素的核磁共振氢谱(¹H-NMR),以2,2,3,3-d₄-3-(三甲基硅基)丙酸钠盐(TSP-d₄)作为内标物,重水(D₂O)为溶剂,90°脉冲,采样次数(NS)为32次,测试温度25℃采样时间(AQ)为4.59 s,弛豫延迟时间(D1)为40 s,对3种低相对分子质量肝素中的残留溶剂乙醇进行定性和定量分析。结果 样品的¹H-NMR谱在化学位移δ 1.18和δ 3.65分别出现甲基和亚甲基质子信号,结合耦合常数可以确定样品中含有残留溶剂乙醇。同时,乙醇和TSP-d₄定量峰信号在¹H-NMR谱上分离度良好,乙醇在线性范围内线...     

高速搅拌湿法制备穿心莲颗粒过程中润湿剂的动态分布规律

目的研究穿心莲粉体高速搅拌湿法制粒过程润湿剂在颗粒中的动态分布规律。方法以模型药物穿心莲-微晶纤维素(MCC)质量比为1∶1.5制备混合粉体,60%乙醇为润湿剂,高速搅拌湿法制粒。以荧光素钠为示踪剂加入润湿剂中,检测荧光素钠在制粒过程不同时间点颗粒中的量。结果在制粒初期润湿剂分布不均匀,局部过度润湿,部分未被润湿,制粒结果出现两极分化,制粒时间增加,润湿剂分布逐步均匀化,颗粒粒径呈近单峰分布。结论高速搅拌湿法制备穿心莲颗粒过程中,润湿剂随时间分布符合一级动力学模型。     

玄梗扶正颗粒制备工艺研究

目的:优选玄梗扶正颗粒的提取工艺和成型工艺，为深入开发该制剂提供理论指导和实践数据。方法:采用正交试验L₄(2³)和单因素试验法，以浸膏得率优选玄梗扶正颗粒最佳提取工艺；以制粒情况、颗粒成型率、溶化性、吸湿率和休止角为指标，优选最佳辅料、润湿剂及药辅比，确定成型工艺参数。结果:按处方量称取各味药，加8倍量的水，浸泡90 min,煎煮3次，每次提取90 min,合并煎液并浓缩得相对密度为1.10～1.15的浸膏，以可溶性淀粉和蔗糖(3∶1)为辅料，90%乙醇为润湿剂，浸膏与辅料比例为1∶1.8制粒。结论:优选提取工艺和制备工艺稳定可行，质量可控。     

针刺联合全麻对老年腹部手术患者苏醒期躁动、应激反应及术后认知功能的影响

目的:探究针刺联合全麻对老年腹部手术患者苏醒期躁动、应激反应及术后认知功能的影响。方法:回顾性分析82例行全麻腹部手术治疗的老年患者临床资料,其中联合针刺干预44例(针刺组),未予以针刺干预38例(常规组)。记录两组麻醉前(A₀)、气管插管后(A₁)、划皮后(A₂)、拔管时(A₃)血流动力学[平均动脉压(MAP)、心率(HR)]及苏醒期躁动情况,比较两组A₀、A₃时应激反应[皮质醇(Cor)、去甲肾上腺素(NE)]及术前、术后3 d认知功能[简易智力状态测试量表(MMSE)]及认知障碍发生情况。结果:两组A₁、A₂、A₃时MAP、HR均较A0时升高(P<0.05),且常规组高于针刺组(P<0.05)。针刺组苏醒期躁动发生率及其躁动分级均低于常规组(P<0.05)。A₃时,两组血清Cor、NE水平均较A₀时升高(P<0.05),且常规组高于针刺组(P<0.05)。两组术后3 d时MMSE评分均较术前降低(P<0.05),且常规组术后3 d MMSE评分低于针刺组(P<0.05),认知障碍发生率则高于针刺组(P<0.05)。结论:针刺可减轻全麻围术期应激反应,对老年腹部手术患者苏醒期躁动控制效果较好,亦能改善术后认知功能障碍,应用前景良好。     

基于匹配频数统计矩法的六味地黄浓缩丸谱量学质量控制与评价研究

目的 基于超分子“印迹模板”理论,划分、整合六味地黄浓缩丸(Liuwei Dihuang Concentrated Pills,LDCP)指纹图谱,将其表征为物质单元并进行谱量学质量控制与评价研究。方法 采用匹配频数统计矩法划分、整合与表征50批LDCP指纹图谱物质单元,根据朗伯-比尔定律将各物质单元总峰面积与出膏率进行多元线性回归建立谱量学方程,进行谱量学研究。结果 50批LDCP的UPLC指纹图谱被划分为35个物质单元(A₁～A₃₅),经多元线性回归得到35个物质单元(A₁～A₃₅)总峰面积与出膏率的谱量学方程：P_T=23.390+0.041 06 A₁-9.100×10^-3 A₂+0.014 68 A₃+0.027 98 A₄-0.033 61A₅-0.042 25 A₆-6.608×10^-3 A<...     

干法制粒技术在连花清瘟胶囊生产中的应用

目的采用干法制粒工艺制备连花清瘟胶囊的颗粒,解决原工艺结块现象。方法以制粒的难易程度和颗粒收率为考察指标,优选干法制粒中最优辅料及辅料用量,采用正交试验设计对干法制粒工艺参数进行优化,并与湿法制粒工艺的颗粒得率、休止角、堆密度进行对比。结果选择淀粉为辅料,最佳干法制粒工艺为轧辊压力12 MPa、轧辊转速5 r/min、送料速度10 r/min。干法制粒工艺颗粒得率明显高于湿法制粒。结论干法制粒工艺可有效改善连花清瘟胶囊制粒中出现的结块现象,适用于连花清瘟胶囊的制粒工艺。     

芪参健骨颗粒的制剂工艺研究

目的:优选芪参健骨颗粒的制剂(成型)工艺。方法:以吸湿率、成型率、溶化性、休止角和制粒难易程度为评价指标,单因素试验考察辅料的种类及用量、混合辅料的配比、润湿剂浓度及用量的影响;采用正交试验法进一步优选制剂工艺条件。结果:芪参健骨颗粒最佳制粒工艺条件为:浸膏粉与辅料(糊精∶乳糖=2∶1)按4∶1的比例混合均匀,加1%甜菊素,以90%乙醇为润湿剂,润湿剂用量为辅料与浸膏总量的30%。结论:优选的制剂工艺制备的成品颗粒流动性好,吸湿率、成型率、溶化性、休止角均符合要求,为芪参健骨颗粒制粒工艺条件的确定提供了科学的实验依据。     

八珍益智颗粒制备工艺优选

目的:优选八珍益智颗粒制备工艺.方法:以总多糖提取率和浸膏得率为评价指标,采用L9(34)正交设计试验法,对八珍益智颗粒制备过程中的水提取工艺条件进行优化,并进行制粒工艺研究.结果:该颗粒剂水提取最佳工艺条件为分别加12,10倍水提取2次,每次2h,每次提取前先浸泡0.5h;制粒工艺为提取液减压浓缩后喷雾干燥得药粉,以90％乙醇作润湿剂,药粉-辅料1∶0.3,矫味剂用量为2.0％.结论:该工艺合理可行,适用于八珍益智颗粒的制备.     

复方芩柏颗粒剂成型工艺的研究

目的 :确定复方芩柏颗粒剂的成型 (制粒 )工艺条件。方法 :考察不同辅料 (乳糖、可溶性淀粉、糊精 )及乳糖用量对浸膏粉吸湿性的影响 ;用正交试验法优选制粒工艺条件 ,考察颗粒的流动性与吸湿性。结果 :3种辅料均可明显降低浸膏粉的吸湿性。最佳制粒工艺条件为 :浸膏粉与乳糖按8∶2的比例混匀 ,以50 %乙醇为润湿剂制软材 ,醇的用量为浸膏粉的4%。成品颗粒的流动性好 ,临界相对湿度约为 60 %。结论 :为复方芩柏颗粒制粒工艺条件的确定及生产环境的控制提供了科学的实验依据。     

基于低场核磁共振技术的不同干燥过程中光皮木瓜水分迁移规律研究

目的研究不同干燥过程中光皮木瓜水分迁移变化规律。方法利用低场核磁共振(LF-NMR)技术无损、非侵入的技术优势,监测不同干燥方式(热风干燥、蒸制后干燥、分段式干燥、阴干)下光皮木瓜的横向弛豫时间(T2)反演谱,分析水分迁移变化。结果新鲜光皮木瓜片中含有3种状态的水,其含量为自由水结合水不易流动水,热风干燥、蒸制后干燥、阴干的规律相似,总水分逐渐散失,水分与非水组分的结合力会增强,蒸制加快了木瓜片的失水率,蒸制后干燥与热风干燥下木瓜片失水速率有显著性差异(P0.05)。分段式烘干中,干燥的间歇阶段会发生不同状态水分之间的转换,以重新达到相对稳定的平衡状态。低温干燥对木瓜组织破坏较小,更利于组织中不易流动水转化为自由水,进而较快散失,而高温干燥在前期就对木瓜片组织结构造成破坏,组织收缩变形,水分与非水组织间的结合力出现短暂增强的现象。结论光皮木瓜干燥过程中3种状态的水分含量与LF-NMR T_2谱的峰面积有较高的相关性,LF-NMR技术为光皮木瓜中水分分布及变化规律研究提供了直观的参考依据,为木瓜的加工开发提供理论基础。     

灯盏花制剂对大鼠缺血性脑损伤再灌注早期脑成像及神经代谢物的作用

目的:研究灯盏花制剂对缺血性脑损伤脑成像的影响及脑组织代谢物的作用。方法:雄性SD大鼠23只,随机分成缺血损伤组(n=11)和灯盏花治疗组(n=12),分别用于核磁共振和大脑表面血管的观察。颈部正中切口,线栓法造成右大脑中动脉血供阻断(MCAO)。缺血2h后,立即腹腔注射灯盏花注射液(1.5mg·kg^-1体重)。采用核磁共振T₂加权成像(T₂WI)和局域质子谱(1H-MRS)技术,研究大脑成像和神经元代谢物N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌酸/磷酸肌酸(Cr/PCr)、胆碱(Cho)和乳酸(Lac)的变化。结果:灯盏花治疗组的高信号强度区信号较同时刻同时间点缺血损伤组减弱、体积小,T₂值减小,NAA值大,Cr/NAA和Cho/NAA比值小,未见乳酸峰;大脑表面的血管呈扩张状态。结论:灯盏花有助于缺血脑组织的血液循环重建,改善神经元的代谢。     

基于多维检测和低场核磁共振技术探讨中药复方骨痹颗粒浸膏粉体吸湿性特征及其改性机制

目的研究中药复方骨痹颗粒浸膏粉体吸湿性特征及其改性机制,为中药固体制剂制备过程的关键工艺技术改进提供依据。方法以骨痹颗粒浸膏粉体为模型药物,将水提原液、水提醇沉中间体和含有不同表面活性剂的水提醇沉中间体经喷雾干燥得到浸膏粉体,采用粉末流动性测试和电镜扫描等多维检测技术分析表征上述浸膏粉体的微观制剂学性质;采用不同表面活性剂对水提醇沉中间体进行吸湿性改性研究,进而引入低场核磁共振技术分析改性后浸膏粉体吸收水分子的含量、相态、分布及结构信息;探索骨痹颗粒浸膏粉体的吸湿性改性机制。结果浸膏粉体喷雾干燥过程中,加入聚乙二醇1000、泊洛沙姆188和月桂醇硫酸镁等表面活性剂可改善粉体的吸湿性。经低场核磁分析可知,上述表面活性剂通过与亲水基结合或与空气中的自由水结合,使得粉体吸湿性降低。结论加入表面活性剂对于骨痹颗粒浸膏粉体的吸湿性具有较好的改善作用,改性机制与水的结合状态相关。     

丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体的体外评价及其对HaCaT细胞增殖的影响

目的进一步评价丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体(TⅡ_A-NLC)的性质,并考察其对HaCaT细胞增殖的影响。方法采用纳米粒度仪及HPLC法对TⅡ_A-NLC的粒径和光稳定性进行考察,透析袋法测定TⅡ_A-NLC在72 h内的累积释放量并绘制释放曲线,MTT法考察TⅡ_A-NLC对HaCaT细胞增殖的影响。结果 TⅡ_A-NLC的平均粒径为(178±9)nm,多分散度指数(PDI)为0.183±0.017,Zeta电位(-27.5±5.6)m V,体外72 h累积释放量为52.28%,TⅡ_A-NLC能显著降低TⅡ_A的光降解速率,TⅡ_A在一定范围内以剂量依赖性的方式抑制HaCaT细胞增殖,同质量浓度的TⅡ_A-NLC对HaCaT细胞增殖的抑制作用显著高于TⅡ_A溶液。结论 TⅡ_A-NLC稳定性好,具有良好的缓释作用,较好的细胞生物相容性,能显著提高TⅡ_A对HaCaT细胞增殖的抑制作用。     

复方灵丹胶囊成型工艺及质量控制考察

目的:优选复方灵丹胶囊的成型工艺并建立其质量标准.方法:采用干法制粒技术,通过单因素试验优选复方灵丹胶囊成型工艺;采用TLC对处方中丹参和山豆根进行定性鉴别;采用HPLC测定丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量.结果:优选的成型工艺为取处方量药材提取物,加3％滑石粉,混合均匀,干法制粒,填充于0号胶囊.丹参和山豆根的薄层鉴别斑点清晰,阴性无干扰;丹参酮ⅡA在0.155 ～0.003 1 g·L-1呈良好线性关系,平均回收率100.9％,RSD 1.25％;丹酚酸B在0.035～1.750 g·L-1呈良好线性关系,平均回收率101.1％,RSD 1.52％.结论:胶囊的成型工艺操作简单,所建立的质量控制方法专属性强,重复性好,可用于复方灵丹胶囊的质量评定.     

FMEA与贝叶斯网络在中药流化床制粒风险评估中的应用

目的:运用失效模式与影响分析(FMEA)及贝叶斯网络(BN)对影响中药流化床制粒过程中的因素进行风险评估,以有效控制风险因素,提升产品质量。方法:通过FMEA对流化床制粒过程进行风险分析,然后将筛选出的中风险和高风险因素作为主要控制点并建立相应的BN,运用敏感性分析筛选出影响颗粒流动性、粒度均匀性、溶化性及产品洁净度的主要风险因素,并以颗粒质量不合格为证据确定各风险因素的发生概率,最后以三叶片流化床制粒过程为例,将FMEA与BN结合应用到其风险评估过程中,验证该方法的有效性和可靠性。结果:在通过FMEA筛选出流化床工艺、原料粒径、原料含水量和吸湿性、投药量、黏合剂浓度和加入量、捕集袋清洗程度和完整性、喷嘴位置等风险点的基础上构建了具有因果关系的流化床制粒风险网络,其中原料吸湿性、黏合剂浓度及加入量、进口温度和雾化压力为大概率风险因素,发生概率分别为55%,63%,59%和58%;根据贝叶斯风险关系网络控制三叶片流化床制粒分析结果显示,在影响因素与颗粒粒度均匀性的回归模型中,进口温度、雾化压力及黏合剂浓度的P分别为0. 003 4,0. 032 6,0. 041 8,表明三者与颗粒质量间均具有较大的相关性,与FMEA-BN方法得出的结论基本一致。结论:FMEA和BN相结合对流化床制粒进行可视化风险评估有助于对制粒过程中的风险因素进行有效控制,降低产品质量风险,为中药制粒工艺的改进和完善提供有力支持。     

丹参酮IIA对阿霉素耐药人乳腺癌细胞的多药耐药逆转作用及机制研究

目的 研究丹参酮II_A对阿霉素耐药人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的多药耐药逆转作用及相关机制。方法 分别用丹参酮II_A、阿霉素、阿霉素联合丹参酮II_A处理人乳腺癌MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞,采用MTT法检测细胞增殖率;流式细胞术检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞内阿霉素蓄积量的变化;检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）消耗量的变化;采用qRT-PCR、Western blotting法检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞ATP结合转运蛋白B1（ATP-binding cassette transporter B1,ABCB1）、ABCG2和ABCC1基因和蛋白表达的变化。结果 丹参酮II_A显著抑制MCF-7及MCF-7/ADR细胞增殖（P<0.05）,呈剂量相关性;丹参酮II_A能够逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性（P<0.05）,增加MCF-7/ADR细胞内阿霉素的蓄积（P<0.05）,减少MCF-7/ADR细胞的ATP消耗（P<0.05）,显著下调ABCC1和ABCG2基因和蛋白表达（P<0.05）。结论 丹参酮II_A能够通过调控ABCG2、ABCC1介导的转运,逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性。     

正交设计优选卷柏中总黄酮的提取工艺研究

目的 优选卷柏中总黄酮的提取工艺.方法 采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定总黄酮和阿曼托双黄酮.以提取量为考察指标,用正交设计方法 优选最佳提取工艺.结果 以总黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1B2C2D2;以阿曼托双黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1～3 B1～3 C2D2.综合考察采用A1B2C2D2为最佳提取工艺,即药材加10倍量的95%乙醇,回流提取2次,每次2h.结论 优选得到的工艺稳定可行,可作为卷柏的提取工艺.     

地黄饮子对卒中后抑郁大鼠海马5-羟色胺受体的影响

目的:通过观察地黄饮子对卒中后抑郁大鼠5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)与5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)mRNA水平表达的影响,进一步探讨地黄饮子治疗脑卒中后抑郁的可能作用机制.方法:健康成年SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为6组(空白组、模型组、百优解组、地黄饮子高、中、低剂量组)每组10只,除空白对照组每笼饲养5只外(雌雄分开),其余各组均采用单独饲养法,每笼饲养1只.卒中后抑郁模型建立成功后,模型组、氟西汀组和地黄饮子高、中、低剂量组分别以2.0mL蒸馏水、盐酸氟西汀(1.8 mg·kg-1)和地黄饮子(按生药)450,150,75 mg· kg-ig,1次/d,持续用药至行为学检测.在脑卒中后抑郁大鼠模型上,采用实时荧光定量RT-PCR方法,对卒中后抑郁大鼠5-HT1AR与5-HT2AR mRNA水平进行观察.结果:大鼠海马5-HT1AR相对表达水平与空白组(1.12±0.16)比较,模型组(0.23 ±0.13)有显著性差异(P＜0.01);地黄饮子中、高剂量组(0.76 ±0.13,0.75 ±0.11)与模型组比较,有显著性差异(P＜0.05).各组大鼠海马5-HT2AR mRNA表达水平与空白组(1.13 ±0.12)比较,模型组(2.21±0.21)有显著性差异(P＜0.05);地黄饮子高、中剂量组(1.21±0.21,1.25 ±0.26),与模型组比较,有显著性差异(P＜0.05).结论:地黄饮子可能是通过上调5-HT1AR mRNA、下调5-HT2AR mRNA在海马区的表达,达到治疗卒中后抑郁的目的.