消渴汤对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞Nephrin和Podocin表达的影响

目的:探究消渴汤对糖尿病肾病大鼠的肾小球足细胞Nephrin和Podocin表达的影响。方法:选取4周龄健康雄性Wistar大鼠45只,采用随机数字表法分为:正常组、对照组和实验组,每组各15只;对照组和实验组大鼠采用一次性腹腔注射链脲霉素(STZ)55mg/kg方法制作糖尿病肾病(DN)模型;各组大鼠分别于完成造模后第0、2、4周采用自动生化分析仪检测大鼠血肌酐、尿素氮、血糖和24 h尿蛋白含量水平;采用Western blotting检测各组大鼠肾皮质中Nephrin和Podocin蛋白表达情况;使用HE染色观察大鼠肾小球结构。结果:实验前,实验组及对照组血糖、24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮均明显高于正常组(P0.05);实验2周后,实验组及对照组血糖、24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮均明显高于正常组(P0.05);实验组及对照组相比各项指标均无差异(Ρ0.05);实验4周后,实验组及对照组血糖、24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮均明显高于正常组(P0.05);实验组与对照组相比各项指标均有下降(P0.05);相比正常组实验组及对照组大鼠肾组织nephrin和podocin蛋白表达显著降低(P0.05);实验组Nephrin和Podocin蛋白水平高于对照组(P0.05)。HE染色结果显示,使用消渴汤治疗后大鼠肾小球体积相对对照组减小,肾小管间质病变减轻,纤维化和炎细胞浸润显著改善。结论:消渴汤可以通过抑制炎症、调节糖代谢并增加大鼠足细胞数目来实现治疗糖尿病肾病。     

复方黄芪首乌合剂对代谢综合征大鼠肾组织Nephrin和Podocin的调节作用

目的:观察复方黄芪首乌合剂对代谢综合征大鼠早期足细胞损伤的保护作用及其机制。方法:采用高糖高脂饲料喂养法建立实验性代谢综合征大鼠模型,以复方黄芪首乌合剂(高、中、低剂量组)灌胃治疗,8周末收集尿标本检测24 h尿蛋白(24 hPro)、尿微量白蛋白(MA)和尿白蛋白肌酐比值(albumin to creatinine ratio,ACR);免疫组织化学法检测肾皮质Nephrin和Podocin的蛋白表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾皮质Nephrin和Podocin mRNA的表达;电镜下观察肾脏基底膜和足细胞的变化。结果:造模大鼠24 hPro、MA和ACR较正常对照组明显增加(P<0.01);肾小球基底膜显著增厚,足细胞与对照组大鼠比较明显减少,足突排列紊乱,足突融合;肾皮质Podocin、Nephrin蛋白和mRNA表达明显低于正常对照组(P<0.05)。经复方黄芪首乌合剂治疗8周后,24 hPro、MA、ACR均明显减少(P<0.05);肾小球基底膜病变减轻,细胞外基质增多减轻,足细胞数目增多,足细胞融合减轻;肾皮质Podocin、Nephrin蛋白和mRNA表达分别较模型组显著增加(P<0.05)。结论:复方黄芪首乌合剂对代谢综合征大鼠肾脏足细胞损伤有保护作用,其作用机制可能与其参与调节代谢综合征大鼠肾组织Nephrin和Podocin的蛋白和mRNA表达有关。     

苁归益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏Nephrin蛋白和Podocin蛋白表达的影响

目的探讨苁归益肾胶囊(由肉苁蓉、当归、山茱萸、桂枝、泽泻和丹皮组成)对高糖高脂饲料喂养加链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病肾脏足细胞裂孔隔膜蛋白相关分子(肾病蛋白Nephrin和肾小球足细胞裂隙膜蛋白Podocin)表达的影响,探讨其降低尿蛋白、保护肾脏的机制。方法随机抽取大鼠10只作为正常组,并将90只成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、苁归治疗组(苁归益肾胶囊高、中、低剂量组)。治疗10周后,收集大鼠尿液测定24 h尿蛋白定量,肾脏HE染色观察病理损伤,检测各组大鼠肾功能,生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾组织Nephrin和Podocin蛋白的表达。结果苁归益肾胶囊可改善糖尿病肾病大鼠肾组织病理损伤,降低糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白定量血肌酐和血尿素,并能增加肾组织中Nephrin和Podocin蛋白的表达。各治疗组肾组织病理改变较模型组均有不同程度的改善。结论苁归益肾胶囊对糖尿病肾病模型大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与上调Podocin和Nephrin表达有关。     

六味地黄丸防治大鼠糖尿病肾病的实验研究

目的:观察足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和podocin在糖尿病肾病发病机制中的作用,探讨六味地黄丸(LWDHW)保护糖尿病肾病大鼠肾脏的机制。方法:SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型,1周后,按血糖浓度将成模的糖尿病大鼠随机分为:模型组(STZ,8只)、治疗组(STZ+LWDHW,8只),另设正常组(Control,8只)。治疗组给予六味地黄丸灌胃,模型组、正常组给予等量生理盐水,持续观察8周。治疗第8周末,称大鼠体重,计算肾系数,观察肾脏病理改变;检测24h尿蛋白总量、血尿素氮、血肌酐;免疫印迹检测nephrin和podocin在肾组织中的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖,体重明显下降(P<0.01),肾系数,24h尿蛋白总量,血尿素氮,血肌酐明显升高(P<0.01);模型组大鼠肾小球肥大、毛细血管基底膜增厚,系膜基质增生,肾小管上皮细胞空泡样变,见蛋白管型;nephrin和podocin蛋白表达减少(P<0.01)。治疗组血糖、体重无明显改变;肾系数,24h尿蛋白总量,血尿素氮,血肌酐明显降低(P<0.05);病理改变明显减轻;大鼠肾组织nephrin和podocin表达明显增加(P<0.05)。结论:六味地黄丸可能通过增加足细胞nephrin和podocin表达发挥保护糖尿病肾病大鼠肾脏的作用。     

消渴平合剂对糖尿病肾病db/db小鼠肾脏足细胞 Nephrin、Podocin、CD2AP表达的影响

目的:观察消渴平合剂对糖尿病肾病db/db小鼠肾脏足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin、Podocin、CD2AP表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病的机制。方法:选取12只db/m小鼠为正常对照组,其余36只db/db小鼠随机分为模型组、消渴平组、厄贝沙坦组,每组各12只;连续给药8周后分别检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、胱抑素C(CysC)及24 h尿蛋白(24 hUP)。采用Real-time PCR、Western blot检测肾脏足细胞nephrin、podocin及CD2AP mRNA和蛋白表达变化。结果:消渴平合剂可以明显降低db/db小鼠FBG、CysC和24 hUP。与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏足细胞nephrin、podocin及CD2AP的表达明显降低(P0.01);与模型组相比,消渴平组nephrin、podocin及CD2AP的表达明显上调(P0.05),与厄贝沙坦组比较无明显差异(P0.05)。结论:消渴平合剂可以降低db/db小鼠空腹血糖、胱抑素C及24 h尿蛋白,保护肾功能,其机制可能与上调肾脏足细胞nephrin、podocin和CD2AP表达有关。     

糖肾宁对糖尿病肾病大鼠肾组织nephrin、desmin表达的影响

目的探讨糖肾宁对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾小球足细胞损伤的影响。方法8周龄SPF级雄性SD大鼠46只,随机选择10只为对照组,其余大鼠予大剂量STZ腹腔注射建立糖尿病模型。其中34只大鼠血糖≥16.7 mmol/L视为糖尿病模型建立成功,随机分为模型组、缬沙坦组、糖肾宁组,予糖肾宁及缬沙坦干预12周,测定空腹血糖、血清尿素氮、血清肌酐、24小时尿蛋白,足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin、骨架蛋白desmin的蛋白或基因表达。结果与对照组比较,模型组大鼠空腹血糖、血清尿素氮、血清肌酐、24小时尿蛋白均明显升高(P0.05),desmin蛋白、基因表达上调(P0.05)、nephrin mRNA表达下调(P0.05);与模型组比较,糖肾宁、缬沙坦干预后,desmin蛋白、基因表达下调(P0.05)、nephrin mRNA表达上调(P0.05),血清尿素氮、血清肌酐、24小时尿蛋白显著降低(P0.05),但血糖无明显变化。结论糖肾宁干预链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病大鼠可减少肾小球足细胞损伤,降低蛋白尿、保护肾功能。     

保肾通络方对早期糖尿病肾病大鼠尿蛋白及尿Nephrin、Podocin排泄的影响

目的观察不同剂量的保肾通络方对早期糖尿病肾病大鼠尿蛋白、尿Nephrin、尿Podocin排泄的影响,探讨本方对糖尿病肾病的作用机制及最佳剂量。方法将链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立的早期糖尿病肾病大鼠模型随机分为正常组、模型组及中药高、中、低剂量组。用药8周后,检测各组大鼠血糖、尿糖、尿白蛋白及尿Nephrin、Podocin的水平,并将尿Nephrin、Podocin的排泄浓度与尿白蛋白做相关性分析。结果药物干预8周后,中药各剂量组大鼠的血糖、尿糖、尿白蛋白水平较模型组有降低趋势,但组间差异无统计学意义(P0.05);中药各剂量组大鼠尿Nephrin、Podocin排泄均低于模型组,其中中药中剂量组、中药高剂量组尿Nephrin排泄明显低于模型组(P0.05),但二者组间差异无统计学意义(P0.05);Pearson相关分析显示尿Nephrin、尿Podocin排泄呈正相关(r=0.517,P0.05),且二者均与尿白蛋白水平呈正相关(r=0.746,P0.05)。结论保肾通络方对早期糖尿病肾病大鼠足细胞可能存在保护作用,其中对尿Nephrin排泄的影响可能先于尿白蛋白出现。     

右归丸对激素抵抗型肾病综合征大鼠模型及SD蛋白的影响

目的观察右归丸对激素抵抗型肾病综合征(steroid-resistant nephrotic syndrome,SRNS)大鼠24 h尿蛋白定量、肾脏功能及足细胞裂孔隔膜(SD)相关蛋白的影响。方法 60只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(50只)。造模组大鼠采用一次性尾静脉注射阿霉素(6 mg/kg),正常组大鼠尾静脉一次性注射等剂量的生理盐水,造模成功2周后,采用随机数字表法分为模型组、激素组、激素联合中药高、中、低组。正常组、模型组等体积生理盐水、激素组泼尼松片混悬液、激素联合中药组右归丸与泼尼松混悬液,连续灌胃干预6周。治疗期间观察大鼠的一般情况,检测各组大鼠24 h尿蛋白定量;给药结束后,应用生化分析仪检测大鼠血生化指标,采集肾组织,采用免疫组织化学检测大鼠肾小球中Nephrin、Podocin变化和分布情况。结果与空白组比较,其它各组尿蛋白、总胆固醇、三酰甘油、肌酐与尿素氮明显增加升高(P 0. 05);血白蛋白含量降低明显(P 0. 05);与模型组相比,各治疗组尿蛋白、血脂、肾功指数下降明显(P 0. 05);血白蛋白含量升高(P 0. 05)。与正常组相比,其它各组Nephrin、Podocin表达量有所减少(P 0. 05);与模型组相比,各治疗组除激素组外其它各组Nephrin、Podocin表达量均有上调(P 0. 05);与正常组比较,Nephrin、Podocin沿肾小球毛细血管袢呈片状、不连续型颗粒布散;与模型组比较,各治疗组Nephrin、Podocin蛋白分布无统计学意义(P 0. 05)。结论右归丸对激素有增敏作用,可明显减少24 h尿蛋白量,降血脂、提高血清蛋白,保护肾功能,有效恢复足细胞SD相关蛋白的表达量,进而延缓SRNS的进展。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的调节作用

目的探讨化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的调节作用。方法 40只大鼠采用高糖高脂饲料联合1%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)35 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,将造模成功的36只大鼠按随机数字表法分为模型组、化瘀通络组和厄贝沙坦组,每组12只。另取10只正常大鼠作为正常组。化瘀通络组和厄贝沙坦组分别给予化瘀通络中药和厄贝沙坦灌胃,同时正常组和模型组等量蒸馏水灌胃。采用ELISA法检测不同时间点各组大鼠24 h尿蛋白定量;连续干预16周后分别检测各组大鼠体重(body weight,BW)、肾重(kidney weight,KW)、肾脏指数(kidney index,KI)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和尿酸(uric acid,UA);光镜和电镜下观察肾组织病理形态学变化;采用Western blot和Real-time PCR法检测肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达。结果 (1)与正常组比较,模型组大鼠第4、8、12、16周24 h尿蛋白定量明显升高(P0.01),造模后大鼠BW减轻,KI、FBG、SCr、BUN和UA水平均升高(P0.01);与模型组比较,化瘀通络组和厄贝沙坦组第4、8、12、16周24 h尿蛋白定量明显降低,且化瘀通络组24 h尿蛋白定量较厄贝沙坦组减少更明显(P0.05,P0.01);造模后化瘀通络组和厄贝沙坦组BUN水平降低(P0.05,P0.01)。(2)肾脏病理显示:模型组肾脏结构紊乱,基底膜明显增厚,系膜重度增生,足突广泛融合;化瘀通络组和厄贝沙坦组肾脏病理改变均有不同程度减轻。(3)Western blot和Real-Time PCR显示:与正常组比较,模型组大鼠肾组织podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达水平均降低(P0.01);与模型组比较,化瘀通络组和厄贝沙坦组podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达水平均升高(P0.01);化瘀通络组podocin、CD2AP蛋白和CD2AP mRNA表达均明显高于厄贝沙坦组,差异有统计学意义(P0.05)。结论化瘀通络中药可以降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白,保护肾功能,改善肾脏病理改变,其机制可能与上调裂孔膜蛋白podocin、CD2AP表达有关。     

川芎嗪对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及相关蛋白nephrin和podocin表达的影响

目的:研究川芎嗪对高脂高糖饮食与链脲佐菌素(STZ)诱致大鼠肾脏损伤的保护作用及与相关蛋白nephrin,podocin表达的影响。方法 :将50只雄性大鼠随机分为正常组和模型组。除正常组外,其余大鼠均给予高脂-高糖饲料喂养4周,再给予STZ(40 mg/kg,ip)注射,72h后测定空腹血糖,将血糖值大于16.67mmol/L的大鼠随机分为4组:模型组,二甲双胍组(250 mg/kg),川芎嗪低剂量组(80mg/kg)和高剂量组(160mg/kg),连续给药8周。末次给药后,收集24h尿液,测定尿蛋白含量;取血测定血糖、血肌酐、尿素氮变化;光镜下观察肾脏病理学变化;Western Blot方法检测肾组织nephrin、podocin蛋白表达水平。结果:模型大鼠血糖值明显高于正常对照组,尿蛋白含量、血肌酐、尿素氮含量亦明显升高,肾组织nephrin、podocin蛋白表达水平降低。低高剂量川芎嗪治疗8周后,明显改善血糖水平,降低尿蛋白含量、血肌酐和尿素氮含量;肾组织nephrin和podocin蛋白表达增加,肾脏组织病理性损伤明显减轻。结论:川芎嗪对高糖高脂饮食与STZ诱致糖尿病大鼠肾损伤具有保护作用,其机制可能与诱导nephrin,podocin表达增加有关。     

益气补肾方联合雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠Nephrin和Podocin表达的调控作用

目的:观察益气补肾中药方联合雷公藤多苷(GTW)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用及其作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠70只,随机分成6组,应用高脂饲料喂养加单侧肾切除术合链脲菌素(STZ)腹腔注射制备DN大鼠模型。第9周起,西药组以厄贝沙坦(15.75 mg·kg-1·d-1)、雷公藤组以GTW(3.15 mg·kg-1·d-1)、中药组以益气补肾汤(相当于生药21.42 g·kg-1·d-1)、联合组以雷公藤多苷和益气补肾汤灌胃,治疗周期8周。16周末采用ELISA法检测大鼠尿微量白蛋白;应用血糖测定仪检测大鼠血糖水平;全自动血液细胞分析仪测定血白细胞;全自动生化仪测定大鼠肝肾功能;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化技术检测肾组织足细胞标志物Nephrin和Podocin的表达;光镜及电子显微镜观察肾组织病理变化。结果:与正常组比较,造模大鼠体重开始增加明显(0~6周),但注射STZ后开始明显消瘦;血糖均显著上升(P0.01);尿微量蛋白/肌酐比值(ACR)的显著升高(P0.05);血肌酐及血尿素氮明显升高(P0.05);Nephrin、Podocin蛋白及其m RNA表达均降低(P0.05)。光镜及电镜结果提示DN大鼠足细胞数目减少、足突增宽融合,系膜增宽,基底膜增厚。与模型组比较,各治疗组大鼠血Scr、BUN和尿ACR均有不同程度,同时Nephrin、Podocin蛋白及其m RNA的表达也相应有所上调,此外,各组病理改变也同时有改善,尤以联合治疗组效果最佳。结论:益气补肾方联合雷公藤多苷能对DN大鼠早期肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与上调足细胞Nephrin和Podocin的表达有关,同时中药复方还具有抑制雷公藤多苷不良反应的功效。     

玉米须提取液对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制研究

目的:探讨玉米须提取液对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制研究.方法:采用健康雄性Sqmgue-Dawley 大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组及玉米须治疗组,第4、8周任取6只大鼠,收集血、尿标本测定生化指标.大鼠肾组织分别作组织学、超微结构、免疫组织化学方法检测肾小球podocin蛋白表达,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察podocin mRNA在肾组织中的表达.结果:在4用、8用,糖尿病组血糖、肌酐清除率、尿白蛋白排泄率较正常对照组均有不同程度的升高.玉米须提取浚治疗组血糖、肌酐清除率、尿白蛋白排泄率较正常对照组均有不同程度的升高.玉米须提取液治疗组血糖、肌酐清除率、尿白蛋白排泄率显著低于同时期的糖尿病组.糖尿病组大鼠肾组织podocin mRNA和蛋白表达较正常对照组明显降低.玉米须提取液组明显上调.结论:玉米须提取液对糖尿病大鼠肾结构功能具有保护作用,可影响肾小球上皮细胞足突podocin蛋白表达,从而对糖尿病肾病有保护作用.     

益肾化湿颗粒对糖尿病肾病小鼠足细胞保护机制研究

目的观察益肾化湿颗粒对糖尿病肾病(DN)小鼠肾脏足细胞裂孔隔膜蛋白(Nephrin、Podocin)、血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病的机制。方法通过高脂膳食建立DN小鼠模型,随机分为正常组、模型组、益肾化湿治疗组、缬沙坦组,并每周称重。干预4周后处死小鼠,分别检测各组24 h尿蛋白量、血糖、肌酐,光镜观察肾脏病理变化,免疫荧光染色检测肾脏PDGFRβ的表达,Western Blot检测Nephrin、Podocin、PDGFRβ的表达。结果与模型组相比,益肾化湿治疗组小鼠血糖降低[模型组(37.04±2.72)mg/d L;益肾化湿组(32.51±4.65)mg/d L],尿微量白蛋白肌酐比降低[模型组(4.95±1.36)μg/mg;益肾化湿组(1.41±0.17)μg/mg],肾脏病理变化有明显改善,Nephrin、Podocin的表达显著增高(P0.01),PDGFRβ的表达显著降低(P0.01)。结论益肾化湿颗粒通过上调足细胞Nephrin、Podocin及降低肾脏PDGFRβ的表达,减轻DN小鼠尿蛋白排泄,具有肾功能保护作用。     

橙皮苷对IgA肾病大鼠肾脏组织中Nephrin蛋白表达的影响研究

目的探讨橙皮苷对IgA肾病大鼠肾脏组织中Nephrin表达是否有调节作用及其作用机制。方法选取雄性SD大鼠60只,适应性喂养2周后随机分为正常组、模型组和橙皮苷组,每组20只。除正常组外,其余组均造模。造模成功后,橙皮苷组给予橙皮苷10mg/(kg·d)灌胃,模型组和正常组给予生理盐水1 mg/(kg·d)灌胃,均1次/d。分别于造模6周、10周及灌胃干预4周、8周检测各组大鼠尿红细胞计数;分别于灌胃干预4周、8周检测24 h尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮水平,采用免疫组化、Western blot法检测肾脏组织中Nephrin蛋白表达情况,采用RT-PCR法检测肾脏组织中Nephrin mRNA表达情况。结果与正常组相比,模型组大鼠毛发杂乱,饮食减少,橙皮苷组干预后毛色、饮食进水及活动度较模型组有一定改善。造模6周、10周及灌胃干预4周、8周,模型组和橙皮苷组尿红细胞计数均明显高于正常组(P均0.05);灌胃干预4周、8周后,橙皮苷组尿红细胞计数均明显低于模型组(P均0.05)。灌胃干预4周、8周后,模型组24 h尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮水平均明显高于正常组(P均0.05),Nephrin蛋白和mRNA表达均明显低于正常组(P均0.05);灌胃干预4周后,橙皮苷组24 h尿蛋白定量和尿素氮水平均明显低于模型组(P均0.05),Nephrin蛋白和mRNA表达均明显高于模型组(P均0.05);灌胃干预8周后,橙皮苷组24 h尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮水平均明显低于模型组(P均0.05),Nephrin蛋白和mRNA表达均明显高于模型组(P均0.05)。结论橙皮苷能明显降低IgA肾病大鼠24 h尿蛋白定量,减少尿红细胞计数,保护肾功能,这可能与其可上调肾脏组织中Nephrin蛋白和mRNA的表达有关。     

糖肾一号胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及其机制研究

目的观察糖肾一号胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠的作用及可能机制。方法 SD大鼠采用ip链脲佐菌素(STZ)方法制备DN模型,造模成功大鼠随机分为模型组,贝那普利组(1.04 g/kg),糖肾一号胶囊高、中、低剂量(9、6、3 g/kg)组,每组15只,另设对照组15只,各组连续ig给药8周,测定各组大鼠血糖、血脂、血胱抑素C、血清固醇元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、SREBP-2c水平,进行尿微量白蛋白定量,检测各组大鼠肾组织IRS-1、PI3K、podocin蛋白表达水平。结果与模型组比较,糖肾一号胶囊高、中剂量组大鼠血糖、血脂、血胱抑素C、尿微量白蛋白明显降低(P0.05、0.01),血清SREBP-1c和SREBP-2c水平显著降低(P0.05),肾脏组织IRS-1、PI3K及podocin蛋白表达水平明显升高(P0.05),而糖肾一号胶囊低剂量组升高不明显(P0.05),高剂量组与中剂量组比较差异显著(P0.05)。结论糖肾一号胶囊对DN大鼠具有一定保护作用,其能够降低DN大鼠血糖、血脂、血胱抑素C、尿微量白蛋白水平,作用机制可能与提高肾组织podocin蛋白表达、改善肾足细胞损伤、延缓肾脏纤维化有关。     

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA 和Podocin mRNA表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗近端小管刷状缘抗原(抗Fx1A)血清一次性尾静脉注射诱导被动型海曼(Heymann)肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新组及益气活血化瘀汤低、中、高剂量组,每组6只。每组按相应剂量灌胃4周,每周收取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、三酰甘油(TG)水平,取肾脏行Masson、PASM染色观测肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察Ig G、C3改变,实时荧光PCR检测Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达。结果与正常对照组比较,其余5组UTP均升高(P0.05),Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达量均减少(P0.01);与模型组比较,给药组UTP均减少(P0.05),Nephrin和Podocin mRNA表达量均增加(P0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P0.05),Scr、BUN、TC、HDL-c、TG差异无统计学意义(P0.05);与洛丁新组比较,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP有所减少,但差异无统计学意义(P0.05),各生化指标差异无统计学意义(P0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达均有所增加,但差异无统计学意义(P0.05);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血化瘀汤可明显减少膜性肾病大鼠的尿蛋白程度,减少肾脏病理损伤,上调肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达,延缓膜性肾病的进展。     

加味升降散对糖尿病大鼠足细胞nephrin. podocin 蛋白表达的影响

目的:加味升降散对糖尿病大鼠足细胞肾小球细胞黏附分子受体抗原(nephrin)、肾小球足细胞跨膜蛋白(podocin表达的影响,探讨其肾脏保护机制。方法:60只雄性成年SD大鼠随机分为空白组、模型组、培哚普利组、低剂量中药组和高剂量中药组。采用大鼠左侧切除左肾手术+高脂高糖饲料+链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)法制备糖尿病大鼠模型。高剂量中药组大鼠给予27 g/(kg·d)加味升降散灌胃,低量中药组大鼠给予9 g/(kg·d)加味升降散灌胃,培哚普利组大鼠给予0.48 mg/(kg·d)(溶于2 mL的CMC-Na溶液)培哚普利灌胃。空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。观察大鼠一般状况,应用考马斯亮蓝法监测24 h尿蛋白定量,应用全自动生化分析仪检测肾功能、血糖。光镜下观察大鼠肾脏病理学变化,免疫组织化法观察nephrin、podocin蛋白在肾脏组织的分布及表达情况。结果:与空白组比较,模型组血糖、血肌酐(Serum creatinine,SCr)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白均升高(P 0.01),nephrin、podocin蛋白表达均下降(P 0.01);与模型组比较,培哚普利组及低、高剂量加味升降散血糖、SCr、BUN、24 h尿蛋白均下降(P 0.01);培哚普利组、低剂量中药组、高剂量中药组nephrin、podocin蛋白表达水平均有不同程度上调(P 0.05),其中高剂量中药组nephrin、podocin蛋白表达水平上调最为显著。结论:加味升降散能有效改善糖尿病大鼠肾功能,减少蛋白尿,改善肾小球硬化等,其途径可能与加味升降散上调大鼠足细胞nephrin、podocin蛋白表达水平,减轻大鼠足细胞损伤有关。     

普罗布考对2型糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用

目的探讨普罗布考对糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用及相关机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为3组,正常组10只给予普通饲料喂养,模型组13只和普罗布考组13只给予高糖高脂饲料喂养。喂养8周后,模型组和普罗布考组以小剂量链脲佐菌素(STZ)(15~25 mg/kg)腹腔注射诱导2型糖尿病模型。之后普罗布考组给予普罗布考500 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予0.5%羟甲基纤维素钠灌胃,均1次/d,连续8周,期间模型组和普罗布考组给予高糖高脂饲料喂养,正常组普通饲料喂养。测定3组大鼠血糖、血脂及氧化应激指标,免疫组化法检测肾组织中Nephrin蛋白表达情况,RTPCR法检测肾组织中Nephrin、podocin和CD2AP mRNA表达情况。结果模型组和普罗布考组血清TG、TC、LDL-C、FPG、Hb A1c、HOMA-IR均明显高于正常组(P均0.05);普罗布考组血清TC、LDL-C水平均明显低于模型组(P均0.05),但FPG、Hb A1c、HOMA-IR与模型组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。模型组血清SOD、GSH-Px含量和肾组织中Nephrin蛋白及Nephrin、podocin、CD2AP mRNA相对表达量均明显低于正常组(P均0.05),血清MDA含量明显高于正常组(P0.05);普罗布考组血清SOD、GSH-Px含量和肾组织中Nephrin蛋白及Nephrin、podocin、CD2AP mRNA相对表达量均明显高于模型组(P均0.05),血清MDA含量明显低于模型组(P0.05)。结论普罗布考可能通过降低糖尿病肾病大鼠血脂水平及提高抗氧化能力,调节足细胞相关蛋白Nephrin、podocin、CD2AP的表达而延缓糖尿病肾病的进展。     

六味地黄汤联合来氟米特、泼尼松治疗大鼠IgA肾病的研究

目的:探讨六味地黄汤联合来氟米特、泼尼松对大鼠IgA肾病的作用及其可能的机理。方法:第12周末造模成功后,随机分为模型对照(M)组、来氟米特和泼尼松(LP)组和中药(C)组、来氟米特、泼尼松联合中药(LPC)组和正常对照(K)组,检测24小时尿蛋白、尿红细胞、肾功、血浆白蛋白。肾组织行HE、PAS、P+M及免疫荧光染色;RT-PCR检测足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和podocin mRNA的表达。结果:与其他组相比,LPC组尿蛋白、尿红细胞明显减少,血清BUN、SCr明显下降,HE、PAS染色、P+M染色提示肾组织病理损害程度相对较轻,免疫荧光提示肾小球系膜区IgA沉积相对明显减少,且肾组织nephrin、podocin mRNA表达上调。结论:六味地黄汤联合来氟米特、泼尼松能够延缓肾脏损害的进展,其作用机制可能与上调Nephrin、Podocin的表达,抑制系膜细胞增生,减少系膜区免疫复合物沉积有关。     

加减补阳还五汤对膜性肾病大鼠Podocin、Nephrin 的影响

目的:探讨加减补阳还五汤对膜性肾病(MN)大鼠的治疗效果及可能的作用机制。方法:将雄性SD大鼠36只随机分为正常组、模型组、盐酸贝那普利组、加减补阳还五汤高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组),每组6只。正常组大鼠按6 mL/kg的剂量尾静脉注射生理盐水,其余5组按等剂量注射抗近端小管刷状缘抗原(Anti-Fx1A)构建MN模型。模型制备成功后,正常组、模型组每天给予10 mL/kg 0.9%的氯化钠注射液灌胃,盐酸贝那普利组每天按1.60 mg/kg的剂量给予0.16 mg/mL的盐酸贝那普利药液,中药高、中、低剂量组分别予以7.04、3.52、1.76 g/mL的中药浓缩液灌胃。分别于模型制备前、模型制备成功后、给药后第7、14、28天留取各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白(24 hUP)。给药28天后处死大鼠,心脏取血,检测血中白蛋白(Alb)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平,取肾脏组织行苏木精-伊红染色(HE染色)、马松三色染色(Masson染色)、过碘酸六胺银染色(PASM染色),光学显微镜下观察肾脏组织病理改变;免疫荧光检测免疫球蛋白G(IgG)和补体C3在肾小球的阳性表达;免疫组织化学法观察足细胞裂孔膜蛋白Podocin在肾小球的阳性表达情况;RT-PCR检测足细胞裂孔膜蛋白Podocin、Nephrin mRNA表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠24 hUP增多(P0.05),肾小球基底膜上皮下免疫复合物形成,IgG、C3表达增多,肾组织Podocin蛋白及Podocin、Nephrin mRNA表达下降(P0.01)。与模型组比较,4个给药组大鼠治疗28 d后24 hUP降低(P0.05);上皮下免疫复合物形成减少,IgG、C3表达下降;肾组织Podocin、Nephrin mRNA表达升高(P0.01);Podocin蛋白表达升高,但仅中药高剂量组差异有统计学意义(P0.05)。与盐酸贝那普利组比较,中药低、中剂量组大鼠给药28 d后24 hUP及肾组织Podocin蛋白表达差异均无统计学意义;中药低剂量组Podocin、Nephrin mRNA表达较低(P0.01);中剂量组Nephrin mRNA的表达较低(P0.05),Podocin mRNA的表达下降,但差异无统计学意义;中药高剂量组大鼠给药28 d后24 hUP降低,上皮下免疫复合物形成减少,IgG、C3表达下降,Podocin蛋白及Podocin、Nephrin mRNA表达增多,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。各组大鼠血Alb、TG、TC、SCr、BUN差异均无统计学意义。结论:加减补阳还五汤能够降低MN大鼠的24 hUP,且高剂量效果最佳,其治疗MN的作用机制可能是上调Podocin、Nephrin mRNA的表达,减少免疫复合物的形成。