E-Cad、MMP9血清中的表达与胃癌痰湿证型关系的临床研究

目的立足于肿瘤转移的生物学特性与痰的病理特征相似基础上,探讨痰在肿瘤转移中发挥作用的可能物质基础。方法以酶联免疫吸附法检测胃癌痰湿证型患者30例治疗前后与非痰湿证型患者32例以及健康对照组10例血清中上皮钙黏附分子(E-Cad)、基质金属蛋白酶(MMP9)的表达;痰湿证组服用消痰散结方1个月,非痰湿证组不治疗。观察治疗前后血清中E-Cad、MMP9的表达变化,并与非痰湿组血清中E-Cad、MMP9的表达进行比较对照。结果两种黏附分子表达在痰湿证型与非痰湿证型中的表达均较健康组升高(P<0.05),痰湿组较非痰湿组升高(P<0.05);治疗组治疗后E-Cad的表达明显降低(P<0.05),MMP9的表达有降低趋势,但差异不显著。结论痰在肿瘤转移中发挥作用的途径可能是通过影响黏附分子的表达,两者存在相关性。     

清热化痰方药对慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰热壅肺证细胞因子的影响

目的:基于清热化痰方药治疗AECOPD痰热壅肺证临床疗效基础上,通过检测治疗前后患者外周血中白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-a)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)的水平变化,进而探讨清热化痰方药治疗AECOPD痰热壅肺证的作用机制。方法:选取符合入选标准的病例140例,随机分为两组。两组分别于治疗前及疗程结束后留取血清测定IL-8、TNF-α、ICAM-1水平,留取血浆测定ET-1、CGRP含量,并与健康组对照。结果:治疗后,两组TNF-α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平均明显降低(P0.01、P0.05),CGRP水平明显升高(P0.01);试验组治疗后TNF-α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平的降低较对照组显著(P0.05),CGRP升高较对照组明显(P0.05)。结论:IL-8、TNF-α、ICAM-1、ET-1、CGRP细胞因子参与COPD的急性加重和形成,清热化痰方药能够降低AECOPD的TNF-α、ICAM-1、IL-8、ET-1高水平表达、升高CGRP表达水平,可能是清热化痰方药治疗AECOPD发挥临床疗效的作用机制之一。     

脑动脉硬化痰证与TLR4、ICAM-1相关性探讨

目的探讨脑动脉硬化痰证与Toll样受体4（TLR4）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1,CD54）的相关性。方法收集临床脑动脉硬化患者病例95例,中医辨证分痰证组（41例）和非痰证组（50例）。酶比色法测定血脂,流式细胞术测定TLR4、ICAM-1表达率。结果痰证组总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）高于非痰证组,但无统计学意义;痰证组TLR4、ICAM-1均高于非痰证组,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论脑动脉硬化患者TLR4、ICAM-1的变化与中医痰证有相关性。     

缺血性中风中医辨证分型与ICAM-1和CD62P表达水平的相关性

目的观察缺血性中风中医证型与血中性粒细胞表面细胞间黏附分子(ICAM-1)和血小板膜上P选择素(CD62P)变化的关系,探讨缺血性中风的发病机理。方法将72例缺血性中风患者按中医辨证分为3个证型组：即痰瘀阻络型组、痰热腑实型组和气虚血瘀型组,每组24例,另设一健康人对照组(24名)、用流式细胞仪测定各组患者的ICAM-1、CD62P的表达水平。结果缺血性中风患者ICAM-1、CD62P水平均显著高于健康人对照组(P<0．01),其中痰瘀阻络型组ICAM-1的表达水平显著高于气虚血瘀型组和痰热腑实型组(P<0．01);痰瘀阻络型组和气虚血瘀型组CD62P的表达水平显著高于痰热腑实型组(P<0．01)。结论缺血性中风不同证型的ICAM-1、CD62P表达水平存在一定的差异性,ICAM-1反映了体内痰阻或痰瘀互结的病理状态,而CD62P则反映了体内血瘀状态。提示痰瘀阻络可能是缺血性中风的病机关键．     

丹参对高血压病血瘀证血清诱导内皮功能障碍的影响

目的:探索丹参对高血压病血瘀证患者血清诱导的内皮功能障碍及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响,并进一步探讨丹参保护内皮功能障碍的潜在作用机制。方法:以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为研究对象,利用高血压病血瘀证患者血清诱导内皮功能障碍,用不同浓度的丹参(50、100μg/mL)处理24 h后,采用试剂盒检测一氧化氮(NO)及内皮素(ET-1)的含量。采用Western Blot检测磷酸化及总的一氧化氮合酶(eNOS)、细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、磷酸化及总的AMPK的表达。采用荧光定量PCR技术检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果:丹参能剂量依赖性的增加NO的含量、降低ET-1的含量、增加eNOS的磷酸化水平,降低内皮细胞黏附分子ICAM-1、VCAM-1的表达,减少单核细胞黏附率,降低炎性细胞因子TNF-α、IL-1β水平,升高AMPK磷酸化水平,与模型组比较差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:丹参能够改善高血压病血瘀证患者血清诱导的内皮功能障碍,其机制可能与激活AMPK有关。     

燥湿化痰方药对痰湿壅肺证慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者细胞因子的影响

目的：基于燥湿化痰方药治疗AECOPD痰湿壅肺证临床疗效基础,通过检测治疗前后患者外周血中白介素8（IL-8）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、内皮素-1（ET-1）、降钙素基因相关肽（CGRP）的水平变化,进而探讨燥湿化痰方药治疗AECOPD痰湿壅肺证的作用机制。方法：选取符合入选标准的病例60例,随机分为2组。两组分别于治疗前及疗程结束后留取血清测定IL-8、TNF-α、ICAM-1水平,留取血浆测定ET-1、CGRP含量,并与健康组对照。结果：治疗后,两组TNF-α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平均明显降低（P〈0.01、P〈0.05）,CGRP水平明显升高（P〈0.01）;试验组治疗后TNF-α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平的降低较对照组显著（P〈0.05）,CGRP升高较对照组明显（P〈0.05）。结论：IL-8、TNF-α、ICAM-1、ET-1、CGRP细胞因子参与COPD的急性加重和形成,燥湿化痰方药能够降低AECOPD的TNF-α、ICAM-1、IL-8、ET-1高水平表达,升高CGRP表达水平,可能是燥湿化痰方药治疗AECOPD发挥临床疗效的作用机制之一。     

血脂异常患者中医证型及血清sICAM-1、sVCAM-1水平与幽门螺旋杆菌感染的相关性研究

目的研究不同中医证型的血脂异常患者与幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染的关系,以及Hp感染对血脂异常患者血清炎症因子的影响。方法对120例血脂异常患者及20例健康对照者的流行病学信息、中医证型、血脂、血清Hp特异性抗体(helicobacter pylori immunoglobulin G,Hp Ig G)、细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,s ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,s VCAM-1)水平进行检测,并采用非参数检验及一元线性回归的方法进行分析。结果血清Hp Ig G表达水平从高到低为肝肾阴虚组脾肾阳虚组阴虚阳亢组气滞血瘀组痰浊阻滞组健康对照组(P0.01)。血脂异常组各中医证型患者血清Hp Ig G表达水平均显著高于对照组(P0.01),肝肾阴虚组患者血清Hp Ig G表达水平与痰浊阻滞组间差异具有显著统计学意义(P0.01)。血脂异常患者血清Hp Ig G水平与s ICAM-1(r=0.236,P0.01)、s VCAM-1(r=0.253,P0.01)表达水平均成正相关关系。结论血脂异常患者血清Hp Ig G水平明显高于健康对照组,且不同中医证型的血脂异常患者血清Hp Ig G水平具有差异性,Hp感染可能通过参与炎性因子的激活,从而促使动脉粥样硬化的发生发展。     

老年人痰浊阻遏证组3种血清黏附分子表达的比较

目的:基于黏附分子在疾病发生、发展中的重要作用,探讨老年人常见中医证候分型中黏附分子的表达,比较痰浊阻遏证与正常对照组之间的差异。方法:采用临床流行调查方法与实验检测相结合,设正常对照组24例,以社区老年人155例为研究对象,经中医辨证分层有痰浊阻遏证组42例。采用酶联免疫吸附(双抗体夹心)法测定血清P-选择素(P-SELECTIN)、细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、单核细胞趋化因子蛋白-1(MCP-1)水平,分析各组与对照组之间的差异。结果:①血清细胞间黏附分子(sICAM-1),在正常对照组为(3.148±1.20)ng/mL,在痰浊阻遏证组为(4.30±1.46)ng/mL,明显增高(P<0.01);②血清P-选择素为(11.53±8.58)ng/mL、单核细胞趋化因子蛋白-1(12.42±5.25)ng/mL,与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:老年人痰浊阻遏证组中sICAM-1血清水平,明显高于正常对照组,探测在炎症反应、动脉粥样硬化的发生与发展中起着重要作用的分子,可能是中医证候分型差别存在的物质基础,寻求中医药诊治的新的切入点。     

从黏附分子层面探究心痛方治疗急性心肌梗死痰瘀互结气郁证的机制

目的观察心痛方治疗急性心肌梗死(AMI)的临床疗效并探究其疗效机制。方法将符合纳入标准的AMI痰瘀互结气郁证患者随机分为实验组和对照组。对照组予以西医常规治疗,实验组在西医常规治疗基础上加服中药心痛方。两组疗程均为28 d。观察两组中医证候积分、临床疗效及血清细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平。结果两组患者治疗后证候积分均下降(P0.01)。实验组积分下降幅度明显大于对照组(P0.05)。治疗后实验组总有效率为85.00%,对照组总有效率为75.00%。实验组疗效优于对照组(P0.05)。治疗后两组患者血清ICAM-1、VCAM-1水平均下降(P0.01)。实验组下降幅度明显大于对照组(P0.01)。结论心痛方治疗AMI痰瘀互结气郁证疗效确切,其疗效机制可能是通过抑制ICAM-1、VCAM-1而减轻炎症反应,减少心肌损伤。     

健脾化痰方对高脂血症脾虚痰浊证模型小型猪血管内皮功能的影响

目的探讨健脾化痰方治疗高脂血症脾虚痰浊证的可能作用机制。方法普通级广西巴马小型猪15只随机分为正常组、模型组和给药组,每组5只。正常组予基础饲料喂饲,模型组和给药组均予高脂饲料喂饲24周建立高脂血症脾虚痰浊证小型猪模型。给药组在高脂饲料喂饲同时给予健脾化痰方颗粒剂,将颗粒剂溶于100ml生理盐水中,均匀掺入饲料内,每日1剂,喂饲24周。在0周和24周时采集小型猪空腹耳静脉血检测血清内皮功能指标包括一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、总一氧化氮合酶(tNOS),及血清内皮素1(ET-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平;24周时检测冠状动脉内皮组织匀浆中内皮功能指标及ET-1、ICAM-1水平。结果 24周时,与对照组比较,模型组小型猪血清和冠状动脉内皮组织匀浆中tNOS、iNOS、ET-1、ICAM-1水平均升高,eNOS、NO水平降低(P0.05);与模型组比较,给药组小型猪血清和冠状动脉内皮组织匀浆中tNOS、iNOS、ET-1、ICAM-1水平均降低,eNOS、NO水平升高(P0.05)。结论健脾化痰方能有效改善血管内皮功能,可能是其治疗高脂血症脾虚痰浊证的作用机制之一。     

细胞粘附分子的表达与中医痰证的关系

目的：探讨中医痰证性疾病与ICAM-1蛋白之间的内在联系。方法：应用免疫组化方法检测辨证明确的中医＂痰核＂性疾病——甲状腺瘤、淋巴结结核、乳腺纤维腺瘤患者各30例的病理组织、15例的正常组织中ICAM-1蛋白的表达。结果：ICAM-1在甲状腺正常组织、腺瘤组织中ICAM-1蛋白的阳性表达检出率分别为40%、60%,P〈0.05,差异有统计学意义;在淋巴结正常组织、结核病组织中ICAM-1蛋白的阳性表达检出率分别为25%、86.7%,P〈0.05,差异有统计学意义;在乳腺正常组织、纤维腺瘤组织中ICAM-1蛋白阳性表达检出率分别为33.3%、70%,P〈0.05,差异有统计学意义。结论：甲状腺腺瘤、淋巴结结核、乳腺纤维腺瘤患者在病理组织中ICAM-1蛋白的表达高于正常组织,在甲状腺腺瘤、淋巴结核、乳腺纤维腺瘤的病理组织中ICAM-1蛋白的阳性率两两比较其P值分别为0.11、0.15、0.08,以上P值均大于0.05,故三组之间比较无显著差异。     

不同治法方药对心肌缺血再灌注损伤大鼠防治作用的对比研究

目的 观察中医不同治法方药对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠的防治作用.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、祛痰宽胸组、活血化瘀组及痰瘀同治组.可逆件冠脉左前降支结扎缺血30min再灌注2 h复制MI/RI模型,检测再灌注后各组大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性,电镜下观察心肌形态学改变以及用免疫组化法测定各组心肌TNF-α、ICAM-1蛋白表达的变化.结果 与模型组比较,各治疗组均能降低血清LDH、CK水平并抑制TNF-α、ICAM-1蛋白表达,减轻心肌超微结构的损伤,且以痰瘀同治组疗效最为显著.结论 祛痰宽胸法、活血化瘀法及痰瘀同治法均对MI/RI大鼠有保护作用,且以痰瘀同治法疗效最明显.     

细胞增殖抑制基因HSG与COPD中医证型的相关性

目的:通过检测细胞增殖抑制基因(HSG)在慢性阻塞性肺病(COPD)不同中医证型组中表达的差异,为后续检测中药方剂治疗COPD奠定基础,并为COPD中医证型的诊断提供有说服力的客观标准。方法:选取110位COPD急性加重期患者及30位正常人为研究对象,随机分为痰浊组、痰热组、气虚组及正常组。所有入选者空腹抽取血液,用试剂盒提取血液总RNA,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各组慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者血清HSG mRNA表达;采用免疫印迹法(Western bolt)检测AECOPD患者血清HSG蛋白表达。结果:痰浊组、痰热组、气虚组与正常组比较有显著性差异(P0.05);痰浊、痰热组与气虚组比较有显著性差异(P0.05);痰浊与痰热组比较无显著性差异。结论:HSG在AECOPD患者血液中低表达,在正常组血液中高表达;气虚组患者血液中HSG表达低于痰浊、痰热组;HSG的表达水平可能影响了气道重建,HSG与COPD病程发展可能存在着内在的关联,其参与了COPD不同中医证候群的形成。     

川芎嗪对糖尿病大鼠视网膜病变IL-1β和ICAM-1表达的影响

目的观察川芎嗪注射液对糖尿病大鼠视网膜病变白细胞介素-1β(IL-1β)和细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨川芎嗪注射液治疗糖尿病大鼠视网膜病变(DR)的作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、模型组和川芎嗪组,用链脲佐菌素(60 mg/kg)一次性腹腔注射的方法建立糖尿病大鼠模型,川芎嗪组予腹腔注射给药川芎嗪(40 mg/kg)。6个月后处死动物摘除眼球进行视网膜血管消化铺片观察和免疫组织化学方法检测IL-1β和ICAM-1的表达。结果造模后模型组视网膜病变明显,川芎嗪治疗后视网膜病变得到明显延缓。视网膜毛细血管IL-1β和ICAM-1的表达,对照组分别为(5.130±1.312)%和(0.424±0.085)%,模型组分别为(7.320±0.623)%和(1.213±0.152)%,川芎嗪组分别为(3.604±1.373)%和(0.614±0.086)%,3组比较均有显著性差异(P均<0.05)。结论川芎嗪可通过降低视网膜IL-1β和ICAM-1的表达,延缓糖尿病大鼠视网膜病变的发生发展。     

实验性大鼠肺血栓栓塞症中ICAM-1、P-选择素的变化及红花注射液对其的影响

目的动态观察红花注射液对大鼠肺血栓栓塞症（PTE）中血管内皮细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和P-选择素的影响.方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,用颈静脉注入自体血凝块制备动物模型.治疗组在模型建立后立即自鼠尾静脉注射红花注射液2 ml/kg,每天1次,共5天.各组大鼠分别于栓塞后1、3、24、72、120 h处死,行病理观察;采用免疫组化和原位杂交的方法检测肺血管内皮ICAM-1和P选择素蛋白及mRNA的表达水平.结果与正常组比较,模型组大鼠肺栓塞后病理可见肺动脉血栓形成,炎性反应明显;肺血管内皮ICAM-1蛋白及mRNA表达在栓塞后3 h开始增高（P＜0.01）,而P-选择素蛋白及mRNA表达在栓塞后1 h开始增高（P＜0.01）.治疗组大鼠病理损伤减轻,肺血管内皮ICAM-1和P-选择素水平均下降（P＜0.01）.结论红花注射液可减轻大鼠PTE时的肺损伤,这种作用可能是通过下调血管内皮上的黏附分子来实现的.     

祛浊化痰中药对AS家兔血管成形术后炎性因子表达的影响

目的:观察祛浊化痰中药(通脉颗粒)对高脂饮食兔血管成形术后炎性因子hs-CRP、ICAM-1、NF-KB的影响。方法:选择新西兰大耳白兔50只随机分为空白组、模型组、中药组、西药组、中西药组各10只,通过喂养高脂饲料建立家兔AS模型,8周后造血管内皮球囊拉伤模型,测定hs-CRP含量及各组ICAM-1、NF-KBmRNA表达。结果:通脉颗粒可显著下调高脂饮食兔血管成形术后病灶中hs-CRP含量,且能明显降低家兔血清ICAM-1、NF-KBmRNA表达水平(P<0.05)。结论:通脉颗粒能减少AS斑块内的炎性因子表达,并可抑制血管内皮拉伤后相关炎性因子的表达,以减少AS的形成及防止术后再狭窄。其作用机制可能与调脂、抗炎的作用有关。     

动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1基因表达与痰浊证素的相关性研究

目的分析动脉粥样硬化(AS)患者基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的基因表达水平与痰浊证素的相关性,探讨MMP-9、TIMP-1基因表达水平作为AS患者中医"痰浊证素"客观指标的可行性。方法将AS患者分为痰浊证素组30例,非痰浊证素组48例,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术进行MMP-9和TIMP-1mRNA表达水平的定量检测。结果痰浊证素组MMP-9和TIMP-1基因表达水平均明显高于非痰浊证素组,差异具有统计学意义。结论 MMP-9及TIMP-1基因表达可作为中医痰浊证素的客观指标。     

老年颈动脉硬化患者血清炎症因子与中医证型的关系

目的研究老年颈动脉硬化患者不同中医证型血清内皮细胞粘附分子-1（ICAM-1）、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）、E选择素（E-selectin）、P选择素（p-selectin）、白细胞介素-6（IL-6）和C反应蛋白（CRP）等炎症因子水平。方法收集176例颈动脉硬化患者，采用酶联免疫吸附法测定血清ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、p-selectin、IL-6和CRP等水平，比较痰证、血瘀证和精髓亏虚证型颈动脉硬化患者血清粘附分子水平变化。结果发现各型颈动脉硬化患者血清炎症因子水平均较对照组显著上升；颈动脉硬化痰证组患者血清ICAM-1和VCAM-1均较血瘀证和精髓亏虚证患者显著上升（P〈0．05）。结论老年患者外周血中炎症因子水平可以在一定程度上反映患者的颈动脉硬化程度，老年颈动脉硬化痰证患者外周血中粘附分子水平的变化具有一定特异性，痰的微观实质可能与粘附分子之间存在某种内在联系。